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无血清K-SFM培养条件下大鼠毛囊Bu lge细胞生物学特性的研究 被引量：5
1
作者 符刚 高强国 +2 位作者 杨恬 余瑾 向明明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第15期1538-1540,共3页
目的研究无血清K-SFM培养条件下,大鼠毛囊Bu lge细胞的生物学特性。方法分离大鼠毛囊Bu lge细胞,分别置于无血清的K-SFM培养基(实验组)及有血清DMEM/F12培养基(对照组)的培养条件下培养。比较Bu lge细胞在两种培养体系中的生长增殖和K1... 目的研究无血清K-SFM培养条件下,大鼠毛囊Bu lge细胞的生物学特性。方法分离大鼠毛囊Bu lge细胞,分别置于无血清的K-SFM培养基(实验组)及有血清DMEM/F12培养基(对照组)的培养条件下培养。比较Bu lge细胞在两种培养体系中的生长增殖和K19的表达状况。结果无血清培养的Bu lge细胞在克隆形成率及K19的表达率均明显高于对照组(P<0.05)。结论体外培养和扩增大鼠毛囊Bu lge细胞,无血清的K-SFM培养基较有血清DMEM/F12培养基更有利于Bu lge细胞的扩增和表型的维持。 展开更多
关键词 毛囊 Bulge细胞 细胞培养 分化
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大鼠毛囊干细胞的纯化培养鉴定及其生物学特性 被引量：8
2
作者 黄恩毅 杨恬 +1 位作者 陈伟 杨力 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期39-42,共4页
目的采用免疫磁珠法(vario magnetic activated cell sorting,Vario MACS)分离纯化培养大鼠CD34+毛囊干细胞,并研究其生物学特性。方法显微分离获得毛囊bulge区,消化成单细胞悬液并进行CD34抗体标记和磁珠标记,使细胞悬液通过分选柱,分... 目的采用免疫磁珠法(vario magnetic activated cell sorting,Vario MACS)分离纯化培养大鼠CD34+毛囊干细胞,并研究其生物学特性。方法显微分离获得毛囊bulge区,消化成单细胞悬液并进行CD34抗体标记和磁珠标记,使细胞悬液通过分选柱,分别收集CD34+细胞和CD34-细胞,检测细胞活性后进行细胞培养并绘制细胞生长曲线。扫描电镜观察毛囊干细胞表面形态,透射电镜观察干细胞内部结构形态。免疫细胞化学检测培养细胞中β1-整联蛋白、CD34和α6-整联蛋白的表达。结果用VarioMACS法有效分离并成功培养CD34+毛囊干细胞,分选后的细胞仍具有较好的活性,细胞生长曲线表明,CD34+毛囊干细胞增殖速度快,增殖期长,而CD34-细胞则较快进入平台期。培养的CD34+细胞中干细胞标记物β1-整联蛋白、CD34和α6-整联蛋白的表达均强于CD34-细胞。获得电镜观察毛囊干细胞表面形态学特征及内部结构特征资料。结论VarioMACS法能有效分离获得的CD34+毛囊干细胞,该细胞具有良好的生物学性能。 展开更多
关键词 免疫磁珠 CD34 毛囊干细胞
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大鼠表皮干细胞的分布与体外分离培养 被引量：9
3
作者 陈伟 杨恬 +2 位作者 连小华 杨珂 黄恩毅 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期376-379,共4页
目的研究大鼠表皮干细胞的分布与体外分离培养。方法用免疫组织化学技术研究大鼠表皮干细胞的分布;用DispaseⅡ、胰酶二步法消化新生大鼠皮肤,获得单细胞悬液,Ⅳ型胶原筛选,体外培养大鼠表皮干细胞,进行免疫组化鉴定,荧光标记流式细胞... 目的研究大鼠表皮干细胞的分布与体外分离培养。方法用免疫组织化学技术研究大鼠表皮干细胞的分布;用DispaseⅡ、胰酶二步法消化新生大鼠皮肤,获得单细胞悬液,Ⅳ型胶原筛选,体外培养大鼠表皮干细胞,进行免疫组化鉴定,荧光标记流式细胞仪分析。结果在表皮基底层、毛囊外根鞘区α6-integrin、K15等表皮干细胞标记物染色阳性,而分化指标CD71染色阴性;CD34在表皮基底层阴性表达,而在毛囊隆突区阳性表达;体外分离的基底层表皮干细胞生长良好,具有较高的克隆形成率;干细胞标记物α6-integrin、K15呈阳性表达,流式细胞仪检测α6-integrin达到84%,说明较为成功地体外分离培养出大鼠表皮基底层干细胞。结论在表皮基底层、毛囊外根鞘区存在表皮干细胞。 展开更多
关键词 表皮干细胞 细胞培养 体外
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毛囊bulge细胞在角膜缘基质诱导下向角膜上皮细胞分化的初步研究 被引量：5
4
作者 余瑾 杨珂 +1 位作者 杨恬 符刚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第20期2016-2019,共4页
目的探讨体外培养的毛囊bulge细胞向角膜上皮细胞分化的可能性。方法体外分离培养毛囊bulge细胞,然后在transwell中与角膜缘基质细胞共培养诱导分化,观察毛囊bulge细胞的分化情况,免疫组化检测K12及K19表达的变化。结果体外培养的毛囊bu... 目的探讨体外培养的毛囊bulge细胞向角膜上皮细胞分化的可能性。方法体外分离培养毛囊bulge细胞,然后在transwell中与角膜缘基质细胞共培养诱导分化,观察毛囊bulge细胞的分化情况,免疫组化检测K12及K19表达的变化。结果体外培养的毛囊bulge细胞保持高增殖,低分化状态。经过2周左右的共培养,毛囊bulge细胞逐渐分化,部分细胞K12表达阳性。结论角膜缘基质细胞可以诱导毛囊bulge细胞向角膜上皮细胞分化。 展开更多
关键词 毛囊 bulge细胞 角膜 上皮 转分化
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表皮角质形成细胞分化无血清培养方法的建立 被引量：5
5
作者 李习玲 连小华 +1 位作者 杨力 杨恬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第13期1342-1344,共3页
目的建立一种研究角质形成细胞分化的细胞培养方法。方法细胞培养采用无血清无钙离子的角质形成细胞生长培养基(keratinocytegrowthmedium,KGM),通过改变培养基中的钙离子浓度来调节角质形成细胞的分化状态,并对分化标记物K10以及在银... 目的建立一种研究角质形成细胞分化的细胞培养方法。方法细胞培养采用无血清无钙离子的角质形成细胞生长培养基(keratinocytegrowthmedium,KGM),通过改变培养基中的钙离子浓度来调节角质形成细胞的分化状态,并对分化标记物K10以及在银屑病患者受损表皮中表达异常增高的组织型纤溶酶原激活剂(tissue-typeplasminogenactiva-tor,tPA)通过免疫细胞化学技术(immunocytochemistry,ICC)分别进行检测。结果低钙(0·09mmol/L)培养条件下,细胞处于未分化状态,K10染色为阴性,tPA呈弱阳性表达;高钙(1·5mmol/L)条件下,细胞出现分层分化,K10染色为阳性,tPA的表达明显增强。结论通过改变KGM的钙离子浓度来调节角质形成细胞的分化,可用于角质形成细胞分化的研究。 展开更多
关键词 角质形成细胞生长培养基 钙离子 分化 组织型纤溶酶原激活剂 银屑病
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毛囊黑素谱系细胞中β-catenin在毛囊周期中的表达 被引量：5
6
作者 邓芳 郭海英 +1 位作者 连小华 杨恬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期793-796,共4页
目的探讨毛囊周期中,β-catenin在毛囊黑素谱系细胞中的表达变化。方法采用β-gal染色、石蜡切片免疫组化、RT-PCR、Western blot等方法检测Dct-Lac-Z CD1小鼠毛囊的黑素谱系细胞随着毛囊的周期其细胞数量、分布的变化及β-catenin的表... 目的探讨毛囊周期中,β-catenin在毛囊黑素谱系细胞中的表达变化。方法采用β-gal染色、石蜡切片免疫组化、RT-PCR、Western blot等方法检测Dct-Lac-Z CD1小鼠毛囊的黑素谱系细胞随着毛囊的周期其细胞数量、分布的变化及β-catenin的表达在mRNA和蛋白水平表达量及部位的变化。结果 WB及RT-PCR结果表明在毛囊周期中,β-cate-nin的表达总量由高到低依次为生长早期(P4、P29)、生长中期(P8)、静止期(P23)、退化期(P18),数据经统计学单因素方差分析,各组间存在显著差异(P<0.05)。免疫组化结果显示在黑素谱系细胞中,β-catenin强表达于活化的黑素母细胞、黑素干细胞和分化过程中的黑素细胞,弱表达于静息的黑素干细胞、成熟分化的黑素细胞。结论β-catenin的上调能促进毛囊黑素谱系细胞的分化,其周期性的表达变化可能是毛发周期性色素生成的基础。 展开更多
关键词 黑素细胞 黑素干细胞 毛囊 Β-CATENIN
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PPARγ2表达促毛囊bulge细胞向皮脂腺定向分化的研究 被引量：3
7
作者 符刚 高强国 +2 位作者 杨恬 余瑾 向明明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第20期2024-2027,共4页
目的探讨毛囊bulge细胞向皮脂腺细胞分化的机制。方法构建携带过氧化物酶体增殖体激活受体γ2(peroxisomeproliferatoractivationreceptorγ2,PPARγ2)基因的绿色荧光蛋白(GFAP)质粒,通过质脂体转染到体外分离培养毛囊bulge细胞中,以转... 目的探讨毛囊bulge细胞向皮脂腺细胞分化的机制。方法构建携带过氧化物酶体增殖体激活受体γ2(peroxisomeproliferatoractivationreceptorγ2,PPARγ2)基因的绿色荧光蛋白(GFAP)质粒,通过质脂体转染到体外分离培养毛囊bulge细胞中,以转染空质粒的毛囊bulge细胞为对照,观察细胞的分化情况,运用免疫细胞化学检测细胞PPARγ和上皮膜抗原(epithelialmembraneantigen,EMA)的表达,油红O染色观察细胞脂滴合成情况。结果荧光显微镜下观察到已转染质粒的细胞呈现绿色荧光,能稳定表达PPARγ2mRNA,该细胞分化3周左右,部分细胞胞浆内出现脂滴,PPARγ、EMA及油红O染色阳性,而对照组为阴性,细胞内未见脂滴。结论毛囊bulge细胞可以分化为皮脂腺细胞,PPARγ2基因在其中起着重要作用。 展开更多
关键词 毛囊 bulge细胞 PPARΓ2 皮脂腺 分化
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诱导表皮角质形成细胞体外分层的途径及机制 被引量：5
8
作者 连小华 杨恬 +1 位作者 蔡绍皙 杨力 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1201-1203,共3页
目的　探讨诱导表皮角质形成细胞体外分层途径及机制。方法　在体外培养状态下,利用气液界面培养法及高浓度钙离子诱导胎鼠皮片、表皮角质形成细胞分层,借助冰冻切片、免疫荧光及激光共聚焦等技术检测其分层层数及分化程度。结果　胚胎... 目的　探讨诱导表皮角质形成细胞体外分层途径及机制。方法　在体外培养状态下,利用气液界面培养法及高浓度钙离子诱导胎鼠皮片、表皮角质形成细胞分层,借助冰冻切片、免疫荧光及激光共聚焦等技术检测其分层层数及分化程度。结果　胚胎龄16d的胎鼠皮片经气液界面培养3d后,其表皮基底上角质形成细胞由2层增加为5层;经气液界面培养7d后,胎鼠皮片表皮基底上角质形成细胞的局部区域分层已可达8层,细胞呈现更为分化的形态。在高浓度Ca2 + (1 5mmol L)条件下培养7d后,培养角质形成细胞发生了分层,分化标记物角蛋白K10在分层角质形成细胞中的表达明显增加。结论　气液界面培养法及高浓度钙离子能诱导表皮角质形成细胞的体外分层,同时促进其分化。 展开更多
关键词 表皮角质形成细胞 表皮分层 体外诱导
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PD98059对肝癌HepG2细胞Tec信号转导作用的初步研究 被引量：3
9
作者 郑继军 王阁 +5 位作者 邓婧 杨进 王红中 胡庆 李增鹏 王东 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期136-139,共4页
目的探讨MEK1抑制剂PD98059对肝癌细胞株HepG2细胞中Tec(tyrosinekinaseexpressedinhepatocellu-larcarcinoma)及ERK2作用。方法免疫细胞化学方法检测Tec、ERK2在HepG2细胞中的表达;用RT-PCR和Westernblot方法检测,不同浓度PD98059处理... 目的探讨MEK1抑制剂PD98059对肝癌细胞株HepG2细胞中Tec(tyrosinekinaseexpressedinhepatocellu-larcarcinoma)及ERK2作用。方法免疫细胞化学方法检测Tec、ERK2在HepG2细胞中的表达;用RT-PCR和Westernblot方法检测,不同浓度PD98059处理细胞后,HepG2细胞中的Tec、ERK2mRNA及蛋白表达。结果Tec、ERK2在HepG2细胞中呈高表达,PD98059明显影响HepG2细胞Tec、ERK2mRNA以及蛋白表达,呈剂量依赖性,40μmol/LPD98059细胞抑制最明显。结论Tec可能是肝癌细胞内Ras/Raf/ERK信号转导途径上游的信号蛋白,与Ras/Raf/ERK信号转导通路存在着某种信号联系。 展开更多
关键词 PD98059 TEC ERK2 肝癌 信号转导
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尿激酶型纤溶酶原激活物对毛囊外根鞘细胞增殖的影响 被引量：2
10
作者 崔志鸿 杨恬 +1 位作者 高强国 杨进 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期277-279,共3页
目的　探讨尿激酶型纤溶酶原激活物 (Urokinase typeplasminogenactivator,uPA)对体外培养的毛囊外根鞘 (Outerrootsheath ,ORS)细胞增殖的作用。方法　体外培养了小鼠ORS细胞 ;用MTT法研究了uPA促进因子肝细胞生长因子 (Hepatocytegrow... 目的　探讨尿激酶型纤溶酶原激活物 (Urokinase typeplasminogenactivator,uPA)对体外培养的毛囊外根鞘 (Outerrootsheath ,ORS)细胞增殖的作用。方法　体外培养了小鼠ORS细胞 ;用MTT法研究了uPA促进因子肝细胞生长因子 (Hepatocytegrowthfactor ,HGF)和uPA抑制因子Amiloride处理后ORS细胞的增殖变化 ;用RT PCR方法研究了ORS细胞的uPAmRNA的表达情况 ,以及HGF和Amiloride处理ORS细胞后uPA的mRNA表达的变化。结果　体外培养的ORS细胞有uPA表达 ;HGF可促进uPAmRNA的表达并促进ORS细胞的增殖 ;Amiloride抑制uPAmRNA表达并抑制ORS细胞增殖。结论　毛囊ORS细胞表达uPA ,HGF促进uPA的表达并促进ORS细胞增殖 ,Amiloride通过抑制uPA的表达和其活性抑制ORS细胞的增殖。 展开更多
关键词 尿激酶型纤溶酶原激活物 外根鞘细胞 HGF AMILORIDE 毛囊 细胞增殖 影响
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AnnexinⅡ在已分化人表皮角质形成细胞中表达的研究 被引量：2
11
作者 李习玲 连小华 +1 位作者 杨力 杨恬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第17期1793-1795,共3页
目的探讨annexinⅡ在已分化人表皮角质形成细胞(keratinocyte,KC)中的表达。方法采用免疫组织化学(immunoh istochem istry,IHC)技术检测早、中、晚期人胚胎表皮KC及成人表皮KC中annexinⅡ蛋白的表达。结果①annexinⅡ在人胚胎期表皮KC... 目的探讨annexinⅡ在已分化人表皮角质形成细胞(keratinocyte,KC)中的表达。方法采用免疫组织化学(immunoh istochem istry,IHC)技术检测早、中、晚期人胚胎表皮KC及成人表皮KC中annexinⅡ蛋白的表达。结果①annexinⅡ在人胚胎期表皮KC中的表达随胚胎的发育逐渐增强,在成人期表皮KC中的表达明显高于胚胎期。②annexinⅡ呈胞膜方式表达,主要分布于基底上层的分化KC中。结论annexinⅡ可能参与表皮KC分化的调控。 展开更多
关键词 ANNEXIN Ⅱ 组织型纤溶酶原激活剂 角质形成细胞 分化 人胚胎 成人
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表皮干细胞体外诱导转分化为角膜上皮细胞的实验研究 被引量：3
12
作者 杨珂 余瑾 杨恬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期671-673,共3页
目的探讨表皮干细胞向角膜上皮细胞转分化的可塑性。方法用Ⅳ型胶原筛选的方法培养并鉴定表皮干细胞,经体外与角膜缘基质细胞共培养诱导分化,免疫组化检测角膜上皮细胞特异标志物K12表达。结果获得的表皮干细胞表现出很强的增殖潜能,光... 目的探讨表皮干细胞向角膜上皮细胞转分化的可塑性。方法用Ⅳ型胶原筛选的方法培养并鉴定表皮干细胞,经体外与角膜缘基质细胞共培养诱导分化,免疫组化检测角膜上皮细胞特异标志物K12表达。结果获得的表皮干细胞表现出很强的增殖潜能,光镜下为原始细胞形态特征,能强表达K19和β1-integrin,共培养2周后可见细胞分化,细胞表达角膜上皮特征性K12。结论在本实验的体外诱导条件下,表皮干细胞能转分化为角膜上皮细胞。 展开更多
关键词 表皮干细胞 角膜上皮 转分化
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Β-CATENIN和COX-2在大鼠毛囊隆突区细胞中的表达及意义 被引量：1
13
作者 张艺 王韵 +1 位作者 曾益军 杨恬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期324-326,共3页
目的通过观察Β-CATENIN和COX-2在体外培养的毛囊隆突区细胞中的表达,探讨其对隆突区细胞增殖的作用及相互关系。方法在体外分离培养毛囊隆突区细胞的基础上,采用免疫细胞化学方法分别检测不同时相Β-CATENIN和COX-2在毛囊隆突区细胞中... 目的通过观察Β-CATENIN和COX-2在体外培养的毛囊隆突区细胞中的表达,探讨其对隆突区细胞增殖的作用及相互关系。方法在体外分离培养毛囊隆突区细胞的基础上,采用免疫细胞化学方法分别检测不同时相Β-CATENIN和COX-2在毛囊隆突区细胞中的表达。结果Β-CATENIN和COX-2在毛囊隆突区细胞呈强表达,并表现出与培养时间的相关性;同时Β-CATENIN可见于细胞质与细胞核中,而COX-2仅见于细胞核。结论Β-CATENIN和COX-2对毛囊隆突区细胞具有促增殖作用,COX-2可能是Β-CATENIN途径发挥作用的核内靶基因。 展开更多
关键词 Β-连环蛋白 环氧合酶-2 毛囊 隆突区 增殖
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pEGFPC1-uPAR重组质粒的构建及对细胞增殖和侵袭性的影响 被引量：1
14
作者 高强国 符刚 +1 位作者 曾益军 杨恬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第19期1928-1930,共3页
目的构建含人uPAR基因片断的真核表达绿色荧光蛋白质粒,并进行初步的细胞生物学研究。方法设计引物,利用PCR从原核表达质粒中扩增人全长uPAR基因,并导入真核表达载体绿色荧光蛋白质粒pGFPC1中,测序确认后转染Pam212细胞,使之在细胞中表... 目的构建含人uPAR基因片断的真核表达绿色荧光蛋白质粒,并进行初步的细胞生物学研究。方法设计引物,利用PCR从原核表达质粒中扩增人全长uPAR基因,并导入真核表达载体绿色荧光蛋白质粒pGFPC1中,测序确认后转染Pam212细胞,使之在细胞中表达,检测其细胞生长特性和侵袭能力的变化。结果测序证实构建的含uPAR的绿色荧光蛋白质粒,其uPARcDNA阅读框完整,连接部位序列正确;转染Pam212细胞后,能促进细胞的生长并能增强细胞的侵袭能力。结论成功构建了含pEGFPC1-uPAR质粒,确认uPAR能促进Pam212细胞的生长和侵袭,为进一步在体定位研究打下了基础。 展开更多
关键词 UPAR pEGFPC1 Pare 212细胞
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一种简单、快捷获取细胞图像和视频信息的方法 被引量：1
15
作者 杨进 阎小美 杨恬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期960-960,964,共2页
关键词 细胞 CCD 视频信息 多媒体 摄影 摄像
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小鼠触须毛囊外根鞘细胞的体外培养及uPA和uPAR表达研究 被引量：1
16
作者 高强国 符刚 杨恬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第16期1452-1454,共3页
目的　建立小鼠毛囊外根鞘细胞的体外培养方法及研究尿激酶型纤溶酶原激活剂及其受体 (uPA uPAR)的表达。方法　建立以毛囊真皮鞘细胞为滋养层 ,培养外根鞘细胞并对uPA uPAR的表达进行免疫细胞化学鉴定。结果　外根鞘细胞在此滋养层上... 目的　建立小鼠毛囊外根鞘细胞的体外培养方法及研究尿激酶型纤溶酶原激活剂及其受体 (uPA uPAR)的表达。方法　建立以毛囊真皮鞘细胞为滋养层 ,培养外根鞘细胞并对uPA uPAR的表达进行免疫细胞化学鉴定。结果　外根鞘细胞在此滋养层上生长较好 ,并有uPA uPAR的表达。结论　毛囊真皮鞘细胞是外根鞘细胞较好的滋养层 。 展开更多
关键词 毛囊 外根鞘细胞 真皮鞘细胞 UPA/UPAR
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环氧合酶-2蛋白在人膀胱移行细胞癌中的表达 被引量：1
17
作者 李国平 杨恬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期904-906,共3页
目的　研究环氧合酶 2 (COX 2 )在膀胱移行细胞癌 (Transitionalcellcarcinoma ,TCC)组织中的表达及其意义。方法　采用SP免疫组化技术 ,对 48例尿路上皮TCC石蜡标本切片进行免疫组化染色 ,对阳性表达率与肿瘤分级及侵袭性间的相关性... 目的　研究环氧合酶 2 (COX 2 )在膀胱移行细胞癌 (Transitionalcellcarcinoma ,TCC)组织中的表达及其意义。方法　采用SP免疫组化技术 ,对 48例尿路上皮TCC石蜡标本切片进行免疫组化染色 ,对阳性表达率与肿瘤分级及侵袭性间的相关性进行统计学分析。结果　COX 2蛋白的阳性表达率与TCC分级及侵袭性呈显著相关 ,在低分级TCC中没有COX 2蛋白的表达 (0 / 18) ,在高分级TCC中COX 2阳性表达率为 44 % (8/ 18)。结论　COX 2在高分级TCC和侵袭性TCC中阳性表达率显著上升 ,表明COX 2可能在TCC的形成中起重要作用 。 展开更多
关键词 膀胱移行细胞癌 环氧合酶-2 TCC 膀胱肿瘤 肿瘤侵袭 免疫组织化学
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小鼠表皮角质形成细胞中TNF-α对PAI-2表达的调节 被引量：1
18
作者 连小华 杨恬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1069-1072,共4页
目的　探讨表皮角质形成细胞中TNF α对PAI 2表达的调节及其生物学意义。方法　利用免疫细胞化学、TUNEL反应及免疫细胞化学 TUNEL双标等方法 ,观察TNF α作用下 ,培养的表皮角质形成细胞及其脱落细胞中PAI 2表达的变化及凋亡发生的情... 目的　探讨表皮角质形成细胞中TNF α对PAI 2表达的调节及其生物学意义。方法　利用免疫细胞化学、TUNEL反应及免疫细胞化学 TUNEL双标等方法 ,观察TNF α作用下 ,培养的表皮角质形成细胞及其脱落细胞中PAI 2表达的变化及凋亡发生的情况。结果　在TNF α作用下 ,脱落细胞中PAI 2的表达明显增加 ,凋亡细胞的数量增多 ,PAI 2在凋亡细胞中的表达也增强 ,而在一些胞体较大、形态呈多角形的凋亡细胞中PAI 2表达的增加更为明显。结论　在高度分化的表皮角质形成细胞中 ,TNF α可促进PAI 2的表达并可诱导凋亡的产生 ,就与KC凋亡的关系而言 ,TNF α所诱导的PAI 2可分为两种 ,一种与KC凋亡有关 ,另一种与KC凋亡无关。 展开更多
关键词 PAI-2 TNF-α表皮角质形成细胞 表达调节
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人表皮角质形成细胞中PAI-3/PCI的表达及作用
19
作者 张诚 李习玲 +5 位作者 连小华 王韵 杨珂 余谨 高强国 杨恬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期294-297,共4页
目的探讨人表皮角质形成细胞(KERATINOCYTE,KC)中,PAI-3/PCI的表达及作用。方法利用免疫细胞化学、RT-PCR方法,检测高CA2+浓度作用下,培养的人分化表皮KC及KC提取物角质壳中PAI-3的表达变化。结果高CA2+浓度下培养24H后,分化标记物K10... 目的探讨人表皮角质形成细胞(KERATINOCYTE,KC)中,PAI-3/PCI的表达及作用。方法利用免疫细胞化学、RT-PCR方法,检测高CA2+浓度作用下,培养的人分化表皮KC及KC提取物角质壳中PAI-3的表达变化。结果高CA2+浓度下培养24H后,分化标记物K10弱阳性表达,PAI-3呈阳性表达;培养48H后,K10强阳性表达,而PAI-3的阳性表达明显增加,72H后,表达开始降低,在低CA2+浓度下阳性染色主要位于细胞核膜周围而高CA2+浓度下主要位于细胞质,同时,PAI-3存在终末分化KCS角质壳中。结论人表皮KC分化过程中,PAI-3的表达随着分化的增加而增加,PAI-3存在终末分化KCS角质壳蛋白中,表明PAI-3参与KC分化的作用。 展开更多
关键词 角质形成细胞 分化 PAI-3 角质壳 PCI
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环氧合酶-2及其特异性抑制剂NS-398对膀胱癌细胞体外生长与侵袭能力的影响
20
作者 李国平 杨恬 +2 位作者 李晋涛 余瑾 严军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期948-951,共4页
目的　研究环氧合酶 2 (Cyclooxygenase 2 ,COX 2 )及其特异性抑制剂NS 3 98在膀胱癌细胞生长和侵袭转移中的作用。方法　利用转基因技术将COX 2cDNA基因导入低表达COX 2的膀胱癌细胞株EJ ,获得高表达COX 2的永久转染细胞EJ COX2 。观... 目的　研究环氧合酶 2 (Cyclooxygenase 2 ,COX 2 )及其特异性抑制剂NS 3 98在膀胱癌细胞生长和侵袭转移中的作用。方法　利用转基因技术将COX 2cDNA基因导入低表达COX 2的膀胱癌细胞株EJ ,获得高表达COX 2的永久转染细胞EJ COX2 。观察转染前后细胞生长速度的变化 ;在NS 3 98作用下 ,Boyden小室检测细胞的侵袭能力的改变 ,用RT PCR和Westernblotting检测uPA的表达变化。结果　转染COX 2的EJ COX2 细胞体外增殖能力增强 ;穿过人工基底膜的体外侵袭能力增强 ;尿激酶型纤溶酶原激活因子 (Urokinaseplasminogenactivator ,uPA)的表达上升 ;NS 3 98能呈剂量依赖地抑制COX 2、uPA的表达和EJ COX2 细胞的侵袭能力。结论　COX 2能促进膀胱癌细胞生长 ,并通过促进uPA的表达从而促进其侵袭转移的能力 ,NS 3 98能呈剂量依赖地抑制COX 2、uPA的表达和EJ COX2 细胞的侵袭能力。 展开更多
关键词 环氧合酶-2 膀胱癌细胞株EJ 侵袭 UPA NS-398
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