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吴茱萸碱对酵母多糖诱导急性腹膜炎小鼠的保护作用 被引量:5
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作者 陈浩 范霞 +7 位作者 孙宇 余静 罗莉 唐婉琦 马娓 杨雪 梁华平 龚建平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期163-168,共6页
目的探讨吴茱萸碱(evodiamine,EVO)对酵母多糖(zymosan,ZYM)诱导的小鼠腹膜炎中炎症反应及中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophil,PMN)浸润的影响。方法将54只成年雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型组和EVO治疗组... 目的探讨吴茱萸碱(evodiamine,EVO)对酵母多糖(zymosan,ZYM)诱导的小鼠腹膜炎中炎症反应及中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophil,PMN)浸润的影响。方法将54只成年雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型组和EVO治疗组。模型组腹腔注射1 mg/m L ZYM溶液(1 m L)建立急性腹膜炎小鼠模型,EVO治疗组则同时腹腔注射10 mg/kg EVO及1 mg/m L ZYM溶液,正常对照组腹腔注射等量磷酸盐缓冲液。各组处理后2、6、12 h处死6只小鼠,收集眼眶血及腹腔灌洗液。采用酶联免疫吸附法检测血清及腹腔灌洗液中白介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、角化细胞来源趋化因子(keratinocyte-derived chemokine,KC)及巨噬细胞炎性蛋白2(macrophage inflammatory protein 2,MIP-2)的含量;通过血细胞计数板计数腹腔灌洗液中混合细胞总数;利用流式细胞仪检测腹腔灌洗液中PMN比例及PMN中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;采用Western blot检测6 h时腹腔灌洗液混合细胞中核转录因子-k B(nuclear factor-κB,NF-κB)p65入核情况。结果建模后2、6、12 h,模型组血清及腹腔灌洗液中IL-6、TNF-α、KC及MIP-2含量均高于正常对照组(P<0.05),EVO治疗组上述指标均较模型组明显降低(P<0.05),其中,血清中IL-6、KC及MIP-2均于2 h达高峰,随后逐渐下降,而TNF-α在2 h逐渐上升,6 h达到高峰,随后逐渐下降;腹腔灌洗液中TNF-α、KC及MIP-2均于2 h达高峰,随后逐渐下降,而IL-6在2 h逐渐上升,6 h达到高峰,随后逐渐下降。制模后6 h,EVO治疗组可显著降低腹腔混合细胞数与PMN数及其百分比(P<0.05),且PMN中ROS显著降低(P<0.05)。另EVO治疗可显著降低腹腔混合细胞中细胞核的NF-κB p65表达(P<0.05)。结论 EVO可抑制ZYM诱导急性小鼠腹膜炎模型中血清及腹腔灌洗液中炎症因子及趋化因子的分泌,减轻腹腔PMN的浸润,并抑制PMN中ROS的产生,该作用可能是通过抑制NF-k B p65入核实现的。 展开更多
关键词 吴茱萸碱 急性腹膜炎 酵母多糖 中性粒细胞浸润
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6甲酰基吲哚并[3,2-b]咔唑对脂多糖诱导的急性呼吸窘迫综合征大鼠的保护作用 被引量:3
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作者 魏佳鑫 范霞 +3 位作者 张莹 陈浩 黄文娟 梁华平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第22期2419-2423,共5页
目的探讨芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)内源性配体6-甲酰基吲哚并[3,2-b]咔唑(6-formylindolo[3,2-b]carbazole,FICZ)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome... 目的探讨芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)内源性配体6-甲酰基吲哚并[3,2-b]咔唑(6-formylindolo[3,2-b]carbazole,FICZ)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)的保护作用及其机制。方法按照随机数字表法将24只SD大鼠分为正常对照组、FICZ对照组、LPS模型组和FICZ治疗组,每组6只。通过气管滴注LPS(3 mg/kg)制备ARDS模型,并于建模后6 h收集各组肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)及肺组织,通过肺湿/干质量比值、HE染色考察各组肺组织的损伤情况;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测BALF和肺组织中炎症因子(IL-1β、TNF-α)水平及肺组织中髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)含量;利用Western blot检测肺组织中AhR和NF-κB p65的蛋白表达。结果与LPS模型组相比,FICZ可有效减轻LPS所致的肺水肿及组织病理学损伤,减少BALF和肺组织中炎症因子TNF-α、IL-1β的释放及肺组织中MPO的含量。另外,FICZ在激活AhR的同时对LPS作用下肺组织胞核中NF-κB p65的升高起到明显的抑制作用。结论 FICZ对LPS诱导的大鼠ARDS具有保护作用,其作用可能是通过激活AhR以减少NF-κB p65的入核来实现的。 展开更多
关键词 6甲酰基吲哚并[3 2-b]咔唑 脂多糖 急性呼吸窘迫综合征 芳香烃受体 NF-κB
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利用改进的聚合酶链反应方法鉴定芳香烃受体敲除小鼠 被引量:2
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作者 唐婉琦 杨雪 +3 位作者 张醇 范霞 严军 梁华平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第16期1761-1763,共3页
目的改进常规的基因分型技术,以更准确、直观地鉴定芳香烃受体敲除(aryl hydrocarbon receptor knockout,AhR KO,AhR-/-)小鼠。方法剪取AhR杂合子(heterozygous,+/-)后代仔鼠脚趾,常规提取基因组脱氧核糖核酸,分别采用传统和改进的PCR... 目的改进常规的基因分型技术,以更准确、直观地鉴定芳香烃受体敲除(aryl hydrocarbon receptor knockout,AhR KO,AhR-/-)小鼠。方法剪取AhR杂合子(heterozygous,+/-)后代仔鼠脚趾,常规提取基因组脱氧核糖核酸,分别采用传统和改进的PCR方法对其基因型进行鉴定,并对结果进行比较,同时分析在试剂总量不变的情况下两种方法获得的基因分型结果的准确性和直观性。结果在反应体系调整为10μL、退火温度和时间改为65.5℃40 s、其余PCR参数(预变性温度和时间为94℃3 min;变性和延伸温度及时间分别为94℃30 s,72℃1 min,该步骤循环35次;最后一步延伸温度和时间为72℃5 min;样本保存温度为4℃)不变的情况下,采用双体系运转的改进PCR法结果比传统PCR法直观,而且总的试剂用量与传统PCR法相等。结论改进的PCR法可以更好地鉴定AhR KO小鼠表型,适合在基因分型工作中推广。 展开更多
关键词 芳香烃受体敲除小鼠 基因分型
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