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题名人瘦素在毕赤酵母中的表达及其分离纯化
被引量：4
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作者
刘先俊
刘方欣
漆洪波
邹全明
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机构
重庆医科大学基础医学院生化教研室
重庆医科大学基础医学院核医学教研室
重庆医科大学第二临床学院妇产科
第三军医大学检验系临床免疫教研室
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出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
2002年第3期250-252,共3页
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文摘
目的:为了获得人(瘦素或瘦蛋白)而进一步研究其生理作用、作用机制与病理意义。Leptin方法:采用逆转录-聚合酶链反应()方法,从人腹部皮下脂肪组织中分离脂肪细胞总,经逆转录、扩增出肥胖基因的编码序列RT-PCRRNAPCR(基因),再克隆到表达载体α中,在毕赤酵母菌株中表达。ObcDNApPICZGS115结果:的扩增产物长度为,克PCR462bp隆后的表达产物,经证实,约为分子量为的特异蛋白条带,与人瘦素的理论预计值相符合,经放免法测定,SDS-PAGE17kD表达量达到。通过其多聚组氨酸接头与金属镍螯合的亲和层析法纯化表达蛋白,在上呈现分子量为的36mg/LSDS-PAGE17kD单一蛋白条带。结论:通过基因工程手段已成功表达出人瘦素并分离纯化得到纯度较高的人瘦素。
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关键词
人瘦素
毕赤酵母
表达
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Keywords
Human leptinPichia pastoris yeastExpression
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分类号
TQ926
[轻工技术与工程—发酵工程]
Q57
[生物学—生物化学]
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