神经电刺激技术在癫痫治疗中的应用 被引量：5

1

作者 杨辉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第22期2235-2239,共5页

我国现有癫痫患者约900万,同时还以每年40万的数量递增,是危害我国人口整体素质的重要疾病之一。有20%～30%的癫痫患者对现有的抗癫痫药物治疗不敏感,最终发展成为药物难治性癫痫,其中部分患者经过手术治疗可取得较为满意的疗效,然而,... 我国现有癫痫患者约900万,同时还以每年40万的数量递增,是危害我国人口整体素质的重要疾病之一。有20%～30%的癫痫患者对现有的抗癫痫药物治疗不敏感,最终发展成为药物难治性癫痫,其中部分患者经过手术治疗可取得较为满意的疗效,然而,仍有相当数量的患者缺乏手术适应证或术后疗效不佳,因此,不断拓展癫痫的治疗手段,对提高癫痫患者的生存质量具有重要意义。 展开更多

关键词 大脑 电刺激 癫痫

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儿童期灾难性癫痫综合征的外科治疗 被引量：3

2

作者 杨辉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1105-1106,共2页

关键词 儿童癫痫 灾难性癫痫 外科治疗 WEST综合征 Lennox—Gastaut综合征

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皮质发育障碍所致儿童癫痫176例手术治疗的临床分析 被引量：9

3

作者 刘仕勇 安宁 +6 位作者 杨辉 杨梅华 侯智 廖伟 肖农 张琴 蔡方成 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第22期2244-2248,共5页

目的分析不同类型皮质发育障碍(malformation of cortical dysplasia,MCD)所致儿童癫痫的临床特征、术前评估和预后,探讨不同类型儿童MCD的外科干预策略。方法回顾性分析我中心采用外科手术治疗176例MCD伴儿童癫痫的临床资料,致痫灶定... 目的分析不同类型皮质发育障碍(malformation of cortical dysplasia,MCD)所致儿童癫痫的临床特征、术前评估和预后,探讨不同类型儿童MCD的外科干预策略。方法回顾性分析我中心采用外科手术治疗176例MCD伴儿童癫痫的临床资料,致痫灶定位情况和外科手术结果,并对不同类型MCD的结果进行比较分析。结果 MCD占同期儿童癫痫病因的34.2%。术后疗效按Engel分级,Ⅰ级106例,Ⅱ级31例,Ⅲ级21例,Ⅳ级14例,有效率89.8%,优良率77.8%,平均智商(IQ)从术前的66.5分提高到72.9分。在不同类型MCD中,半巨脑、结节性硬化、局灶性皮质发育障碍、无/巨脑回畸形、灰质异位和多小脑回的术后癫痫控制优良率依次为100%、90.9%、76.8%、75.0%、66.7%和62.5%,Ⅱ型局灶性皮质发育障碍(focal cortical dysplasia,FCD)疗效优于Ⅰ型FCD(84.2%vs 70.5%),合并肿瘤的FCD的优于单纯的FCD(86.4%vs 76.6%),伴海马硬化的患儿疗效较佳(85.7%vs 76.7%)。智力评估结果显示,FCD和结节性硬化患儿均得到显著提高,其他类型智力改善不明显。结论不同类型MCD具有不同的临床特点、影像学特点、电生理特点、功能学和外科预后,因此需要重视针对不同类型MCD,进行差异化、个体化的外科评估程序和手术处理。 展开更多

关键词 儿童难治性癫痫 外科治疗 皮质发育障碍 局灶性皮质发育障碍 结节性硬化

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血清和脑脊液中IL-6含量变化在儿童难治性癫痫发作中的意义 被引量：11

4

作者 尹清 树海峰 +1 位作者 刘宏亮 杨辉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1234-1236,共3页

目的探讨白细胞介素-6(IL-6)与小儿难治性癫痫发病机制之间的潜在关系。方法采用酶联免疫吸附法检测48例小儿难治性癫痫患者癫痫发作后血清和脑脊液中IL-6的含量变化。结果癫痫发作1、6 h后,癫痫组患者血清IL-6水平分别为(8.23±0.... 目的探讨白细胞介素-6(IL-6)与小儿难治性癫痫发病机制之间的潜在关系。方法采用酶联免疫吸附法检测48例小儿难治性癫痫患者癫痫发作后血清和脑脊液中IL-6的含量变化。结果癫痫发作1、6 h后,癫痫组患者血清IL-6水平分别为(8.23±0.58)、(11.63±1.35)pg/ml,与正常对照组(0.75±0.48)pg/ml相比有统计学意义(P<0.05,P<0.01);癫痫发作1、6 h后,脑脊液中IL-6水平亦逐渐升高,分别为(10.35±3.06)、(19.55±2.32)pg/ml,显著高于正常对照组[(1.27±0.65)pg/ml,P<0.01];而发作后12 h,癫痫组患者血清和脑脊液中的IL-6含量趋于正常[分别为(1.05±0.66)、(3.54±1.31)pg/ml],与正常对照组相比无显著差异(P>0.05)。结论癫痫发作可诱导血清和脑脊液中IL-6表达水平的上调,这可能促进炎性损伤的进一步加重,可能与小儿难治性癫痫的病情进展密切相关。 展开更多

关键词 小儿 难治性癫痫 癫痫发作 白细胞介素-6

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难治性颞叶癫痫患者颞叶皮层金属基质蛋白酶-9的表达 被引量：2

5

作者 李松 余思逊 +6 位作者 贺教江 张春青 树海峰 阴金波 刘仕勇 安宁 杨辉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期492-495,共4页

目的研究成人难治性颞叶癫痫患者颞叶皮层中金属基质蛋白酶-9(MMP-9)的表达,探讨其在难治性癫痫发病中的作用机制。方法收集新桥医院神经外科手术切除的成人难治性颞叶癫痫颞叶皮层标本24例,与15例正常对照皮层比较,运用RT-PCR、明胶酶... 目的研究成人难治性颞叶癫痫患者颞叶皮层中金属基质蛋白酶-9(MMP-9)的表达,探讨其在难治性癫痫发病中的作用机制。方法收集新桥医院神经外科手术切除的成人难治性颞叶癫痫颞叶皮层标本24例,与15例正常对照皮层比较,运用RT-PCR、明胶酶谱法和免疫组织化学方法检测MMP-9在致痫灶中的表达分布。结果在难治性颞叶癫痫患者颞叶皮层中,MMP-9在mRNA、酶活性较对照组明显升高(P<0.05)。免疫组化结果显示,在正常皮层中MMP-9弱至中等强度表达于神经元上,偶见胶质细胞表达,而在致痫灶中强表达于锥体神经元和星形胶质细胞上,免疫染色强度明显高于正常皮层[染色强度值:(2.13±0.56)vs(1.52±0.69);相对光密度值:(55.60±7.20)vs(37.10±8.70);P<0.05]。结论难治性颞叶癫痫患者颞叶致痫皮层中MMP-9表达增高可能与癫痫发病密切相关,有可能成为新的难治性癫痫的药物靶点。 展开更多

关键词 难治性颞叶癫痫 金属基质蛋白酶9 RT-PCR 明胶酶谱法 免疫组织化学

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5例小脑半球梗死的外科治疗

6

作者 吕胜青 宋业纯 +3 位作者 何家全 黄其林 周政 杨辉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第19期1863-1864,共2页

关键词 后颅窝 小脑半球梗死 外科治疗 占位效应

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颅内埋藏电极脑电图监测在难治性婴儿痉挛症外科中的应用

7

作者 杨梅华 黄轶 +7 位作者 刘仕勇 杨辉 安宁 石先俊 刘立红 肖农 张琴 蔡方成 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第22期2249-2253,共5页

目的探讨颅内埋藏电极脑电图(intracranialelectroencephalogram,iEEG)在难治性婴儿痉挛症(intractableinfantile spasms,IIS)外科中的应用。方法无创检查定位困难的IIS 18例,采用双侧颅内硬膜下电极,其中14例同时在颅外安装头皮电极,... 目的探讨颅内埋藏电极脑电图(intracranialelectroencephalogram,iEEG)在难治性婴儿痉挛症(intractableinfantile spasms,IIS)外科中的应用。方法无创检查定位困难的IIS 18例,采用双侧颅内硬膜下电极,其中14例同时在颅外安装头皮电极,行长程视频脑电图监测。根据术后病理及随访结果分析iEEG监测对IIS的定位价值,并与头皮脑电图(scale electroencephalogram,sEEG)对比其特点。结果在iEEG上仅7例脑电图特征同sEEG,表现为典型高度失律或变异失律,其余11例未见失律,为后半球异常或局灶、单侧发放。iEEG定位9例为单侧局灶起源,5例明确为双侧起源但以一侧优势,4例难辨别。14例接受开颅手术治疗。术后随访1～3年,疗效按Engel的标准评定,效果优良(EngelⅠ+Ⅱ级)为78.6%(11/14),无感染等严重并发症发生。结论颅内埋藏电极脑电图能使无创检查定位困难的77.8%的IIS准确定位并获得满意手术疗效。sEEG上出现的高度失律并非真正的全脑性放电,iEEG发作期记录到皮层恒定的局灶改变提示症状性或隐源性IS的可能,其痫灶起源于皮层。 展开更多

关键词 难治性婴儿痉挛症 致痫灶 颅内脑电图

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颞叶内侧癫痫患者颞叶皮层致痫灶中Nogo-A信号通路的表达 被引量：3

8

作者 朱孔江 李松 +3 位作者 徐广振 刘仕勇 安宁 杨辉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1076-1079,共4页

目的研究Nogo-A及其下游信号通路在MTLE患者颞叶皮层的表达,探讨其在癫痫后异常神经环路形成过程中的作用。方法收集本科MTLE患者颞叶皮层标本12例与正常颞叶皮层标本12例,采用RT-PCR、Western blot、免疫组化方法检测Nogo-A、NgR、P75(... 目的研究Nogo-A及其下游信号通路在MTLE患者颞叶皮层的表达,探讨其在癫痫后异常神经环路形成过程中的作用。方法收集本科MTLE患者颞叶皮层标本12例与正常颞叶皮层标本12例,采用RT-PCR、Western blot、免疫组化方法检测Nogo-A、NgR、P75(NTR)、Lingo-1、Troy表达情况。结果MTLE患者颞叶皮层致痫灶中出现神经元丢失、细胞排列结构紊乱、极性消失和胶质增生等病理改变。与正常对照相比,MTLE患者颞叶皮层Nogo-A mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01),NgR mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01);Nogo-A蛋白在神经元中表达显著升高(P<0.01),而在胶质细胞中表达显著降低(P<0.01);NgR、P75(NTR)、Troy、Lingo-1蛋白主要表达于神经元中,其中前三者表达均显著升高(P<0.05,P<0.01),而Lingo-1蛋白表达降低不显著(P>0.05)。结论Nogo-A及其下游信号通路在MTLE患者颞叶皮层中的表达发生改变,提示其非常可能参与了异常神经环路的形成过程。 展开更多

关键词 癫痫 NOGO-A NGR P75(NTR) Troy LINGO-1

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大鼠海马神经干细胞的扩增及与三维微小凹图式复合的研究 被引量：3

9

作者 吕艳玲 吴泽志 +5 位作者 张利光 宋兆全 于婷 文灿 阴金波 陈景龙 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期520-524,共5页

目的比较2种培养基下海马神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的生长特性,进而实现海马NSCs扩增的优化及其与聚乳酸(poly-L-lactide,PLLA)三维微小凹图式的复合。方法分离大鼠胚胎海马细胞并采用Neurobasal为基础的培养基和DMEM/F12为... 目的比较2种培养基下海马神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的生长特性,进而实现海马NSCs扩增的优化及其与聚乳酸(poly-L-lactide,PLLA)三维微小凹图式的复合。方法分离大鼠胚胎海马细胞并采用Neurobasal为基础的培养基和DMEM/F12为基础的培养基进行扩增。以四甲基氮唑蓝(MTT)比色法及神经球数目统计法评价2种培养基下细胞增殖行为。采用紫外光光刻、硅蚀刻及软光刻技术制备PLLA三维微小凹图式并实现海马NSCs与微小凹图式的复合。结果原代分离的海马细胞呈神经干细胞标志物阳性并能向神经元系和胶质细胞系分化。在30d的扩增时间内,海马NSCs在以Neurobasal为基础的培养基中缓慢扩增聚集成神经球,少见细胞贴壁及分化;在以DMEM/F12为基础的培养基中海马NSCs扩增迅速,但易贴壁和分化。培养第25天时后者神经球数量为前者的4.7倍。微加工制备的微小凹图式结构清晰、稳定,具有高纵横结构比(≥1)。扩增的海马NSCs能在三维微小凹图式上成功复合生长。结论以DMEM/F12为基础的培养基有利于大鼠海马NSCs的扩增,以Neurobasal为基础的培养基利于海马NSCs的纯化。序贯应用2种培养基可有效扩增海马NSCs并实现其与三维微小凹图式的复合。 展开更多

关键词 海马神经干细胞 神经球 原代培养 扩增 聚乳酸 微加工

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瞬时受体电位通道蛋白3在结节性硬化症癫痫患者皮层病灶区中的表达 被引量：3

10

作者 赵湧频 陈康宁 +2 位作者 树海峰 余思逊 杨辉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期983-986,共4页

目的研究瞬时受体电位通道蛋白3(transient receptor potential canonical channel 3,TRPC3)在结节性硬化症(tuberous sclerosis complex,TSC)癫痫患者皮层脑组织的表达与分布,探讨TRPC3离子通道参与结节性硬化致癫痫发作的可能机制。... 目的研究瞬时受体电位通道蛋白3(transient receptor potential canonical channel 3,TRPC3)在结节性硬化症(tuberous sclerosis complex,TSC)癫痫患者皮层脑组织的表达与分布,探讨TRPC3离子通道参与结节性硬化致癫痫发作的可能机制。方法收集自2008年6月至2010年12月手术切除并经病理检测证实是TSC癫痫患者的皮层脑组织标本12例,与7例正常对照皮层脑组织比较,通过采用Western blot、免疫组化、免疫荧光双标,检测TRPC3通道蛋白在正常脑组织与病理标本中的表达分布情况。结果 Western blot蛋白检测结果显示,TRPC3在TSC病理标本中的相对光密度值(ROD)为(0.65±0.08),在正常脑组织(CTX)中的ROD值为(0.36±0.06),提示TRPC3在TSC标本中的表达较正常脑组织中显著增高(P<0.05);免疫组化及免疫荧光双标结果,TRPC3在TSC病灶中免疫强度明显增高,并且特异性高表达于皮层损伤区致痫灶中的异构神经元,包括特征性的巨型细胞(giant cells,GCs)、异形神经元(dysplastic neurons,DNs)。结论 TRPC3在结节性硬化症患者致痫皮层中表达异常增高,以及特异性的细胞分布模式可能与癫痫发病密切相关。 展开更多

关键词 TRPC3 结节性硬化症(TSC) 癫痫

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TRPC5在结节性硬化症癫痫患者皮层致痫结节中的表达 被引量：2

11

作者 徐广振 郑大海 +1 位作者 树海峰 杨辉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期712-716,共5页

目的研究瞬时受体电位通道蛋白5(transient receptor potential canonical channel 5,TRPC5)在结节性硬化症(tuberous sclerosis complex,TSC)癫痫患者皮质中的表达与分布,探讨TRPC5在TSC癫痫发生中的可能机制。方法收集新桥医院神经外... 目的研究瞬时受体电位通道蛋白5(transient receptor potential canonical channel 5,TRPC5)在结节性硬化症(tuberous sclerosis complex,TSC)癫痫患者皮质中的表达与分布,探讨TRPC5在TSC癫痫发生中的可能机制。方法收集新桥医院神经外科手术切除的TSC癫痫患者皮层致痫结节14例,与12例正常对照皮层(CTX)相比较,运用RT-PCR、Western blot、免疫组织化学和免疫荧光等方法检测TRPC5在致痫灶中的表达分布。结果 TSC癫痫患者皮层致痫结节中,TRPC5在mRNA、蛋白表达水平较对照组明显升高(P<0.05)。免疫组化结果显示,在正常皮层中TRPC5弱至中等强度表达于神经元上,偶在胶质细胞上表达,而在TSC癫痫患者皮层致痫结节中强表达于神经元上,特别是巨型细胞和异形神经元上,胶质细胞表达强度也较CTX组增高,免疫染色强度明显高于正常皮层(染色强度值:2.77±0.43 vs 1.64±0.56;相对光密度值:64.72±9.56 vs 30.34±9.43;P<0.05)。结论 TRPC5表达增高可能与TSC患者癫痫发病密切相关,可能成为治疗难治性癫痫的新药物靶点。 展开更多

关键词 癫痫 结节性硬化症 瞬时受体电位通道蛋白5

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3种微创技术治疗慢性硬膜下血肿的疗效分析 被引量：14

12

作者 宋业纯 吕胜青 +2 位作者 张银 杨辉 安宁 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第14期1458-1460,共3页

目的比较单骨孔、双骨孔及小骨窗技术外科治疗慢性硬膜下血肿(chronic subdural hematoma,CSDH)的手术疗效。方法回顾性分析2005年10月至2010年12月手术治疗的125例CSDH患者的临床资料,将患者分为3组:单骨孔组31例,骨孔直径1 cm;双骨孔... 目的比较单骨孔、双骨孔及小骨窗技术外科治疗慢性硬膜下血肿(chronic subdural hematoma,CSDH)的手术疗效。方法回顾性分析2005年10月至2010年12月手术治疗的125例CSDH患者的临床资料,将患者分为3组:单骨孔组31例,骨孔直径1 cm;双骨孔组50例,骨孔直径1 cm,分别于血肿前后各钻骨孔1个;小骨窗组44例,术中将骨孔扩大成直径2～3 cm的骨窗。结果 3组患者术后7 d的残存血肿量及出院时的神经功能状态无明显差异(P>0.05)。单骨孔组的手术时间较双骨孔组及小骨窗组明显缩短(P<0.05)。单骨孔及双骨孔组在住院天数、并发症方面无明显差异(P>0.05),但均较小骨窗组明显增高(P<0.05)。单骨孔组的复发率较双骨孔组及小骨窗组明显增高(P<0.05),后2组间无明显差异(P>0.05)。多变量回归分析显示手术方式是影响术后复发的独立因素,相对于单骨孔技术,双骨孔技术复发率的降低具有统计学意义(OR=0.148,95%CI 0.026～0.847,P=0.032)。结论小骨窗技术可作为治疗CSDH首选的治疗方法,双骨孔技术可有效降低术后复发率,尤其适用于术后复发患者。 展开更多

关键词 慢性硬膜下血肿 骨孔开颅 小骨窗

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网孔支架辅助微弹簧圈治疗已破裂颅内动脉瘤的临床疗效分析 被引量：10

13

作者 赖挺 刘俊 +2 位作者 杨辉 周政 李正杨 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期339-342,共4页

目的探讨网孔支架辅助微弹簧圈在已破裂颅内动脉瘤栓塞治疗过程中的操控性、相关并发症及临床疗效。方法回顾性分析应用网孔支架辅助微弹簧圈栓塞治疗60例已破裂颅内动脉瘤患者资料。结果所有60枚支架顺利释放到位。术后即刻造影,动脉瘤... 目的探讨网孔支架辅助微弹簧圈在已破裂颅内动脉瘤栓塞治疗过程中的操控性、相关并发症及临床疗效。方法回顾性分析应用网孔支架辅助微弹簧圈栓塞治疗60例已破裂颅内动脉瘤患者资料。结果所有60枚支架顺利释放到位。术后即刻造影,动脉瘤获100%栓塞34个,95.0%栓塞11个,90.0%栓塞14个,80.0%栓塞1个。术中出现血管痉挛4例,动脉瘤破例3例,血栓形成1例。术后随访3～18个月,死亡2例,患者术后生存质量与术前(Hunt-Hess分级)有统计学差异(P<0.05)。患者术后获影像学随访23例,其中DSA随访19例,1例出现支架内血管狭窄,均无动脉瘤复发。结论使用网孔支架辅助微弹簧圈栓塞治疗已破裂颅内动脉瘤具有操作性良好、安全性高等优点;术者娴熟的技术、对手术时机的准确把握和对介入材料的正确选择有助于减少并发症。 展开更多

关键词 破例颅内动脉瘤 网孔支架 微弹簧圈 血管内治疗

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不同发育阶段大鼠脑髓鞘化的研究 被引量：2

14

作者 张雨平 黄其林 +2 位作者 赵聪敏 汤金梁 王亚丽 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第22期2189-2192,共4页

目的研究大鼠不同发育阶段脑髓鞘化的发展及规律。方法应用LFB髓鞘染色、MBP免疫组化及Wes-tern blot观察不同发育阶段大鼠脑髓鞘的分布及变化。结果LFB及MBP免疫组化染色E18、P0、P2均未见着色,P7大鼠胼胝体中部少量LFB着色,P15两种染... 目的研究大鼠不同发育阶段脑髓鞘化的发展及规律。方法应用LFB髓鞘染色、MBP免疫组化及Wes-tern blot观察不同发育阶段大鼠脑髓鞘的分布及变化。结果LFB及MBP免疫组化染色E18、P0、P2均未见着色,P7大鼠胼胝体中部少量LFB着色,P15两种染色均呈阳性,P30着色加深,与P90、P720类似。通过Western blot检测MBP蛋白在孕中后期已有表达,出生后随日龄增长逐渐增加,至老年期表达量最高。结论大鼠脑髓鞘化从P15已经开始,P30接近成熟;观察髓鞘的最佳时间在30d以后。 展开更多

关键词 大鼠 脑 髓鞘化 发育

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caveolae对血管平滑肌细胞增殖的影响及可能机制 被引量：2

15

作者 李正杨 周政 +4 位作者 杨辉 刘俊 赖挺 安家印 雷雪 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1262-1266,共5页

目的观察caveolae对血管平滑肌细胞增殖的影响及可能机制。方法取培养第3代VSMCs培养皿中培养。干扰组细胞加甲基-β-环糊精(methyl-β-cyclodextrin,MβCD)(5 mmol/L,DMEM配置)作用2 h;对照组加入与MβCD等量的DMEM作用2 h后以DMEM冲洗... 目的观察caveolae对血管平滑肌细胞增殖的影响及可能机制。方法取培养第3代VSMCs培养皿中培养。干扰组细胞加甲基-β-环糊精(methyl-β-cyclodextrin,MβCD)(5 mmol/L,DMEM配置)作用2 h;对照组加入与MβCD等量的DMEM作用2 h后以DMEM冲洗3次后正常培养48 h。采集细胞进行RT-PCR检测Caveolin-1、pSmad2 mRNA表达变化,Western blot法检测Caveolin-1、pSmad2蛋白表达变化,免疫组化检测Caveolin-1、TGF-β受体1(TGF-βR1)在细胞中的表达分布,CCK-8法检测细胞增殖能力。结果 Caveolin-1在MβCD干扰后,基因和蛋白表达水平明显下降(P<0.01),并且以细胞膜和细胞质高表达为主;而Smad2在MβCD干扰后,基因和蛋白表达水平明显上升,与正常对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01);并且TβR-1在MβCD干扰后细胞内表达增加。CCK-8检测结果显示,MβCD干扰后,VSMCs增殖被显著抑制(P<0.01)。结论破坏caveolae结构后可以抑制VSMCs的增殖,其可能的机制是caveolae被破坏后,TGF-β/Smad信号通路增强,不能抑制Smad2磷酸化和下游的信号转导,从而达到抑制VSMCs的增殖的作用。 展开更多

关键词 血管平滑肌细胞 小窝 转化生长因子

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GW112基因siRNA对人胃癌SGC-7901细胞体外增殖的影响 被引量：2

16

作者 黄轶 杨梅华 +2 位作者 杨华安 蒋雪 曾昭淳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第13期1379-1382,共4页

目的构建靶向GW112siRNA逆转录病毒载体并筛选特异高效的RNAi靶点,研究GW112基因沉默后对胃癌SGC-7901细胞体外增殖的影响。方法应用逆转录病毒载体psilencer5.1-H1Retro构建针对GW112基因3个不同靶点的RNAi干扰载体-pSiRNA-GW112(pSi40... 目的构建靶向GW112siRNA逆转录病毒载体并筛选特异高效的RNAi靶点,研究GW112基因沉默后对胃癌SGC-7901细胞体外增殖的影响。方法应用逆转录病毒载体psilencer5.1-H1Retro构建针对GW112基因3个不同靶点的RNAi干扰载体-pSiRNA-GW112(pSi405-GW112,pSi1066-GW112,pSi1480-GW112),将脂质体法转染PT67细胞包装的病毒感染SGC-7901细胞,嘌呤霉素筛选稳定克隆,RT-PCR鉴定病毒整合,Real-timePCR筛选高效抑制靶点,CCK-8法检测对细胞体外增殖的影响。Westernblot检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果测序结果证实各干扰靶点的重组逆转录病毒载体pSiRNA-GW112构建正确。RT-PCR结果显示除亲本细胞外,经各靶点病毒上清感染的细胞均能扩增出510bp的Puro抗性基因片段。Real-TimePCR分析表明与SGC-7901亲本细胞组相比,7901-Si405,7901-Si1066及7901-Si1480组GW112的转录水平分别只有SGC-7901组的(15.50±0.01)%,(32.40±0.01)%与(57.00±0.02)%。而7901-Sc组GW112表达基本无变化。Si405,Si1066与Si1480靶点的抑制率分别为84.5%,67.6%及43.0%。沉默GW112后导致SGC-7901细胞体外增殖能力显著抑制(P<0.05),并伴随PCNA蛋白表达下调。结论构建的重组逆转录病毒载体pSiRNA-GW112能显著抑制SGC-7901细胞的体外增殖能力,且这种增殖抑制与下调的PCNA表达有关。 展开更多

关键词 GW112基因 RNA干扰 逆转录病毒 胃癌

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双头连体婴儿脑电活动1例报告

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作者 刘立红 杨梅华 +2 位作者 石先俊 廖白军 朱敏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第17期1732-1732,1740,共2页

1临床资料 孕39周妇女,系第1胎第1产,于2011年5月5日在外院剖宫产娩出一体双头女活婴,4.05 kg,遂于5月9日入住我院儿科,置于保温箱中,持续头罩吸氧下双头反应可,哭声较弱。

关键词 双头畸形 连体双头畸形 EEG 懒波

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小鼠脑出血模型血肿周围雌激素受体的表达 被引量：1

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作者 朱孔江 徐广振 杨辉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第17期1877-1879,共3页

目的研究脑出血模型血肿周围组织雌激素受体表达变化,以初步探索其是否参与脑出血后的神经保护作用。方法立体定位注射自体尾血建立小鼠尾状壳核出血模型,利用免疫组化、Western blot检测造模3 d后血肿周围组织ERs表达情况,测量、统计... 目的研究脑出血模型血肿周围组织雌激素受体表达变化,以初步探索其是否参与脑出血后的神经保护作用。方法立体定位注射自体尾血建立小鼠尾状壳核出血模型,利用免疫组化、Western blot检测造模3 d后血肿周围组织ERs表达情况,测量、统计其光密度值。结果 ICH 3 d后,尼氏染色见血肿周围组织神经元萎缩、密度降低;免疫组化、Western blot均显示血肿周围组织ERs表达显著高于血肿对侧正常组织(P<0.05,P<0.01)。结论 ERs在ICH后表达上调,提示其可能介导雌激素的神经保护作用而影响ICH继发病理损害。 展开更多

关键词 脑出血 ERΑ ERΒ

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甲基-β-环糊精对内皮素-1诱导大鼠颈总动脉血管平滑肌细胞胞内钙浓度变化的影响

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作者 雷雪 阴金波 +3 位作者 刘俊 李正杨 安家印 周政 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1173-1177,共5页

目的研究甲基-β-环糊精(methyl-β-cyclodextrin,MβCD)对内皮素-1(endothelin-1,ET-1)诱导大鼠颈总动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)胞内钙离子浓度([Ca2+]i)变化的影响。方法原代培养大鼠颈总动脉平滑肌细胞... 目的研究甲基-β-环糊精(methyl-β-cyclodextrin,MβCD)对内皮素-1(endothelin-1,ET-1)诱导大鼠颈总动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)胞内钙离子浓度([Ca2+]i)变化的影响。方法原代培养大鼠颈总动脉平滑肌细胞,通过形态学和免疫荧光染色鉴定。再通过炎症因子TNF-α(100μg/L)和MβCD(5 mmol/L)的不同处理将细胞分为4组:PSS液+ET-1组(A组)、PSS液+MβCD+ET-1组(B组)、PSS液+TNF-α+ET-1组(C组)、PSS液+TNF-α+MβCD+ET-1组(D组)。最后各组细胞经Furo-2/AM染色后,采用TILL荧光钙成像系统检测活细胞在ET-1(100 nmol/L)刺激下胞内钙荧光强度的变化情况,R(F 340 nm/F 380 nm)值代表单细胞胞内钙荧光强度比值。结果TILL荧光钙成像系统检测结果显示A^D组细胞静息状态荧光强度R0值分别为(0.591 6±0.082 0)、(0.575 3±0.079 0)、(0.655 1±0.083 7)、(0.610 5±0.080 4),组间比较无统计学差异(P>0.05)。各组细胞经ET-1(100 nmol/L)刺激后胞内钙荧光强度分别较静息状态上升:A组上升(115±17)%,B组上升(67±15)%,与A组比较差异有统计学意义(P<0.05);C组上升(279±21)%,与A组比较差异有统计学意义(P<0.01);D组上升(88±16)%,与C组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 MβCD破坏caveolae结构后明显降低了VSMCs胞内钙离子浓度升高程度,caveolae可能是抑制脑血管痉挛发生的重要靶点。 展开更多

关键词 血管平滑肌细胞 甲基-β-环糊精 小窝结构 钙离子浓度 内皮素-1

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