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小鼠胫骨骨折愈合中FGFR3基因表达的原位定位 被引量:4
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作者 杨启红 陈林 朱京慈 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1220-1222,共3页
目的 观察成纤维细胞生长因子受体3 (FGFR3 )基因在小鼠胫骨骨折愈合中的时空表达模式,分析FGFR3在骨折愈合中可能的作用。方法 选用标准的小鼠胫骨骨折模型,常规石蜡切片,观察FGFR3mRNA在骨折愈合过程中不同时期的基因表达情况。结... 目的 观察成纤维细胞生长因子受体3 (FGFR3 )基因在小鼠胫骨骨折愈合中的时空表达模式,分析FGFR3在骨折愈合中可能的作用。方法 选用标准的小鼠胫骨骨折模型,常规石蜡切片,观察FGFR3mRNA在骨折愈合过程中不同时期的基因表达情况。结果 骨折后软骨痂中前软骨细胞中出现微弱的FGFR3mRNA信号。至7d ,骨痂肥大前软骨细胞和肥大软骨细胞中均可见FGFR3mRNA强阳性表达。到14d和2 8d ,骨痂软骨细胞被成骨细胞取代,FGFR3阳性表达信号消失。结论 FGFR3在小鼠胫骨骨折愈合中的肥大前软骨细胞和肥大软骨细胞中表达,提示参与调节胚胎骨骼发育中软骨细胞增殖的FGFR3基因,可能在成年骨折愈合中参与调节了软骨细胞的分化而影响骨折愈合。 展开更多
关键词 FGFR3 软骨内骨化 骨折 原位杂交 基因表达
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转基因表达的调控方法 被引量:5
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作者 杨启红 陈林 梁勇 《动物医学进展》 CSCD 2003年第4期49-51,共3页
转基因动物技术作为一种研究基因功能的技术体系 ,在生命科学研究领域有着广泛的应用前景。有效地使精确的遗传基因修饰在动物体内得到表达并实现世代间的传递是转基因技术的关键。近年来由于转座子、逆转录病毒的运用以及采用加入或去... 转基因动物技术作为一种研究基因功能的技术体系 ,在生命科学研究领域有着广泛的应用前景。有效地使精确的遗传基因修饰在动物体内得到表达并实现世代间的传递是转基因技术的关键。近年来由于转座子、逆转录病毒的运用以及采用加入或去除某些基因的体细胞的克隆技术的发展 ,不同物种转基因的培育方法日趋简便。 Cre-L ox P系统越来越多地用于从基因组中去除特定的序列或靶向整合外源DNA。四环素等系统已被证实可获得确切的转基因表达。具有反式显性阴性效应的与 DNA形成三链螺旋的 RNA、反义 RNA(包括 :含 RNA干预和核酶的双链 RNA)以及蛋白质的表达均被证实可特异性地抑制宿主或病毒基因的表达。文章综述了转基因的概念。 展开更多
关键词 转基因表达 调控方法 培育方法 转基因动物 转基因
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Bek腺病毒表达载体的构建及其在哺乳类动物细胞中的表达 被引量:2
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作者 刘斌剑 王建民 +4 位作者 陈林 宋瑞华 赵玲 宋维威 苟元彬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期144-146,共3页
目的构建Bek腺病毒表达载体并观察该载体在成纤维细胞中转基因表达FGFR2-Ⅲc的情况,为研究骨骼发育打下基础。方法利用AdEasy-1腺病毒载体系统构建Bek腺病毒表达载体;该载体感染成纤维细胞后,通过荧光定量PCR(FQ-PCR)检测Bek腺病毒表达... 目的构建Bek腺病毒表达载体并观察该载体在成纤维细胞中转基因表达FGFR2-Ⅲc的情况,为研究骨骼发育打下基础。方法利用AdEasy-1腺病毒载体系统构建Bek腺病毒表达载体;该载体感染成纤维细胞后,通过荧光定量PCR(FQ-PCR)检测Bek腺病毒表达载体转基因表达FGFR2-ⅢcmRNA情况。结果Bek腺病毒表达载体感染成纤维细胞后,成纤维细胞有绿色荧光表达,荧光定量PCR检测表明Bek腺病毒表达载体转基因表达FGFR2-ⅢcmRNA效果明显(P<0·05)。结论Bek腺病毒表达载体构建成功,能够转基因表达FGFR2-ⅢcmRNA,为研究骨骼发育和成骨机制提供了基础。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子受体 腺病毒载体 基因治疗 哺乳类动物细
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成纤维细胞生长因子受体3腺病毒载体的包装与鉴定
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作者 刘志君 陈林 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期561-564,共4页
目的构建成纤维细胞生长因子受体3(fibroblast growth factor receptors3,FGFR3)腺病毒载体,并进行鉴定、包装及表达检测。方法将小鼠FGFR3cDNA亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,通过电击转化使其在BJ5183细菌中与AdEasy-1同源重组,通过... 目的构建成纤维细胞生长因子受体3(fibroblast growth factor receptors3,FGFR3)腺病毒载体,并进行鉴定、包装及表达检测。方法将小鼠FGFR3cDNA亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,通过电击转化使其在BJ5183细菌中与AdEasy-1同源重组,通过酶切及测序筛选阳性重组子。以脂质体介导法转染HEK293细胞进行包装、扩增并测定其滴度;并用RT-PCR及Western blot检测FGFR3在HT29细胞中的表达。结果经限制性内切酶检测、测序鉴定和细胞转染后GFP的表达等证实成功地构建了携带FGFR3cDNA的重组腺病毒载体并制备出有感染能力的高滴度重组腺病毒。将构建的腺病毒重组子转染HT29细胞,RT-PCR及Western blot均检测到FGFR3的表达。结论成功地构建了含有FGFR3cDNA的重组腺病毒载体并在HT29中表达了小鼠FGFR3分子,为进一步研究FGFR3的功能及其在骨折愈合中的作用提供有效的基因转移载体。 展开更多
关键词 FGFR3 腺病毒 转染
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