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pIRES2-HPV18E2-EGFP质粒重组及其在HeLa细胞中的表达
被引量：
1
1
作者
汪云
李力
+1 位作者
李元朝
吕凤林
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第12期1280-1282,共3页
目的构建人乳头瘤病毒18型E2基因片段(HPV18E2)重组表达质粒并予以表达,为进一步研制HPV18相关疾病提供材料。方法以重组质粒(pBR322-HPV18)为模板,PCR方法扩增HPV18E2DNA片段,将HPV18E2DNA与加强绿色荧光质粒(pIRES2-EGFP)重组构建重...
目的构建人乳头瘤病毒18型E2基因片段(HPV18E2)重组表达质粒并予以表达,为进一步研制HPV18相关疾病提供材料。方法以重组质粒(pBR322-HPV18)为模板,PCR方法扩增HPV18E2DNA片段,将HPV18E2DNA与加强绿色荧光质粒(pIRES2-EGFP)重组构建重组质粒(pIRES2-HPV18E2-EGFP)。用酶切电泳及测序检查质粒重组后序列正确性。重组质粒转染Hela细胞。RT-PCR鉴定转染细胞中E2基因。结果PCR扩增DNA片段约为1 kb,与预期结果相同。克隆重组质粒pIRES2-HPV18E2-EGFP酶切后显示的酶切图谱与预期相同,而且测序验证插入片段全序列无改变。转染并用G418筛选后,在荧光显微镜下可见绿色荧光细胞的表达。转染细胞RT-PCR出现特异性条带。结论成功构建表达HPV18 E2蛋白的靶细胞模型。
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关键词
人乳头瘤病毒18型
E2基因
基因重组
转染
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职称材料
题名
pIRES2-HPV18E2-EGFP质粒重组及其在HeLa细胞中的表达
被引量：
1
1
作者
汪云
李力
李元朝
吕凤林
机构
第三军医大学
大坪
医院
野战
外科
研究所
妇产科
第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤烧伤与复合伤研究室
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第12期1280-1282,共3页
文摘
目的构建人乳头瘤病毒18型E2基因片段(HPV18E2)重组表达质粒并予以表达,为进一步研制HPV18相关疾病提供材料。方法以重组质粒(pBR322-HPV18)为模板,PCR方法扩增HPV18E2DNA片段,将HPV18E2DNA与加强绿色荧光质粒(pIRES2-EGFP)重组构建重组质粒(pIRES2-HPV18E2-EGFP)。用酶切电泳及测序检查质粒重组后序列正确性。重组质粒转染Hela细胞。RT-PCR鉴定转染细胞中E2基因。结果PCR扩增DNA片段约为1 kb,与预期结果相同。克隆重组质粒pIRES2-HPV18E2-EGFP酶切后显示的酶切图谱与预期相同,而且测序验证插入片段全序列无改变。转染并用G418筛选后,在荧光显微镜下可见绿色荧光细胞的表达。转染细胞RT-PCR出现特异性条带。结论成功构建表达HPV18 E2蛋白的靶细胞模型。
关键词
人乳头瘤病毒18型
E2基因
基因重组
转染
Keywords
human papillomavirus type 18
E2 gene
plasmid construction
gene transfection
分类号
R394-33 [医药卫生—医学遗传学]
R394.2 [医药卫生—医学遗传学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
pIRES2-HPV18E2-EGFP质粒重组及其在HeLa细胞中的表达
汪云
李力
李元朝
吕凤林
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
1
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