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成年小鼠骨细胞的分离鉴定及其成纤维细胞生长因子受体的表达
1
作者
唐玉彬
苏楠
+3 位作者
温轩
陈思宇
杜晓兰
陈林
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第8期718-722,共5页
目的建立稳定的成年小鼠骨细胞分离和鉴定方法,检测其标志性基因和成纤维细胞生长因子受体（fibroblast growth factor receptor,FGFR）表达。方法将3月龄C57小鼠的胫骨和股骨分离后剪除干骺端,冲去骨髓,切割成约1 mm碎片,用Ⅰ型胶原酶...
目的建立稳定的成年小鼠骨细胞分离和鉴定方法,检测其标志性基因和成纤维细胞生长因子受体（fibroblast growth factor receptor,FGFR）表达。方法将3月龄C57小鼠的胫骨和股骨分离后剪除干骺端,冲去骨髓,切割成约1 mm碎片,用Ⅰ型胶原酶和EDTA溶液交替消化以获取骨细胞。分别通过形态观察、ALP染色、OC染色和E11/gp38染色鉴定骨细胞。qRT-PCR检测骨细胞标志性基因表达,并与骨细胞系IDG-SW3和MLO-Y4比较。检测FGFRs在骨细胞的表达。结果分离出的骨细胞呈多树突状或星状,并借突触彼此连接。ALP染色可见成骨细胞染色阳性,骨细胞染色阴性。OC染色成骨细胞和骨细胞均阳性,成纤维细胞阴性,而E11/gp38染色仅见骨细胞染色阳性。实验所得细胞表达骨细胞特异基因DMP1、SOST、FGF23,表明骨细胞成功分离,且此原代骨细胞与IDG-SW3和MLOY4细胞系表达有差异。FGFR1-3在骨细胞中均有表达。结论成功分离成年小鼠原代骨细胞,发现FGFR1-3在原代骨细胞中均有表达。
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关键词
骨细胞
细胞分离
成纤维细胞生长因子受体
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职称材料
题名
成年小鼠骨细胞的分离鉴定及其成纤维细胞生长因子受体的表达
1
作者
唐玉彬
苏楠
温轩
陈思宇
杜晓兰
陈林
机构
第三军医大学
大坪
医院
野战
外科
研究所
:
创伤
实验室
兰州军区兰州总
医院
急诊科
第三军医大学
大坪
医院
野战
外科
研究所
康复科
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第8期718-722,共5页
基金
国家重点基础研究发展计划(973计划
2014CB942904)
+2 种基金
国家自然科学基金国际合作与交流项目(81220108020)
国家自然科学基金重点项目(81030036)
国家自然科学基金面上项目(81471092)~~
文摘
目的建立稳定的成年小鼠骨细胞分离和鉴定方法,检测其标志性基因和成纤维细胞生长因子受体（fibroblast growth factor receptor,FGFR）表达。方法将3月龄C57小鼠的胫骨和股骨分离后剪除干骺端,冲去骨髓,切割成约1 mm碎片,用Ⅰ型胶原酶和EDTA溶液交替消化以获取骨细胞。分别通过形态观察、ALP染色、OC染色和E11/gp38染色鉴定骨细胞。qRT-PCR检测骨细胞标志性基因表达,并与骨细胞系IDG-SW3和MLO-Y4比较。检测FGFRs在骨细胞的表达。结果分离出的骨细胞呈多树突状或星状,并借突触彼此连接。ALP染色可见成骨细胞染色阳性,骨细胞染色阴性。OC染色成骨细胞和骨细胞均阳性,成纤维细胞阴性,而E11/gp38染色仅见骨细胞染色阳性。实验所得细胞表达骨细胞特异基因DMP1、SOST、FGF23,表明骨细胞成功分离,且此原代骨细胞与IDG-SW3和MLOY4细胞系表达有差异。FGFR1-3在骨细胞中均有表达。结论成功分离成年小鼠原代骨细胞,发现FGFR1-3在原代骨细胞中均有表达。
关键词
骨细胞
细胞分离
成纤维细胞生长因子受体
Keywords
osteocyte
cell isolation
fibroblast growth factor receptors
分类号
R322.71 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R329-33 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
成年小鼠骨细胞的分离鉴定及其成纤维细胞生长因子受体的表达
唐玉彬
苏楠
温轩
陈思宇
杜晓兰
陈林
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
0
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