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家蚕蛾吐出液的酶活性及蛋白质种类鉴定
被引量：
3
1
作者
祝元锋
王赵群
+1 位作者
何宁佳
冯丽春
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第3期452-457,共6页
家蚕羽化时用口腔吐出液溶解前端茧层的丝胶及少量丝素后脱茧而出,测定吐出液中各种酶类的活性以及鉴定吐出液中的蛋白质种类,对解析家蚕羽化过程的溶茧机制具有重要意义。在家蚕羽化前解剖收集嗉囊液,在家蚕羽化时收集蛾吐出液,解剖获...
家蚕羽化时用口腔吐出液溶解前端茧层的丝胶及少量丝素后脱茧而出,测定吐出液中各种酶类的活性以及鉴定吐出液中的蛋白质种类,对解析家蚕羽化过程的溶茧机制具有重要意义。在家蚕羽化前解剖收集嗉囊液,在家蚕羽化时收集蛾吐出液,解剖获取蛾下颚晶体,测定3组样品中的蛋白酶、酯酶、纤溶酶和丝胶酶活性:在蛾吐出液和嗉囊液中皆检测到4种酶的活性,2组检测样品除蛋白酶活性接近外,酯酶、纤溶酶和丝胶酶活性则是蛾吐出液比嗉囊液分别高出21%、57%、26%;下颚晶体不具有纤溶酶活性,其他3种酶的活性也皆比蛾吐出液和嗉囊液低。采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析技术在家蚕蛾吐出液中鉴定出29种蛋白质,其中包括14种酶类、4种蛋白酶抑制剂、5种30K蛋白、1种转运相关蛋白、2种免疫相关蛋白和3种其他蛋白质。研究结果显示了蚕蛾吐出液成分的复杂性,同时说明家蚕羽化时吐出液对丝胶和部分丝素的水解除了溶茧酶的作用外,可能还有其他成分的参与。
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关键词
家蚕
羽化
吐出液
嗉囊液
下颚晶体
酶活性
蛋白质
液相色谱一串联质谱
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职称材料
七斛血糖制剂对KK-A^y小鼠降糖作用
2
作者
张璇
李小丽
+2 位作者
王宁
姚欣彤
周维英
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第10期1053-1054,共2页
目的观察七斛血糖制剂对自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠降糖作用及机制的初步研究。方法 C57BL/6小鼠作为正常对照组,KK-Ay小鼠随机分成6组,分别为模型对照组,七斛低、中、高剂量组(0.75,1.5和3.0 g生药·kg-1),阳性对照组(二甲双胍组和...
目的观察七斛血糖制剂对自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠降糖作用及机制的初步研究。方法 C57BL/6小鼠作为正常对照组,KK-Ay小鼠随机分成6组,分别为模型对照组,七斛低、中、高剂量组(0.75,1.5和3.0 g生药·kg-1),阳性对照组(二甲双胍组和伏格列波糖组),灌胃给药28 d。于给药第8、15、22和29天测量小鼠随机血糖、体重及摄食量,并于第29天取血检测血脂四项,取肝和肾观察病理改变。结果与正常对照组比较,模型对照组小鼠摄食量、体重、血糖、总胆固醇(CHOL)和甘油三酯(TG)水平显著升高(P<0.01),小鼠肝细胞变性,脂肪沉积明显,中央静脉扩张、充血,肾小球萎缩严重并伴有充血;与模型对照组比较,给药第8、15、22和29天,七斛中、高剂量组小鼠的随机血糖均显著降低(P<0.05),其中七斛高剂量组降糖率可达35%以上;七斛中、高剂量组小鼠摄食量、体重、CHOL和TG均显著降低(P<0.05);七斛中、高剂量组小鼠肝细胞变性减轻,脂肪沉积减少,肾小球轻度萎缩,充血显著减轻。结论七斛血糖制剂能显著降低KK-Ay小鼠的血糖、总胆固醇和甘油三酯水平,且能显著改善KK-Ay小鼠肝和肾的病变。
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关键词
糖尿病
七斛血糖制剂
高血糖
高血脂
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职称材料
一种易操作的小鼠肝细胞的分离及培养方法
3
作者
范仕郡
刘鑫
+3 位作者
杨东
祝元锋
鲁永玲
郑江
《中国比较医学杂志》
北大核心
2017年第11期75-79,共5页
目的在传统肝细胞提取方法的基础上,优化一种易操作、快速实用获取小鼠肝细胞的方法,为从事肝脏功能相关研究人员提供改良的实验方法参考。方法以肝脏分离液逆向灌注小鼠肝脏后,剪碎,肝脏酶消化后密度梯度离心分离肝细胞,转入培养基培...
目的在传统肝细胞提取方法的基础上,优化一种易操作、快速实用获取小鼠肝细胞的方法,为从事肝脏功能相关研究人员提供改良的实验方法参考。方法以肝脏分离液逆向灌注小鼠肝脏后,剪碎,肝脏酶消化后密度梯度离心分离肝细胞,转入培养基培养。采用台盼蓝染色计算细胞活力,流式细胞检测技术计算纯度,倒置显微镜观察细胞形态。结果获得较高纯度和活力的肝细胞,具备肝细胞的典型形态特征。结论通过逆向灌注,降低了灌注的难度,同时获得较高纯度、较高活力的肝细胞,经多次实验证明该方法确实是一种易操作、高效适用的肝细胞提取方法。
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关键词
C57BL/6J小鼠
肝细胞
逆向灌注
活力
纯度
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职称材料
题名
家蚕蛾吐出液的酶活性及蛋白质种类鉴定
被引量：
3
1
作者
祝元锋
王赵群
何宁佳
冯丽春
机构
西南
大学
生物技术学院
第三军医大学第一附属医院中心实验室
出处
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第3期452-457,共6页
基金
现代农业产业技术体系建设专项(No.CARS-22)
文摘
家蚕羽化时用口腔吐出液溶解前端茧层的丝胶及少量丝素后脱茧而出,测定吐出液中各种酶类的活性以及鉴定吐出液中的蛋白质种类,对解析家蚕羽化过程的溶茧机制具有重要意义。在家蚕羽化前解剖收集嗉囊液,在家蚕羽化时收集蛾吐出液,解剖获取蛾下颚晶体,测定3组样品中的蛋白酶、酯酶、纤溶酶和丝胶酶活性:在蛾吐出液和嗉囊液中皆检测到4种酶的活性,2组检测样品除蛋白酶活性接近外,酯酶、纤溶酶和丝胶酶活性则是蛾吐出液比嗉囊液分别高出21%、57%、26%;下颚晶体不具有纤溶酶活性,其他3种酶的活性也皆比蛾吐出液和嗉囊液低。采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析技术在家蚕蛾吐出液中鉴定出29种蛋白质,其中包括14种酶类、4种蛋白酶抑制剂、5种30K蛋白、1种转运相关蛋白、2种免疫相关蛋白和3种其他蛋白质。研究结果显示了蚕蛾吐出液成分的复杂性,同时说明家蚕羽化时吐出液对丝胶和部分丝素的水解除了溶茧酶的作用外,可能还有其他成分的参与。
关键词
家蚕
羽化
吐出液
嗉囊液
下颚晶体
酶活性
蛋白质
液相色谱一串联质谱
Keywords
Bombyx mori
Eclosion
Spit liquid
Craw liq- uid
Maxilla crystal
Enzyme activity
Protein
LC-MS/MS
分类号
S881.2 [农业科学—特种经济动物饲养]
Q55 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
七斛血糖制剂对KK-A^y小鼠降糖作用
2
作者
张璇
李小丽
王宁
姚欣彤
周维英
机构
第三军医大学
药学院药理学教研室
第三军医大学第一附属医院中心实验室
出处
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第10期1053-1054,共2页
文摘
目的观察七斛血糖制剂对自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠降糖作用及机制的初步研究。方法 C57BL/6小鼠作为正常对照组,KK-Ay小鼠随机分成6组,分别为模型对照组,七斛低、中、高剂量组(0.75,1.5和3.0 g生药·kg-1),阳性对照组(二甲双胍组和伏格列波糖组),灌胃给药28 d。于给药第8、15、22和29天测量小鼠随机血糖、体重及摄食量,并于第29天取血检测血脂四项,取肝和肾观察病理改变。结果与正常对照组比较,模型对照组小鼠摄食量、体重、血糖、总胆固醇(CHOL)和甘油三酯(TG)水平显著升高(P<0.01),小鼠肝细胞变性,脂肪沉积明显,中央静脉扩张、充血,肾小球萎缩严重并伴有充血;与模型对照组比较,给药第8、15、22和29天,七斛中、高剂量组小鼠的随机血糖均显著降低(P<0.05),其中七斛高剂量组降糖率可达35%以上;七斛中、高剂量组小鼠摄食量、体重、CHOL和TG均显著降低(P<0.05);七斛中、高剂量组小鼠肝细胞变性减轻,脂肪沉积减少,肾小球轻度萎缩,充血显著减轻。结论七斛血糖制剂能显著降低KK-Ay小鼠的血糖、总胆固醇和甘油三酯水平,且能显著改善KK-Ay小鼠肝和肾的病变。
关键词
糖尿病
七斛血糖制剂
高血糖
高血脂
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
一种易操作的小鼠肝细胞的分离及培养方法
3
作者
范仕郡
刘鑫
杨东
祝元锋
鲁永玲
郑江
机构
第三军医大学第一附属医院中心实验室
出处
《中国比较医学杂志》
北大核心
2017年第11期75-79,共5页
基金
国家自然科学基金项目(编号:81372089)
文摘
目的在传统肝细胞提取方法的基础上,优化一种易操作、快速实用获取小鼠肝细胞的方法,为从事肝脏功能相关研究人员提供改良的实验方法参考。方法以肝脏分离液逆向灌注小鼠肝脏后,剪碎,肝脏酶消化后密度梯度离心分离肝细胞,转入培养基培养。采用台盼蓝染色计算细胞活力,流式细胞检测技术计算纯度,倒置显微镜观察细胞形态。结果获得较高纯度和活力的肝细胞,具备肝细胞的典型形态特征。结论通过逆向灌注,降低了灌注的难度,同时获得较高纯度、较高活力的肝细胞,经多次实验证明该方法确实是一种易操作、高效适用的肝细胞提取方法。
关键词
C57BL/6J小鼠
肝细胞
逆向灌注
活力
纯度
Keywords
C57BL/6J mice
Hepatocytes
Reversed perfusion
Viability
Purity
分类号
R-33 [医药卫生]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
家蚕蛾吐出液的酶活性及蛋白质种类鉴定
祝元锋
王赵群
何宁佳
冯丽春
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2014
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
七斛血糖制剂对KK-A^y小鼠降糖作用
张璇
李小丽
王宁
姚欣彤
周维英
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
一种易操作的小鼠肝细胞的分离及培养方法
范仕郡
刘鑫
杨东
祝元锋
鲁永玲
郑江
《中国比较医学杂志》
北大核心
2017
0
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职称材料
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