肌萎缩侧索硬化发病机制的研究进展 被引量：14

1

作者 郭永强 李森 +1 位作者 张海鸿 伍亚民 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2017年第6期685-689,共5页

肌萎缩侧索硬化(ALS)是最常见的一种运动神经元疾病,分为家族性和散发性。一般认为,ALS的发病机制主要包括基因突变、氧化应激、兴奋毒性、线粒体异常和免疫炎症反应等。这些发病机制之间相互联系,相互影响,最终引起了以运动神经系统为... 肌萎缩侧索硬化(ALS)是最常见的一种运动神经元疾病,分为家族性和散发性。一般认为,ALS的发病机制主要包括基因突变、氧化应激、兴奋毒性、线粒体异常和免疫炎症反应等。这些发病机制之间相互联系,相互影响,最终引起了以运动神经系统为主的多系统病变。 展开更多

关键词 肌萎缩侧索硬化 发病机制 基因突变 氧化应激 兴奋毒性 线粒体异常 免疫炎症反应 综述

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下调PTEN基因对缺氧损伤后海马神经元NR2B受体调控机制研究 被引量：2

2

作者 陈力学 刘宝松 +3 位作者 石少权 周冀英 桂蓓 邵阳 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期493-496,共4页

目的:探讨用RNAi干扰技术下调第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(Phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)对缺氧损伤引起的神经元NR2B受体表达调控机制。方法:建立海马神经元培养缺氧缺糖(Oxygen-glu... 目的:探讨用RNAi干扰技术下调第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(Phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)对缺氧损伤引起的神经元NR2B受体表达调控机制。方法:建立海马神经元培养缺氧缺糖(Oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤模型,转染shRNAspten-GFP质粒,采用细胞比色分析(Colorimetric assay)法观察神经元膜表面NR2B含量,RT-PCR测定NR2B受体的mRNA的表达,采用Fura2-AM法测定胞内Ca2+浓度,AlamarBlue进行神经元活力分析。结果:shRNAspten-GFP能成功转染到神经元中;细胞比色法显示神经元膜表面有大量NR2B表达,与PshGFP对照组相比shRNAspten治疗组NR2B含量明显降低(P<0.05),RT-PCR测定结果与细胞比色法结果基本一致;OGD损伤组比正常组胞内Ca2+浓度显著升高(P<0.05),转染PTEN基因后胞内Ca2+浓度比PshGFP对照组明显降低(P<0.05);无关对照PshGFP组神经元活力较正常对照组和治疗组均有显著下降(P<0.05)。结论:下调PTEN基因可降低NR2B的表达,阻断Ca2+内流,增加细胞活力,从而保护神经元损伤。 展开更多

关键词 PTEN shRNAs Fura2-AM AlamarBlue测定 细胞比色分析

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PTEN表达下调对神经元胞内游离钙离子和神经元凋亡的研究 被引量：2

3

作者 陈力学 刘宝松 +1 位作者 康格非 姜利人 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2006年第4期505-508,共4页

目的:探讨神经元缺血缺氧损伤再灌后,下调PTEN在阻断Ca2+内流及凋亡调控方面的保护机制。方法:建立神经元缺糖缺氧(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤模型,转染shRNAspten-GFP质粒,用Western blotting检测PTEN水平,Fura2-AM法测定胞... 目的:探讨神经元缺血缺氧损伤再灌后,下调PTEN在阻断Ca2+内流及凋亡调控方面的保护机制。方法:建立神经元缺糖缺氧(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤模型,转染shRNAspten-GFP质粒,用Western blotting检测PTEN水平,Fura2-AM法测定胞内Ca2+浓度,流式细胞术和AO/EB检测神经元凋亡。结果:与正常组相比OGD后细胞凋亡率和胞内Ca2+浓度显著升高(P<0.05);与对照组相比经shRNAspten干预后胞内Ca2+浓度和细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。结论:shRNAspten-GFP能成功转染到神经元中,PTEN表达下调可阻断Ca2+内流并对缺糖缺氧诱导的细胞凋亡有拮抗作用,从而达到神经元保护的目的。 展开更多

关键词 PTEN shRNAspten-GFP质粒 游离钙 凋亡 神经元培养

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脊髓损伤致脑部结构功能重塑的机制研究进展 被引量：1

4

作者 冯东亮 张海鸿 伍亚民 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2015年第4期378-381,共4页

近几十年随着电生理学和神经影像学技术的发展,研究者发现脊髓损伤后不仅脊髓本身发生病理变化,还可引起脑内结构和功能改变。本文从脊髓损伤引起脑部神经细胞变性、脑内神经营养因子变化、脑内结构和功能重塑及其常用药物治疗的影响几... 近几十年随着电生理学和神经影像学技术的发展,研究者发现脊髓损伤后不仅脊髓本身发生病理变化,还可引起脑内结构和功能改变。本文从脊髓损伤引起脑部神经细胞变性、脑内神经营养因子变化、脑内结构和功能重塑及其常用药物治疗的影响几个方面,综述脊髓损伤对脑内结构和功能重塑的影响和可能的机制。 展开更多

关键词 脊髓损伤 脑损伤 神经营养因子 功能重塑 综述

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氯胺酮治疗颌面部撞击致颅脑损伤的动物实验研究

5

作者 张从纪 李慧增 +2 位作者 廖维宏 杨军 史文进 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期33-35,共3页

目的：探索临床应用氯胺酮对颌面部撞击致颅脑损伤早期治疗的可能性。方法：采用落体撞击大鼠颌面部发生中等程度的创伤性脑损伤动物模型，给予氯胺酮进行早期药物治疗，观察大鼠神经功能的恢复时间。结果：氯胺酮治疗组大鼠在木条平衡... 目的：探索临床应用氯胺酮对颌面部撞击致颅脑损伤早期治疗的可能性。方法：采用落体撞击大鼠颌面部发生中等程度的创伤性脑损伤动物模型，给予氯胺酮进行早期药物治疗，观察大鼠神经功能的恢复时间。结果：氯胺酮治疗组大鼠在木条平衡和木条行走实验中与对照组相比差别明... 展开更多

关键词 氯胺酮 颌面外伤 颅脑损伤 动物实验

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下调PTEN基因对全脑缺血再灌注大鼠神经元损伤的保护作用研究

6

作者 申崇标 陈力学 +3 位作者 刘宝松 周冀英 曾照芳 邵阳 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期826-828,共3页

目的探讨下调第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(PTEN)对全脑缺血再灌注大鼠神经元损伤的保护作用。方法 60只SD大鼠随机分为正常对照组(转染脂质体)、pshGFP组(转染pshGFP质粒)、pshRNApten治疗组(转染pshRNApten质粒),每组20... 目的探讨下调第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(PTEN)对全脑缺血再灌注大鼠神经元损伤的保护作用。方法 60只SD大鼠随机分为正常对照组(转染脂质体)、pshGFP组(转染pshGFP质粒)、pshRNApten治疗组(转染pshRNApten质粒),每组20只,各组分别于再灌注后3d(6只)、7d(7只)、14d(7只)三个时间点进行观察。正常对照组与pshGFP组分别注射脂质体与pshGFP质粒,pshRNApten治疗组于海马局部注射pshRNApten质粒。注射2d后,采用四动脉结扎法建立大鼠全脑缺血再灌注模型。利用RT-PCR和免疫组化法检测海马神经元PTEN基因的表达;采用HE和Nissl染色检测神经元损伤情况;采用TUNEL法检测神经元凋亡情况。结果 pshRNApten治疗组海马神经元PTEN基因的mRNA和蛋白表达量均较正常对照组明显下降(P<0.05)。pshRNApten治疗组海马神经元损伤和变性程度均明显轻于pshGFP组大鼠,海马TUNEL染色阳性细胞数也明显少于psh-GFP组大鼠(P<0.05)。结论下调PTEN能有效缓解由缺血再灌注所致的神经元损伤。 展开更多

关键词 基因 PTEN 缺氧缺血 脑 再灌注 神经元

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人工反射弧建立后脊髓功能及形态改变的实验研究

7

作者 刘洋 伍亚民 +4 位作者 刘媛 龙在云 曾琳 李应玉 杨恒文 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 2005年第12期744-748,i0018,共6页

目的：观察“皮肤-脊髓-膀胱”人工反射弧建立后大鼠脊髓L4节段神经元单位放电及形态学改变情况。方法：32只SPF级Wistar成年雄性大鼠，均分为正常对照组和“皮肤-脊髓-膀胱”人工反射弧模型组，记录正常组和手术后3个月以上模型组大鼠L... 目的：观察“皮肤-脊髓-膀胱”人工反射弧建立后大鼠脊髓L4节段神经元单位放电及形态学改变情况。方法：32只SPF级Wistar成年雄性大鼠，均分为正常对照组和“皮肤-脊髓-膀胱”人工反射弧模型组，记录正常组和手术后3个月以上模型组大鼠L4节段背侧角和腹侧角的脊髓单位放电(SCUDs)以及在加入乙酰胆碱(ACh)和皮下电刺激的情况下SCUDs情况。同时对L4脊髓和膀胱组织行组织学检查。结果：模型组大鼠背侧角SCUDs的平均频率与正常组大鼠相比显著降低(P＜0．01)。在加入过量ACh(0．1mol／L)和连续电刺激(幅度7．6mA，持续200μs，频率4Hz)的情况下，模型组大鼠L4节段脊髓腹侧角SCUDs均受到抑制终止放电。脊髓L3尾部至L5头侧的左侧前角(以L4节段为主)可见NY单标的神经元，HE染色镜下观察模型组大鼠吻合门神经根纤维排列紊乱，细胞数量明显增多，有类血管样结构存存。左侧脊髓L4节段前角组织轻度萎缩，部分前角神经元胞浆皱缩，核深染，少量细胞出现空泡样变，部分细胞核边集。部分侧角中间神经元则形态较好。具有前角运动神经元的形态，膀胱壁一侧肌层增厚。结论：人工反射弧建立之后，部分中间神经元由于在功能上的可塑性可能替代部分萎缩的前角运动神经元的功能。乙酰胆碱可能参与了大鼠人工反射弧中L4脊髓节段腹侧角运动神经元网络的信息反馈过程。 展开更多

关键词 人工反射弧 脊髓单位放电 大鼠

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Wnt信号转导途径对神经细胞分化和突触形成作用的研究进展

8

作者 王莉 伍亚民 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期695-698,共4页

关键词 信号转导途径 神经细胞分化 WNT 形成作用 突触 信号传导途径 中枢神经系统 生物发育

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神经干细胞向神经元和胶质细胞分化调控机制的研究进展

9

作者 侯天勇 伍亚民 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 2004年第11期696-698,共3页

关键词 神经干细胞分化 胶质细胞 治疗 分化潜能 神经元 调控机制 中枢 成年神经干细胞 成年哺乳动物 永生细胞系

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电针对脊髓损伤后轴突再生影响的研究进展 被引量：8

10

作者 郑利强 江琼 +1 位作者 胡春蓉 伍亚民 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2017年第12期1380-1383,共4页

脊髓损伤后运动功能恢复一直是医学界面临的重大难题,而轴突再生是脊髓损伤后运动和神经功能恢复的基础和目标。目前研究认为,电针对脊髓损伤后轴突再生的作用明确。本文主要从胶质瘢痕的形成、轴突生长抑制因子的作用、神经营养因子的... 脊髓损伤后运动功能恢复一直是医学界面临的重大难题,而轴突再生是脊髓损伤后运动和神经功能恢复的基础和目标。目前研究认为,电针对脊髓损伤后轴突再生的作用明确。本文主要从胶质瘢痕的形成、轴突生长抑制因子的作用、神经营养因子的分泌以及神经元内在生长状态等方面总结电针对脊髓损伤后轴突再生的作用。 展开更多

关键词 脊髓损伤 轴突再生 电针 胶质瘢痕 综述

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Ski在神经系统中的作用及机制的研究进展 被引量：8

11

作者 周开升 朱彦东 +1 位作者 张海鸿 伍亚民 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2016年第7期797-800,共4页

Ski作为一种进化保守蛋白,在不同物种中广泛参与并调节多种细胞的增殖及分化过程。Ski在胚胎神经系统发育、中枢及周围神经系统病变中发挥一定作用,可能涉及转化生长因子-β及其超家族成员之一骨形态形成蛋白信号通路。

关键词 SKI 神经系统 机制 综述

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脊髓损伤导致认知障碍及其相关机制的研究进展 被引量：4

12

作者 罗泽汝心 谭波涛 伍亚民 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2017年第4期390-393,共4页

脊髓损伤的研究主要集中在运动功能和感觉功能的缺失及自主神经相关的并发症等方面,而对脊髓损伤后造成的大脑认知障碍的研究较少。影响脊髓损伤后认知障碍的因素主要有情绪、创伤性脑损伤、饮酒史、药物滥用史和文化水平等,可能机制主... 脊髓损伤的研究主要集中在运动功能和感觉功能的缺失及自主神经相关的并发症等方面,而对脊髓损伤后造成的大脑认知障碍的研究较少。影响脊髓损伤后认知障碍的因素主要有情绪、创伤性脑损伤、饮酒史、药物滥用史和文化水平等,可能机制主要有创伤性脑损伤、大脑结构改变、脑内损伤和功能的改变以及不恰当的治疗等。 展开更多

关键词 脊髓损伤 认知障碍 创伤性脑损伤 综述

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黄芪多糖对大鼠脊髓损伤后运动功能和脊髓病理的效果 被引量：18

13

作者 郑利强 伍亚民 +1 位作者 石永江 江琼 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2016年第11期1269-1275,共7页

目的观察黄芪多糖对脊髓损伤后运动功能和脊髓病理变化的影响。方法 70只成年Sprague-Dawley大鼠分为正常组(n=10)、损伤组(n=30)和治疗组(n=30),损伤组和治疗组内再分为7 d、14 d、28 d三个亚组。损伤组和治疗组均采用Allen法(10g×... 目的观察黄芪多糖对脊髓损伤后运动功能和脊髓病理变化的影响。方法 70只成年Sprague-Dawley大鼠分为正常组(n=10)、损伤组(n=30)和治疗组(n=30),损伤组和治疗组内再分为7 d、14 d、28 d三个亚组。损伤组和治疗组均采用Allen法(10g×25 mm)损伤大鼠T_10脊髓。造模成功后,治疗组术后每天腹腔注射黄芪多糖注射液10 mg/kg。术后7 d、14 d、28 d,各亚组分别行BBB评分,HE染色观察细胞形态,Nissl染色观察尼氏小体,铬花青染色观察脱髓鞘情况。结果术后各时间点,治疗组BBB评分高于损伤组(P<0.05)。损伤组术后7 d、14 d损伤部位以坏死组织为主,空洞开始形成;28 d时空洞基本形成,空洞周围有致密瘢痕。治疗组各时间点损伤部位坏死较轻,14 d、28 d时空洞面积缩小。损伤组术后7 d出现脱髓鞘,并逐渐加重;术后28 d,损伤中心出现空洞。治疗组各时间点脱髓鞘及髓鞘排列疏松情况有所改善。损伤组术后7 d尼氏小体开始融合,14 d时融合加重,28 d时几乎完全融合或溶解。治疗组各时间点尼氏小体融合程度较轻。结论黄芪多糖能减轻脊髓损伤后病理损害,促进运动功能改善。 展开更多

关键词 脊髓损伤 黄芪多糖 运动功能 病理 大鼠

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神经干细胞与原浆型星形胶质细胞联合移植对大鼠损伤脊髓轴浆运输功能的修复作用 被引量：8

14

作者 曾琳 李民 +4 位作者 刘媛 龙在云 李应玉 伍亚民 廖维宏 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 2008年第4期298-301,I0002,I0003,共6页

目的:观察神经干细胞(NSC)与原浆型星形胶质细胞(PAS)联合移植对大鼠损伤脊髓轴浆运输功能的修复作用。方法:40只Wistar大鼠,制成L1～L2左侧脊髓半切空洞损伤模型,随机分为损伤组(A组),损伤后移植PAS组(B组)、移植NSC组(C组)、NSC和PAS... 目的:观察神经干细胞(NSC)与原浆型星形胶质细胞(PAS)联合移植对大鼠损伤脊髓轴浆运输功能的修复作用。方法:40只Wistar大鼠,制成L1～L2左侧脊髓半切空洞损伤模型,随机分为损伤组(A组),损伤后移植PAS组(B组)、移植NSC组(C组)、NSC和PAS按2∶1比例联合移植组(D组),每组10只。4周及8周后行损伤部位神经丝-200(NF-200)染色观察NSC在体内的分化情况,腓肠肌胆碱酯酶染色观察运动终板的反应和核黄逆行示踪观察轴浆运输的恢复情况。结果:(1)4周时D组和C组移植部位可见少量NF-200阳性标记的神经元,8周时数量明显增多,D组多于C组;4周及8周时A、B组均未见到明显阳性标记的神经元。(2)4周时,A、B组胆碱酯酶染色示运动终板均出现退变,终板染色变浅;8周时A组终板明显退变,出现大片染色空白区,甚至终板消失,只剩下模糊的轮廓;B组终板退变程度轻于A组,着色淡,轮廓欠清晰,周边呈浅棕红色淡染,但未出现大片染色空白区;C、D组4周时终板边缘发生皱缩,呈颗粒样改变,无明显染色缺失;8周时C组较4周时变化不明显,D组受损终板皱缩明显好转,颗粒样改变消失。(3)4周时,B、C、D组核黄染色的神经元散在位于脊髓的前、后、侧角,其中D组阳性标记的神经元的数量及荧光强度大于B、C组,C组又稍强于B;8周时B、C、D组阳性神经元数量均增多,神经元的数量及荧光强度仍是D组>C组>B组;A组4周及8周时均未见到明显阳性染色的神经元。结论:联合移植NSC和PAS(2∶1)能更好地修复损伤脊髓的轴浆运输功能并能较好地防治其后肢肌肉运动终板的溃变。 展开更多

关键词 神经干细胞 原浆型星形胶质细胞 脊髓损伤 轴浆运输 运动终板

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沉默ski基因对大鼠星形胶质细胞迁移的影响 被引量：6

15

作者 赵鑫 王兴文 +4 位作者 寇江力 李忠浩 郭永强 伍亚民 张海鸿 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2017年第8期905-911,共7页

目的研究ski基因在大鼠星形胶质细胞迁移过程中的作用。方法分离大鼠脑皮质星形胶质细胞,体外培养。合成ski基因和阴性对照小干扰片段。设置ski-siRNA转染组、阴性对照组和空白对照组。采用脂质体法将特异性针对ski基因的siRNA和阴性对... 目的研究ski基因在大鼠星形胶质细胞迁移过程中的作用。方法分离大鼠脑皮质星形胶质细胞,体外培养。合成ski基因和阴性对照小干扰片段。设置ski-siRNA转染组、阴性对照组和空白对照组。采用脂质体法将特异性针对ski基因的siRNA和阴性对照siRNA转入大鼠星形胶质细胞。采用Western blotting检测各组ski蛋白的表达水平;采用Transwell细胞迁移实验和细胞划痕实验检测ski-siRNA转染后星形胶质细胞迁移能力的变化。结果与空白对照组和阴性对照组比较,ski-siRNA转染组细胞内ski蛋白的相对表达水平显著降低(F=132.957,P<0.001)。Transwell细胞迁移实验发现,ski-siRNA转染组每孔迁移细胞数少于空白对照组和阴性对照组(F>47.197,P<0.05)。细胞划痕实验显示,转染组细胞1~5 d的划痕愈合率均明显低于对照组(F>69.187,P<0.01)。结论沉默ski基因能显著抑制星形胶质细胞的迁移能力,ski可能参与星形胶质细胞的转移过程,进而调控胶质瘢痕的形成。 展开更多

关键词 SKI RNA干扰 星形胶质细胞 Transwell细胞迁移实验 划痕实验 大鼠

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Ski在大鼠活化星形胶质细胞中表达的变化 被引量：7

16

作者 赵鑫 寇江力 +6 位作者 郭永强 蒲彦川 周开升 南伟 汪静 伍亚民 张海鸿 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期968-974,共7页

目的:探究Ski在大鼠正常及活化星形胶质细胞中的表达及随时间变化的规律。方法:提取大鼠大脑皮质,分离星形胶质细胞,体外培养。采用LPS刺激和细胞划痕损伤2种方法活化星形胶质细胞,均采用Western blot法检测各个时点2种活化星形胶质细胞... 目的:探究Ski在大鼠正常及活化星形胶质细胞中的表达及随时间变化的规律。方法:提取大鼠大脑皮质,分离星形胶质细胞,体外培养。采用LPS刺激和细胞划痕损伤2种方法活化星形胶质细胞,均采用Western blot法检测各个时点2种活化星形胶质细胞中Ski和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)蛋白表达情况,利用间接免疫荧光法检测Ski蛋白在星形胶质细胞中的表达定位。结果:GFAP蛋白在星形胶质细胞中固有表达,LPS活化和划痕损伤后表达均上调。Ski在正常星形胶质细胞中呈低表达状态,1 mg/L LPS活化星形胶质细胞后,Ski表达开始增加,4 d时表达量最高(P<0.05),6 d时开始下降,但仍高于未活化组;细胞划痕损伤后Ski蛋白表达情况与上述情况高度一致。Ski在正常及LPS活化6 d星形胶质细胞中表达主要集中在胞核,LPS活化后2和4 d时在胞质中出现明确的Ski表达。结论:Ski蛋白表达于星形胶质细胞,并在活化星形胶质细胞中表达上调。由此,我们推测Ski蛋白可能调控星形胶质细胞的活化、增殖等过程。 展开更多

关键词 SKI 胶质纤维酸性蛋白 星形胶质细胞 胶质瘢痕

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不同类型星形胶质细胞对神经干细胞定向分化的影响 被引量：4

17

作者 刘媛 龙在云 +3 位作者 曾琳 李民 伍亚民 王正国 《中国康复理论与实践》 CSCD 2007年第11期1026-1028,F0003,共4页

目的观察不同类型星形胶质细胞作为饲养层细胞对神经干细胞定向分化为神经元的影响。方法通过无血清培养的方法,将原代培养所获得的神经干细胞克隆;经纯化和标记后,分别接种在以原浆型和纤维型星形胶质细胞作为饲养细胞的培养皿中并加入... 目的观察不同类型星形胶质细胞作为饲养层细胞对神经干细胞定向分化为神经元的影响。方法通过无血清培养的方法,将原代培养所获得的神经干细胞克隆;经纯化和标记后,分别接种在以原浆型和纤维型星形胶质细胞作为饲养细胞的培养皿中并加入NeuralBasal培养基,10d后行NF-200免疫荧光染色,在显微镜下随机选取20个视野,记数神经元和标记神经干细胞的比例,并对分化的神经元细胞进行胆碱酯酶染色和Fura-3探针标记。结果在原浆型和纤维型星形胶质细胞培养条件下,神经干细胞分化为神经元的比例分别为72%与43%,分化细胞胆碱酯酶染色阳性。分化神经元在药物刺激下,细胞内可发生钙离子活动的变化。结论原浆型星形胶质细胞具有较好地促进神经干细胞向神经元,特别是向有生物学活性的运动神经元分化,可作为神经组织工程中研究中一种新的种子细胞。 展开更多

关键词 星形胶质细胞 原浆型 纤维型 神经干细胞 神经元 分化

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两种荧光标记物对中枢神经系统内源性神经干细胞的标记效果比较 被引量：2

18

作者 谭波涛 虞璟 +4 位作者 刘媛 伍亚民 龙在云 贾功伟 虞乐华 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期843-848,共6页

目的观察DIL和DAPI两种不同的标记物对中枢神经系统内源性神经干细胞的标记效果。方法清洁级健康成年SD大鼠36只,随机分为实验组(DIL组,DAPI组)和对照组(DMSO组,PBS组)。使用立体定位仪,向实验组大鼠侧脑室注入0.2%DIL或10μg/ml DAPI... 目的观察DIL和DAPI两种不同的标记物对中枢神经系统内源性神经干细胞的标记效果。方法清洁级健康成年SD大鼠36只,随机分为实验组(DIL组,DAPI组)和对照组(DMSO组,PBS组)。使用立体定位仪,向实验组大鼠侧脑室注入0.2%DIL或10μg/ml DAPI各10μl,对照组大鼠侧脑室相应注入DMSO或PBS各10μl。注射后2h和24h对动物进行神经功能损伤评分(NSS)。采用激光共聚焦显微镜观察注射后1、3、7d脑室及脊髓颈、胸、腰段室管膜细胞的荧光标记情况,对目标区域荧光强度进行半定量分析,并对不同组别和时间点的脑室及脊髓标本测定结果进行比较。结果注射DIL及DAPI后2h,大鼠NSS评分很低,与相应对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),24h后基本恢复正常。DIL注射后1d,侧脑室及各节段的脊髓室管膜细胞胞质均显示红色荧光,一直持续到注射后7d。DAPI注射后1d,侧脑室内标记的细胞核形态清晰,呈蓝色,脑室脉络丛大量细胞亦可见蓝色荧光标记,但脊髓各节段室管膜区的细胞均未见蓝色荧光,注射后3、7d的情况与1d类似。两种试剂标记后,目标区域内各时间点的荧光强度差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DIL可对内源性神经干细胞的细胞质进行标记,适合作为侧脑室和脊髓室管膜内源性神经干细胞的标记物。DAPI可标记细胞核,适合用于侧脑室内源性神经干细胞的标记。脑室注射荧光染料对动物影响小,是一项相对安全的操作。 展开更多

关键词 干细胞 中枢神经系统 荧光抗体技术 DIL DAPI

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新生大鼠脊髓损伤后再生相关基因文库构建及EST筛选 被引量：2

19

作者 马海涵 初同伟 +2 位作者 廖维宏 伍亚民 邵阳 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 2004年第2期100-102,共3页

目的:分析新生大鼠损伤后再生时运动皮层神经元基因表达变化以探讨相关的再生机制。方法:新生大鼠脊髓双侧半横断后即刻单侧胚胎脊髓移植,术后3天用抑制性消减杂交技术筛选大鼠双侧运动皮层神经元差异表达基因,构建差减cDNA文库,通过蓝... 目的:分析新生大鼠损伤后再生时运动皮层神经元基因表达变化以探讨相关的再生机制。方法:新生大鼠脊髓双侧半横断后即刻单侧胚胎脊髓移植,术后3天用抑制性消减杂交技术筛选大鼠双侧运动皮层神经元差异表达基因,构建差减cDNA文库,通过蓝白斑实验和cDNA斑点杂交验证差异表达基因真阳性克隆,测序分析。结果:发现25个全新的EST片段,在GenBank中登陆并获得注册。结论:新生大鼠皮层神经元轴突中断后的再生过程中有基因表达变化,变化的基因可能与神经元再生有关。 展开更多

关键词 新生大鼠 脊髓损伤 基因文库 EST 皮层神经元

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大鼠脊髓损伤后ski相关蛋白表达的时空变化规律及作用 被引量：2

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作者 朱彦东 周开升 +7 位作者 郭永强 江龙 郑利强 汪静 李森 龙在云 伍亚民 张海鸿 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2017年第8期912-918,共7页

目的探究大鼠脊髓损伤后ski相关蛋白(SKIP)的表达及其变化规律。方法 60只成年雌性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(n=30)和打击组(n=30),每组分为1 d、3 d、5 d、7 d、14 d五个时间点,各6只。打击组用Allen法制作T10打击损伤模型,... 目的探究大鼠脊髓损伤后ski相关蛋白(SKIP)的表达及其变化规律。方法 60只成年雌性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(n=30)和打击组(n=30),每组分为1 d、3 d、5 d、7 d、14 d五个时间点,各6只。打击组用Allen法制作T10打击损伤模型,假手术组只咬开椎板。采用BBB评分评价后肢运动功能;尼氏染色观察损伤后脊髓神经元的病理变化;免疫荧光染色观察损伤脊髓SKIP的表达情况。结果打击组各时间点BBB评分均显著低于假手术组(t>48.267,P<0.001)。与假手术组相比,打击组5 d脊髓神经元胞浆中尼氏小体开始崩解、凝聚,分布不规则,神经元变性坏死,14 d时损伤加重。免疫荧光染色显示,SKIP主要在脊髓灰质中表达,白质中极少表达;损伤后SKIP表达逐渐上升,5 d时达到高峰(t=-17.035,P<0.001),14 d时明显降低(t=3.853,P<0.05)。结论 SKIP可能是一种作用于神经元并影响其凋亡的新的信号分子。 展开更多

关键词 脊髓损伤 ski相关蛋白 神经元 凋亡 大鼠

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