Wnt5a与髓细胞白血病发生关系的研究 被引量：5

1

作者 袁媛 李招权 +2 位作者 司维柯 潘静 赵宸 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第21期2056-2059,共4页

目的观察Wnt5a在髓细胞白血病中的表达以及外源性Wnt5a对K562细胞生长的影响。方法RT-PCR检测5例急性髓细胞白血病、6例慢性髓细胞白血病外周血或骨髓标本及白血病细胞系中Wnt5a的表达。用AdWnt5a和AdG-FP腺病毒转染CHO细胞制备的条件... 目的观察Wnt5a在髓细胞白血病中的表达以及外源性Wnt5a对K562细胞生长的影响。方法RT-PCR检测5例急性髓细胞白血病、6例慢性髓细胞白血病外周血或骨髓标本及白血病细胞系中Wnt5a的表达。用AdWnt5a和AdG-FP腺病毒转染CHO细胞制备的条件培养液分别处理K562细胞1～5d,采用细胞计数、台盼蓝染色、细胞形态等方法观察Wnt5a对K562细胞生长影响。结果6例慢性髓细胞白血病均未表达Wnt5a,5例急性髓细胞白血病中4例不表达或弱表达,仅1例完全缓解的病人高表达Wnt5a。K562、HL-60细胞中Wnt5a也不表达,Jurkat细胞高表达。以GFP条件培养液处理细胞为对照,Wnt5a条件培养液处理K562细胞生长明显受到抑制,但未影响细胞的存活率。与对照相比细胞形态上出现了分化的表型。结论Wnt5a在急慢性髓细胞白血病外周血或骨髓中以及髓系白血病细胞株中均表达缺失或降低,并且外源性的Wnt5a可抑制K562细胞生长并有诱导其分化的现象,提示Wnt5a的表达下调可能与髓细胞白血病的发生有关。 展开更多

关键词 WNT5A 白血病 K562细胞 WNT信号 重组腺病毒

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骨髓纤维化患者TGF-β_1及其Ⅰ、Ⅱ型受体测定的临床意义 被引量：3

2

作者 陈晓莉 史占忠 +1 位作者 蒲晓允 邓均 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期457-458,共2页

目的　研究转化生长因子 β1(TGF β1)及其Ⅰ、Ⅱ型受体 (TGFR1及TGFR2 )在骨髓纤维化发生、发展中的作用 ,并观察其在骨髓纤维化预后方面的意义。方法　用SABC免疫组织化学方法观察TGF β1及TGFR1、TGFR2在 2 3例骨髓纤维化患者骨髓组... 目的　研究转化生长因子 β1(TGF β1)及其Ⅰ、Ⅱ型受体 (TGFR1及TGFR2 )在骨髓纤维化发生、发展中的作用 ,并观察其在骨髓纤维化预后方面的意义。方法　用SABC免疫组织化学方法观察TGF β1及TGFR1、TGFR2在 2 3例骨髓纤维化患者骨髓组织的表达情况 ,并应用ELISA法测定骨髓纤维化患者血清中的TGF β1水平。结果　原发性和继发性骨髓纤维化患者骨髓组织TGF β1及TGFR1的表达水平均明显高于对照组 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,而TGFR2的表达水平与对照组比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。骨髓纤维化患者血清TGF β1水平明显高于对照组 ,差异非常显著 (P <0 .0 1) ,继发性骨髓纤维化患者升高更明显 ,骨髓纤维化临床缓解后血清TGF β1水平下降至接近正常。结论　TGF β1及其Ⅰ、Ⅱ型受体参与骨髓纤维化的发生 ,骨髓纤维化患者TGF β1、TGFR1的检测有助于判断其预后。 展开更多

关键词 骨髓纤维化 转化生长因子-Β1 转化生长因子-β1受体 I型 Ⅱ型

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Wnt5a基因在淋巴细胞系恶性肿瘤中的表达分析 被引量：3

3

作者 邓刚 司维柯 +2 位作者 潘静 赵宸 李招权 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第19期1832-1835,共4页

目的检测Wnt5a基因在淋巴细胞系恶性肿瘤患者骨髓中的表达,探讨Wnt5a基因与淋巴细胞系恶性肿瘤发生的关系。方法采用氯化氨试剂裂解红细胞收集有核细胞;半定量RT-PCR方法检测19例淋巴细胞系恶性肿瘤、11例治疗缓解淋巴细胞系恶性肿瘤、2... 目的检测Wnt5a基因在淋巴细胞系恶性肿瘤患者骨髓中的表达,探讨Wnt5a基因与淋巴细胞系恶性肿瘤发生的关系。方法采用氯化氨试剂裂解红细胞收集有核细胞;半定量RT-PCR方法检测19例淋巴细胞系恶性肿瘤、11例治疗缓解淋巴细胞系恶性肿瘤、27例正常人骨髓标本和10例脐带血CD34+细胞中Wnt5a mRNA的表达;免疫细胞化学法检测部分标本中Wnt5a蛋白表达。结果Wnt5a mRNA在正常人、淋巴细胞系恶性肿瘤病例、治疗缓解病例和脐带血CD34+细胞中的阳性表达率分别为88.9%(24/27)、10.5%(2/19)、72.7%(8/11)、100%(10/10),半定量均值分别为(0.4015±0.150)、(0.1139±0.048)、(0.3570±0.141)、(0.2475±0.095)。经统计学分析Wnt5a mRNA在淋巴细胞系恶性肿瘤病例中的表达明显低于正常人(P<0.05);治疗缓解病例与正常人间没有显著性差异(P>0.05),而与未缓解病例间有差异(P<0.05);在脐带血CD34+细胞中的表达低于正常人(P<0.05)但高于淋巴细胞系恶性肿瘤病例(P<0.05);Wnt5a蛋白在正常人中阳性表达,而在淋巴细胞系恶性肿瘤病例中低表达或表达缺失。结论Wnt5a基因在淋巴细胞系恶性肿瘤病例中表达缺失而在治疗缓解病例中表达恢复,提示淋巴细胞系恶性肿瘤的发生可能与Wnt5a基因表达缺失或下调有关,Wnt5a可以作为一个淋巴细胞系恶性肿瘤诊断与疗效评价的指标。 展开更多

关键词 WNT5A 淋巴细胞系恶性肿瘤 基因表达

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K562细胞影响BMSCs生长及MIP-1α表达的实验研究 被引量：5

4

作者 邓均 蒲晓允 +3 位作者 张春雷 李招权 黄辉 陈晓莉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第19期1720-1722,共3页

目的　研究K5 62细胞在与正常骨髓基质细胞 (bonemarrowstromalcells ,BMSCs)接触和隔离培养条件下对BMSCs生长特性及造血负调因子MIP 1α表达的影响。方法　加入K5 62细胞与BMSCs直接接触与用隔离膜两种方式培养 ,第 2、4、7、12天观察... 目的　研究K5 62细胞在与正常骨髓基质细胞 (bonemarrowstromalcells ,BMSCs)接触和隔离培养条件下对BMSCs生长特性及造血负调因子MIP 1α表达的影响。方法　加入K5 62细胞与BMSCs直接接触与用隔离膜两种方式培养 ,第 2、4、7、12天观察BMSCs生长增殖情况 ;检测培养上清的MIP 1α含量和BMSCs中MIP 1αmRNA的表达 ;TUNEL法检测BMSCs的凋亡。结果　加入K5 62细胞培养后BMSCs在第 12天时数量显著减少 ;接触培养BMSCs的凋亡在第 4天后显著高于对照组 (P <0 .0 1) ;MIP 1α水平升高到 4d与对照组有显著差异 (P <0 .0 1) ;BMSCs胞浆MIP 1αmRNA阳性率升高到第4天后与对照组有显著差异 (P <0 .0 1)。结论　K5 62细胞可抑制正常BMSCs生长 ,促进其凋亡 ,上调其MIP 1α的表达 ,可能是造成正常造血的抑制和白血病细胞导致造血微环境损伤的主要原因之一。 展开更多

关键词 MIP-1Α BMSC K562细胞 表达 对照组 正常 凋亡 RNA 生长 造血

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低氧诱导因子-1α对骨形态发生蛋白2诱导的干细胞成软骨、成骨分化的影响 被引量：10

5

作者 周年 黄伟 +8 位作者 廖军义 胡宁 陈筱蓉 梁熙 司维柯 杨忠 易世雄 凡廷旭 赵辰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1243-1248,共6页

目的探讨低氧通路中关键转录调控因子低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)对骨形态发生蛋白2(bone morpho-genetic protein 2,BMP2)诱导干细胞骨、软骨分化的影响,阐明HIF-1α在干细胞成骨、软骨分化中的作用。方... 目的探讨低氧通路中关键转录调控因子低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)对骨形态发生蛋白2(bone morpho-genetic protein 2,BMP2)诱导干细胞骨、软骨分化的影响,阐明HIF-1α在干细胞成骨、软骨分化中的作用。方法构建相应腺病毒AdBMP2、AdHIF-1α、AdGFP,单独或共同感染干细胞,Western blot法检测成软骨、成骨分化关键转录调控因子Sox9、Runx2的表达,Real-time PCR法检测成软骨、成骨分化标志物COL2A1、aggrecan、COL1A1和ALP mRNA表达,Alcian blue、ALP及Alizarin red S染色检测软骨细胞外基质及骨基质钙盐沉积情况。进行干细胞裸鼠皮下移植,观察不同处理组形成骨块的组织结构情况,探讨HIF-1α对BMP2诱导干细胞成骨、软骨分化的影响。结果诱导分化后第1、3天,BMP2+HIF-1α组Sox9蛋白表达明显高于BMP2单独处理组,而BMP2+HIF-1α组Runx2蛋白表达明显低于BMP2单独处理组。诱导分化后第7、9天,BMP2+HIF-1α组COL2A1、aggrecan mRNA相对表达明显高于BMP2单独处理组(P<0.05),而BMP2+HIF-1α组COL1A1、ALP mRNA相对表达明显低于BMP2单独处理组(P<0.05)。Alcian blue染色发现BMP2+HIF-1α组软骨细胞外基质分泌多于BMP2单独处理组,染色更深;ALP染色发现BMP2+HIF-1α组ALP的活性弱于BMP2单独处理组;茜素红染色发现BMP2+HIF-1α组较BMP2单独处理组骨基质钙盐沉积更少;体内试验组织学观察见BMP2+HIF-1α组软骨成分更多,骨化不明显,BMP2单独处理组软骨成分少,软骨内骨化更明显。结论HIF-1α明显增强了BMP2诱导的干细胞成软骨分化,抑制了成骨分化及软骨内骨化,维持了软骨分化表型。 展开更多

关键词 低氧诱导因子-1Α 骨形态发生蛋白2 干细胞 软骨分化 成骨分化

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骨骼肌纤维化的细胞与分子机制研究进展 被引量：13

6

作者 邓修元 吴志彬 杨忠 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2014年第2期142-147,共6页

骨骼肌是具有完全再生能力的组织,在急性创伤性损害后骨骼肌多能完成再生修复。当出现慢性退行性病变如进行性肌营养不良和反复肌纤维损伤时,骨骼肌修复过程常伴随着纤维化的发生。通过近十余年来对骨骼肌纤维化机制的研究,发现多种细... 骨骼肌是具有完全再生能力的组织,在急性创伤性损害后骨骼肌多能完成再生修复。当出现慢性退行性病变如进行性肌营养不良和反复肌纤维损伤时,骨骼肌修复过程常伴随着纤维化的发生。通过近十余年来对骨骼肌纤维化机制的研究,发现多种细胞和系列调控分子参与该过程,特别是肌卫星细胞来源的肌成纤维细胞等相关细胞和转化生长因子β(TGF-β)等促纤维化发展的生长因子。本文就骨骼肌纤维化的细胞分子机制及相关拮抗策略进行综述。 展开更多

关键词 骨骼肌 纤维化 肌卫星细胞 肌成纤维细胞 转化生长因子Β 综述 TRANSFORMING growth factorβ

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外源性Wnt5a诱导K562细胞分化表型的实验研究 被引量：6

7

作者 袁媛 司维柯 +2 位作者 李招权 潘静 赵宸 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第5期946-949,共4页

本研究探讨外源性Wnt5a诱导K562细胞定向分化的作用。用重组腺病毒AdWnt5a、AdGFP感染CHO细胞,分别制备Wnt5a和GFP对照条件培养液,并处理K562细胞1-7天,用光学显微镜和电子显微镜观察细胞形态变化;采用过氧化物酶(POX)、糖原(PAS)和非... 本研究探讨外源性Wnt5a诱导K562细胞定向分化的作用。用重组腺病毒AdWnt5a、AdGFP感染CHO细胞,分别制备Wnt5a和GFP对照条件培养液,并处理K562细胞1-7天,用光学显微镜和电子显微镜观察细胞形态变化;采用过氧化物酶(POX)、糖原(PAS)和非特异性酯酶(α-NAE)染色、细胞表面分化抗原CD13、CD14、CD68鉴定K562细胞的分化表型;用流式细胞术检测细胞分化周期的变化。结果表明:与对照GFP条件培养液相比,Wnt5a条件培养液处理的K562细胞形态和超微结构均出现了分化成熟的特征;POX、PAS、α-NAE细胞化学染色均为阳性,并且α-NAE阳性70%可被氟化钠抑制;单核细胞系表面标志抗原CD14、CD68和粒细胞系表面标志抗原CD13经免疫细胞化学染色均呈阳性,但CD13与对照比较无显著性差异;Wnt5a处理K562细胞5天,细胞周期阻滞在G2期。结论:外源性的Wnt5a可诱导K562细胞向成熟方向分化,并且有向单核细胞系分化的现象。 展开更多

关键词 WNT5A K562细胞 诱导分化 WNT信号

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外源性Wnt5a激活K562细胞非经典Wnt5a／Ca^2＋信号途径研究 被引量：4

8

作者 李招权 司维柯 +3 位作者 邹全明 袁媛 潘静 赵宸 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期924-927,共4页

目的观察外源性Wat5a对K562细胞非经典Wnt5a/Ca2+途径的影响,进一步研究外源性Wnt5a诱导K562细胞的分化机制。方法激光共聚焦显微镜观察Ca2+内流的变化,以RT-PCR及免疫组化检测β-catenin的表达变化,以Western blot检测cyclinD1的表达... 目的观察外源性Wat5a对K562细胞非经典Wnt5a/Ca2+途径的影响,进一步研究外源性Wnt5a诱导K562细胞的分化机制。方法激光共聚焦显微镜观察Ca2+内流的变化,以RT-PCR及免疫组化检测β-catenin的表达变化,以Western blot检测cyclinD1的表达变化。结果外源性Wnt5a能明显促进K562细胞Ca2+内流,显著下调cyclinD1表达,且能下调K562细胞β-catenin表达,但β-catenin表达下调无统计学意义。结论外源性Wnt5a能激活K562细胞非经典Wnt5a/Ca2+途径,外源性Wnt5a诱导K562细胞分化机制可能与此相关。 展开更多

关键词 WNT5A K562细胞 CA^2+ β-catenin CYCLIN D1

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Cyr61与β-catenin在肝癌组织和细胞株中表达的相关性研究 被引量：5

9

作者 孙世俊 司维柯 +3 位作者 丁伟 潘静 李招权 赵宸 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期485-488,共4页

目的研究Cyr61与β-catenin在肝细胞肝癌和肝癌细胞株中的表达及其相关性,探讨二者在肝癌发生中的作用。方法采用免疫组化法检测32例肝细胞肝癌患者肝癌组织中Cyr61与β-catenin蛋白的表达水平;免疫组化法和RT-PCR检测正常肝细胞株L02... 目的研究Cyr61与β-catenin在肝细胞肝癌和肝癌细胞株中的表达及其相关性,探讨二者在肝癌发生中的作用。方法采用免疫组化法检测32例肝细胞肝癌患者肝癌组织中Cyr61与β-catenin蛋白的表达水平;免疫组化法和RT-PCR检测正常肝细胞株L02和肝癌细胞株HepG2、QGY-7701、H22中Cyr61与β-catenin蛋白与mRNA的表达水平;并比较二者的相关性。结果65.63%(21/32)肝癌标本Cyr61蛋白阳性表达,71.88%(23/32)肝癌标本β-catenin蛋白阳性表达,二者合并阳性表达有56.25%(18/32),合并阴性表达有18.75%(6/32),Cyr61表达与β-catenin表达呈正相关(r=0·425,P<0·05);正常肝细胞株L02及肝癌细胞株HepG2、QGY-7701、H22中Cyr61与β-catenin mRNA与蛋白均有表达,二者表达一致性达100%。结论Cyr61与β-catenin在肝癌和肝癌细胞株中高度一致阳性表达,提示Cyr61的表达可能与β-catenin的表达有关,二者可能在肝癌的发生中起到重要作用。 展开更多

关键词 CYR61 Β-CATENIN 癌 肝细胞

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过表达外源性Cyr61对人肝癌细胞株HepG2生长和迁移的影响 被引量：3

10

作者 丁伟 司维柯 +2 位作者 孙世俊 潘静 李招权 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期378-381,共4页

目的采用AdEasy系统构建的带有标记基因RFP的重组腺病毒Ad-Cyr61感染人肝癌细胞株HepG2,并观察外源性Cyr61对肿瘤细胞生长和迁移的影响。方法Ad-Cyr61与Ad-RFP分别感染人肝癌细胞株HepG2,荧光倒置显微镜观察荧光表达,通过RT-PCR、免疫... 目的采用AdEasy系统构建的带有标记基因RFP的重组腺病毒Ad-Cyr61感染人肝癌细胞株HepG2,并观察外源性Cyr61对肿瘤细胞生长和迁移的影响。方法Ad-Cyr61与Ad-RFP分别感染人肝癌细胞株HepG2,荧光倒置显微镜观察荧光表达,通过RT-PCR、免疫组化实验分别检测Ad-Cyr61的mRNA和蛋白的表达;通过MTT实验、细胞计数实验、克隆形成实验和划痕愈合实验,观察Cyr61对人肝癌细胞株HepG2细胞增殖和迁移的影响。结果Ad-Cyr61感染人肝癌细胞株HepG2,与对照组比较细胞数量增多,集落形成增加,细胞划痕逐渐愈合。结论Ad-Cyr61感染人肝癌细胞株HepG2后可促进细胞增殖和迁移,提示Cyr61在肿瘤发生和转移中可能起到重要作用。 展开更多

关键词 富半胱氨酸蛋白61 重组腺病毒 人肝癌HEPG2细胞 增殖 迁移

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纤状蛇纹石石棉对兔肺泡巨噬细胞影响的体外研究 被引量：7

11

作者 邓建军 董发勤 +4 位作者 蒲晓允 方育琼 蒋惠芝 董跃君 李德知 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第12期1170-1172,共3页

目的　探讨纤状蛇纹石石棉致肺泡巨噬细胞受损的机制。方法　采用体外细胞培养技术 ,以兔肺泡巨噬细胞死亡率、乳酸脱氢酶 (LDH)、超氧化物歧化酶 (SOD)活力及丙二醛 (MDA)含量变化来表示不同剂量、不同培养时间的纤状蛇纹石石棉对巨噬... 目的　探讨纤状蛇纹石石棉致肺泡巨噬细胞受损的机制。方法　采用体外细胞培养技术 ,以兔肺泡巨噬细胞死亡率、乳酸脱氢酶 (LDH)、超氧化物歧化酶 (SOD)活力及丙二醛 (MDA)含量变化来表示不同剂量、不同培养时间的纤状蛇纹石石棉对巨噬细胞的毒性。结果　纤状蛇纹石石棉对肺泡巨噬细胞的毒性存在着剂量 效应关系、时间 效应关系 ;12 5 μg/ml培养 18h后 ,细胞死亡率及LDH增加 ,5 0 0 μg/ml培养 5h后 ,细胞死亡率、LDH、MDA均明显增加 ,而SOD活力明显降低。随粉尘剂量的增加及培养时间的延长 ,细胞毒性也增加。 展开更多

关键词 纤状蛇纹石石棉 细胞毒性 肺泡巨噬细胞

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应激对大鼠血管紧张素Ⅱ与胃粘膜微循环及能量代谢的影响 被引量：4

12

作者 陈晓莉 蒲晓允 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期875-876,共2页

关键词 应激 血管紧张素Ⅱ 肾粘膜 微循环 能量代谢

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放射损伤对骨髓细胞间相互作用因素影响的研究 被引量：1

13

作者 蒲晓允 陈晓莉 +4 位作者 潘静 李招权 邓均 黄辉 叶勇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期116-118,共3页

目的　了解放射损伤条件下骨髓细胞的生物力学特性及与细胞间相互作用的关系。方法　以 6Gy6 0 Co照射昆明系小鼠制备动物模型 ,以细胞电泳法检测骨髓细胞的细胞电泳率 ,荧光探针法测定细胞膜微粘度 ,旋转法测细胞的粘附性 ,核孔滤膜法... 目的　了解放射损伤条件下骨髓细胞的生物力学特性及与细胞间相互作用的关系。方法　以 6Gy6 0 Co照射昆明系小鼠制备动物模型 ,以细胞电泳法检测骨髓细胞的细胞电泳率 ,荧光探针法测定细胞膜微粘度 ,旋转法测细胞的粘附性 ,核孔滤膜法检测细胞的变形指数。结果　放射损伤后骨髓细胞的变形能力降低 ,细胞膜微粘度增加 ,粘附率降低 ,细胞电泳率降低。结论　放射线对骨髓细胞 (包括基质细胞和造血细胞 )的力学特性有显著影响 ,是放射损伤后造血功能减退的原因之一。 展开更多

关键词 放射损伤 骨髓细胞 粘附性 膜流动性 细胞变形性 生物力学 动物模型

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Wnt5a基因在急性髓细胞白血病病例中的表达分析 被引量：1

14

作者 赵宸 杨宗林 +5 位作者 司维柯 邓刚 牛长春 袁媛 李招权 潘静 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1034-1037,共4页

目的检测Wnt5a基因在良性血液病、急性髓细胞白血病及缓解病例骨髓中的表达情况,探讨Wnt5a在急性髓细胞白血病发生中的作用。方法RT-PCR方法检测18例良性血液病病例,30例急性髓细胞白血病初诊病例和25例缓解病例骨髓中Wnt5amRNA的表达情... 目的检测Wnt5a基因在良性血液病、急性髓细胞白血病及缓解病例骨髓中的表达情况,探讨Wnt5a在急性髓细胞白血病发生中的作用。方法RT-PCR方法检测18例良性血液病病例,30例急性髓细胞白血病初诊病例和25例缓解病例骨髓中Wnt5amRNA的表达情况;免疫细胞化学法检测对应骨髓中Wnt5a蛋白的表达情况。结果Wnt5a mRNA在良性血液病、急性髓细胞白血病病例和缓解病例中的阳性表达率分别为88.9%(16/18)、30%(9/30)和68.0%(17/25),半定量值分别为(0.3826±0.1908)、(0.1041±0.0590)和(0.2606±0.1466)。统计学分析Wnt5a mRNA在初诊病例中的表达明显低于缓解病例(P<0.05),缓解病例与良性血液病之间无明显差异(P>0.05);Wnt5a蛋白在良性血液病中阳性表达,在急性髓细胞白血病初诊病例中低表达或表达缺失,在缓解病例中表达恢复。结论Wnt5a基因在急性髓细胞白血病初诊病例中表达缺失而在治疗缓解病例中表达恢复,提示急性髓系白血病的发生可能与Wnt5a基因表达缺失或下调有关,Wnt5a可以作为一个髓系白血病诊断、指导治疗和疗效评价的指标。 展开更多

关键词 WNT5A 基因表达 急性髓细胞白血病 血液病

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诱导型一氧化氮合酶基因在3T3细胞中的转染和鉴定 被引量：1

15

作者 蒲晓允 张春雷 +2 位作者 邓均 李召权 黄辉 《医学研究生学报》 CAS 2004年第6期484-486,F002,共4页

目的 :观察人诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)基因转染 3T3成纤维细胞的可能性。　方法 :用阳性脂质体将含人iNOS基因的真核表达载体pcDNA3.0 iNOS转染至 3T3成纤维细胞 ,用G4 18筛选 ,通过RT PCR、免疫组化的方法鉴定。　结果 :pcDNA3.0 i... 目的 :观察人诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)基因转染 3T3成纤维细胞的可能性。　方法 :用阳性脂质体将含人iNOS基因的真核表达载体pcDNA3.0 iNOS转染至 3T3成纤维细胞 ,用G4 18筛选 ,通过RT PCR、免疫组化的方法鉴定。　结果 :pcDNA3.0 iNOS基因转染的 3T3细胞有人iNOS基因mRNA和iNOS蛋白的表达。　结论 :iNOS基因能在 3T3成纤维细胞得到稳定转染和表达 ,能为模拟体内一氧化氮 (NO)作用提供有力的工具。 展开更多

关键词 一氧化氮 基因转染 诱导型一氧化氮合酶

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正常和病理骨髓基质细胞对K562细胞增殖和凋亡的影响 被引量：1

16

作者 邓均 周桃莉 +3 位作者 李招权 黄辉 陈晓莉 蒲晓允 《医学研究生学报》 CAS 2006年第9期777-779,共3页

目的:研究正常和病理骨髓基质细胞(BMSC)在与K562细胞接触和隔离培养条件下对该细胞株增殖与凋亡的影响。方法:将慢性髓细胞白血病(CML)患者和正常人BMSC各自分为单独培养的对照组、K562与BMSC直接接触的接触培养组和隔离培养组,分别于... 目的:研究正常和病理骨髓基质细胞(BMSC)在与K562细胞接触和隔离培养条件下对该细胞株增殖与凋亡的影响。方法:将慢性髓细胞白血病(CML)患者和正常人BMSC各自分为单独培养的对照组、K562与BMSC直接接触的接触培养组和隔离培养组,分别于第2、4、7和12 d观察K562细胞生长增殖情况;以末端标记技术(TUNEL)检测K562细胞的凋亡。结果:正常BMSC培养条件下与对照组比较,接触培养组和隔离培养组K562细胞数量在培养第4 d后显著升高(P<0.05),接触培养组显著快于隔离培养组(P<0.05);在CML BMSC培养条件下,K562的生长速度显著加快,4 d以后与对照组比较的差异有显著性意义(P<0.01)。K562细胞凋亡在正常BMSC培养条件下显著减少,隔离培养组在第7 d、接触培养组在第4 d与对照组比较的差异有显著性意义(P<0.05);在CML BMSC培养条件下,隔离培养组在4 d后、接触培养组在2 d后凋亡减少,与对照组比较差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论:BMSC可通过间接因素(调节因子作用)保护K562细胞,直接接触因素(由黏附分子介导的直接作用)能加强这种保护作用,导致K562细胞生长增快,凋亡减少。 展开更多

关键词 骨髓基质细胞 K562细胞 凋亡

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辐射对L929细胞生长及CCN1基因表达的影响 被引量：1

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作者 万莹铧 司维柯 +5 位作者 杜业军 李招权 潘静 赵宸 李军 粟永萍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期205-208,共4页

目的通过观察辐射对小鼠皮肤成纤维细胞系L929生长及CCN1基因表达的影响,探讨CCN1基因与辐射损伤的关系。方法体外培养L929细胞系,以4Gy60Coγ射线照射为辐射组,并设对照组,MTT法测细胞增殖变化,平板克隆形成实验检测克隆形成能力,流式... 目的通过观察辐射对小鼠皮肤成纤维细胞系L929生长及CCN1基因表达的影响,探讨CCN1基因与辐射损伤的关系。方法体外培养L929细胞系,以4Gy60Coγ射线照射为辐射组,并设对照组,MTT法测细胞增殖变化,平板克隆形成实验检测克隆形成能力,流式细胞术测细胞周期,RT-PCR及免疫细胞化学法检测L929细胞中CCN1基因的表达情况。结果辐射组细胞辐照2d增殖抑制明显(P<0.01),克隆形成也明显受到抑制(P<0.05);辐射后24h,细胞出现G2期停滞;辐射后6hL929细胞CCN1的mRNA表达水平明显降低(P<0.01),至24h开始回调(P<0.05);辐照后24～48h,细胞CCN1蛋白的表达水平明显下降(P<0.01)。结论因辐照生长受到抑制的小鼠成纤维细胞L929,其CCN1基因的表达水平下调,提示CCN1基因的表达水平低下是辐射导致细胞生长抑制的因素之一。 展开更多

关键词 辐射 电离 细胞系 L929 Cyr61/CCN1

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不同剂量螺旋藻多糖对小鼠干/祖细胞增殖能力的影响

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作者 陈晓莉 蒲晓允 +4 位作者 邓均 李招权 潘静 黄辉 叶勇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期1002-1002,共1页

关键词 螺旋藻多糖 细胞增殖 造血干细胞 螺旋藻 单核细胞 祖细胞

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外源性CCN1促进辐射损伤L929细胞的生长和迁移

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作者 李招权 万莹铧 +4 位作者 李军 司维柯 粟永萍 杜业军 潘静 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1127-1130,共4页

目的观察外源性CCN1是否促进辐射损伤L929细胞生长和迁移,以探讨CCN1在放创复合伤修复中的作用。方法以4Gyγ射线辐射L929细胞作为辐射损伤细胞模型,细胞辐射后分别加入2mlCCN1或RFP条件培养液,37℃,5%CO2培养,作为CCN1组和RFP组;空白... 目的观察外源性CCN1是否促进辐射损伤L929细胞生长和迁移,以探讨CCN1在放创复合伤修复中的作用。方法以4Gyγ射线辐射L929细胞作为辐射损伤细胞模型,细胞辐射后分别加入2mlCCN1或RFP条件培养液,37℃,5%CO2培养,作为CCN1组和RFP组;空白条件培养液培养辐射损伤L929细胞作为空白组。各组进行MTT试验、平板克隆形成试验、细胞周期分析和划痕愈合试验。结果与RFP组和空白组相比,CCN1条件培养液处理后,与空白组辐射损伤L929细胞增殖明显增强(P<0.05),与RFP组和空白组相比,克隆形成率明显增高[CCN1组(34.4±3.6)%,RFP组(24.5±2.9)%,空白组(29.5±3.5)%](P<0.05),培养5d时CCN1组S期细胞[(37.3±2.3)%]比RFP组[(25.2±1.9)%]和空白组[(26.9±1.3)%]增多(P<0.01),细胞迁移能力明显增强划痕愈合试验在1～5d的愈合宽度/原宽度值与RFP组和空白组相比差异显著(P<0.01)。结论外源性CCN1可促进辐射损伤的成纤维细胞生长和迁移,提示CCN1是放创复合伤修复的促进因素之一。 展开更多

关键词 CCN1 辐射损伤 L929 增殖 迁移

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凝血酶增强内皮细胞蛋白C受体表达及释放

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作者 李招权 蒲晓允 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期153-153,163,共2页

关键词 内皮细胞 蛋白C 凝血酶 受体表达 大血管 体外细胞培养 抗凝活性 游离型 释放 发现

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