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幽门螺杆菌尿素酶B亚单位功能片段的纯化及活性研究
被引量：
5
1
作者
袁小澎
邹全明
+4 位作者
柏杨
杨珺
郭鹰
张卫军
刘正祥
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第7期959-962,共4页
目的建立一种有效的尿素酶功能片段的纯化方法。方法应用已构建的尿素酶B功能片段表达载体,IPTG诱导表达,包涵体鉴定试验判断目的蛋白表达形式,AKTA100上分别采用亲和层析和离子层析等多级纯化方式优化纯化条件,HPLC检测纯化蛋白纯度,...
目的建立一种有效的尿素酶功能片段的纯化方法。方法应用已构建的尿素酶B功能片段表达载体,IPTG诱导表达,包涵体鉴定试验判断目的蛋白表达形式,AKTA100上分别采用亲和层析和离子层析等多级纯化方式优化纯化条件,HPLC检测纯化蛋白纯度,尿素酶活性阻断试验对纯化后功能片段进行活性鉴定。结果IPTG诱导后目的蛋白高表达,包涵体鉴定试验证实目的蛋白以可溶形式存在宿主细胞中,优化后方案得到目的蛋白纯度>90%且能被尿素酶B免疫的兔血清识别,纯化后蛋白免疫家兔后产生兔抗血清能够特异性中和Hp尿素酶活性。结论成功建立了尿素酶功能片段的纯化方法。
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关键词
幽门螺杆菌
蛋白纯化
尿素酶B
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职称材料
题名
幽门螺杆菌尿素酶B亚单位功能片段的纯化及活性研究
被引量：
5
1
作者
袁小澎
邹全明
柏杨
杨珺
郭鹰
张卫军
刘正祥
机构
南方医科
大学
珠江医院检验科
第三军医大学生物临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第7期959-962,共4页
基金
国家"十五"863课题(2001AA2151611)~~
文摘
目的建立一种有效的尿素酶功能片段的纯化方法。方法应用已构建的尿素酶B功能片段表达载体,IPTG诱导表达,包涵体鉴定试验判断目的蛋白表达形式,AKTA100上分别采用亲和层析和离子层析等多级纯化方式优化纯化条件,HPLC检测纯化蛋白纯度,尿素酶活性阻断试验对纯化后功能片段进行活性鉴定。结果IPTG诱导后目的蛋白高表达,包涵体鉴定试验证实目的蛋白以可溶形式存在宿主细胞中,优化后方案得到目的蛋白纯度>90%且能被尿素酶B免疫的兔血清识别,纯化后蛋白免疫家兔后产生兔抗血清能够特异性中和Hp尿素酶活性。结论成功建立了尿素酶功能片段的纯化方法。
关键词
幽门螺杆菌
蛋白纯化
尿素酶B
Keywords
Helicobacter pylori
protein purification
UreB
分类号
Q936 [生物学—微生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
幽门螺杆菌尿素酶B亚单位功能片段的纯化及活性研究
袁小澎
邹全明
柏杨
杨珺
郭鹰
张卫军
刘正祥
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
5
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