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地塞米松和IL-10对hPBMC促炎细胞因子产生和核转录因子活化的影响 被引量：15
1
作者 洪新 郭振辉 +1 位作者 毛宝龄 钱桂生 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期1328-1332,共5页
目的 :观察地塞米松 (Dex)和白细胞介素 (IL) - 1 0对培养的经脂多糖 (LPS)刺激的人外周血单个核细胞 (hPBMC)释放促炎细胞因子肿瘤坏死因子 (TNF) -α、IL - 6及对转录因子核因子 -κB(NF -κB)、活化蛋白 - 1(AP - 1 )、cAMP反应元件... 目的 :观察地塞米松 (Dex)和白细胞介素 (IL) - 1 0对培养的经脂多糖 (LPS)刺激的人外周血单个核细胞 (hPBMC)释放促炎细胞因子肿瘤坏死因子 (TNF) -α、IL - 6及对转录因子核因子 -κB(NF -κB)、活化蛋白 - 1(AP - 1 )、cAMP反应元件结合蛋白 (CREB)活化的影响。方法 :用LPS刺激分离培养的hPBMC ,分为正常对照组、LPS刺激组、IL - 1 0和Dex干预组。ELISA法检测培养上清中TNF -α、IL - 6含量。凝胶电泳迁移率改变分析法 (EMSA)检测核提取物中NF -κB、AP - 1、CREB活性。结果 :LPS刺激 1h后TNF -α含量显著增加 ,Dex和IL - 1 0干预后TNF-α含量增加被显著抑制 ;IL - 6含量在LPS刺激后 1 2h显著增加 ,Dex和IL - 1 0显著抑制IL - 6的产生 ;LPS刺激 1 2h后IL - 1 0含量显著增加 ,Dex对IL - 1 0产生没有明显影响。LPS刺激 1h后NF -κB、AP - 1、CREB的DNA结合活性显著增加 ,Dex和IL - 1 0显著抑制以上三种核因子的活性 ,但Dex对AP - 1、CREB活性的抑制作用强于IL - 1 0。结论 :LPS诱导hPBMC释放多种促炎和抗炎细胞因子的产生 ,并诱导多种转录因子的活化 ;Dex、IL - 1 0能抑制上述促炎细胞因子的产生和转录因子的活化。Dex对AP - 1、CREB活性的抑制作用强于IL - 1 0。 展开更多
关键词 NF-κB 白细胞介素-10 地塞米松 单核细胞 炎症
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LPS／CD14结合位点模拟肽对内毒素性大鼠急性肺损伤的治疗作用 被引量：2
2
作者 徐智 李昆霖 +2 位作者 陈锐 钱桂生 吴国明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第24期2469-2473,共5页
目的观测LPS/CD14结合位点模拟肽(mimic peptides 12,MP12)对内毒素性急性肺损伤大鼠模型的治疗作用。方法将30只Wistar大鼠按随机数字表法分为生理盐水对照组、LPS组和LPS+MP12组(n=10)。另将40只Wistar大鼠分为两组,分别接受与LPS组和... 目的观测LPS/CD14结合位点模拟肽(mimic peptides 12,MP12)对内毒素性急性肺损伤大鼠模型的治疗作用。方法将30只Wistar大鼠按随机数字表法分为生理盐水对照组、LPS组和LPS+MP12组(n=10)。另将40只Wistar大鼠分为两组,分别接受与LPS组和LPS+MP12组相同的处理方法,用于观测死亡率。采用LPS静脉注射法复制内毒素性急性肺损伤大鼠模型。LPS+MP12组在接受LPS注射后立即予MP12静脉注射。2 h后抽取静脉血用于检测血浆内毒素浓度。于12 h抽取动脉血,检测动脉血氧分压(PaO2)。24 h后处死各组大鼠,留取右下肺用于病理检查,右上肺匀浆检测TNF-α,留取左肺行支气管肺泡灌洗并分离肺泡巨噬细胞。采用荧光显微镜检测MP12对肺泡巨噬细胞与LPS结合的抑制作用。结果 LPS组及LPS+MP12组的血浆内毒素浓度明显高于生理盐水对照组(P<0.01),而LPS组与LPS+MP12组间血浆内毒素浓度无显著差异(P>0.05)。LPS组及LPS+MP12组PaO2显著低于生理盐水对照组(P<0.01),但LPS+MP12组PaO2显著高于LPS组(P<0.01)。LPS+MP12组肺组织TNF-α浓度及病理学评分显著低于LPS组(P<0.01)。LPS+MP12组肺泡巨噬细胞与LPS的结合率显著低于LPS组(P<0.01)。LPS+MP12组的72 h死亡率显著低于LPS组(40%vs 75%,P<0.01)。结论 LPS/CD14结合位点模拟肽(MP12)能通过阻断内毒素与肺泡巨噬细胞的结合,减轻内毒素导致的肺部炎症及病理损害,显著提高内毒素性急性肺损伤大鼠的动脉血氧分压、减少死亡率。 展开更多
关键词 内毒素 CD14 模拟肽 急性肺损伤
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Versican基因RNAi慢病毒载体的构建及其对毛乳头细胞聚集性生长的干预作用
3
作者 封明霞 伍津津 杨桂红 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第14期1460-1465,共6页
目的构建Versican基因RNAi慢病毒载体并研究Versican对毛乳头细胞聚集性生长的干预作用。方法根据人Versican基因序列,构建4个携带RNAi序列的慢病毒载体,利用293T细胞进行慢病毒包装。实验分为Control组(不做处理)、NC组(用空慢病毒载... 目的构建Versican基因RNAi慢病毒载体并研究Versican对毛乳头细胞聚集性生长的干预作用。方法根据人Versican基因序列,构建4个携带RNAi序列的慢病毒载体,利用293T细胞进行慢病毒包装。实验分为Control组(不做处理)、NC组(用空慢病毒载体包装的病毒转染细胞)和KD1、KD2、KD3、KD4 Versican RNAi慢病毒感染组。应用KD1、KD2、KD3、KD4 Versican RNAi慢病毒及NC慢病毒感染H1299细胞,荧光显微镜下观察感染效率,应用Real-time PCR检测Versican的表达,筛选出感染效率和特异性最高的慢病毒载体进行下一步研究。用慢病毒感染毛乳头细胞后,用Real-time PCR检测Versican基因的表达,并用Western blot检测Versican、ADAMTS4、p-c-JUN蛋白的表达,应用光镜观察毛乳头的生长情况。结果成功构建4种慢病毒载体,其中KD2慢病毒感染H1299细胞较其他慢病毒、Control和NC组显著下调Versican mRNA的表达(P<0.01)。应用KD2慢病毒感染毛乳头细胞后,较Control和NC组明显下调毛乳头细胞Versican mRNA和蛋白的表达(P<0.01),ADAMTS4、p-c-JUN蛋白的表达较Control组明显下调(P<0.01),毛乳头细胞聚集性生长的特性消失。结论成功构建了Versican基因RNAi慢病毒载体。Versican基因通过c-JUN-ADAMTS-4通路调控毛乳头细胞的聚集性生长。 展开更多
关键词 多功能蛋白聚糖类 RNA干扰 慢病毒 毛乳头细胞 聚集性生长
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