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实时荧光定量检测中国实验用小型猪肝脏CYP3A29 mRNA表达水平 被引量:8
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作者 杨家大 商海涛 +2 位作者 魏泓 杨婉身 刘昕 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期575-580,共6页
CYP3A29是猪肝脏最重要的药物代谢关键酶。研究中国实验用小型猪肝脏CYP3A29mRNA的表达特性对于评估其是否适宜于作为人CYP3A4介导的药理学研究动物模型具有一定意义。以β-actin作校正,利用TaqMan定量技术对巴马香猪、贵州小型香猪肝脏... CYP3A29是猪肝脏最重要的药物代谢关键酶。研究中国实验用小型猪肝脏CYP3A29mRNA的表达特性对于评估其是否适宜于作为人CYP3A4介导的药理学研究动物模型具有一定意义。以β-actin作校正,利用TaqMan定量技术对巴马香猪、贵州小型香猪肝脏CYP3A29mRNA表达水平进行检测,并以荣昌猪作为对照。结果表明,巴马香猪、贵州小型香猪、荣昌猪肝脏CYP3A29mRNA表达水平与报道的人肝脏CYP3A4相近;三品系(种)猪间肝脏CYP3A29mRNA表达水平较为接近,但品系(种)内个体间变异较大。提示巴马香猪、贵州小型香猪作为药物评价的实验动物具有一定可行性。 展开更多
关键词 巴马香猪 CYP3A29 TaqMan定量
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通过双原核显微注射提高转基因小鼠研制效率的实验研究 被引量:6
2
作者 王勇 刘勤 +3 位作者 倪勇 魏泓 孙新民 赵永聚 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2005年第3期159-162,F0010,共5页
目的建立高效的转基因小鼠制备技术,为开展遗传工程动物模型研究奠定技术基础。方法通过向小鼠受精卵原核中注入不同浓度的DNA分子,筛选最适注射用DNA浓度;将K14/hCTLA4-Ig基因表达载体分子通过显微注射分别导入小鼠受精卵雌、雄原核,... 目的建立高效的转基因小鼠制备技术,为开展遗传工程动物模型研究奠定技术基础。方法通过向小鼠受精卵原核中注入不同浓度的DNA分子,筛选最适注射用DNA浓度;将K14/hCTLA4-Ig基因表达载体分子通过显微注射分别导入小鼠受精卵雌、雄原核,并设立单原核注射对照组;利用输卵管腹壶部穿刺移植法将注射后的小鼠受精卵移植于同期发情的受体母鼠;利用PCR对出生的转基因首建小鼠进行筛选。结果最适DNA分子浓度为10ng/μl;在单、双原核注射组胚胎2细胞卵裂率分别为52.3%(132/253)和45.0%(108/240),差异有显著性(P<0.05);注射胚胎移植后体内存活率分别为18.1%(24/132)和16.7%(18/108),差异无显著性;转基因首建小鼠阳性率分别为3/24和5/18,转基因阳性小鼠占总注射胚胎的比例为1.2%(3/253)和2.08%(5/240),差异有极显著性(P<0.01)。结论尽管双原核注射对胚胎的2细胞卵裂率有一定影响,但通过双原核注射可有效提高转基因小鼠的制备效率。 展开更多
关键词 双原核显微注射 转基因技术 小鼠 动物模型 医学实验 胚胎发育
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大鼠糖尿病溃疡动物模型的初步研究 被引量:28
3
作者 葛良鹏 魏泓 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2005年第2期88-90,F010,共4页
目的构建大鼠糖尿病溃疡动物模型,观察评价该模型的临床及病理特点。方法利用磁片循环压迫的方法,构建大鼠糖尿病溃疡动物模型,并从整体,组织和生化三个层次对糖尿病溃疡进行了研究。结果构建出了一个可以复制的糖尿病溃疡动物模型,该... 目的构建大鼠糖尿病溃疡动物模型,观察评价该模型的临床及病理特点。方法利用磁片循环压迫的方法,构建大鼠糖尿病溃疡动物模型,并从整体,组织和生化三个层次对糖尿病溃疡进行了研究。结果构建出了一个可以复制的糖尿病溃疡动物模型,该模型具有组织坏死、白细胞聚集以及高浓度晚期糖化终末产物等特征。结论利用缺血再灌注法构建了大鼠糖尿病溃疡动物模型。其病理改变与人极为相似,是一种很好的用于糖尿病溃疡发病机制和治疗研究的动物模型。 展开更多
关键词 动物模型 糖尿病 溃疡 大鼠 病理特点 病理改变 发病机制 构建 白细胞 灌注法 组织
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人肺癌转移动物模型建立及其生物学特性的研究 被引量:4
4
作者 魏泓 史景泉 陈意生 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期355-355,共1页
人肺癌转移动物模型建立及其生物学特性的研究Astudyonestablishmentofmetastaticmodelsforhumanlungcarcinomainmiceandtheirbiologicalch... 人肺癌转移动物模型建立及其生物学特性的研究Astudyonestablishmentofmetastaticmodelsforhumanlungcarcinomainmiceandtheirbiologicalcharacteristics魏泓史景... 展开更多
关键词 肺肿瘤 转移瘤 模型 生物学特征
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建立我国规模化无菌动物高效研究应用体系 被引量:4
5
作者 曾本华 魏泓 《中国实验动物学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期648-653,共6页
无菌动物与宏基因组技术是驱动人体健康微生物组研究的两大动力。没有无菌动物菌群(株)移植模型,就无法确立菌群与疾病的因果关系;没有无菌动物,就没有菌群与人体疾病研究飞速发展的今天与明天。无菌动物应用已形成有菌与无菌动物比较... 无菌动物与宏基因组技术是驱动人体健康微生物组研究的两大动力。没有无菌动物菌群(株)移植模型,就无法确立菌群与疾病的因果关系;没有无菌动物,就没有菌群与人体疾病研究飞速发展的今天与明天。无菌动物应用已形成有菌与无菌动物比较、菌群(株)移植、基因工程动物无菌化、无菌动物发育四种通用研究模式,研究模式的标准化将加大无菌动物研究应用规模及速度。本课题组经过十几年努力,已建成国内体量大、技术体系稳定、服务单位多、具有较大影响力的无菌动物平台,为国内生物医学、畜牧、食品微生物组科学问题解决提供了有力支撑。但是,目前我国无菌动物规模小、效率低、供用平台与应用条件分离,无菌动物基础理论与技术体系尚待发展,难以满足日益增长的应用需求。亟待建立规模化无菌动物高效研究应用体系,以适应我国微生物组研究高速发展。 展开更多
关键词 无菌动物 微生物组 动物模型
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胃转流手术对模型猪肠道菌群及部分血清学指标的影响
6
作者 葛亮 曾本华 +6 位作者 肖榕 王立斌 卿利娟 吴群 李婧 郑小波 魏泓 《上海畜牧兽医通讯》 2013年第3期2-4,共3页
为研究模型猪在实行胃转流手术后肠道菌群以及血清学指标的变化情况。选取6头成年雌性巴马香猪,接受胃转流手术后,检测血清学指标变化,并利用变性梯度凝胶电泳技术(DGGE)评价该术式对肠道菌群的影响。结果:正常组菌群平均丰富度(Richnes... 为研究模型猪在实行胃转流手术后肠道菌群以及血清学指标的变化情况。选取6头成年雌性巴马香猪,接受胃转流手术后,检测血清学指标变化,并利用变性梯度凝胶电泳技术(DGGE)评价该术式对肠道菌群的影响。结果:正常组菌群平均丰富度(Richness,S)为6.44±0.33,术后一月、二月、三月组为5.30±1.50、7.22±0.60、7.47±0.76;正常组Shannon指数(H')为3.29±0.05,术后组分别为3.12±0.34、3.42±0.11、3.40±0.21;正常组术后一月组跟术后二月组、三月组总相似度为63%,组间差异不明显;血清学统计分析中,正常组和术后七月组在肌酐和总胆红素两项有显著差异。结果表明:胃转流手术会对模型猪肠道微生态造成一定影响,但并不显著;另外该手术可能会损伤肝脏,并降低肾小球通过率。 展开更多
关键词 胃转流手术 模型猪 变性梯度凝胶电泳 肠道菌群 血清学指标
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基于无菌动物研究肠道微生物与类风湿关节炎发病相关性 被引量:6
7
作者 惠彩霞 曾本华 +2 位作者 刘晓飞 魏泓 方勇飞 《中国实验动物学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期667-670,675,共5页
肠道微生物与宿主的生长发育、免疫、代谢等方面均密切相关,但肠道菌群与宿主之间复杂的相互作用在很大程度上仍然是未知的。目前无菌动物已成为探索肠道微生物与宿主相互作用的重要工具,多项研究使用无菌动物模型探讨肠道菌群在宿主代... 肠道微生物与宿主的生长发育、免疫、代谢等方面均密切相关,但肠道菌群与宿主之间复杂的相互作用在很大程度上仍然是未知的。目前无菌动物已成为探索肠道微生物与宿主相互作用的重要工具,多项研究使用无菌动物模型探讨肠道菌群在宿主代谢、机体免疫系统的发育和成熟等方面的作用,其中包括肠道菌群在自身免疫性疾病发病及预后中的作用。研究发现,肠道菌群作为环境因素之一可能参与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)发病,然而其因果关系未明。本文将对使用无菌动物探讨肠道微生物参与类风湿关节炎发病的相关性研究作一综述,为进一步深入研究肠道菌群在RA发病中的作用及机制研究提供理论依据。 展开更多
关键词 无菌动物 肠道菌群 类风湿关节炎 免疫 动物模型
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新生儿坏死性小肠结肠炎动物模型研究进展 被引量:6
8
作者 杨凯蒂 贺雨 +4 位作者 曾本华 肖洒 艾青 魏泓 余加林 《中国实验动物学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期689-692,共4页
新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC)是新生儿时期严重的胃肠道疾病,病死率高,多见于早产儿,极低出生体重儿,但确切病因及发病机制尚未阐明。积极探寻其发病机制,需建立可靠的动物模型以助于对该病的病因、发病机制及防治等各方面进行深入研究... 新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC)是新生儿时期严重的胃肠道疾病,病死率高,多见于早产儿,极低出生体重儿,但确切病因及发病机制尚未阐明。积极探寻其发病机制,需建立可靠的动物模型以助于对该病的病因、发病机制及防治等各方面进行深入研究,以改善NEC患儿预后有重要意义。 展开更多
关键词 坏死性小肠结肠炎 动物模型 新生儿
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无菌动物在饮食干涉肠道菌群研究中的应用 被引量:4
9
作者 董飒爽 曾本华 +2 位作者 王洁 魏泓 方祥 《中国实验动物学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期676-680,共5页
膳食干涉对肠道菌群与健康的影响已成为医学健康领域的研究热点,从发展来看,肠道菌群有可能会成为研究饮食方式、保健食品、中药制剂等对人体健康影响的重要靶标。然而,肠道菌群由于其复杂性,研究它和饮食干涉的关系对动物模型有高标准... 膳食干涉对肠道菌群与健康的影响已成为医学健康领域的研究热点,从发展来看,肠道菌群有可能会成为研究饮食方式、保健食品、中药制剂等对人体健康影响的重要靶标。然而,肠道菌群由于其复杂性,研究它和饮食干涉的关系对动物模型有高标准的要求,无菌动物体内外不携带任何活的微生物和寄生虫,在生物医学及人体疾病和健康等方面均有一定的应用和研究,是当前肠道菌群研究中应用最多的基础动物模型。采用无菌动物构建人源菌群动物是研究饮食、菌群与健康关系的常用方式。本文主要综述无菌动物构建人源菌群动物的研究应用及饮食干涉对肠道菌群的影响。 展开更多
关键词 无菌动物 肠道菌群 饮食干涉
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小型猪CYP3A88基因克隆与其他动物的序列比较 被引量:5
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作者 王世春 桂蓓 +2 位作者 商海涛 刘宇 魏泓 《中国比较医学杂志》 2009年第1期15-20,F0002,共7页
目的克隆我国资源小型猪品系巴马香猪肝脏中的CYP3A88基因,并进行生物信息学分析。方法应用RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)技术对其全长进行扩增,测序,利用Internet和GenBank数据库对其序列进行生物信息学分析。结果首次克隆... 目的克隆我国资源小型猪品系巴马香猪肝脏中的CYP3A88基因,并进行生物信息学分析。方法应用RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)技术对其全长进行扩增,测序,利用Internet和GenBank数据库对其序列进行生物信息学分析。结果首次克隆并鉴定了我国资源小型猪品系巴马香猪肝脏中CYP3A88(GenBank登录号:EF625347)的编码区,获得大小为1965bp的全长cDNA,编码区长为1512bp,编码503个氨基酸;比较核苷酸序列,与小型猪CYP3A39相似性高达94%,而与人等其它动物的CYP3A相似性则在86%以下;推导和分析氨基酸序列表明,与小型猪CYP3A其它成员(CYP3A39、CYP3A29、CYP3A22)进行对比,其相似性分别为92%,89%,80%,而将小型猪与人的CYP3A分别比对,小型猪CYP3A88与人CYP3A4相似性最高,为77%;对其二级结构预测,它可能含12个α螺旋,4个β折叠;经NCBI上的CDD程序分析可知,其39~491氨基酸区域为P4503A亚家族保守结构区域;经聚类分析,小型猪和狗的CYP3A与人有较近的进化关系;通过同源建模法对其在线建模,人CYP3A4晶体结构作为其模建模型,得到了其经典的三维结构。结论在猪CYP3A家族四个基因中,CYP3A88在序列和高级结构上均与人CYP3A4的最为相似。 展开更多
关键词 小型猪 CYP3A88 RACE技术 序列分析
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睾丸内注射pEGFP-N_1体内转染精子并在山羊早期胚胎成功表达 被引量:19
11
作者 李福兵 魏泓 +1 位作者 孙新民 赵永聚 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2005年第2期110-113,F011,共5页
目的探讨睾丸内注射法pEGFP-N1在精细胞的整合和在早期胚胎中表达。方法选择4头本地山羊,双侧睾丸注射不同剂量质粒DNApEGFP-N1,注射后PCR和Southern杂交检测pEGFP-N1在精子中的整合。结果pEGFP-N1整合到精子基因组中,转染效率最高发生... 目的探讨睾丸内注射法pEGFP-N1在精细胞的整合和在早期胚胎中表达。方法选择4头本地山羊,双侧睾丸注射不同剂量质粒DNApEGFP-N1,注射后PCR和Southern杂交检测pEGFP-N1在精子中的整合。结果pEGFP-N1整合到精子基因组中,转染效率最高发生在注射后第40天,转染阳性率最高为81%;绿色荧光蛋白在精子及其体外受精的部分胚胎中表达,胚胎阳性率最高的达66.7%。结论通过睾丸内注射pEGFP-N1能整合进入精子基因组,并能通过体外受精在山羊早期胚胎中表达;睾丸内注射法可能是一种可行、简单并利于推广的制备转基因山羊的方法。 展开更多
关键词 早期胚胎 精子 睾丸 表达 体内 绿色荧光蛋白 体外受精 转基因山羊 本地山羊 方法选择 杂交检测 转染效率 注射法 基因组 阳性率 整合 精细胞 PCR 质粒
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乳杆菌黏附抑制致病性大肠杆菌对肠上皮样细胞侵袭的初步研究 被引量:11
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作者 王斌 但国蓉 +1 位作者 袁静 魏泓 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期550-552,共3页
目的探讨乳杆菌对肠上皮样细胞HT29黏附的生物学保护作用。方法将乳杆菌和致病性大肠杆菌与肠上皮样细胞HT29共孵育3h后,采用活菌计数的方法来观察致病性大肠杆菌黏附肠上皮样细胞的数量;并通过检测细胞培养液中乳酸脱氢酶的含量,以观... 目的探讨乳杆菌对肠上皮样细胞HT29黏附的生物学保护作用。方法将乳杆菌和致病性大肠杆菌与肠上皮样细胞HT29共孵育3h后,采用活菌计数的方法来观察致病性大肠杆菌黏附肠上皮样细胞的数量;并通过检测细胞培养液中乳酸脱氢酶的含量,以观察细胞膜通透性的变化;采用MTT法检测细胞的活性。结果路氏乳杆菌JCM1081可以抑制致病性大肠杆菌对肠上皮样细胞HT29的黏附(28%)和侵袭(27.7%),并可减弱致病性大肠杆菌对细胞的损伤。乳杆菌JCM1081单独与肠上皮样细胞HT29黏附作用3h后,细胞结构正常,乳酸脱氢酶的水平没发生明显的变化,细胞活力无明显下降。结论路氏乳杆菌JCM1081通过对肠上皮细胞的黏附占位,竞争性抑制致病性大肠杆菌对肠上皮细胞的黏附和侵袭,保护细胞膜的完整性和细胞活性。 展开更多
关键词 乳杆菌 致病性大肠杆菌 抑制 黏附 侵袭
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高脂饮食对菌群人源化小鼠肠道菌群结构的影响 被引量:13
13
作者 陈杏云 曾本华 +1 位作者 魏泓 胡新中 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第17期278-283,共6页
采用高脂饮食建立肥胖菌群人源化(HFA)小鼠模型,研究高脂饮食对HFA小鼠肠道微生态结构的影响,探讨肥胖、饮食与肠道菌群之间的关系。将20只无菌小鼠接种健康人志愿者的粪便悬液构建HFA小鼠模型后分为普通组和高脂组,分别用基础饲料和高... 采用高脂饮食建立肥胖菌群人源化(HFA)小鼠模型,研究高脂饮食对HFA小鼠肠道微生态结构的影响,探讨肥胖、饮食与肠道菌群之间的关系。将20只无菌小鼠接种健康人志愿者的粪便悬液构建HFA小鼠模型后分为普通组和高脂组,分别用基础饲料和高脂饲料饲喂8周,测定小鼠体质量、血糖血脂以及用PCR-DGGE方法检测肠道菌群的变化。结果显示:与普通组HFA小鼠相比,高脂组HFA小鼠体质量、肝质量、脂肪组织质量及血清中总甘油三酯水平显著增加(P<0.01),血糖水平也显著增加(P<0.05)。同时高脂组HFA小鼠肠道微生物多样性指数显著升高(P<0.05),正常优势菌群丰度降低,零时刻时的非优势菌群丰度增加,测序结果表明高脂饮食可能会诱导HFA小鼠肠道内Staphylococcus lentus、Staphylococcus vitulinus和Shigella flexneri等有害菌生长繁殖。本实验采用高脂饮食成功建立起肥胖HFA小鼠模型并证实了高脂饮食明显改变HFA小鼠肠道菌群结构。肠道菌群组成和细菌丰度发生很大变化导致肠道微生态失调,这提示人源性肠道菌群可能参与饮食结构失衡引起的肥胖的发展。 展开更多
关键词 无菌小鼠 菌群人源化小鼠 肠道菌群 高脂饮食 肥胖 PCR DGGE
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茶多酚对apoE^(-/-)小鼠脂类代谢和肠道双歧杆菌的影响 被引量:10
14
作者 王玮 曾本华 +4 位作者 李桂花 廖振林 张晓婧 魏泓 方祥 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2012年第4期106-109,共4页
研究茶多酚对小鼠脂类代谢和结肠双歧杆菌的影响,探讨茶多酚采食与脂类代谢和肠道双歧杆菌之间的关系。ApoE-/-小鼠以高脂饲料饲养并在饮水中添加1.6g/L茶多酚,8周后用变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析肠道双歧杆菌多样性。结果表明,高脂饮... 研究茶多酚对小鼠脂类代谢和结肠双歧杆菌的影响,探讨茶多酚采食与脂类代谢和肠道双歧杆菌之间的关系。ApoE-/-小鼠以高脂饲料饲养并在饮水中添加1.6g/L茶多酚,8周后用变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析肠道双歧杆菌多样性。结果表明,高脂饮食对照组(HF)和茶多酚组(T)肠道双歧杆菌多样性有显著差异;16周后,T组血清中TC、LDL-C含量分别为19.8,16.1mmol/L,显著低于HF组的36.4,28.4mmol/L(P<0.05)。说明茶多酚采食对apoE-/-小鼠肠道双歧杆菌菌群多样性和脂类代谢均有显著的影响。 展开更多
关键词 茶多酚 双歧杆菌 脂类代谢 PCR-DGGE
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嗜酸乳杆菌对抗生素诱导小鼠肠道菌群失调的作用 被引量:20
15
作者 谢彩虹 袁静 +1 位作者 王瑞君 魏泓 《肠外与肠内营养》 CAS 2007年第3期132-136,共5页
目的:用传统的微生物培养法和无需预先培养的PCR-变性梯度凝胶电泳(DGGE)法,分析嗜酸乳杆菌对经头孢曲松处理后的小鼠肠道菌群的效果影响。方法:SPF级雌性BALB/c小鼠随机饮用头孢曲松水溶液5 d,造成小鼠抗生素相关性菌群失调模型后,自... 目的:用传统的微生物培养法和无需预先培养的PCR-变性梯度凝胶电泳(DGGE)法,分析嗜酸乳杆菌对经头孢曲松处理后的小鼠肠道菌群的效果影响。方法:SPF级雌性BALB/c小鼠随机饮用头孢曲松水溶液5 d,造成小鼠抗生素相关性菌群失调模型后,自然恢复组灌服等渗盐水;治疗组灌服嗜酸乳杆菌菌液(108CFU/mL),处理7 d后,对各组小鼠进行解剖,并取其盲肠内容物,运用活菌计数和PCR-DGGE技术,分析抗生素对小鼠盲肠内细菌的影响和嗜酸乳杆菌对已失调的肠道菌群的调整作用。结果:经头孢曲松处理后,使小鼠肠道内乳杆菌和双歧杆菌数量减少,肠球菌异常增殖,与正常对照组比有极显著差异;嗜酸乳杆菌的治疗使乳杆菌和双歧杆菌的数量得到恢复,同时肠球菌数量也降至正常水平;抗生素处理使优势菌群发生改变,菌群多样性减少,与正常对照组相比有极显著差异;灌服嗜酸乳杆菌后,菌群多样性指数回升至正常水平,与抗生素处理组及自然恢复组比较有显著性差异,而与正常对照组比较无显著性差异。结论:嗜酸乳杆菌对头孢曲松引起的肠道菌群失调具有调整作用;与传统微生物培养法相比,PCR-DGGE法是一种快速、有效并能直观反映整个微生态动态变化的分子生物学方法。 展开更多
关键词 头孢曲松 嗜酸乳杆菌 肠道菌群 变性梯度凝胶电泳
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提高精子转染外源DNA效率的山羊精液冷冻方法 被引量:5
16
作者 赵永聚 魏泓 +2 位作者 孙新明 李福兵 王勇 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2007年第1期47-51,共5页
目的筛选一种既提高精子转染外源DNA效率,又保持解冻后精子活力的山羊精液冷冻—解冻方法。方法应用正交设计L9(34),因素分别为稀释液种类、稀释比例、降温时间和解冻液,每个因素选择3个水平,检测和比较解冻后精子转染外源DNA效率和精... 目的筛选一种既提高精子转染外源DNA效率,又保持解冻后精子活力的山羊精液冷冻—解冻方法。方法应用正交设计L9(34),因素分别为稀释液种类、稀释比例、降温时间和解冻液,每个因素选择3个水平,检测和比较解冻后精子转染外源DNA效率和精子活力。结果所选冷冻—解冻各因素对精液转染效率影响不显著[F(8,18)=1.032,P=0.449];平衡时间对冷冻—解冻活力影响极显著[F(2,24)=9.972,P=0.001],平衡1h极显著小于平衡2 h和4 h的精液活力(P=0.003,P=0.000),以平衡4 h最好。用筛选的冷冻—解冻方法处理精液,解冻后精子的活力极明显降低(P=0.002);生存指数降低,GOT释放量增加,菌落数减少,与鲜精相比差异显著(P=0.018;P=0.016;P=0.018);精子畸形率增加,顶体完整率降低,与鲜精相比差异不显著(P=0.494;P=0.084)。结论优化了提高精子转染外源DNA效率的山羊精液冷冻—解冻方法。 展开更多
关键词 山羊 精子 冷冻保存 外源DNA 活力
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仔猪睾丸间质细胞培养方法的比较 被引量:7
17
作者 卿利娟 魏泓 +6 位作者 李婧 肖榕 吴群 葛亮 商海涛 郑小波 刘宇 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2013年第11期29-31,35,共4页
为了对比仔猪睾丸间质细胞不同培养方法的培养效果。运用过筛培养法、不过筛培养法,组织块培养法3种方法对仔猪睾丸间质细胞进行体外分离和培养,并对其进行细胞各项指标的比较。结果显示,不过筛培养法培养的细胞活力、纯度、细胞功能都... 为了对比仔猪睾丸间质细胞不同培养方法的培养效果。运用过筛培养法、不过筛培养法,组织块培养法3种方法对仔猪睾丸间质细胞进行体外分离和培养,并对其进行细胞各项指标的比较。结果显示,不过筛培养法培养的细胞活力、纯度、细胞功能都较好,培养时间也短;过筛培养法培养的细胞活力较低;组织块培养法培养的细胞纯度较低。但在其他细胞指标上,后两种方法又各自有优点。结果3种培养方法都能简单有效的培养出状态良好的仔猪睾丸间质细胞,但其在纯度,活力,培养时间等方面有所差别。 展开更多
关键词 睾丸间质细胞 纯度 活力 功能
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昆明小鼠成熟卵母细胞体外受精及受精卵体外培养的研究 被引量:14
18
作者 孙新明 魏泓 +4 位作者 赵永聚 王勇 李福兵 王爱平 倪勇 《中国比较医学杂志》 CAS 2005年第3期129-132,共4页
目的通过比较获能受精液成分及成熟卵母细胞的处理方法,观察对昆明小鼠体外受精(IVF)效果的影响和用于早期胚胎培养的三种发育培养液培养效果,探讨并建立起适合于昆明小鼠卵子体外受精与受精卵体外发育的实验体系。方法用T6或FM两种获... 目的通过比较获能受精液成分及成熟卵母细胞的处理方法,观察对昆明小鼠体外受精(IVF)效果的影响和用于早期胚胎培养的三种发育培养液培养效果,探讨并建立起适合于昆明小鼠卵子体外受精与受精卵体外发育的实验体系。方法用T6或FM两种获能受精液对采自昆明雄鼠附睾尾的精子与成熟卵母细胞进行体外受精(IVF),受精前对成熟卵母细胞选用透明质酸酶去除卵丘细胞和不去卵丘细胞(对照组)两种方法进行处理,受精卵分别用M16、改良的CZB液(mCZB)和改良的M16液(mM16)三种发育培养液对体外受精胚进行培养。结果选用FM获能受精液的受精率极显著高于T6液(92.3%对64.7%),且体外受精前先用透明质酸酶处理的成熟卵母细胞比对照组成熟卵母细胞受精率要低(59.2%对64.7%),但差异不显著;用mM16培养液进行培养时桑胚率及囊胚率(55.3%和35.6%)显著高于mCZB(13.3%和8.1%)和M16培养液(17.3%和14.7%),后两者差异不显著。结论昆明小鼠卵子体外受精时宜选用FM受精获能液,不宜用透明质酸酶去除卵丘细胞,且宜选用mM16培养液对昆明小鼠体外受精卵进行早期培养,其中的亚硫磺酸钠可有效的克服2-细胞胚后的体外发育阻滞现象。 展开更多
关键词 体外受精 胚胎培养 成熟卵母细胞 昆明小鼠
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脂质体法介导山羊精子转染外源DNA最适条件的研究 被引量:5
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作者 孙新明 魏泓 +1 位作者 赵永聚 王爱平 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期77-82,共6页
研究了阳离子脂质体介导山羊精子转染外源DNA的方法、效果及其影响因素以确定其最适转染条件,为进一步用此方法生产转基因动物提供参考.结果显示:①脂质体介导法可用于山羊精子转染外源DNA;②脂质体介导转染1、2、3号公羊的精子消化后... 研究了阳离子脂质体介导山羊精子转染外源DNA的方法、效果及其影响因素以确定其最适转染条件,为进一步用此方法生产转基因动物提供参考.结果显示:①脂质体介导法可用于山羊精子转染外源DNA;②脂质体介导转染1、2、3号公羊的精子消化后阳性率分别为25.2%,22.6%,27.5%,差异不显著(p>0.05).③脂质体介导转染的精子消化前后阳性率在充分洗涤组为41.3%和25.5%,极显著高于原精液直接加入1∶10∶1转染液不洗涤处理组的25.6%和11.4%及原精液加入不含缓冲液的转染液处理组的17.2%和7.8%(p<0.01).④离心洗涤后精液分别与在转染缓冲液中加入0、0.1%、0.3%、0.6%BSA(质量/体积)的转染液共同孵育后的消化前后阳性率分别为41.3%和25.5%、35%和21.4%、27.5%和15.3%及11.2%和8.2%;⑤用不同缓冲液配制的转染液进行脂质体介导山羊精子转染外源DNA的效率有差异,其中以mDM液转染精子的消化前、后阳性率最高(为41.3%和25.5%).研究表明:脂质体介导转染外源DNA的独特机制使供精个体间精子转染效率趋于一致;精子与脂质体-DNA复合物混合前将精子充分离心洗涤可显著提高脂质体介导精子转染外源DNA的效率;血清白蛋白能降低脂质体对精子介导的转染效率;脂质体法介导山羊转染外源DNA的最适转染条件为用mDM液充分洗涤精子后再与脂质体-DNA复合物混合转染. 展开更多
关键词 精子介导基因转移 脂质体 山羊
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我国小型猪品系资源状况初浅分析 被引量:38
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作者 商海涛 魏泓 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2007年第1期70-75,共6页
小型猪正逐渐成为生命科学研究中的重要实验动物。我国具有独特和丰富的小型猪资源,我国小型猪品系或资源涉及资源品系、封闭群、近交培育品系等。本文就我国的小型猪品系资源状况进行了介绍和初步分析。
关键词 小型猪 中国 品种资源 实验动物
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