敲低肌切蛋白可抑制胃肠道间质瘤细胞的增殖能力 被引量：3

1

作者 刘军言 刘佳佳 +3 位作者 吴益西 陈骞 林勇 钱锋 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1422-1426,共5页

目的探讨肌切蛋白（scinderin,SCIN）对胃肠道间质瘤（gastrointestinal stromal tumor,GIST）细胞增殖能力的影响。方法用shRNA慢病毒干扰技术将SCIN在GIST细胞中稳定敲低,并通过Western blot和qRT-PCR检测敲低效率。通过CCK-8实验检... 目的探讨肌切蛋白（scinderin,SCIN）对胃肠道间质瘤（gastrointestinal stromal tumor,GIST）细胞增殖能力的影响。方法用shRNA慢病毒干扰技术将SCIN在GIST细胞中稳定敲低,并通过Western blot和qRT-PCR检测敲低效率。通过CCK-8实验检测伊马替尼IC50和SCIN对GIST细胞增殖能力的影响,通过平板克隆形成实验检测SCIN对GIST细胞克隆形成能力的影响,通过裸鼠皮下成瘤实验检测SCIN对移植瘤生长的影响。实验按照对GIST细胞进行的不同处理分组：WT组（野生型组,未进行转染）,Mock组（阴性对照组,转染阴性对照序列）,sh SCIN 1组（转染SCIN干扰序列1）,sh SCIN 2组（转染SCIN干扰序列2）。结果 sh SCIN 1组和sh SCIN 2组GIST细胞在增殖能力上明显低于Mock组,增殖能力在第2~7天均有明显差异（n=4,P〈0.05）。移植瘤实验中sh SCIN 1组较Mock组的移植瘤质量显著降低：sh SCIN 1组vs Mock组=（0.175 0±0.045 6）g vs（0.334 1±0.016 5）g（n=4,P〈0.01）。平板克隆形成实验显示sh SCIN 1组克隆形成数显著少于Mock组,分别为59.67±5.68和123.33±2.52（n=3,P〈0.01）。在使用0.57μmol/L的伊马替尼处理WT组细胞1、3、5 d后,SCIN的表达随处理时间而降低。结论敲低SCIN可以抑制GIST细胞在体外和体内环境中的增殖能力,伊马替尼可以抑制GIST细胞中SCIN的表达,SCIN可能成为GIST的治疗靶点。 展开更多

关键词 肌切蛋白 胃肠道间质瘤 增殖 伊马替尼

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JAK2/STAT3通路在表皮生长因子诱导结肠癌细胞侵袭迁移中的作用 被引量：10

2

作者 徐建华 张超 +4 位作者 唐波 郝迎学 刘涛 陈军 崔浩 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期638-641,共4页

目的探讨JAK2/STAT3通路在表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)诱导结肠癌细胞侵袭迁移中的作用。方法以人结肠癌细胞株LoVo为研究对象,分为对照组、表皮生长因子处理组(EGF组)、表皮生长因子与JAK2激酶抑制剂AG490共处理组(EGF+... 目的探讨JAK2/STAT3通路在表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)诱导结肠癌细胞侵袭迁移中的作用。方法以人结肠癌细胞株LoVo为研究对象,分为对照组、表皮生长因子处理组(EGF组)、表皮生长因子与JAK2激酶抑制剂AG490共处理组(EGF+AG490组)。采用免疫荧光和Western blot检测各组LoVo细胞E钙粘素蛋白、磷酸化STAT3表达水平;Transwell法检测细胞侵袭能力;细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果细胞划痕实验对照组细胞划痕闭合约38%,EGF+AG490组细胞划痕闭合约40%,而EGF组闭合约80%。EGF组显著高于另2组(P<0.05);体外侵袭实验显示对照组透膜细胞数为(21.24±2.65)/视野,EGF+AG490组为(23.19±3.50)/视野,EGF组为(55.08±2.14)/视野。EGF组显著高于另2组(P<0.05);与EGF+AG490组结肠癌LoVo细胞相比,EGF组细胞P-STAT3表达增加72.4%,E-cadherin蛋白表达降低68.5%(P<0.05);免疫荧光显示EGF组细胞E-cadherin向细胞质内移位。结论EGF可通过JAK2/STAT3通路调节E-cadherin在结肠癌LoVo细胞中的表达和定位,增强结肠癌细胞的侵袭迁移能力。 展开更多

关键词 结肠癌 表皮生长因子 JAK2/STAT3通路 E钙粘素

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达芬奇机器人直肠癌根治术的学习曲线 被引量：23

3

作者 兰远志 曾冬竹 +6 位作者 张超 钱锋 甘露 陈华 雷晓 罗华星 余佩武 《中国微创外科杂志》 CSCD 2014年第6期490-493,共4页

目的探讨达芬奇机器人直肠癌根治术的学习曲线。方法回顾分析我院微创胃肠外科中心2010年3月～2012年5月完成的60例达芬奇机器人直肠癌根治术的临床资料，按手术先后顺序分成A、B、C3组，每组20例，比较各组机器人安装时间、手术时间、... 目的探讨达芬奇机器人直肠癌根治术的学习曲线。方法回顾分析我院微创胃肠外科中心2010年3月～2012年5月完成的60例达芬奇机器人直肠癌根治术的临床资料，按手术先后顺序分成A、B、C3组，每组20例，比较各组机器人安装时间、手术时间、出血量、淋巴结清扫数目、并发症、术后住院时间。结果A组机器人安装时间（66±6）min，显著长于B组（35±5）min和c组（32±4）min（q=27．365，P〈0．05；q=30．013，P〈0．05），B、C2组无统计学差异（q=2.648，P〉0．05）。3组手术时间无统计学差异（F=1．28，P=0．286），总手术时间差异（F=8．82，P=0．000）主要由于机器人安装时间差异，机器人直肠癌根治术学习曲线为20例。3组出血量、淋巴结清扫数目、并发症、术后住院时间无显著性差异（P〉0．05）。结论对于熟练掌握腹腔镜直肠癌根治术的外科医生，达芬奇机器人直肠癌根治术学习曲线约为20例。 展开更多

关键词 直肠癌 达芬奇机器人手术系统 学习曲线

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达芬奇机器人系统全胃切除术的围手术期护理 被引量：5

4

作者 饶芸 骆群 +2 位作者 李雪玲 徐萍 赵欣 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期44-44,49,共2页

胃癌是常见消化道恶性肿瘤之一,其死亡率达23.86/10万。腹腔镜胃癌根治手术逐步在临床广泛开展。近年来,达芬奇机器人手术系统开始投入临床使用,使困扰腹腔镜胃癌手术的诸多问题得到改善。我中心于2010年3月成功完成了国内第1例机器人... 胃癌是常见消化道恶性肿瘤之一,其死亡率达23.86/10万。腹腔镜胃癌根治手术逐步在临床广泛开展。近年来,达芬奇机器人手术系统开始投入临床使用,使困扰腹腔镜胃癌手术的诸多问题得到改善。我中心于2010年3月成功完成了国内第1例机器人根治性全胃切除术,效果良好,现将围手术期护理情况报告如下。 展开更多

关键词 达芬奇机器人 全胃切除术 护理 围手术期

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体外模拟CO_2、He气腹对胃癌细胞增殖的影响 被引量：4

5

作者 石彦 雷晓 +6 位作者 余佩武 罗华星 郝迎学 赵永亮 钱锋 唐波 饶云 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期338-340,共3页

目的研究体外建立模拟CO2、He气腹环境对胃癌MKN-45细胞增殖的影响,初步探讨CO2气腹腹腔镜胃癌手术的安全性。方法体外建立模拟CO2、He气腹环境,全自动气腹机维持压力为12mmHg,作用3h并没对照组。处理后0、0.5、1、1.5、2、2.5、3h,用p... 目的研究体外建立模拟CO2、He气腹环境对胃癌MKN-45细胞增殖的影响,初步探讨CO2气腹腹腔镜胃癌手术的安全性。方法体外建立模拟CO2、He气腹环境,全自动气腹机维持压力为12mmHg,作用3h并没对照组。处理后0、0.5、1、1.5、2、2.5、3h,用pH计检测细胞培养液pH值变化;用MTT法检测第1、2、3、4、5、6、7天细胞增殖情况。结果处理结束后CO2气腹组细胞培养液pH值呈弱酸性,与对照组比下降非常显著(P<0.01),处理后2hpH值恢复正常;He气腹组pH值呈弱碱性,与对照组比升高显著(P<0.05),1.5h恢复正常。MTT法检测细胞增殖结果显示,CO2气腹组和He气腹组人胃癌MKN-45细胞的增殖与对照组比无统计学差异(P>0.05)。结论体外模拟12mmHgCO2气腹和He气腹持续作用3h时,均不促进胃癌细胞增殖。 展开更多

关键词 气腹 胃癌细胞 增殖 细胞培养液 PH值

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上调基因-4在结肠癌中的表达及临床意义 被引量：4

6

作者 崔浩 张超 +2 位作者 刘涛 王攀 徐建华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期33-35,共3页

目的探讨上调基因-4(up-regulated gene-4,URG-4)在结肠癌及其癌旁组织中的表达及临床意义。方法收集2010年1-6月本院手术切除的82例结肠癌、癌旁组织样本及石蜡切片标本,用RT-PCR、免疫组化检测URG-4基因的转录和表达情况,分析其与临... 目的探讨上调基因-4(up-regulated gene-4,URG-4)在结肠癌及其癌旁组织中的表达及临床意义。方法收集2010年1-6月本院手术切除的82例结肠癌、癌旁组织样本及石蜡切片标本,用RT-PCR、免疫组化检测URG-4基因的转录和表达情况,分析其与临床病理参数的关系。结果结肠癌组织中的URG-4 mRNA阳性率为85.37%(70/82),显著高于癌旁组织中的36.59%(30/82)(P<0.01)。URG-4蛋白在结肠癌中的表达率为70.73%(58/82),癌旁组织为24.39%(20/82),两组比较差异非常显著(P<0.01);肿瘤组织中URG-4的表达与患者的年龄、性别、肿瘤的分化程度、有无远处转移无明显相关性(P>0.05),而与浸润深度及淋巴结转移显著相关(P<0.01)。结论与癌旁组织相比URG-4在结肠癌中高表达,并且URG-4表达强度与肿瘤浸润深度和淋巴结转移呈正相关,提示其可能在结肠癌的发生、发展中起重要作用。 展开更多

关键词 上调基因-4 结肠癌 RT-PCR 免疫组化

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JAK2／STAT3途径在IL-6抑制LPS诱导的树突状细胞分化成熟中的作用 被引量：4

7

作者 赵永亮 余佩武 +2 位作者 雷晓 刘伟 饶芸 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1063-1065,共3页

目的观察JAK2/STAT3信号途径在IL-6抑制LPS诱导的小鼠髓源性树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells,BMDCs)分化成熟中的作用。方法分离小鼠骨髓细胞,采用黏附法结合GM-CSF和IL-4刺激法在体外培养BMDCs;用相差倒置显微镜观察BM... 目的观察JAK2/STAT3信号途径在IL-6抑制LPS诱导的小鼠髓源性树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells,BMDCs)分化成熟中的作用。方法分离小鼠骨髓细胞,采用黏附法结合GM-CSF和IL-4刺激法在体外培养BMDCs;用相差倒置显微镜观察BMDCs的形态特点;用LPS诱导DCs成熟;采用流式细胞术观察IL-6处理与否,LPS诱导的BMDCs在表型上的变化;Western blot检测BMDCs细胞质p-JAK2、总STAT3和p-STAT3的表达水平。结果形态观察和FCM分析的结果表明:体外成功培养了纯度较高的高表达CD11c的BMDCs,LPS能明显诱导BMDCs表面MHC-Ⅱ类分子和共刺激分子CD80、CD86、CD40的表达上调;而经过IL-6处理后,LPS诱导BMDCs表面MHC-Ⅱ类分子、CD80、CD86、CD40表达上调的能力被显著削弱(P<0.01)。Western blot结果显示,与单独用LPS处理的BMDCs相比,经IL-6处理后的BMDC中p-JAK2、p-STAT3表达随作用时间增加而明显上调,提示IL-6促进JAK2/STAT3信号途径活化。结论JAK2/STAT3信号途径参与了IL-6抑制LPS诱导的BMDCs成熟过程。 展开更多

关键词 髓源性树突状细胞 白细胞介素-6 LPS JAK2/STAT3信号途径

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腹腔镜全胃切除术后消化道重建方式的探讨 被引量：17

8

作者 赵永亮 余佩武 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第18期1907-1909,共3页

自20年前Kitano等首次报道了腹腔镜胃癌手术以来,腹腔镜胃癌根治手术在世界各地得到广泛开展,在很多医院腹腔镜远端胃癌根治术已被普遍接受。随着腔镜器械的发展,腔镜外科医生的腹腔镜技术迅速提高,腹腔镜胃癌根治术已经从早期胃癌扩展... 自20年前Kitano等首次报道了腹腔镜胃癌手术以来,腹腔镜胃癌根治手术在世界各地得到广泛开展,在很多医院腹腔镜远端胃癌根治术已被普遍接受。随着腔镜器械的发展,腔镜外科医生的腹腔镜技术迅速提高,腹腔镜胃癌根治术已经从早期胃癌扩展到进展期胃癌,根治范围也从远端胃癌切除扩展到根治性全胃切除。腹腔镜根治性全胃切除术包括根治切除和消化道重建两方面重要内容,由于腹腔镜清晰的视野和良好的显露,根治切除及淋巴结清扫在腹腔镜下比较容易完成,但由于病人和肿瘤两方面的因素,消化道重建则困难很多。 展开更多

关键词 胃肿瘤 腹腔镜全胃切除术 消化道重建 食管空肠吻合

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5-氟尿嘧啶及长春新碱对胃癌细胞SGC-7901干细胞相关特性的影响 被引量：4

9

作者 陈军 崔有宏 +3 位作者 郝迎学 唐波 植懿丹 余佩武 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1247-1251,共5页

目的探讨化疗药物5-FU、长春新碱对胃癌细胞SGC-7901干细胞相关表型及功能影响。方法 5-FU、长春新碱分别作用于SGC-7901细胞后,通过流式细胞术及荧光实时定量PCR的方法观察胃癌干细胞候选标志CD44、CD133的表达,检测干性相关基因及上皮... 目的探讨化疗药物5-FU、长春新碱对胃癌细胞SGC-7901干细胞相关表型及功能影响。方法 5-FU、长春新碱分别作用于SGC-7901细胞后,通过流式细胞术及荧光实时定量PCR的方法观察胃癌干细胞候选标志CD44、CD133的表达,检测干性相关基因及上皮-间质转化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)相关基因的表达变化,并检测药物作用对其集落形成能力、无血清培养基中成球能力及NOD/SCID小鼠体内成瘤能力的影响。结果不同浓度5-FU、长春新碱作用3 d后均可显著增加剩余SGC-7901细胞CD44 mRNA的总体表达水平,分别为未用药组的(2.36±0.03)、(1.74±0.05)、(6.03±0.75)、(4.06±0.77)倍,均有显著差异(P<0.05)。CD133及CD44阳性细胞比例亦明显升高,但干性基因表达、克隆形成能力、成瘤能力未见明显增加。而与5-FU不同的是,长春新碱作用后细胞发生了EMT相关基因的表达改变,在无血清培养基中形态与其他组细胞差异显著,且可形成典型的细胞球。结论 5-FU及长春新碱作用后细胞CD44和CD133的表达增加,此外长春新碱还促进细胞EMT改变,并增加细胞在无血清培养基中的成球能力。 展开更多

关键词 胃癌干细胞 5-FU 长春新碱 上皮-间质转化

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腹腔镜胃癌根治术:未来治疗胃癌的标准手术 被引量：15

10

作者 余佩武 罗华星 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第18期1889-1892,共4页

以腹腔镜手术为代表的微创外科技术经过20余年的发展,目前已广泛应用于腹部的各种手术,几乎所有的腹部外科手术都可以在腹腔镜下完成,但截止到目前,只有腹腔镜胆囊切除术被认为是最具微创价值的手术,是胆囊切除的标准术式。由于腹腔镜... 以腹腔镜手术为代表的微创外科技术经过20余年的发展,目前已广泛应用于腹部的各种手术,几乎所有的腹部外科手术都可以在腹腔镜下完成,但截止到目前,只有腹腔镜胆囊切除术被认为是最具微创价值的手术,是胆囊切除的标准术式。由于腹腔镜手术相对于传统的手术具有明显的微创优势,随着外科医师微创手术技术的成熟以及腹腔镜器械的不断发展,腹腔镜手术逐步在恶性肿瘤手术中得到了广泛的开展。 展开更多

关键词 腹腔镜 胃肿瘤 胃癌根治术

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CLIC-1 mRNA及蛋白在结肠癌的表达及临床意义 被引量：3

11

作者 王攀 张超 +1 位作者 刘涛 崔浩 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第22期2407-2409,共3页

目的探讨氯离子通道-1(chloride intracellular channel 1,CLIC-1)mRNA及蛋白在结肠癌中的表达及其临床意义。方法采用RT-PCR和免疫组化检测2011年1-6月本院手术切除的54例结肠癌和相应癌旁组织中CLIC-1mRNA及蛋白的表达,分析其与临床... 目的探讨氯离子通道-1(chloride intracellular channel 1,CLIC-1)mRNA及蛋白在结肠癌中的表达及其临床意义。方法采用RT-PCR和免疫组化检测2011年1-6月本院手术切除的54例结肠癌和相应癌旁组织中CLIC-1mRNA及蛋白的表达,分析其与临床病理特征的关系。结果结肠癌组织中的CLIC-1 mRNA表达水平高于癌旁组织[(0.658±0.043)vs(0.281±0.027),P<0.05],CLIC-1蛋白表达与浸润程度、有无淋巴结转移和TNM分期比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),而与患者的年龄、性别、肿瘤直径、原发部位、分化程度方面比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CLIC-1在结肠癌中的表达明显升高,在结肠癌的进展中可能有一定作用。 展开更多

关键词 CLIC-1 结肠肿瘤 RT-PCR 免疫组化

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腹腔镜全胃切除术后早期拔出胃管对患者恢复的影响 被引量：2

12

作者 饶芸 骆群 +3 位作者 李雪玲 徐萍 赵欣 刘媛 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期731-733,共3页

传统认为胃肠减压是腹部手术后减少误吸，促进胃肠道功能恢复，预防吻合口瘘发生的重要手段^[1]。近年来，为了促进患者快速康复，提高患者的生活质量，有文献报道全胃切除术患者可以不置胃管，但尚存在争议^[2-3]。本研究分析2011年11... 传统认为胃肠减压是腹部手术后减少误吸，促进胃肠道功能恢复，预防吻合口瘘发生的重要手段^[1]。近年来，为了促进患者快速康复，提高患者的生活质量，有文献报道全胃切除术患者可以不置胃管，但尚存在争议^[2-3]。本研究分析2011年11月至2012年11月我科行腹腔镜全胃切除患者的临床资料，探讨早期拔出胃管的安全性和可行性。 展开更多

关键词 腹腔镜 全胃切除术 早期拔出胃管 术后不适

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达芬奇机器人胃癌手术相关技术与应用前景 被引量：8

13

作者 余佩武 唐波 《中国微创外科杂志》 CSCD 2012年第7期584-585,共2页

1994年经美国FDA批准,自动定位内镜系统作为机器人持镜手应用于普通外科临床,此后又开发了宙斯机器人系统,但FDA仅批准其作为外科手术助手而不能作为真正的手术者。2000年7月,美国FDA正式批准了Intuitive Surgical公司研发的达芬奇机器... 1994年经美国FDA批准,自动定位内镜系统作为机器人持镜手应用于普通外科临床,此后又开发了宙斯机器人系统,但FDA仅批准其作为外科手术助手而不能作为真正的手术者。2000年7月,美国FDA正式批准了Intuitive Surgical公司研发的达芬奇机器人手术系统应用于临床外科治疗，在此后几年中，应用达芬奇机器人手术系统相继开展了胆囊切除术、胃底折叠术、Heller肌切开术、胃旁路术、结肠切除术等腹部外科手术。 展开更多

关键词 机器人系统 达芬奇 应用 胃癌手术 机器人手术系统 腹部外科手术 FDA批准 美国FDA

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IL-6通过SOCS3诱导小鼠髓源性DCs分化成熟障碍的分子机制研究 被引量：2

14

作者 赵永亮 余佩武 +1 位作者 刘伟 饶芸 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第15期1568-1571,共4页

目的观察IL-6诱导小鼠髓源性DCs分化成熟障碍过程中SOCS3的表达变化并探讨其分子机制。方法分离小鼠骨髓细胞,采用黏附法结合GM-CSF和IL-4刺激法在体外培养髓源性DCs(BMDCs)。用LPS诱导iDCs成熟,采用Real-Time RT-PCR和Western blot方法... 目的观察IL-6诱导小鼠髓源性DCs分化成熟障碍过程中SOCS3的表达变化并探讨其分子机制。方法分离小鼠骨髓细胞,采用黏附法结合GM-CSF和IL-4刺激法在体外培养髓源性DCs(BMDCs)。用LPS诱导iDCs成熟,采用Real-Time RT-PCR和Western blot方法,观察IL-6处理前后LPS诱导的BMDCs中SOCS3表达的变化,并用甲基化特异性PCR观察SOCS3启动子CpG岛的甲基化状态。结果 Real-Time RT-PCR和Western blot结果显示,LPS能显著诱导BMDCs SOCS3 mRNA和蛋白的表达上调;而经过IL-6处理后,LPS诱导BMDCs SOCS3 mRNA和蛋白表达上调的能力被显著抑制(P<0.05)。甲基化特异性PCR与单独用LPS处理的BMDCs相比,经IL-6处理后的BMDCs SOCS3启动子区CpG岛被甲基化。结论 IL-6通过诱导SOCS3基因启动子区CpG岛的甲基化来抑制SOCS3表达,进而阻遏iDCs分化成熟,促进胃癌等肿瘤细胞侵袭转移。 展开更多

关键词 髓源性树突状细胞 分化成熟障碍 IL-6 SOCS3 CPG岛甲基化

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Peutz-Jeghers综合征1例及其基因诊断 被引量：2

15

作者 于妍妍 郭洪 +3 位作者 石彦 刘丹 许雪青 白云 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1249-1249,1257,共2页

Peutz-Jeghers综合征（PJS）是一种常染色体显性遗传病,现行的临床诊断条件为消化道2个或2个以上经组织学证实的错构瘤性息肉、皮肤或黏膜色素沉着以及家族史[1]。研究[2]发现STK11基因是PJS的致病基因,主要参与调控细胞周期、代谢和极... Peutz-Jeghers综合征（PJS）是一种常染色体显性遗传病,现行的临床诊断条件为消化道2个或2个以上经组织学证实的错构瘤性息肉、皮肤或黏膜色素沉着以及家族史[1]。研究[2]发现STK11基因是PJS的致病基因,主要参与调控细胞周期、代谢和极性等。由于PJS患者的临床表现存在异质性,因此其确诊需借助于基因诊断。 展开更多

关键词 PEUTZ-JEGHERS综合征 STK11 基因诊断 突变

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达芬奇机器人胃癌手术的技术特点与现状 被引量：6

16

作者 余佩武 唐波 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第20期1472-1474,共3页

达芬奇机器人手术系统作为新兴人工智能手术系统,开启了智能化微创手术的新时代,近年逐渐应用于临床在胃癌外科领域目前报道较少,已成为研究的热点。本文就达芬奇机器人胃癌手术的技术特点、应用现状和前景作一介绍。

关键词 达芬奇机器人手术系统 胃癌手术 技术特点

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沉默肌切蛋白表达抑制胃癌干细胞自我更新能力 被引量：1

17

作者 刘佳佳 刘军言 +5 位作者 严鹏 吴益西 姬成东 王艳霞 向东方 钱锋 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第23期2324-2328,共5页

目的探讨肌切蛋白(scinderin,SCIN)在调控胃癌干细胞自我更新能力中的作用。方法采用shRNA慢病毒干扰技术构建沉默SCIN表达的MGC803胃癌细胞系和XN0422原代胃癌细胞,同时构建各自的阴性对照(mock)细胞;以平板克隆形成和成球实验分别检... 目的探讨肌切蛋白(scinderin,SCIN)在调控胃癌干细胞自我更新能力中的作用。方法采用shRNA慢病毒干扰技术构建沉默SCIN表达的MGC803胃癌细胞系和XN0422原代胃癌细胞,同时构建各自的阴性对照(mock)细胞;以平板克隆形成和成球实验分别检测沉默SCIN对胃癌细胞克隆形成和成球能力的影响;裸鼠皮下移植瘤模型观察沉默SCIN对胃癌细胞体内成瘤能力的影响。结果SCIN在胃癌干细胞中的表达显著高于普通贴壁细胞;沉默SCIN显著降低胃癌细胞的克隆和成球能力,MGC803细胞中SCIN敲低细胞与mock细胞的克隆形成数分别为(26.33±4.37)和(62.33±3.18),肿瘤球形成数分别为(12.33±0.88)和(39.00±2.69),而在XN0422细胞中,克隆形成数分别为(14.67±3.38)和(49.67±2.19),肿瘤球形成数分别为(15.67±1.76)和(33.33±1.65)(P<0.01);SCIN敲低的MGC803和XN0422细胞较其mock细胞所形成的裸鼠皮下移植瘤,体积显著减小、质量显著减轻,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 SCIN基因沉默能有效抑制胃癌干细胞自我更新能力,可能成为针对胃癌肿瘤干细胞治疗的新靶点。 展开更多

关键词 胃癌 肌切蛋白 干细胞 自我更新

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Ln5γ2对胃癌细胞迁移、侵袭的影响

18

作者 曾冬竹 郝迎学 +3 位作者 余佩武 罗华星 杨卫军 张帆 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期750-753,共4页

目的探讨Ln5γ2对胃癌SGC-7901细胞迁移、侵袭的影响及可能机制。方法实验分为对照组、Ln5γ2趋化组、上皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)干扰组、空载体组。以Ln5γ2诱导趋化SGC-7901,观察穿过铺和未铺Matrigl... 目的探讨Ln5γ2对胃癌SGC-7901细胞迁移、侵袭的影响及可能机制。方法实验分为对照组、Ln5γ2趋化组、上皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)干扰组、空载体组。以Ln5γ2诱导趋化SGC-7901,观察穿过铺和未铺Matrigl胶的Transwell小室滤膜的细胞数目。采用ELISA和免疫荧光方法检测细胞缓冲液中MMP-2和MMP-9浓度以及细胞骨架结构改变。结果 Ln5γ2诱导趋化SGC-7901,穿过铺和未铺Matrigl胶的Transwell小室滤膜的细胞数目明显高于对照组(P<0.01),EGFR干扰后数目与对照组无显著差异(P>0.05)。EGFR干扰组细胞MMP-2和MMP-9浓度下降,细胞骨架结构模糊,伪足形成减少或消失。结论 Ln5γ2可以促进胃癌SGC-7901侵袭迁移,可能机制为通过EGFR改变细胞骨架结构,影响MMPs的分泌。 展开更多

关键词 Ln5γ2 胃癌 侵袭 迁移

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STAT3信号通路在IL-6抑制人单核细胞来源树突状细胞CCR7表达中的作用 被引量：3

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作者 李腾飞 苏崇宇 +3 位作者 黄刚 付小龙 余佩武 赵永亮 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期751-756,共6页

目的探讨STAT3信号通路在IL-6抑制人单核细胞来源树突状细胞(human monocytederived dendritic cells,mo DCs)趋化因子受体7(C-C chemokine receptor type 7,CCR7)表达中的作用。方法采用CD14+磁珠分离法从外周血中分离得到单核细胞,加... 目的探讨STAT3信号通路在IL-6抑制人单核细胞来源树突状细胞(human monocytederived dendritic cells,mo DCs)趋化因子受体7(C-C chemokine receptor type 7,CCR7)表达中的作用。方法采用CD14+磁珠分离法从外周血中分离得到单核细胞,加入rh GM-CSF和rh IL-4在体外诱导培养树突状细胞。LPS用于刺激mo DCs表达CCR7,RT-PCR检测不同浓度IL-6处理后再用LPS刺激后的mo DCs CCR7 mRNA表达。Western blot检测IL-6处理mo DCs和IL-6预处理后再加入STAT3磷酸化特各异性抑制剂JSI-124的mo DCs STAT3、p-STAT3表达。IL-6预处理并抑制STAT3磷酸化后,LPS刺激48 h,RT-PCR检测mo DCs CCR7 mRNA的表达,流式细胞仪检测mo DCs CCR7蛋白表达,细胞迁移实验检测mo DCs细胞迁移功能。结果与单独LPS刺激组比较,IL-6明显抑制LPS刺激的mo DCs CCR7mRNA的表达(P<0.05)。Western blot结果显示,与单独LPS刺激组比较,IL-6导致mo DCs细胞内STAT3高度活化;而抑制STAT3信号高度活化后,与IL-6+LPS处理组比较,mo DCs CCR7 mRNA表达、蛋白分子表达、细胞迁移能力明显升高(P<0.05),与LPS刺激组无差异(P>0.05)。结论 IL-6通过高度活化STAT3信号通路抑制人单核细胞来源树突状细胞CCR7表达,导致树突状细胞的迁移能力受损,而靶向干预STAT3通路可能成为纠正树突状细胞迁移障碍的潜在手段。 展开更多

关键词 人单核细胞来源树突状细胞 白细胞介素-6 STAT3 趋化因子受体7

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人STAT3重组腺病毒的制备及其对胃癌细胞株SGC-7901增殖的影响

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作者 董宗明 赵永亮 +1 位作者 余佩武 黄钢 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期764-768,共5页

目的制备可表达人转录因子STAT3的重组腺病毒,检测该基因在胃癌细胞株SGC-7901的表达活性及对其增殖的影响。方法以人胎盘组织cDNAs为模板通过PCR获得hSTAT3完整阅读框,T/A克隆测序证实后,亚克隆至穿梭载体pAdTrack-CMV中,PmeⅠ线性化... 目的制备可表达人转录因子STAT3的重组腺病毒,检测该基因在胃癌细胞株SGC-7901的表达活性及对其增殖的影响。方法以人胎盘组织cDNAs为模板通过PCR获得hSTAT3完整阅读框,T/A克隆测序证实后,亚克隆至穿梭载体pAdTrack-CMV中,PmeⅠ线性化与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在BJ5183细菌同源重组,经PacⅠ线性化后转染293FT细胞包装,同时包装空载体腺病毒,进行病毒滴度测定。取AdV-STAT3、AdV-GFP分别感染SGC-7901细胞,设空白对照,Western blot检测3组细胞STAT3蛋白表达,MTT法检测对细胞增殖的影响。结果获得hSTAT3完整阅读框,T载体中测序无突变,亚克隆至pAdTrack-CMV,并与pAdEasy-1成功重组后包装AdV-STAT3,测定滴度为2.8×1010pfu/mL,AdV-GFP滴度为3.2×1010pfu/mL。与AdV-GFP组及空白对照组比,Western blot示AdV-STAT3组蛋白明显表达(P<0.05);MTT示AdV-1-STAT3组明显促进细胞增殖(P<0.05)。结论成功制备hSTAT3的重组腺病毒,感染胃癌细胞株SGC-7901后高表达并促进其增殖。 展开更多

关键词 STAT3 重组腺病毒 胃癌 增殖

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