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HSV_1-TK转染人肺腺癌细胞A549的实验研究: 1; 作者何祥梁郭先健 +4 位作者钱桂生何雪花黄桂君陈维中李淑萍《中国肺癌杂志》 CAS 2001年第1期25-28,共4页; 目的　体内外观察HSV1 TK/GCV对人肺腺癌细胞A5 49的杀伤效应。方法　构建含TK基因的逆转录病毒表达载体 ,电穿孔法转化肺癌细胞A5 49。MTT法检测转染细胞对GCV的药物敏感性 ,并观察旁观者效应 ;电镜、FCM、TUNEL法检测GCV诱导转染细... 展开更多; 关键词 HSV1-TK基因基因转移基因治疗细胞凋亡肺腺癌; 在线阅读下载PDF 职称材料

屋尘螨致敏/激发小鼠气道变态反应性炎症模型的构建被引量：3: 2; 作者毕玉田王彦 +3 位作者吴奎卓文磊王长征钱桂生《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2007年第5期338-341,F0002,共5页; 目的使用屋尘螨(HDM)提取液致敏和激发C57BL/6小鼠构建气道变态反应性炎症模型的方法。方法模型组和对照组,各8只。模型组以HDM致敏和激发小鼠,分别于第0、7、14、21天腹腔注射HDM,10 d后,连续雾化吸入HDM 3 d。对照组以PBS代替HDM。进... 展开更多; 关键词尘螨科动物模型超敏反应炎症; 在线阅读下载PDF 职称材料

肺动脉平滑肌细胞对低氧诱导的肺微血管内皮细胞白介素表达的调节及机制被引量：1: 3; 作者张志远钱桂生 +3 位作者王建春李运成刘婷王关嵩《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期725-728,共4页; 目的研究低氧对肺微血管内皮细胞(PMVECs)的白细胞介素(IL)6、IL-1β、受体酪氨酸激酶(RTK)和Janus激酶3(JAK3)表达的影响,以及肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)在其中的调控作用。方法单独培养的大鼠PMVECs分为正常(N)组及低氧2h(H2)组、6h(H6... 展开更多; 关键词肺动脉肌细胞平滑肌内皮细胞细胞低氧白细胞介素受体蛋白质酪氨酸激酶类 Janus激酶3; 在线阅读下载PDF 职称材料

FasL基因和屋尘螨过敏原基因共表达质粒DNA疫苗对屋尘螨致敏/激发小鼠气道炎症的作用被引量：2: 4; 作者王彦林科雄 +2 位作者王长征吴奎毕玉田《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第2期189-191,共3页; 目的:观察FasL基因和屋尘螨过敏原Derp2基因共表达质粒的DNA疫苗(DNA-FasL-Derp2)对屋尘螨致敏/激发小鼠气道炎症的作用。方法:DNA-FasL-Derp2肌注接种屋尘螨致敏/激发C57BL/6小鼠,再次激发后处死小鼠。观察肺组织病理变化,检测支气管... 展开更多; 关键词尘螨科FasL DNA疫苗气道炎症; 在线阅读下载PDF 职称材料

Rab1对海水干预肺微血管内皮细胞β肾上腺素受体表达的调节作用被引量：1: 5; 作者李运成王关嵩 +2 位作者魏征华吴国明钱桂生《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期833-837,共5页; 目的研究Rab1对大鼠肺微血管内皮细胞(RPMVECs)β肾上腺素受体(β-ARs)表达的调节作用。方法取原代培养的RPMVECs作为研究对象,设计3个实验:(1)检测海水干预对β-ARs表达的影响,设对照组和海水处理(SW)组。(2)构建大鼠野生型Rab1慢病毒... 展开更多; 关键词 rab1 GTP结合蛋白质类血管内皮细胞受体肾上腺素能β; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HSV_1-TK转染人肺腺癌细胞A549的实验研究: 1; 作者何祥梁郭先健钱桂生何雪花黄桂君陈维中李淑萍; 机构第一军医大学珠江医院呼吸科第三军医大学新桥医院呼吸疾病研究所; 出处《中国肺癌杂志》 CAS 2001年第1期25-28,共4页; 文摘目的　体内外观察HSV1 TK/GCV对人肺腺癌细胞A5 49的杀伤效应。方法　构建含TK基因的逆转录病毒表达载体 ,电穿孔法转化肺癌细胞A5 49。MTT法检测转染细胞对GCV的药物敏感性 ,并观察旁观者效应 ;电镜、FCM、TUNEL法检测GCV诱导转染细胞凋亡变化 ;PCR和细胞原位杂交分别检测转染细胞TK基因整合和表达 ;活体内观察GCV对转染细胞、亲代细胞接种裸鼠皮下肿瘤治疗效果。结果　转基因细胞变得较不规则 ,多角型 ,易形成空泡。A5 49、A5 49 PLXSN、A5 49 TK三种细胞体外倍增时间分别为 ( 3 6.15± 3 .2 7)、( 4 0 .82± 3 .75 )和 ( 4 2 .0 6± 4.12 )小时 (P >0 .0 5 )。转染细胞对GCV的敏感性比亲代细胞提高 46倍 (P<0 .0 0 1)。旁观者效应在高细胞密度接种 ( 1× 10 4细胞 /孔 )较低细胞密度接种 ( 1× 10 3细胞 /孔 )明显。电镜发现转染细胞有凋亡小体、核呈半月征。FCM、TUNEL均能检测到转染细胞凋亡发生率明显高于对照细胞 (P<0 .0 0 1)。PCR及原位杂交表明转染细胞有TK基因整合和表达。体内实验表明GCV能明显抑制转染细胞接种的肿瘤 ,而亲代细胞接种的肿瘤未受抑制。结论　转TK基因细胞在体内外都获得了对GCV的敏感性。TK/GCV系统杀灭肿瘤可能与诱导细胞凋亡有关。GCV能在活体内抑制转TK基因细胞裸鼠移?; 关键词 HSV1-TK基因基因转移基因治疗细胞凋亡肺腺癌; Keywords HSV 1 TK gene Gene transfer Gene therapy Lung neoplasms Cell apoptosis; 分类号 R734.2 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名屋尘螨致敏/激发小鼠气道变态反应性炎症模型的构建被引量：3: 2; 作者毕玉田王彦吴奎卓文磊王长征钱桂生; 机构第三军医大学新桥医院全军呼吸疾病研究所全军肿瘤研究所; 出处《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2007年第5期338-341,F0002,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(编号:30470772) 重庆市自然科学基金资助项目(编号:CSTC2005BB5005); 文摘目的使用屋尘螨(HDM)提取液致敏和激发C57BL/6小鼠构建气道变态反应性炎症模型的方法。方法模型组和对照组,各8只。模型组以HDM致敏和激发小鼠,分别于第0、7、14、21天腹腔注射HDM,10 d后,连续雾化吸入HDM 3 d。对照组以PBS代替HDM。进行支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞总数计数和分类计数,肺组织病理检查,ELISA测定BALF上清中IL-4、IL-5和IFNγ-水平。结果模型组可见明显炎性细胞浸润,以嗜酸性粒细胞为主。而对照组未见明显炎性细胞浸润。BALF中细胞总数计数和嗜酸性粒细胞比例较对照组明显升高(P<0.01);BALF上清中IL-4、IL-5水平较对照组明显升高(P<0.001),IFNγ-水平较对照组降低(P<0.01)。结论使用HDM致敏和激发C57BL/6小鼠成功地建立了小鼠气道变应性炎症模型。; 关键词尘螨科动物模型超敏反应炎症; Keywords House dust mite extract Animal model Hypersensitivity reaction Inflammation; 分类号 S813.23 [农业科学—畜牧学] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名肺动脉平滑肌细胞对低氧诱导的肺微血管内皮细胞白介素表达的调节及机制被引量：1: 3; 作者张志远钱桂生王建春李运成刘婷王关嵩; 机构第三军医大学新桥医院呼吸疾病研究所; 出处《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期725-728,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(30770928) 军队"十一五"重点攻关课题资助项目(06G083 +1 种基金 08G093) 国家教育部留学回国人员科研启动基金项目(2007); 文摘目的研究低氧对肺微血管内皮细胞(PMVECs)的白细胞介素(IL)6、IL-1β、受体酪氨酸激酶(RTK)和Janus激酶3(JAK3)表达的影响,以及肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)在其中的调控作用。方法单独培养的大鼠PMVECs分为正常(N)组及低氧2h(H2)组、6h(H6)组、12h(H12)组,另设立PMVECs共培养组(与PASMCs共同培养)和单纯培养组,均接受6h或12h的低氧(氧浓度为3%)处理。应用RT-PCR方法检测IL-6、JAK3的mRNA表达水平,放免法测定培养细胞上清中的IL-6蛋白含量,放射性酶分析法测定细胞膜、胞质中RTK的活性,ELISA法测定细胞培养上清中的IL-1β蛋白含量。结果低氧刺激后,PMVECs的IL-6、JAK3mRNA表达及IL-6、IL-1β蛋白含量均增加。与N组比较,低氧处理各组的以上各指标均有所上升(P<0.01),以6h时间点最为明显(P<0.01)。胞膜RTK活性在低氧刺激各组明显降低(P<0.01),而胞质RTK活性明显升高(P<0.01),以12h时间点最为明显(P<0.05)。在低氧刺激6h后,共培养组的PMVECs内IL-6、JAK3的mRNA表达,以及IL-6、IL-1β蛋白含量均较单纯培养组有所降低(P<0.05);在低氧刺激12h后,共培养组的PMVECs的RTK活性也较单纯培养组降低(P<0.05)。结论低氧可以促进PM-VECs的IL-6mRNA表达,并能增加IL-6和IL-1β蛋白含量,复合培养情况下PASMCs对此具有下调作用,其机制可能与RTK和JAK涉及的信号转导通路有关。; 关键词肺动脉肌细胞平滑肌内皮细胞细胞低氧白细胞介素受体蛋白质酪氨酸激酶类 Janus激酶3; Keywords pulmonary artery myocytes, smooth muscle endothelial cells cell hypoxia interleukin receptor protein-tyrosine kinases Janus kinase 3; 分类号 R364.4 [医药卫生—病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名FasL基因和屋尘螨过敏原基因共表达质粒DNA疫苗对屋尘螨致敏/激发小鼠气道炎症的作用被引量：2: 4; 作者王彦林科雄王长征吴奎毕玉田; 机构第三军医大学新桥医院全军呼吸疾病研究所; 出处《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第2期189-191,共3页; 基金国家自然科学基金资助项目(编号:30470772); 文摘目的:观察FasL基因和屋尘螨过敏原Derp2基因共表达质粒的DNA疫苗(DNA-FasL-Derp2)对屋尘螨致敏/激发小鼠气道炎症的作用。方法:DNA-FasL-Derp2肌注接种屋尘螨致敏/激发C57BL/6小鼠,再次激发后处死小鼠。观察肺组织病理变化,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞总数和分类计数,以及IL-5、IFN-γ水平。并与仅编码Derp2基因的DNA疫苗(DNA-Derp2)比较。结果:接种DNA-FasL-Derp2和DNA-Derp2均能显著减轻屋尘螨致敏/激发小鼠气道炎症,减少BALF中细胞总数和嗜酸粒细胞比例,降低BALF中IL-5水平,以DNA-FasL-Derp2更显著。结论:DNA-FasL-Derp2可有效抑制屋尘螨致敏/激发小鼠气道炎症,而且比DNA-Derp2更有效。; 关键词尘螨科FasL DNA疫苗气道炎症; Keywords Pyroglyphidas FasL DNA vaccine Airway inflammation; 分类号 R562.25 [医药卫生—呼吸系统]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Rab1对海水干预肺微血管内皮细胞β肾上腺素受体表达的调节作用被引量：1: 5; 作者李运成王关嵩魏征华吴国明钱桂生; 机构第三军医大学新桥医院呼吸疾病研究所; 出处《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期833-837,共5页; 基金国家自然科学基金(81170066) 国家科技支撑计划课题(2009BAI85B03) +3 种基金军队"十一五"攻关课题(06G083 08G093)~~; 文摘目的研究Rab1对大鼠肺微血管内皮细胞(RPMVECs)β肾上腺素受体(β-ARs)表达的调节作用。方法取原代培养的RPMVECs作为研究对象,设计3个实验:(1)检测海水干预对β-ARs表达的影响,设对照组和海水处理(SW)组。(2)构建大鼠野生型Rab1慢病毒表达载体(Rab1WT)和Rab1阴性突变体慢病毒表达载体(Rab1N124I),检测两种质粒转染对β-ARs及其亚型(β1-AR、β2-AR)表达的影响,设对照组、转染Rab1WT组(WT组)和转染Rab1N124I组(N124I组)。(3)检测Rab1WT转染对海水处理β-ARs表达的影响,设对照组、SW组和转染Rab1WT后海水处理组(WT/SW组)。上述3个实验中,对照组RPMVECs常规培养至实验结束;SW组细胞常规培养后用海水处理2h;WT组和N124I组细胞分别转染Rab1WT和Rab1N124I(滴度109TU/ml);WT/SW组细胞转染Rab1WT后培养48h,用海水处理2h。β-ARs及其亚型的表达均采用配体饱和测定法进行检测。结果 (1)对照组和SW组RPMVECs表面β-ARs的表达量分别为2107.00±202.36和1324.00±130.01cpm/105细胞,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)对照组、WT组和N124I组β-ARs的表达量分别为2048.00±207.64、2833.00±203.07和1040.00±91.59cpm/105细胞(P<0.05),β1-AR分别为517.78±29.65、591.22±18.29、364.11±20.68cpm/105细胞(P<0.05),β2-AR分别为1627.90±112.27、2262.10±169.33和694.33±29.79cpm/105细胞(P<0.05)。与对照组比较,WT组β1-AR的表达增加了14.2%(P<0.05),β2-AR增加了49.0%(P<0.01)。(3)SW组β-ARs的表达量为1276.00±121.42cpm/105细胞,与对照组(2059.00±174.62cpm/105细胞)比较下降了38.0%(P<0.01),WT/SW组β-ARs的表达量为2017.20±101.14cpm/105细胞,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),与SW组比较增加了58%(P<0.01)。结论海水干预可降低β-ARs在RPMVECs细胞膜上的表达,Rab1可对抗该作用,使β-ARs的表达上调。; 关键词 rab1 GTP结合蛋白质类血管内皮细胞受体肾上腺素能β; Keywords rab I GTP-binding proteins endothelial cells receptors, adrenergic, beta; 分类号 R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	HSV_1-TK转染人肺腺癌细胞A549的实验研究	何祥梁郭先健钱桂生何雪花黄桂君陈维中李淑萍	《中国肺癌杂志》 CAS	2001	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	屋尘螨致敏/激发小鼠气道变态反应性炎症模型的构建	毕玉田王彦吴奎卓文磊王长征钱桂生	《中国实验动物学报》 CAS CSCD	2007	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	肺动脉平滑肌细胞对低氧诱导的肺微血管内皮细胞白介素表达的调节及机制	张志远钱桂生王建春李运成刘婷王关嵩	《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	FasL基因和屋尘螨过敏原基因共表达质粒DNA疫苗对屋尘螨致敏/激发小鼠气道炎症的作用	王彦林科雄王长征吴奎毕玉田	《实用医学杂志》 CAS 北大核心	2011	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	Rab1对海水干预肺微血管内皮细胞β肾上腺素受体表达的调节作用	李运成王关嵩魏征华吴国明钱桂生	《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2012	1	在线阅读下载PDF 职称材料