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适度运动对人体肠道菌群结构的影响 被引量:32
1
作者 蒋兴宇 赵霞 +1 位作者 邹凌云 蒲晓允 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第18期1824-1831,共8页
目的适度运动有益于身心健康。本研究从肠道菌群结构的角度来探讨运动对人体健康的影响。方法招募运动组和少动组志愿者人群,利用16S r DNA高通量测序技术分析志愿者肠道菌群结构。结果高通量测序共获得61 888个OTUs,其中已注释的OTUs有... 目的适度运动有益于身心健康。本研究从肠道菌群结构的角度来探讨运动对人体健康的影响。方法招募运动组和少动组志愿者人群,利用16S r DNA高通量测序技术分析志愿者肠道菌群结构。结果高通量测序共获得61 888个OTUs,其中已注释的OTUs有61 149个。PCo A分析显示,运动组和少动组之间肠道菌群结构存在显著差异。运动组中毛螺菌科(Lachnospiraceae)和拟杆菌科(Bacteroidaceae)的丰度显著高于少动组(P=2.5627×10^(-7),P=0.000 178 4),普雷沃氏菌科(Prevotellaceae)和韦荣氏球菌科(Veillonellaceae)的丰度显著低于少动组(P=0.000 003 46,P=0.000017 41)。有3株可培养的菌株在运动组中丰度显著增加,分别为瘤胃球菌属的Ruminococcus_sp.5_1_39BFAA,双歧杆菌属的Bifidobacterium_adolescentis以及丁酸产盐菌属的Anaerostipes_hadrus。在运动组中显著增加的肠道菌,如拟杆菌科,双歧杆菌属的Bifidobacterium_adolescentis以及Anaerostipes_hadrus,能够代谢产生丰富的SCFAs,对肠粘膜免疫系统动态平衡的维持具有重要意义。结论运动可能通过肠道菌群结构的改变及其与肠黏膜系统的相互作用对人体产生积极影响。 展开更多
关键词 肠道菌群 运动 16S rDNA高通量测序
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铜绿假单胞菌ampC基因分布和产酶状况对药物敏感性的影响 被引量:9
2
作者 胡波 宋勇 +2 位作者 张方 施毅 胡明冬 《医学研究生学报》 CAS 2008年第1期11-15,共5页
目的:了解147株铜绿假单胞菌ampC基因分布和产酶状况对药敏的影响。方法:通过聚合酶链反应(PCR)法检测ampC基因分布情况,PCR产物克隆测序;通过酶提取物三维试验检测AmpC酶;纸片扩散法检测铜绿假单胞菌的药敏情况。结果:107株铜绿假单胞... 目的:了解147株铜绿假单胞菌ampC基因分布和产酶状况对药敏的影响。方法:通过聚合酶链反应(PCR)法检测ampC基因分布情况,PCR产物克隆测序;通过酶提取物三维试验检测AmpC酶;纸片扩散法检测铜绿假单胞菌的药敏情况。结果:107株铜绿假单胞菌ampC基因阳性(占72.8%),PCR产物测序结果与Gene-Bank序列(AE 004827)同源性为100%。ampC基因阴性菌株依次对亚胺培南、头孢他啶、头孢吡肟及头孢哌酮/舒巴坦敏感,敏感率均≥90.0%;ampC基因阳性菌株对头孢他啶、头孢吡肟及头孢哌酮/舒巴坦敏感率明显降低(P<0.05);147株铜绿假单胞菌中88株产AmpC酶(占60.0%),不产AmpC酶菌株依次对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、头孢吡肟敏感,产AmpC酶菌株仅对亚胺培南、头孢吡肟保持较高敏感率,而对头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、头孢噻肟、氨曲南、头孢呋辛敏感率明显降低(P<0.05)。结论:铜绿假单胞菌广泛存在着ampC耐药基因,明确ampC基因分布和产酶状况有助于临床抗菌药物的选用。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 AMPC基因 AMPC酶 药敏
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人BMP-7基因重组腺病毒的构建与鉴定 被引量:7
3
作者 方针强 叶钢 +3 位作者 欧阳一辛 刘永亮 贾维胜 冯嘉瑜 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期153-156,共4页
目的构建含有人骨形态发生蛋白-7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7)基因的重组腺病毒载体,并对其相关指标进行鉴定,观察其对肾小管上皮细胞株(HKC)细胞的转染情况。方法用基因工程技术将人BMP-7基因cDNA亚克隆至穿梭质粒pDC316上,... 目的构建含有人骨形态发生蛋白-7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7)基因的重组腺病毒载体,并对其相关指标进行鉴定,观察其对肾小管上皮细胞株(HKC)细胞的转染情况。方法用基因工程技术将人BMP-7基因cDNA亚克隆至穿梭质粒pDC316上,利用脂质体介导的方法将AdMax腺病毒包装系统的骨架质粒pBHGlox_E1,3Cre和穿梭质粒pDC316-BMP-7转染入HEK293细胞,进行同源重组,得到腺病毒重组质粒Ad5-BMP-7,并在其中包装扩增病毒。采用PCR方法对重组腺病毒进行鉴定,利用穿梭质粒中所带绿色荧光蛋白GFP报告基因,进行病毒滴度的测定和对HKC细胞感染效率的检测。结果酶切鉴定及PCR结果证明BMP-7基因重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度达1.25×1010PFU/ml,对HKC有较强感染能力。结论应用细胞内同源重组方法成功构建了含人BMP-7基因的重组腺病毒载体。 展开更多
关键词 腺病毒 骨形成蛋白-7 同源重组
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院内感染耐药黄杆菌携带β-内酰胺酶基因的研究 被引量:5
4
作者 罗羽 夏培元 +3 位作者 王仙园 殷春红 秦孝建 解晓珍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期827-829,共3页
目的 探讨临床分离黄杆菌耐药株携带 β 内酰胺酶 (bla)基因类型及基因介导方式。 方法 研究对象为临床分离所得的 6株黄杆菌临床耐药株。产 β 内酰胺酶情况采用纸片法定性检测 ;细菌质粒和染色体以市售试剂盒抽提 ;酶编码基因类型用... 目的 探讨临床分离黄杆菌耐药株携带 β 内酰胺酶 (bla)基因类型及基因介导方式。 方法 研究对象为临床分离所得的 6株黄杆菌临床耐药株。产 β 内酰胺酶情况采用纸片法定性检测 ;细菌质粒和染色体以市售试剂盒抽提 ;酶编码基因类型用PCR检测分析。结果  6株黄杆菌均产bla ,在其染色体、质粒上共发现 7种不同类型的bla基因 ,其中菌株 0 2 2 3存在染色体和质粒共同介导的PSE 1基因 ,0 2 2 3 7存在质粒介导的SHV、PSE 1基因 ,0 2 2 44存在质粒介导的TEM、AmpC、PSE 1基因 ,0 2 2 5 8除存在由质粒介导的SHV、OXA 1、CTX M 1基因外 ,尚由染色体介导SHV、TEM基因 ,0 2 3 3 2存在染色体介导的TEM基因 ,0 2 3 72存在质粒介导的OXA 1、Sme 1基因。结论 西南医院临床分离的耐药黄杆菌携带bla酶基因种类较多 ,可由质粒、染色体分别介导或两者共同介导 ,耐药株的产生可能与大量。 展开更多
关键词 院内感染 黄杆菌 Β-内酰胺酶 基因
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应用量子点及磁微粒技术快速检测阴道毛滴虫抗原 被引量:4
5
作者 李蒙 蒲晓允 +1 位作者 李玲 余娟春 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期740-743,共4页
目的以阴道毛滴虫(trichomonas vaginalis,Tv)检测为切入点,构建以量子点和磁微粒技术为基础的夹心法快速检测抗原技术,为同步多项抗原检测作准备。方法针对Tv特异性黏附蛋白AP33制备其抗体,以碳二亚胺交联法,分别连接抗体-量子点及抗体... 目的以阴道毛滴虫(trichomonas vaginalis,Tv)检测为切入点,构建以量子点和磁微粒技术为基础的夹心法快速检测抗原技术,为同步多项抗原检测作准备。方法针对Tv特异性黏附蛋白AP33制备其抗体,以碳二亚胺交联法,分别连接抗体-量子点及抗体-磁微粒加入待测抗原AP33结合后,在荧光显微镜下观测结果。结果确立了本检测系统的最优条件,对AP33的检测与几种阴道常见病原菌无交叉反应,检测限为0.05μg/ml。结论成功构建了量子点磁微粒检测技术,对Tv抗原检测,特异度为90%,准确率为88%。 展开更多
关键词 量子点 磁微粒 阴道毛滴虫 抗原检测
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脑缺血时脑组织内啡肽和单胺类介质动态变化的实验研究 被引量:4
6
作者 彭英 刘兴材 +1 位作者 蔡文琴 潘瑾 《第一军医大学学报》 CAS CSCD 1994年第4期266-268,共3页
建立了大白鼠全脑缺血动物模型,用RIA法及荧光分光光度计检测了缺血脑组织匀浆的LEK、β─EP、DynA1─13及5─HT和5─HI─AA的含量。LEK在脑组织缺血60min内含量略下降,但无统计学意义;β─EP在脑... 建立了大白鼠全脑缺血动物模型,用RIA法及荧光分光光度计检测了缺血脑组织匀浆的LEK、β─EP、DynA1─13及5─HT和5─HI─AA的含量。LEK在脑组织缺血60min内含量略下降,但无统计学意义;β─EP在脑组织缺血30min时显著下降(P<0.05),缺血60min时明显上升,而5─HT含量则显著下降。上述结果提示内啡肽和单胺类介质均参与了缺血性脑损伤的病理过程。 展开更多
关键词 脑缺血 亮脑啡肽 内啡肽 强啡肽 5-羟吲哚乙酸
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乳腺癌细胞过表达iASPP对顺铂作用的影响 被引量:4
7
作者 李强 程湘 +1 位作者 孙守勋 刘莹 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第15期1438-1440,共3页
目的构建过表达iASPP的乳腺癌细胞株,分析过表达iASPP对顺铂(cis-dichlorodiamine platinum,DDP)作用下乳腺癌细胞的影响。方法采用RT-PCR方法在乳腺组织中扩增出iASPP,转染入MCF-7,G418筛选获得过表达iASPP的乳腺癌细胞株,MTT和流式细... 目的构建过表达iASPP的乳腺癌细胞株,分析过表达iASPP对顺铂(cis-dichlorodiamine platinum,DDP)作用下乳腺癌细胞的影响。方法采用RT-PCR方法在乳腺组织中扩增出iASPP,转染入MCF-7,G418筛选获得过表达iASPP的乳腺癌细胞株,MTT和流式细胞仪分析过表达iASPP的乳腺癌细胞株在DDP作用下增殖和凋亡情况。结果成功构建了过表达iASPP的乳腺癌细胞株,过表达iASPP可明显降低DDP对乳腺癌细胞增殖的抑制作用(P<0.01),并降低细胞凋亡的百分数(P<0.01)。结论过表达iASPP可以明显降低乳腺癌细胞MCF-7对DDP作用的敏感性。 展开更多
关键词 IASPP 顺铂 乳腺癌细胞
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两种快速血糖仪与全自动生化分析仪检测血糖的比对分析 被引量:4
8
作者 孟凡飞 刘飞 蒲晓允 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第24期2495-2495,2510,共2页
快速血糖仪测葡萄糖具有价格合理、携带方便、实时检测、微血量、无需专业人员操作等优点被广泛应用[1]。本研究对本院使用的快速血糖仪与检验科全自动生化分析仪血糖测定进行结果比对。下面把比对的操作程序和部分比对分析内容及体会... 快速血糖仪测葡萄糖具有价格合理、携带方便、实时检测、微血量、无需专业人员操作等优点被广泛应用[1]。本研究对本院使用的快速血糖仪与检验科全自动生化分析仪血糖测定进行结果比对。下面把比对的操作程序和部分比对分析内容及体会进行总结。1资料与方法1.1仪器与试剂随机抽取本院在用5台快速血糖仪(达乐3台,雅培安妥2台),均采用原装配套试纸条。 展开更多
关键词 快速血糖仪 毛细血管全血 静脉血浆血糖 全自动生化分析仪
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幽门螺杆菌尿素酶B亚单位核酸疫苗的构建及鉴定 被引量:5
9
作者 曾韦锟 邹全明 井申荣 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期665-667,共3页
目的:克隆幽门螺杆菌HpureB基因,并构建其核酸疫苗。方法:以HpNCTC11637株基因组DNA为模板,用PCR扩增ureB基因,并亚克隆至pMD18-T载体中。将目的基因经SalI、BglⅡ酶切纯化后插入pTCAE中,转化E.coliDH5α。经SalI、XhoI酶切并测序鉴定... 目的:克隆幽门螺杆菌HpureB基因,并构建其核酸疫苗。方法:以HpNCTC11637株基因组DNA为模板,用PCR扩增ureB基因,并亚克隆至pMD18-T载体中。将目的基因经SalI、BglⅡ酶切纯化后插入pTCAE中,转化E.coliDH5α。经SalI、XhoI酶切并测序鉴定的阳性重组质粒命名为pT-ureB。以电穿孔法将pT-ureB转染CHO细胞,用Wes-tern blot检测UreB蛋白的表达。结果:克隆重组后得到pT-ureB。将pT-ureB以电穿孔法转染CHO细胞后,取其培养上清进行Western blot检测,在UreB的相对分子质量(Mr)为62000处出现特异性条带。结论:成功地构建了HpureB核酸疫苗。体外转染CHO细胞后,经Western blot检测证实有UreB蛋白的表达,为进一步的相关研究奠定了基础。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 UREB DNA疫苗
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水浴治疗尿毒症的初步探讨 被引量:5
10
作者 杨惠标 缪兴文 +1 位作者 张莉 陶淲 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第1期67-68,共2页
水浴治疗尿毒症的初步探讨杨惠标,缪兴文,张莉(第三军医大学新桥医院肾内科)630037陶(第三军医大学新桥医院检验科)630037腹膜透析、血液透析治疗尿毒症疗效确切,但治疗费昂贵;胃肠透析,药物治疗疗效很有限。我们... 水浴治疗尿毒症的初步探讨杨惠标,缪兴文,张莉(第三军医大学新桥医院肾内科)630037陶(第三军医大学新桥医院检验科)630037腹膜透析、血液透析治疗尿毒症疗效确切,但治疗费昂贵;胃肠透析,药物治疗疗效很有限。我们根据皮肤汗腺的排泄功能,采用温水浴... 展开更多
关键词 尿毒症 水浴疗法
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急性肺损伤大鼠多核白细胞与肺组织β受体变化的相关性研究 被引量:2
11
作者 徐兴祥 孙耕耘 +1 位作者 钱桂生 董解菊 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期432-435,共4页
目的:观察急性肺损伤(ALI)大鼠循环血多核白细胞(PMN)和肺组织β肾上腺素能受体(β-AR)的变化,并探讨二者β-AR变化的相关性。方法:静往内毒素复制大鼠ALI模型,循环血PMN及肺组织β-AR用放射性配基结合... 目的:观察急性肺损伤(ALI)大鼠循环血多核白细胞(PMN)和肺组织β肾上腺素能受体(β-AR)的变化,并探讨二者β-AR变化的相关性。方法:静往内毒素复制大鼠ALI模型,循环血PMN及肺组织β-AR用放射性配基结合分析法测定。结果:静往内毒素后1、4、6h,大鼠循环血PMN及肺组织β-AR的最大结合容量(Bmax)均明显低于对照组(P<0.01);静注内毒素后4 h,6 h较1h及6h较4 h PMN β-AR的Bmax均显著降低(P<0.05),肺组织β-AR Bmax各内毒素组间差异不明显(P>0.05);循环血PMN和肺组织β-AR变化在程度上无相关性(P>0.05)。结论:ALI时循环血PMN及肺组织β-AR数目均明显减少,其在ALI发生发展中可能起一定的作用,但ALI时外周血PMNβ-AR不能作为观察肺组织β-AR变化的相关指标。 展开更多
关键词 急性肺损伤 大鼠 多核白细胞 Β-AR
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细菌拉丝试验的应用探讨 被引量:2
12
作者 解晓珍 田洪明 +1 位作者 舒亦平 潘绍武 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期67-68,共2页
细菌拉丝试验的应用探讨Astudyofadaptionofthe“String”testforbacteria¥//解晓珍,田洪明,舒亦平(第三军医大学新桥医院检验科)630037潘绍武(第三军医大学检验系临床微生物... 细菌拉丝试验的应用探讨Astudyofadaptionofthe“String”testforbacteria¥//解晓珍,田洪明,舒亦平(第三军医大学新桥医院检验科)630037潘绍武(第三军医大学检验系临床微生物学教研室)630038关键词细菌;... 展开更多
关键词 细菌 拉丝试验 革兰氏染色
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幽门螺杆菌hpaA真核表达质粒的构建及鉴定 被引量:2
13
作者 曾韦锟 邹全明 井申荣 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期547-549,共3页
目的 克隆幽门螺杆菌hpaA基因,并构建其真核表达质粒。方法 以HpNCTC11637基因组DNA为模板, PCR扩增hpaA基因,亚克隆至pMD18 T载体中,目的基因经酶切纯化后插入pTCAE,转化E.coliDH5α,酶切并测序鉴定正 确的重组质粒命名为pT hpa... 目的 克隆幽门螺杆菌hpaA基因,并构建其真核表达质粒。方法 以HpNCTC11637基因组DNA为模板, PCR扩增hpaA基因,亚克隆至pMD18 T载体中,目的基因经酶切纯化后插入pTCAE,转化E.coliDH5α,酶切并测序鉴定正 确的重组质粒命名为pT hpaA。电穿孔法将pT hpaA转染CHO细胞,Westernblot检测HpaA蛋白的表达。结果 克隆重组 得到pT hpaA,将pT hpaA电穿孔法转染CHO后,培养上清经Westernblot检测,在相对分子量为30000条带处出现特异性抗 原抗体反应。结论 成功构建了幽门螺杆菌hpaA真核表达质粒,体外CHO细胞转染和Westernblot实验证实了HpaA蛋 白的表达,为进一步的免疫实验奠定了基础。 展开更多
关键词 HELICOBACTER PYLORI HPAA DNA疫苗
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RNA干扰与人类疾病 被引量:3
14
作者 李阳 倪兵 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第23期2393-2395,共3页
关键词 RNAI SIRNA 基因治疗 恶性肿瘤 感染性疾病
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PCR法检测人类脲原体U.Parvum和U.Urealyticum 被引量:3
15
作者 张新 蒲晓允 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第17期1784-1787,共4页
目的建立2个快速、同步检测脲原体U.Parvum和U.Urealyticum的PCR反应体系。方法根据脲原体尿素酶B基因序列,设计2对分别针对U.Parvum和U.Urealyticum的特异性引物,建立2个PCR反应体系。通过脲原体标准株和临床阳性标本的PCR产物测序以... 目的建立2个快速、同步检测脲原体U.Parvum和U.Urealyticum的PCR反应体系。方法根据脲原体尿素酶B基因序列,设计2对分别针对U.Parvum和U.Urealyticum的特异性引物,建立2个PCR反应体系。通过脲原体标准株和临床阳性标本的PCR产物测序以及进行特异性和敏感性实验,对2个PCR体系进行评价。应用2个PCR反应体系对48例临床标本进行脲原体检测以及与培养法检测脲原体进行方法学比较。结果2个PCR体系能够检测U.Par-vum、U.Urealyticum标准株和临床标本中脲原体,扩增产物长度与目的片段大小一致。标准株和2个临床阳性标本扩增产物测序结果与GenBank中公布的序列完全一致。2个PCR体系与其他14株细菌(包括5株有尿素酶细菌)无交叉反应,检测限度均为10拷贝/ul的重组质粒DNA。对48例临床标本同时进行PCR和培养法脲原体检测,PCR的阳性检出率为54.2%,培养法为39.6%(P<0.05)。与培养法比较,PCR的灵敏度为94.7%,而与PCR法相比,培养法的灵敏度为69.2%。结论2个PCR反应体系能够快速、同步进行临床标本中脲原体的分种鉴别,具有高度特异性和灵敏度。 展开更多
关键词 U.Parvum U. UREALYTICUM PCR
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量子点快速检测弓形虫IgG抗体方法的建立及初步应用 被引量:1
16
作者 李玲 刘琳琳 +2 位作者 蒲晓允 纽琴 余娟春 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1057-1059,共3页
目的建立一种简便、快速的人弓形虫(Toxoplasma,TOXO)IgG抗体检测新方法,并在临床初步应用。方法应用TOXO抗原包被羧基磁珠作为固相载体,量子点标记羊抗人IgG作为检测抗体,建立TOXO IgG检测方法,同时优化检测条件;对255份临床血清标本... 目的建立一种简便、快速的人弓形虫(Toxoplasma,TOXO)IgG抗体检测新方法,并在临床初步应用。方法应用TOXO抗原包被羧基磁珠作为固相载体,量子点标记羊抗人IgG作为检测抗体,建立TOXO IgG检测方法,同时优化检测条件;对255份临床血清标本进行了检测,并与意大利DiaSorin TOXO IgG ELISA试剂进行比较。结果检测最佳条件为:抗原包被浓度100μg/ml,量子点标记二抗工作浓度为1∶200,待测血清稀释度为1∶100。本方法的诊断敏感性、特异性分别为93.3%、96.7%,与进口试剂盒的总符合率为96.5%。结论基于量子点标记及免疫磁珠技术检测TOXOIgG,操作简便、快速,具有较高的特异性、敏感性和有较好的临床应用价值。 展开更多
关键词 量子点 免疫磁珠 弓形虫
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眼睑皮肤钙沉着症2例 被引量:1
17
作者 阎衡 项贵明 +3 位作者 周春丽 王莉 杨希川 叶庆佾 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期123-123,共1页
例1.女,20岁。因双上睑扁平丘疹10年,于2008年8月15日就诊。10年前发现左睑出现黄白色丘疹,无自觉症状,逐渐增大.随后右睑出现相似皮损。自诉外用药物后丘疹可变平。家族中无类似疾病患者。皮肤科检查:左上睑见一绿豆大黄白色扁... 例1.女,20岁。因双上睑扁平丘疹10年,于2008年8月15日就诊。10年前发现左睑出现黄白色丘疹,无自觉症状,逐渐增大.随后右睑出现相似皮损。自诉外用药物后丘疹可变平。家族中无类似疾病患者。皮肤科检查:左上睑见一绿豆大黄白色扁平丘疹,边界清楚(图1A),质地硬,右上睑见一米粒大相似皮损。临床考虑皮肤钙沉着症或睑黄瘤。实验室检查:血常规及血钙、磷均正常;皮损组织病理检查:真皮内散在分布大小不等深蓝色及淡蓝色颗粒(图1B)。诊断:眼睑局限型特发性皮肤钙沉着症。 展开更多
关键词 皮肤钙沉着症 特发性 眼睑
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人趋化因子ELC的克隆与表达 被引量:1
18
作者 罗福康 沈大斌 郑红 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1204-1207,共4页
目的 克隆人趋化因子ELC基因,表达并初步纯化ELC融合蛋白。方法 从扁桃体中提取总RNA ,再进行RT PCR ,扩增ELC成熟蛋白基因,并在5′和3′分别添加NcoⅠ和EcoRⅠ酶切位点,通过这两个酶切位点重组于pET3 2a(+ )载体上,转化E .coliDH5α... 目的 克隆人趋化因子ELC基因,表达并初步纯化ELC融合蛋白。方法 从扁桃体中提取总RNA ,再进行RT PCR ,扩增ELC成熟蛋白基因,并在5′和3′分别添加NcoⅠ和EcoRⅠ酶切位点,通过这两个酶切位点重组于pET3 2a(+ )载体上,转化E .coliDH5α,筛选阳性克隆,酶切鉴定,DNA测序检测插入序列的正确性,缺失突变获得ELC天然蛋白表达载体pET3 2a(+ ) ELC ,SDS PAGE分析其表达,Westernblot验证融合蛋白。大量表达并初步纯化ELC融合蛋白。结果 成功克隆了ELC基因,表达并初步纯化得到ELC融合蛋白。结论 构建的ELC硫氧还蛋白融合表达载体以可溶性蛋白的方式表达ELC硫氧还蛋白。 展开更多
关键词 ELC 融合表达 载体 缺失突变 WESTERN BLOTTING 蛋白纯化
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间接免疫荧光法检测冠心病患者外周血单个核细胞PP65抗原 被引量:2
19
作者 姚磊 张孝廉 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期85-86,共2页
目的:了解冠心病患者外周血单个核细胞巨细胞病毒活动感染情况,并探讨动脉粥样硬化与HCMV感染的关系。方法:运用间接免疫荧光的方法,对29例冠心病患者、39例其他心血管病患者以及42例正常对照组外周血单个核细胞巨细胞病毒PP65抗原进行... 目的:了解冠心病患者外周血单个核细胞巨细胞病毒活动感染情况,并探讨动脉粥样硬化与HCMV感染的关系。方法:运用间接免疫荧光的方法,对29例冠心病患者、39例其他心血管病患者以及42例正常对照组外周血单个核细胞巨细胞病毒PP65抗原进行检测,并运用免疫散射比浊法对各组CRP进行测定。结果:29例冠心病患者中巨细胞病毒pp65抗原阳性者7例,占24.1%;与其他心血管患者中巨细胞病毒pp65抗原阳性率(5.1%)以及正常对照组巨细胞病毒pp65抗原阳性率(2.4%)相比明显升高,29例冠心病患者CRP水平(5.06±1.79mg/L)也明显高于其它两组(P<0.05)。结论:冠心病患者外周血单个核细胞巨细胞病毒活动感染可能在动脉粥样硬化的发展过程中有重要作用。 展开更多
关键词 冠心病 巨细胞病毒 PP65抗原 单个核细胞
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非发酵菌感染的菌群分布分析 被引量:1
20
作者 李强 解晓珍 +1 位作者 李阳 李蒙 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第14期1486-1486,1508,共2页
关键词 非发酵菌 菌群分布
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