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供体年龄影响融合生长内皮祖细胞对平滑肌细胞表型转换及增殖迁移的作用
被引量：
6
1
作者
朱光旭
周芳
+5 位作者
阮光萍
宋明宝
杨建勇
黄岚
康华莉
潘兴华
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期769-776,共8页
目的：探讨老龄和年轻个体来源融合生长状态内皮祖细胞（EPCs）对血管平滑肌细胞（SMCs）表型转换以及增殖和迁移的调节作用。方法：脱臼处死1～2月龄、19～26月龄SD大鼠，应用含15％ FBS的DMEM／F12培养基（含内皮细胞生长添加剂100 mg...
目的：探讨老龄和年轻个体来源融合生长状态内皮祖细胞（EPCs）对血管平滑肌细胞（SMCs）表型转换以及增殖和迁移的调节作用。方法：脱臼处死1～2月龄、19～26月龄SD大鼠，应用含15％ FBS的DMEM／F12培养基（含内皮细胞生长添加剂100 mg／L、肝素100 mg／L、青霉素、链霉素各1×105 U／L）培养EPCs，取1～2月龄大鼠腹主动脉，组织块法培养血管SMCs，应用DiI-Ac-LDL与FITC-UEA-1荧光双染以及α-SM-actin免疫荧光分别对EPCs和SMCs进行鉴定。建立细胞共培养体系，上室为融合生长状态的EPCs，下室为SMCs，实验分4组：（1）第3代SMCs（P3）组；（2）第4代SMCs（P4）组；（3）第4代SMCs与年轻大鼠来源EPCs共培养（P4YE）组；（4）第4代SMCs与老龄大鼠来源EPCs共培养（ P4AE）组。 Western blotting检测α-SM-actin和osteopontin蛋白的表达；[3 H ]-TdR掺入法检测SMCs增殖；细胞划痕实验检测SMCs的迁移能力。结果：与P3组相比， P4组的SMCsα-SM-actin表达显著下调，而osteopontin表达显著增强；P4YE组SMCs的α-SM-actin及osteopontin表达与P3组比较未见有显著差别；与P4组相比，年轻和老龄大鼠来源的EPCs均显著促进第4代SMCs的α-SM-actin和下调osteopontin的表达，抑制第4代SMCs的增殖和迁移；与老龄大鼠来源的EPCs相比，年轻大鼠来源的EPCs更能够显著延迟SMCs表型由收缩型向合成型转换，抑制SMCs增殖和迁移。结论：共培养融合生长状态的EPCs使血管SMCs表型转换延迟、抑制SMCs增殖和迁移，年轻大鼠来源的EPCs较老龄大鼠来源的EPC更显著延迟血管SMCs表型由收缩型向合成型转换，并具有更强的抑制血管SMCs增殖和迁移的能力。
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关键词
内皮祖细胞
平滑肌细胞
细胞表型
细胞增殖
细胞迁移
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职称材料
Jagged1过表达促进老龄大鼠来源的内皮祖细胞向成熟内皮细胞分化
被引量：
2
2
作者
朱光旭
潘兴华
+4 位作者
宋明宝
余争平
庞荣清
阮光萍
康华莉
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第6期969-974,共6页
目的:探讨上调Jagged1表达对内皮培养条件下老龄大鼠来源的内皮祖细胞(EPC)向内皮细胞分化的影响。方法:脱臼处死1～2月龄和19～26月龄SD大鼠,PBS冲洗股骨和胫骨骨髓,Ficoll密度梯度离心分离单个核细胞,应用含10%FBS的DMEM/F12培养基以...
目的:探讨上调Jagged1表达对内皮培养条件下老龄大鼠来源的内皮祖细胞(EPC)向内皮细胞分化的影响。方法:脱臼处死1～2月龄和19～26月龄SD大鼠,PBS冲洗股骨和胫骨骨髓,Ficoll密度梯度离心分离单个核细胞,应用含10%FBS的DMEM/F12培养基以差速贴壁法进行体外培养,DiI-ac-LDL与FITC-UEA-1荧光双染进行EPC特性鉴定。实验分为4组:对照组、PIRES2-EGFP转染组、PIRES2-EGFP-Jagged1转染组和未转染的年轻大鼠来源EPC组。荧光显微镜下计数GFP阳性细胞数并计算转染效率;免疫荧光、RT-PCR和Western blotting检测Jagged1 mRNA和蛋白、von Willebrand因子(vWF)及血管内皮生长因子激酶插入区受体(KDR)mRNA表达,体外血管生成实验检测EPC的血管形成能力。结果:转染后Jagged1在EGFP-Jagged1组表达较对照组显著增强(P<0.01);Jagged1过表达显著促进老龄大鼠EPC vWF与KDR mRNA表达(P<0.01)和体外血管生成能力(P<0.01);vWF与KDR mRNA表达以及体外血管生成能力在Jagged1转染组与年轻大鼠EPC组间未见有显著差别。结论:Jagged1过表达促进内皮培养条件下老龄大鼠来源EPC向成熟内皮细胞分化。
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关键词
Jagged1蛋白
内皮祖细胞
血管发生
衰老
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职称材料
题名
供体年龄影响融合生长内皮祖细胞对平滑肌细胞表型转换及增殖迁移的作用
被引量：
6
1
作者
朱光旭
周芳
阮光萍
宋明宝
杨建勇
黄岚
康华莉
潘兴华
机构
成都军区昆明总
医院
临床实验科云南省干细胞与组织工程中心
第三军医大学新桥医院全军心血管疾病研究所
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期769-776,共8页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81170316
No.81101158)
"973"基础研究规划资助项目(No.2012CB518100)
文摘
目的：探讨老龄和年轻个体来源融合生长状态内皮祖细胞（EPCs）对血管平滑肌细胞（SMCs）表型转换以及增殖和迁移的调节作用。方法：脱臼处死1～2月龄、19～26月龄SD大鼠，应用含15％ FBS的DMEM／F12培养基（含内皮细胞生长添加剂100 mg／L、肝素100 mg／L、青霉素、链霉素各1×105 U／L）培养EPCs，取1～2月龄大鼠腹主动脉，组织块法培养血管SMCs，应用DiI-Ac-LDL与FITC-UEA-1荧光双染以及α-SM-actin免疫荧光分别对EPCs和SMCs进行鉴定。建立细胞共培养体系，上室为融合生长状态的EPCs，下室为SMCs，实验分4组：（1）第3代SMCs（P3）组；（2）第4代SMCs（P4）组；（3）第4代SMCs与年轻大鼠来源EPCs共培养（P4YE）组；（4）第4代SMCs与老龄大鼠来源EPCs共培养（ P4AE）组。 Western blotting检测α-SM-actin和osteopontin蛋白的表达；[3 H ]-TdR掺入法检测SMCs增殖；细胞划痕实验检测SMCs的迁移能力。结果：与P3组相比， P4组的SMCsα-SM-actin表达显著下调，而osteopontin表达显著增强；P4YE组SMCs的α-SM-actin及osteopontin表达与P3组比较未见有显著差别；与P4组相比，年轻和老龄大鼠来源的EPCs均显著促进第4代SMCs的α-SM-actin和下调osteopontin的表达，抑制第4代SMCs的增殖和迁移；与老龄大鼠来源的EPCs相比，年轻大鼠来源的EPCs更能够显著延迟SMCs表型由收缩型向合成型转换，抑制SMCs增殖和迁移。结论：共培养融合生长状态的EPCs使血管SMCs表型转换延迟、抑制SMCs增殖和迁移，年轻大鼠来源的EPCs较老龄大鼠来源的EPC更显著延迟血管SMCs表型由收缩型向合成型转换，并具有更强的抑制血管SMCs增殖和迁移的能力。
关键词
内皮祖细胞
平滑肌细胞
细胞表型
细胞增殖
细胞迁移
Keywords
Endothelial progenitor cells
Smooth muscle cells
Cell phenotype
Cell proliferation
Cell migra-tion
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
Jagged1过表达促进老龄大鼠来源的内皮祖细胞向成熟内皮细胞分化
被引量：
2
2
作者
朱光旭
潘兴华
宋明宝
余争平
庞荣清
阮光萍
康华莉
机构
成都军区昆明总
医院
检验科
第三军医大学新桥医院全军心血管疾病研究所
第三军医大学
军事预防医学院电磁辐射生物学效应
研究所
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第6期969-974,共6页
基金
“973”基础研究规划项目(No.2012CB518100)
国家自然科学基金资助项目(No.81170316)
文摘
目的:探讨上调Jagged1表达对内皮培养条件下老龄大鼠来源的内皮祖细胞(EPC)向内皮细胞分化的影响。方法:脱臼处死1～2月龄和19～26月龄SD大鼠,PBS冲洗股骨和胫骨骨髓,Ficoll密度梯度离心分离单个核细胞,应用含10%FBS的DMEM/F12培养基以差速贴壁法进行体外培养,DiI-ac-LDL与FITC-UEA-1荧光双染进行EPC特性鉴定。实验分为4组:对照组、PIRES2-EGFP转染组、PIRES2-EGFP-Jagged1转染组和未转染的年轻大鼠来源EPC组。荧光显微镜下计数GFP阳性细胞数并计算转染效率;免疫荧光、RT-PCR和Western blotting检测Jagged1 mRNA和蛋白、von Willebrand因子(vWF)及血管内皮生长因子激酶插入区受体(KDR)mRNA表达,体外血管生成实验检测EPC的血管形成能力。结果:转染后Jagged1在EGFP-Jagged1组表达较对照组显著增强(P<0.01);Jagged1过表达显著促进老龄大鼠EPC vWF与KDR mRNA表达(P<0.01)和体外血管生成能力(P<0.01);vWF与KDR mRNA表达以及体外血管生成能力在Jagged1转染组与年轻大鼠EPC组间未见有显著差别。结论:Jagged1过表达促进内皮培养条件下老龄大鼠来源EPC向成熟内皮细胞分化。
关键词
Jagged1蛋白
内皮祖细胞
血管发生
衰老
Keywords
Jaggedl protein
Endothelial progenitor cells
Vasculogenesis
Aging
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
供体年龄影响融合生长内皮祖细胞对平滑肌细胞表型转换及增殖迁移的作用
朱光旭
周芳
阮光萍
宋明宝
杨建勇
黄岚
康华莉
潘兴华
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015
6
在线阅读
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职称材料
2
Jagged1过表达促进老龄大鼠来源的内皮祖细胞向成熟内皮细胞分化
朱光旭
潘兴华
宋明宝
余争平
庞荣清
阮光萍
康华莉
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
2
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