PD-1^+肿瘤浸润性CD8^+T淋巴细胞的表型鉴定及功能研究 被引量：4

1

作者 李小红 陈陵 朱波 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期438-441,共4页

目的从肿瘤局部分离衰竭性CD8+T淋巴细胞(CD8+PD-1+T细胞),并对其功能进行研究,初步探讨机体免疫系统无法有效杀伤和清除肿瘤的原因。方法 C57BL/6小鼠皮下注射Lewis肺癌细胞株建立小鼠肿瘤模型。将肿瘤制成单细胞悬液后,染细胞表面标... 目的从肿瘤局部分离衰竭性CD8+T淋巴细胞(CD8+PD-1+T细胞),并对其功能进行研究,初步探讨机体免疫系统无法有效杀伤和清除肿瘤的原因。方法 C57BL/6小鼠皮下注射Lewis肺癌细胞株建立小鼠肿瘤模型。将肿瘤制成单细胞悬液后,染细胞表面标志。采用流式细胞术从肿瘤局部分选CD8+PD-1+T淋巴细胞及CD8+PD-1-T淋巴细胞,体外经非特异性刺激后行细胞内因子染色,检测IFN-γ分泌能力。CFSE细胞染色检测其增殖活性。结果肿瘤局部成功分离得浸润性CD8+T淋巴细胞,其中将近80%的细胞高表达衰竭表型PD-1+。CFSE结果显示CD8+PD-1+T细胞较CD8+PD-1-T细胞增殖活性明显下降;细胞内因子染色后流式细胞术检测结果显示肿瘤局部CD8+PD-1+T细胞较CD8+PD-1-T细胞IFN-γ分泌能力降低约50%。结论肿瘤局部存在一群免疫衰竭性T细胞,可能参与了肿瘤的免疫逃逸。 展开更多

关键词 肿瘤 T淋巴细胞 PD-1

在线阅读 下载PDF 职称材料

血清多肿瘤标志物蛋白芯片检测结果在结直肠癌诊断中的价值 被引量：16

2

作者 龙驰 胡义德 曹正怀 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期13-15,共3页

目的探讨血清多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统(C-12)检测结果对结直肠癌(CRC)的诊断价值。方法采用C-12对130例住院CRC患者(CRC组)和108例门诊体检人员(对照组)血清进行检测,分析C-12在两组人群之间、CRC不同TNM分期之间、C-12包含的12种... 目的探讨血清多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统(C-12)检测结果对结直肠癌(CRC)的诊断价值。方法采用C-12对130例住院CRC患者(CRC组)和108例门诊体检人员(对照组)血清进行检测,分析C-12在两组人群之间、CRC不同TNM分期之间、C-12包含的12种肿瘤标志物之间、不同肿瘤标志物联合检测之间的阳性率差异。结果 CRC组C-12阳性率显著高于对照组(P<0.01),随CRC分期升高而上升(P<0.01),其中CEA、CA242、CA19-9阳性率显著高于其余9项肿瘤标志物(P<0.01),CEA联合CA242、CA19-9检测能提高敏感度,但它们之间联合检测或12项肿瘤标志物联合检测与单项肿瘤标志物CEA相比差异无显著性(P>0.05)。结论 C-12有助于CRC诊断,临床分期越晚诊断价值越高,其中CEA、CA242、CA19-9的诊断价值优于其余9项肿瘤标志物,多肿瘤标志物联合检测能提高检测敏感度,但并不显著优于单项肿瘤标志物CEA。 展开更多

关键词 蛋白芯片 肿瘤标志物 结直肠癌 癌胚抗原CEA 糖类抗原CA242 糖类抗原CA19-9

在线阅读 下载PDF 职称材料

重组人内皮抑素联合紫杉醇+顺铂化疗方案治疗人乳腺癌祼鼠移植瘤的研究 被引量：9

3

作者 邓莉 张轩珍 +2 位作者 王卫东 陈正堂 曹正怀 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期783-786,共4页

目的探讨重组人内皮抑素(endostar,商品名恩度)联合化疗方案对人乳腺癌(MCF-7)裸鼠模型的治疗,观察其对祼鼠血管生成及肿瘤生长的抑制作用。方法将48只荷瘤鼠按随机数字表法分为A组及B组,每组24只,两组再分为化疗组、内皮抑素组、联合... 目的探讨重组人内皮抑素(endostar,商品名恩度)联合化疗方案对人乳腺癌(MCF-7)裸鼠模型的治疗,观察其对祼鼠血管生成及肿瘤生长的抑制作用。方法将48只荷瘤鼠按随机数字表法分为A组及B组,每组24只,两组再分为化疗组、内皮抑素组、联合用药组及对照组,化疗组给予紫杉醇+顺铂(TP),紫杉醇20mg/kg,腹腔注射,第1、7、14天,顺铂5mg/kg,腹腔注射,第1、7天;内皮抑素组给予重组人内皮抑素10mg/kg,静脉推注,连续14d;联合用药组给予重组人内皮抑素+TP:紫杉醇20mg/kg,腹腔注射,第1、7、14天,顺铂5mg/kg,腹腔注射,第1、7天,重组人内皮抑素10mg/kg,静脉推注;对照组连续14d静脉推注等体积生理盐水,比较各组的抑瘤率,绘制肿瘤生长曲线。ELISA方法检测血清血管内皮生长因子(VEGF),肿瘤组织病理切片,观察微血管密度(MVD)、凋亡指数,B组动物观察其生存期。结果联合用药组VEGF、MVD与其他各组比较明显减低(P<0.05),凋亡指数与其他各组比较明显增加(P<0.05),生存时间与对照组比较明显延长(P<0.05)。结论重组人内皮抑素联合TP方案治疗人乳腺癌裸鼠移植瘤对肿瘤生长及肿瘤血管抑制优于单一化疗,但1个周期联合化疗用药不能延长生存期。 展开更多

关键词 乳腺癌 重组人内皮抑素 化疗 裸鼠

在线阅读 下载PDF 职称材料

人卵巢癌细胞系A2780中肿瘤干细胞的分离及鉴定 被引量：5

4

作者 谢伟 龙海霞 +3 位作者 张恒 向橦 朱波 谢荣凯 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期356-359,共4页

目的从人卵巢癌细胞系A2780中分离并鉴定卵巢癌干细胞。方法将A2780细胞置于含人重组表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、人重组碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、牛血清白蛋白和人胰岛素的无血清培... 目的从人卵巢癌细胞系A2780中分离并鉴定卵巢癌干细胞。方法将A2780细胞置于含人重组表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、人重组碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、牛血清白蛋白和人胰岛素的无血清培养基中培养,采用连续传代诱导培养肿瘤干细胞,对每代分离出来的肿瘤干细胞进行流式检测,并对第4代肿瘤干细胞进行免疫荧光检测和逆向分化实验。结果从A2780细胞中成功分离出肿瘤干细胞,在上述无血清培养基中呈悬浮生长,具有很强的自我更新能力,流式检测显示随着传代诱导,CD133阳性率依次升高,免疫荧光进一步证实了CD133是卵巢癌干细胞的表面标记物,诱导分化实验说明其可逆向分化成为A2780肿瘤细胞。结论体外培养的卵巢癌细胞株A2780中存在卵巢癌干细胞,并能将其分离培养和诱导分化。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 肿瘤细胞 培养的 肿瘤干细胞 分离 鉴定

在线阅读 下载PDF 职称材料

肿瘤分子靶向治疗临床应用值得注意的几个问题 被引量：10

5

作者 陈正堂 孙建国 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期1-3,共3页

近年来,肿瘤分子靶向治疗临床应用方兴未艾。与传统的化疗细胞毒药物不同,肿瘤分子靶向药物不直接杀伤细胞,而是作用于肿瘤细胞过表达或突变、且与肿瘤恶性生物学行为密切相关的分子（靶点）,从而抑制肿瘤的过度增殖、新生血管生成、浸... 近年来,肿瘤分子靶向治疗临床应用方兴未艾。与传统的化疗细胞毒药物不同,肿瘤分子靶向药物不直接杀伤细胞,而是作用于肿瘤细胞过表达或突变、且与肿瘤恶性生物学行为密切相关的分子（靶点）,从而抑制肿瘤的过度增殖、新生血管生成、浸润和转移。然而,这类药物是不是就没有任何毒副作用,而可以放心大胆、不加选择地应用呢？临床应用应该注意些什么呢？现就我们临床应用此类药物的粗浅体会,提出对上述问题的若干思考,供同道们讨论、指正。 展开更多

关键词 肿瘤 药物治疗 分子靶向性 临床应用

在线阅读 下载PDF 职称材料

CD133^+卵巢癌干细胞样细胞向血管内皮细胞分化的实验研究 被引量：6

6

作者 贺路航 向橦 +2 位作者 张艳玲 谢荣凯 朱波 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期413-416,共4页

目的研究CD133+卵巢癌干细胞样细胞(ovarian cancer stem-like cells,OCSLCs)向血管内皮细胞的分化。方法通过无血清培养方法诱导卵巢癌A2780细胞株来源的CD133+OCSLCs;体外观察其在Matrigel基质胶上向血管内皮细胞分化的生物学行为,RT-... 目的研究CD133+卵巢癌干细胞样细胞(ovarian cancer stem-like cells,OCSLCs)向血管内皮细胞的分化。方法通过无血清培养方法诱导卵巢癌A2780细胞株来源的CD133+OCSLCs;体外观察其在Matrigel基质胶上向血管内皮细胞分化的生物学行为,RT-PCR和Western blot检测其成管后CD31的表达;通过裸鼠皮下移植瘤实验,免疫荧光法观察CD133+OCSLCs在卵巢癌血管新生中的作用。结果成功诱导出CD133+OCSLCs;体外成管实验结果显示CD133+OCSLCs在Matrigel基质胶上具有成管能力,6 h管腔样结构形成最为明显;免疫荧光、RT-PCR和Western blot证实,OCSLCs成管后表达CD31内皮细胞标记物(P<0.01);CD133+OCSLCs接种裸鼠皮下成瘤后,通过免疫荧光可观察到人源性肿瘤微血管的形成。结论 CD133+OCSLCs具有向血管内皮细胞分化的潜能。 展开更多

关键词 卵巢癌干细胞样细胞 血管内皮细胞 血管生成

在线阅读 下载PDF 职称材料

丁字鞋固定技术在下肢肿瘤体位固定中的应用 被引量：2

7

作者 文晓静 戴红娅 +1 位作者 张琰 李光辉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第24期2490-2491,共2页

目的探讨下肢肿瘤放疗中利用丁字鞋固定体位相较于常规负压垫固定对摆位时间和摆位精度的影响。方法选择下肢肿瘤患者20例,简单随机分为A组(10例)和B组(10例),A组用真空负压垫固定,B组用丁字鞋定位,每例患者治疗前均采用锥形束CT(cone b... 目的探讨下肢肿瘤放疗中利用丁字鞋固定体位相较于常规负压垫固定对摆位时间和摆位精度的影响。方法选择下肢肿瘤患者20例,简单随机分为A组(10例)和B组(10例),A组用真空负压垫固定,B组用丁字鞋定位,每例患者治疗前均采用锥形束CT(cone beam CT,CBCT)扫描配准纠正摆位误差,统计每例患者的摆位误差和摆位时间,并对2组数据进行统计分析。结果丁字鞋固定组摆位时间明显低于负压垫固定组的摆位时间(P<0.05);CBCT图像配准结果中,丁字鞋固定组在Lat左右和Lng前后方向上均优于负压垫固定组[(0.25±0.19 vs 0.44±0.16)cm,P=0.028;(0.27±0.18 vs 0.58±0.13)cm,P<0.01]。结论下肢肿瘤放疗定位采用丁字鞋定位技术可以减小摆位难度,缩短摆位时间,减少摆位误差,值得在临床中推荐使用。 展开更多

关键词 丁字鞋固定技术 下肢肿瘤体 摆位误差 固定 放射治疗

在线阅读 下载PDF 职称材料

胸部放疗中纵隔淋巴结剂量监测的辐照仿真模型的数字化研究

8

作者 张继兵 孙建国 +3 位作者 周一兵 戴红娅 马传坤 陈正堂 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期862-865,共4页

目的建立胸部放疗中纵隔淋巴结剂量监测的辐照仿真模型,为临床上监测纵隔淋巴结的实际受照剂量提供实验依据。方法以标准中国人体(身高170 cm、体质量65 kg)为参照,选取20例相近体型的男性胸部肿瘤患者,运用瓦里安公司的Eclipse治疗计... 目的建立胸部放疗中纵隔淋巴结剂量监测的辐照仿真模型,为临床上监测纵隔淋巴结的实际受照剂量提供实验依据。方法以标准中国人体(身高170 cm、体质量65 kg)为参照,选取20例相近体型的男性胸部肿瘤患者,运用瓦里安公司的Eclipse治疗计划系统(treatment planning system,TPS)确定纵隔淋巴结分布区的三维定位点;根据定位点和三维立体数据,对辐照仿真体模(以下简称体模)进行打孔;根据辐射监测探头的形状和大小,安装辐射剂量监测设备。结果通过Eclipse系统,精确定位了标准中国人体的纵隔淋巴结各分区中心点,并在胸部CT图像横断面、矢状面和冠状面上测量了标准中国人体的三维定位平均数据;利用该数据在体模上实施精确打孔,并安装辐射剂量监测装置,建立了纵隔淋巴结辐射剂量监测的仿真模型。结论建立了胸部放疗中纵隔淋巴结剂量监测的辐照仿真模型,实现了精确打孔并安装了探测设备。 展开更多

关键词 辐照模型 剂量监测 胸部放疗 仿真技术

在线阅读 下载PDF 职称材料

CD133^+卵巢癌干细胞通过CXCL16/CXCR6维持其侵袭迁移能力 被引量：4

9

作者 杨阳 林盛 +2 位作者 黄佳妮 董翔宇 朱波 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期757-761,共5页

目的探讨人卵巢癌干细胞(ovarian cancer stem cells,OCSCs)自分泌趋化因子CXCL16对OCSCs增殖及侵袭迁移能力的影响。方法采用Real-time PCR、ELISA及流式细胞仪检测A2780细胞株诱导的CD133+OCSCs和CD133-非卵巢癌干细胞(non ovarian ca... 目的探讨人卵巢癌干细胞(ovarian cancer stem cells,OCSCs)自分泌趋化因子CXCL16对OCSCs增殖及侵袭迁移能力的影响。方法采用Real-time PCR、ELISA及流式细胞仪检测A2780细胞株诱导的CD133+OCSCs和CD133-非卵巢癌干细胞(non ovarian cancer stem cells,n OCSCs)中CXCL16及CXCR6的表达;用CCK-8法检测阻断CXCL16对OCSCs增殖能力的影响;利用Transwell迁移、侵袭实验检测分别阻断CXCL16或CXCR6及shRNA沉默CXCL16对OCSCs侵袭迁移能力的影响。结果与n OCSCs比较,OCSCs中CXCL16及CXCR6 mRNA均表达上调(P<0.01)。ELISA结果显示OCSCs的CXCL16分泌量远远高于n OCSCs[(2 434.00±204.65)vs(129.33±31.64)ng/m L,P<0.01]。流式细胞仪检测发现OCSCs表面CXCR6表达率显著高于n OCSCs(60.6%vs 2.4%,P<0.01)。与对照组比较,中和抗体阻断CXCL16对OCSCs增殖无明显影响(P>0.05),然而阻断CXCL16或CXCR6能明显抑制OCSCs的侵袭迁移能力(P<0.01)。shRNA沉默CXCL16同样能显著抑制OCSCs的侵袭迁移能力(P<0.01)。结论 CD133+卵巢癌干细胞自分泌CXCL16,后者与CXCR6结合可维持卵巢癌干细胞高侵袭迁移能力。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 肿瘤干细胞 趋化因子受体CXCL16 趋化因子受体CXCR6 肿瘤侵袭 细胞迁移

在线阅读 下载PDF 职称材料

血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶-9在前列腺癌中的表达及其相互关系 被引量：5

10

作者 王钦文 刁鑫伟 +3 位作者 陈正堂 叶明福 许建平 王亚丽 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第19期1859-1861,共3页

目的分析血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在前列腺癌中的表达及其相互关系。方法应用免疫组织化学方法,检测148例前列腺癌(prostate cancer,PCa)组织... 目的分析血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在前列腺癌中的表达及其相互关系。方法应用免疫组织化学方法,检测148例前列腺癌(prostate cancer,PCa)组织中和10例前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)组织中VEGF和MMP-9的表达。结果前列腺癌组织中VEGF和MMP-9的高表达率分别为66.2%、39.2%,显著高于前列腺增生组(P<0.05)。VEGF和MMP-9的表达与前列腺癌的分化程度及转移有关(P<0.05),与患者的年龄及雄激素受体水平(AR)无关(P>0.05)。且VEGF、MMP-9在前列腺癌中的表达具有相关性。结论VEGF和MMP-9的表达与前列腺癌的发展密切相关,并对前列腺癌的预后判定有一定的意义。 展开更多

关键词 前列腺癌 免疫组织化学 VEGF MMP-9

在线阅读 下载PDF 职称材料

实时定量PCR检测miR-373*、miR-200c在乳腺癌干细胞中的表达及其靶基因预测 被引量：4

11

作者 邱钧 金俊余 +3 位作者 孙建国 廖荣霞 王欣欣 陈正堂 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期984-987,共4页

目的分析miR-373*、miR-200c在乳腺癌干细胞(breast cancer stem cells,BCSCs)和MCF-7乳腺癌细胞株中的差异表达。方法 Trizol法分别抽提乳腺癌干细胞和MCF-7细胞总RNA,实时定量PCR检测miRNAs表达,对表达差异显著的miRNAs进行潜在靶基... 目的分析miR-373*、miR-200c在乳腺癌干细胞(breast cancer stem cells,BCSCs)和MCF-7乳腺癌细胞株中的差异表达。方法 Trizol法分别抽提乳腺癌干细胞和MCF-7细胞总RNA,实时定量PCR检测miRNAs表达,对表达差异显著的miRNAs进行潜在靶基因预测。结果 miR-373*在乳腺癌干细胞中较MCF-7细胞高表达(6.684±0.548),而miR-200c在乳腺癌干细胞中较MCF-7细胞低表达(0.345±0.031)。通过软件分析预测,miR-373*与TP53INP2、CASP8、EIF4A1、EEF1A1等基因均具有可能靶位点,miR-200c与TCF2、TDE2、SYVN1、PDCD10、RAP2C等基因均具有可能靶位点。结论 miR-373*在乳腺癌干细胞中高表达,可能是一个潜在的癌基因。miR-200c在乳腺癌干细胞中低表达,可能是一个潜在的抑癌基因。 展开更多

关键词 MIRNAS 乳腺癌 肿瘤干细胞 非编码RNA

在线阅读 下载PDF 职称材料

放、化疗治疗局部晚期鼻咽癌的Meta分析 被引量：11

12

作者 张岸梅 陈正堂 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期233-237,共5页

目的比较放、化疗综合治疗与单纯放疗在局部晚期鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者中的疗效,分析两者在死亡率(mortality rate,MR)、无事件生存率(event-free survival,EFS)、局部复发率(local recurrence rate,LRR)及远处转移... 目的比较放、化疗综合治疗与单纯放疗在局部晚期鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者中的疗效,分析两者在死亡率(mortality rate,MR)、无事件生存率(event-free survival,EFS)、局部复发率(local recurrence rate,LRR)及远处转移率(distant metastasis rate,DMR)的差别,以进一步明确放、化疗综合治疗在局部晚期NPC中的作用。方法根据制定的文献纳入标准,选择已发表的临床随机对照研究进行Meta分析。结果本研究共纳入16项临床研究,累计3768例患者。同期放化疗组患者的2、3、5年MR、EFR、LRR及DMR均较单纯放疗组显著改善(P<0.01)。与单纯放疗组相比,诱导化疗组的LRR及DMR亦较低(P<0.05)。而辅助化疗组与单纯放疗组相比,OS、EFR、LRR和DMR都没有统计学差异(P>0.05)。结论放、化疗综合治疗(尤其是同期放、化疗)与单纯放疗相比,能更好的改善NPC患者的生存率,并降低其LRR和DMR,是治疗局部晚期NPC的有效方法。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 放疗 化疗 META分析 随机对照试验

在线阅读 下载PDF 职称材料

放射控导的wt-p53蛋白正反馈基因环路对肺腺癌细胞周期、凋亡及放射敏感性的影响 被引量：2

13

作者 毛丽伟 廖国清 +2 位作者 王红梅 王卫东 陈正堂 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期462-465,共4页

目的研究体外环境放射控导的wt-p53蛋白正反馈基因环路对肺腺癌细胞细胞周期、凋亡率及放射敏感性的影响。方法采用直线加速器8MV-X线,400MU/min、4Gy、源皮距100cm的照射条件照射治疗组pE6R4-p53-EGFP/H1299转染细胞和对照组H1299(p53-... 目的研究体外环境放射控导的wt-p53蛋白正反馈基因环路对肺腺癌细胞细胞周期、凋亡率及放射敏感性的影响。方法采用直线加速器8MV-X线,400MU/min、4Gy、源皮距100cm的照射条件照射治疗组pE6R4-p53-EGFP/H1299转染细胞和对照组H1299(p53-/-)、pE6-p53-EGFP/H1299和pR4-p53-EGFP/H1299转染细胞,12h后收集各组细胞,流式细胞仪分析该环路在放射线诱导下对肺腺癌细胞周期和细胞凋亡率的影响;绘制细胞放射剂量-存活曲线,计算平均致死剂量(Do)值及放射增敏比(sensitive enhancement ratio,SER)。结果4Gy8MV-X线照射治疗组和对照组细胞后12h,治疗组细胞在照射后(75.13±1.42)%发生明显G0/G1期阻滞;照射后各组细胞凋亡率均高于照射前,照射后治疗组细胞凋亡率为(23.73±0.21)%,分别是对照组H1299(p53-/-)细胞[(4.17±0.12)%]、pE6-p53-EGFP/H1299细胞[(15.67±0.32)%]、pR4-p53-EGFP/H1299细胞[(9.23±0.15)%]的5.69、1.51倍和2.57倍。治疗组pE6R4-p53-EGFP/H1299细胞和对照组pE6-p53-EGFP/H1299、H1299(p53-/-)细胞Do值分别0.91、1.073、1.413Gy,根据Do值计算SER分别为2.63和1.34。结论放射可诱导wt-p53蛋白正反馈基因环路上调wt-p53蛋白表达,从而调控肺腺癌细胞发生显著G/G1阻滞,使细胞凋亡比例增加,显著提高了肺腺癌细胞放射敏感性。 展开更多

关键词 放射治疗剂量 肿瘤抑制蛋白p53 基因环路 非小细胞肺癌 细胞系 肿瘤 辐射耐受性 体外研究

在线阅读 下载PDF 职称材料

小鼠支气管肺泡干细胞的培养鉴定和分选 被引量：2

14

作者 钱莘 安江洪 +2 位作者 敖绪军 孙建国 陈正堂 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期775-778,共4页

目的对正常成年小鼠肺内支气管肺泡干细胞（bronehoalveolar stem cell，BASC）进行克隆培养、鉴定和流式细胞仪分选。方法用胶原酶和分散酶联合消化小鼠肺组织制备肺单细胞悬液，并经免疫磁珠分选Sca-1^＋细胞；胶原蛋白和小鼠Swiss-3T... 目的对正常成年小鼠肺内支气管肺泡干细胞（bronehoalveolar stem cell，BASC）进行克隆培养、鉴定和流式细胞仪分选。方法用胶原酶和分散酶联合消化小鼠肺组织制备肺单细胞悬液，并经免疫磁珠分选Sca-1^＋细胞；胶原蛋白和小鼠Swiss-3T3成纤维细胞系包被培养板；无血清乳腺上皮细胞培养基培养Sca-1^＋细胞；双重免疫荧光染色Clara细胞抗原（CCA）和肺泡表面活性蛋白C（SP-C）鉴定BASC，并用流式细胞仪分选BASC。结果通过胶原酶和分散酶联合消化小鼠肺组织，平均每只成年小鼠可得到有核细胞总数（1．6～1．8）×10^7；经磁珠分选后的Sca-1^＋细胞纯度明显高于未经分选的肺Sca-1^＋细胞[分别为（87．3±5．9）％、（9．6±1．8）％，P〈0．05]；在无血清乳腺上皮细胞培养基中Sca-1^＋细胞在第4天可形成BASC克隆和其他不表达CCA、SP-C的细胞克隆；流式细胞仪检测CD45^-CD31^-Sca-1^＋CD34^＋细胞占肺细胞总数的0．7％～1．1％，根据此分子标记能够分选出高纯度的BASC。结论通过胶原酶和分散酶联合消化，免疫磁珠分选的Sca-1^＋细胞在无血清乳腺上皮细胞培养基中能够形成非纯化的BASC克隆，而流式细胞仪可以分选出高纯度的BASC。 展开更多

关键词 干细胞 Clara细胞抗原 肺泡表面活性蛋白C 流式细胞术

在线阅读 下载PDF 职称材料

全身照射用于造血干细胞移植前预处理78例临床分析 被引量：3

15

作者 李德志 周一兵 +1 位作者 万久庆 陈正堂 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期254-256,共3页

目的回顾性分析全身照射(totalbody irradiation,TBI)用于造血干细胞移植治疗白血病和恶性淋巴瘤的作用、照射剂量及并发症。方法2002年5月至2007年12月本院有78例造血干细胞移植患者使用了TBI作为预处理。采用直线加速器8MVX线,吸收剂... 目的回顾性分析全身照射(totalbody irradiation,TBI)用于造血干细胞移植治疗白血病和恶性淋巴瘤的作用、照射剂量及并发症。方法2002年5月至2007年12月本院有78例造血干细胞移植患者使用了TBI作为预处理。采用直线加速器8MVX线,吸收剂量率为4.5～5.0cGy/min,照射剂量为7～11Gy,连续2d完成。78例中,55例采用传统的先大剂量化疗再TBI的预处理方案,23例采用先TBI再大剂量化疗的顺序。结果78例使用了TBI作为预处理的病例移植全部成功,无严重的放射性肺炎等并发症发生。结论TBI预处理方案是安全、有效的;采用先TBI再大剂量化疗的顺序,可有效减少TBI的即时反应,采用直线加速器做TBI对设备有更高的要求。 展开更多

关键词 全身照射 干细胞移植 血液肿瘤

在线阅读 下载PDF 职称材料

172例肺腺癌脑转移影响因素的临床分析 被引量：2

16

作者 刘小军 张雪琳 +1 位作者 李莎莎 胡义德 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期73-76,共4页

目的探讨肺腺癌脑转移临床影响因素,为肺腺癌临床诊治提供参考。方法回顾性分析本院2005-2010年172例肺腺癌脑转移患者的临床资料。通过生存分析Kaplan-Meier法计算累计脑转移率并进行Log-Rank检验比较,全组患者通过比例风险模型(Cox模... 目的探讨肺腺癌脑转移临床影响因素,为肺腺癌临床诊治提供参考。方法回顾性分析本院2005-2010年172例肺腺癌脑转移患者的临床资料。通过生存分析Kaplan-Meier法计算累计脑转移率并进行Log-Rank检验比较,全组患者通过比例风险模型(Cox模型)进行多因素分析。结果患者从确诊到出现脑转移中位时间为13个月,1年累计脑转移发生率47.1%,2年累计脑转移发生率72.7%。单因素分析显示患者的行为状态ECOG评分、原发肿瘤数目、T分期、N分期、M分期、TNM分期、治疗情况和近期疗效等对脑转移有影响(P<0.001)。多因素分析显示N分期(P=0.001)、M分期(P=0.000)、TNM分期(P=0.042)、近期疗效(P<0.001)对脑转移影响存在显著差异。结论 N分期、M分期、TNM分期、近期疗效可能是影响肺腺癌脑转移的重要因素。 展开更多

关键词 肺腺癌 脑转移 影响因素 临床分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

mmu-miR-294调控MMP3靶基因对LLC细胞侵袭迁移的影响 被引量：2

17

作者 金俊余 孙建国 +5 位作者 张岸梅 王欣欣 廖荣霞 邱钧 马虎 陈正堂 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1200-1204,共5页

目的预测并验证小鼠mmu-miR-294调控的靶基因,探讨其在肺癌发生发展中的生物学功能。方法生物信息学预测mmu-miR-294可能调控的靶基因金属蛋白酶(MMP3),双荧光素酶检测验证mmu-miR-294调控MMP3的真实性;脂质体2000介导转染mmu-miR-294... 目的预测并验证小鼠mmu-miR-294调控的靶基因,探讨其在肺癌发生发展中的生物学功能。方法生物信息学预测mmu-miR-294可能调控的靶基因金属蛋白酶(MMP3),双荧光素酶检测验证mmu-miR-294调控MMP3的真实性;脂质体2000介导转染mmu-miR-294模拟物进入Lewis(LLC)细胞株,通过Transwell实验检测细胞侵袭、迁移能力的改变。结果重组质粒经XbaⅠ单酶切能获得约5 000 bp和100 bp的酶切片段,阳性克隆测序,双荧光素酶报告基因检测证明合成寡核苷酸链序列插入正确;脂质体2000介导转染mmu-miR-294模拟物,过表达实验组MMP3蛋白水平较对照组明显降低。转染mmu-miR-294模拟物后LLC细胞的侵袭迁移能力显著降低(P<0.01)。结论低表达mmu-miR-294有助于维持LLC的侵袭转移特性,增加其表达水平可以有效抑制LLC的侵袭迁移能力。mmu-miR-294可能通过调控其靶基因MMP3表达而发挥功能。 展开更多

关键词 mmu—miR-294 肺癌干细胞 肺癌 MMP3

在线阅读 下载PDF 职称材料

Beclin-1在非小细胞肺癌中的表达与意义 被引量：1

18

作者 肖瑜 龙驰 +2 位作者 张明慧 罗焱 胡义德 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1271-1273,共3页

目的探讨自噬重要调控因子Beclin-1在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及其临床意义。方法收集150例非小细胞肺癌患者的癌组织及癌旁组织并制成组织芯片,应用免疫组化的方法检测Beclin-1在肺癌组织及癌旁组织中... 目的探讨自噬重要调控因子Beclin-1在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及其临床意义。方法收集150例非小细胞肺癌患者的癌组织及癌旁组织并制成组织芯片,应用免疫组化的方法检测Beclin-1在肺癌组织及癌旁组织中的表达情况。分析Beclin-1的表达与肺癌不同临床参数之间的关系并对病例进行生存分析。结果 Beclin-1在肺癌组织的阳性表达率(26.00%)显著低于癌旁组织(82.00%)(P<0.05);肺鳞癌组织中Beclin-1的阳性表达率(34.66%)显著高于肺腺癌(17.34%)(P<0.05);Beclin-1的表达率在不同性别、年龄、分化程度、淋巴结转移、远处转移组间无显著差异(P>0.05);Beclin-1阴性表达的非小细胞肺癌患者的生存率显著低于阳性表达的患者(P<0.05)。结论 Beclin-1可能是一个非小细胞肺癌治疗的新的靶点,有可能成为非小细胞肺癌病理类型判断的辅助指标和预后评估候选指标之一。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 自噬 BECLIN-1 组织芯片

在线阅读 下载PDF 职称材料

CXCR4阳性Lewis肺癌细胞的高致瘤性和高转移潜能 被引量：1

19

作者 辇伟奇 敖绪军 +1 位作者 陈芳琳 陈正堂 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期315-318,共4页

目的从小鼠肺腺癌细胞株(lewis lung carcinoma,LLC)中分离并鉴定具有高转移潜能的肿瘤干细胞样细胞亚群。方法流式分析Sca1、CXCR4双阳性细胞比例,激光共聚焦检测小鼠肺癌组织中双阳性细胞表达情况;以CXCR4作为磁珠分选细胞的表面标志... 目的从小鼠肺腺癌细胞株(lewis lung carcinoma,LLC)中分离并鉴定具有高转移潜能的肿瘤干细胞样细胞亚群。方法流式分析Sca1、CXCR4双阳性细胞比例,激光共聚焦检测小鼠肺癌组织中双阳性细胞表达情况;以CXCR4作为磁珠分选细胞的表面标志,检测分选前后细胞活性,观察分析CXCR4阳性亚群的恶性生物学行为。结果LLC细胞中Sca-1、CXCR4双阳性细胞比例为0.1%,CXCR4阳性细胞为0.18%,小鼠肺癌组织存在荧光双染色细胞;分选前细胞活性为(95.58±0.87)%,分选后活力为(94.96±0.76)%(P>0.05);CXCR4阳性亚群在无血清中呈球状生长,CXCR阴性亚群1×105即不可成瘤,CXCR4阳性亚群在7×103仍可成瘤;CXCR4阴性和阳性亚群分别以5×105、2×104密度各接种3只小鼠,前者无转移,而后者2只发生肺转移,1只发生耳转移。结论Lewis肺癌细胞中的CXCR4阳性亚群具有一定的自我更新和转移能力,具备癌转移性干细胞某些特性。 展开更多

关键词 细胞系 肿瘤 癌 非小细胞肺 肿瘤干细胞 小鼠 近交C578L 癌 Lewis肺 受体 CXCR4

在线阅读 下载PDF 职称材料

HOXA10在肺腺癌中的过表达及其临床意义 被引量：1

20

作者 张雪淋 原薇薇 +2 位作者 傅华 刘小军 胡义德 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期468-471,共4页

目的研究肺腺癌组织和细胞系中HOXA10的表达及其临床意义。方法运用免疫组织化学方法检测75例肺腺癌及其癌旁组织中HOXA10的表达情况,并分析HOXA10的表达与患者的临床特征及5年生存率的相关性。此外利用反转录PCR、Western blot及免疫... 目的研究肺腺癌组织和细胞系中HOXA10的表达及其临床意义。方法运用免疫组织化学方法检测75例肺腺癌及其癌旁组织中HOXA10的表达情况,并分析HOXA10的表达与患者的临床特征及5年生存率的相关性。此外利用反转录PCR、Western blot及免疫荧光染色检测正常肺支气管上皮细胞系HBE以及4种肺腺癌细胞系H322、H1650、A549、H1975中HOXA10的表达情况。结果 HOXA10主要表达于胞浆中,且于75例肺腺癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.01),并与肿瘤的浸润深度(P<0.05)及淋巴结转移(P<0.01)有关。而HOXA10高表达与低表达的肺腺癌患者的5年生存率没有显著差异(P>0.05)。反转录PCR、Western blot及免疫荧光染色的结果显示HOXA10在肺腺癌细胞系中的表达明显高于正常肺支气管上皮细胞系。结论 HOXA10高表达于肺腺癌及肺腺癌细胞系中,这可能与肺腺癌的侵袭和恶性淋巴结转移的程度密切相关。 展开更多

关键词 肺腺癌 HOXA10 表达 临床意义

在线阅读 下载PDF 职称材料