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人eIF4A3真核表达载体构建及稳定表达细胞株筛选
被引量：
2
1
作者
李向云
徐祥
+2 位作者
李秉煦
黄宏
徐云升
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第18期1897-1899,共3页
目的构建人eIF4A3重组质粒载体,筛选高表达人eIF4A3的稳定细胞株。方法 RT-PCR克隆eIF4A3基因,将获得的基因片段分别连接到含有HA和c-myc标签的质粒载体上,转染HeLa细胞,经G418筛选获稳定表达细胞株,在体外翻译体系中进行体外翻译,通过...
目的构建人eIF4A3重组质粒载体,筛选高表达人eIF4A3的稳定细胞株。方法 RT-PCR克隆eIF4A3基因,将获得的基因片段分别连接到含有HA和c-myc标签的质粒载体上,转染HeLa细胞,经G418筛选获稳定表达细胞株,在体外翻译体系中进行体外翻译,通过免疫印迹鉴定eIF4A3的表达。结果成功构建人eIF4A3的真核表达载体,可在HeLa细胞中稳定表达,且能在体外翻译体系中翻译eIF4A3蛋白质。功能研究初步证明eIF4A3可以抑制荧光素酶报告基因的表达。结论获得了可稳定高表达人eIF4A3的HeLa细胞株及可用于体外翻译的真核表达载体。
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关键词
真核起始因子4A3
稳定细胞株
体外翻译
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职称材料
题名
人eIF4A3真核表达载体构建及稳定表达细胞株筛选
被引量：
2
1
作者
李向云
徐祥
李秉煦
黄宏
徐云升
机构
温州医学院附属第一
医院
皮肤科
第三军医大学大坪医院野战外科研究所一室 创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第18期1897-1899,共3页
基金
国家自然科学基金(30972800)~~
文摘
目的构建人eIF4A3重组质粒载体,筛选高表达人eIF4A3的稳定细胞株。方法 RT-PCR克隆eIF4A3基因,将获得的基因片段分别连接到含有HA和c-myc标签的质粒载体上,转染HeLa细胞,经G418筛选获稳定表达细胞株,在体外翻译体系中进行体外翻译,通过免疫印迹鉴定eIF4A3的表达。结果成功构建人eIF4A3的真核表达载体,可在HeLa细胞中稳定表达,且能在体外翻译体系中翻译eIF4A3蛋白质。功能研究初步证明eIF4A3可以抑制荧光素酶报告基因的表达。结论获得了可稳定高表达人eIF4A3的HeLa细胞株及可用于体外翻译的真核表达载体。
关键词
真核起始因子4A3
稳定细胞株
体外翻译
Keywords
eukaryotic initiation factor 4A3
stable cell line
in vitro translation
分类号
R341 [医药卫生—基础医学]
R394.33 [医药卫生—医学遗传学]
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出处
发文年
被引量
操作
1
人eIF4A3真核表达载体构建及稳定表达细胞株筛选
李向云
徐祥
李秉煦
黄宏
徐云升
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
2
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