经小脑延髓池局部应用反义寡核苷酸对脑组织TNF-α表达的影响 被引量：4

1

作者 侯立军 张光霁 +6 位作者 卢亦成 朱诚 江基尧 白如林 刘荫秋 李薇 蔡文琴 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期655-657,共3页

目的 :观察 TNF-α反义寡核苷酸对 TNF-α的阻断作用。方法 :用 DNA合成仪合成 17聚体的 TNF-α正义寡核苷酸和反义寡核苷酸。 2 4只犬随机分为对照组和实验组 (包括人工脑脊液组、正义链组和反义链组 )。实验组动物用已建成的颅脑爆炸... 目的 :观察 TNF-α反义寡核苷酸对 TNF-α的阻断作用。方法 :用 DNA合成仪合成 17聚体的 TNF-α正义寡核苷酸和反义寡核苷酸。 2 4只犬随机分为对照组和实验组 (包括人工脑脊液组、正义链组和反义链组 )。实验组动物用已建成的颅脑爆炸伤模型装置致伤 ,伤前经小脑 -延髓池分别注入人工脑脊液、TNF-α正义寡核苷酸和 TNF-α反义寡核苷酸 ,比较 3组动物脑组织 TNF-α m RNA表达的变化。结果 :与人工脑脊液组和正义链组相比 ,伤前经小脑 -延髓池脑内局部应用 TNF-α反义寡核苷酸组 ,颅脑爆炸伤后脑组织内 TNF- α m RNA表达量明显减少 (P<0 .0 1)。结论 :经小脑延髓池局部应用反义寡核苷酸可有效阻断颅脑爆炸伤后脑组织 TNF- α的表达。 展开更多

关键词 脑损伤 爆炸伤 原位杂交 肿瘤坏死因子 寡核苷酸类 ODN

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单味黄芪红花丹参注射液对神经干细胞分化影响的初步研究 被引量：29

2

作者 刘建军 姚忠祥 +2 位作者 秦茂林 陈兴书 陈建芳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第14期1470-1472,共3页

目的寻找对神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的增殖、分化和存活有促进作用的单味中药成分,进而确定对NSCs的增殖和分化有影响的中药有效成分。方法本研究筛选了黄芪、红花、丹参3种中药注射液分别刺激培养的NSCs,观察NSCs的分化状... 目的寻找对神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的增殖、分化和存活有促进作用的单味中药成分,进而确定对NSCs的增殖和分化有影响的中药有效成分。方法本研究筛选了黄芪、红花、丹参3种中药注射液分别刺激培养的NSCs,观察NSCs的分化状态。结果发现黄芪、红花有明显的促进NSCs分化的作用,其中黄芪效果最佳,而丹参却有促进NSCs凋亡的作用,这种作用随着其浓度的升高而加强。结论黄芪、红花对NSCs的分化起积极作用,丹参对NSCs的分化有毒性作用,也可能促进NSCs的凋亡,为进一步从细胞水平和分子水平研究中药的作用机制和NSCs的分化机制提供了依据。 展开更多

关键词 中药注射液 神经干细胞 分化

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2007-2008年北京地区CA16VP1区系统进化分析 被引量：22

3

作者 王娟 罗珍 +3 位作者 范东瀛 高娜 朱俊萍 安静 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第23期2342-2346,共5页

目的了解2007-2008年北京地区柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)流行情况及其种系进化规律和基因分型。方法收集北京地区2007-2008年133例手足口病病例临床标本,从中筛选CA16毒株,扩增部分毒株VP1区并进行序列测定和分析。结... 目的了解2007-2008年北京地区柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)流行情况及其种系进化规律和基因分型。方法收集北京地区2007-2008年133例手足口病病例临床标本,从中筛选CA16毒株,扩增部分毒株VP1区并进行序列测定和分析。结果共筛选得到39例45份CA16阳性标本,测定其中16株病毒的VP1区核苷酸序列,其同源性为91.43%～98.65%,氨基酸同源性为97.98%～100%。该16株病毒与GenBank中选取的24株CA16参考株的核苷酸同源性为78.13%～98.65%,氨基酸同源性为89.9%～100%。16株北京分离株中的9株与近年多数中国大陆分离株形成进化树上亲缘关系较近的一群,其余7株与我国台湾及周边国家的一系列分离株亲缘关系较近。结论CA16为北京地区手足口病的主要致病原之一,本地区毒株同源性较高,同GenBank中24株CA16参比毒株序列进行系统进化分析显示其属于B基因群,16株北京分离株在系统进化树上有分别归属于两支的趋势。 展开更多

关键词 柯萨奇病毒A组16型 手足口病 系统进化分析

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PD大鼠纹状体提取液诱导中脑神经干细胞分化为多巴胺能神经元的研究 被引量：15

4

作者 余小强 阮怀珍 +3 位作者 蔡文琴 范晓棠 姚忠祥 杨辉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期18-21,共4页

目的　研究PD大鼠纹状体提取液诱对中脑神经干细胞的诱导分化作用。方法　①体外分离、培养大鼠胚胎的中脑神经干细胞 ,并诱导其分化 ,巢素 (Nestin)、神经丝 2 0 0 (NF 2 0 0 )、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)免疫组化染色鉴定。②加入纹... 目的　研究PD大鼠纹状体提取液诱对中脑神经干细胞的诱导分化作用。方法　①体外分离、培养大鼠胚胎的中脑神经干细胞 ,并诱导其分化 ,巢素 (Nestin)、神经丝 2 0 0 (NF 2 0 0 )、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)免疫组化染色鉴定。②加入纹状体提取液后 ,分化细胞用抗酪氨酸羟化酶 (TH)免疫组化鉴定 ,并用流式细胞技术检测分化比例。结果　①从大鼠胚胎的腹侧中脑部位分离获得了大量未分化、呈巢状悬浮生长的细胞团 ,且能分化为神经元和神经胶质细胞。②经纹状体提取液诱导后 ,能够分化出多巴胺能神经元 ,分化比例达 2 0 %左右。 展开更多

关键词 中脑 神经干细胞 纹状体提取液 分化

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Kit信号通路调控成年小鼠Cajal间质细胞的表型改变 被引量：8

5

作者 韩鹃 梅峰 +4 位作者 乔着意 王梅 任慧琴 赵庆波 刘剑 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1268-1272,共5页

目的 通过构建阻断Kit信号的动物模型，观察结肠壁内Cajal间质细胞（interstitial cells of cajal，ICC）数量与网络的变化，探讨调控ICC可塑性的分子机制。方法选取45只4周龄健康BALB/c小鼠，体质量18～20 g，酪氨酸激酶特异性抑制剂... 目的 通过构建阻断Kit信号的动物模型，观察结肠壁内Cajal间质细胞（interstitial cells of cajal，ICC）数量与网络的变化，探讨调控ICC可塑性的分子机制。方法选取45只4周龄健康BALB/c小鼠，体质量18～20 g，酪氨酸激酶特异性抑制剂伊马替尼（imatinib，STI571）灌胃制作动物模型，全层铺片Kit/CD44双重荧光标记观察造模后0、8、16 d及停药8、16 d，各亚型Kit＋和CD44＋ICC数量和形态的变化，Western blot和实时定量荧光RT-PCR分别从蛋白水平和基因水平检测Kit和CD44量的变化。结果 ①以近端结肠为例，Imatinib可致结肠壁内Kit＋ICC-IM、ICC-MY数量明显减少，用药16 d其数量下降至对照组的50%左右[ICC-MY：（136.17±3.56）vs（66.74±1.47），P〈0.05]，停药后逐渐恢复正常。②ICC-SM的数量及网络在整个实验过程中没有明显变化。③用药后，Kit蛋白水平和基因水平均明显下降，停药后恢复正常。④用药后各亚型CD44＋ICC的数量及网络没有变化，且CD44在蛋白和基因水平均没有变化。结论 Kit信号通路可调节结肠ICC的可塑性。抑制Kit信号通路后，ICC并没有消失，只是丢失了其Kit表型。 展开更多

关键词 CAJAL间质细胞 Kit受体 CD44受体 干细胞生长因子 伊马替尼

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青蒿琥酯对人表皮鳞癌A431细胞增殖和凋亡的影响 被引量：5

6

作者 江忠勇 梅峰 +4 位作者 于彬 韩鹃 田衍平 李世峰 周德山 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期615-618,共4页

目的初步探讨青蒿琥酯(artesunate,ART)对人表皮鳞癌细胞增殖和凋亡的影响及其相关机制。方法以人表皮鳞癌细胞系A431为研究对象,人永生化角质形成细胞系HaCaT为正常对照,顺铂(diamminedichloroplatinum,DDP)为药物阳性对照,通过MTT法... 目的初步探讨青蒿琥酯(artesunate,ART)对人表皮鳞癌细胞增殖和凋亡的影响及其相关机制。方法以人表皮鳞癌细胞系A431为研究对象,人永生化角质形成细胞系HaCaT为正常对照,顺铂(diamminedichloroplatinum,DDP)为药物阳性对照,通过MTT法和流式细胞术观察ART对A431细胞增殖和凋亡的影响,以及铁离子抑制剂去铁敏(desferrioxamine,DFOM)部分阻断ART对A431细胞的生长抑制作用。结果ART对A431细胞有较明显的增殖抑制作用,对HaCaT细胞的损害显著低于DDP;药物组ART60μmol/L(IC50)作用A431细胞48h,A431细胞阻滞于S期[(67.60±4.12)%,P<0.05],同时凋亡率上调[(19.87±0.03)%,P<0.01];药物阻断组DFOM60μmol/L预处理A431细胞4h、加入ART60μmol/L作用48h,凋亡率显著下调[(7.37±0.02)%,P<0.01],而周期检测未发生变化。结论ART通过阻滞A431细胞停滞于S期和诱导A431细胞凋亡发挥增殖抑制作用,此作用在一定范围内与药物剂量呈正相关;ART对A431细胞的诱导凋亡作用与Fe2+介导有关;ART毒副作用明显低于DDP。 展开更多

关键词 青蒿琥酯 鳞状细胞癌 角质形成细胞 细胞凋亡

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利用DNA免疫技术制备抗登革2型病毒NS2B蛋白多克隆抗体 被引量：4

7

作者 刘丽梅 陈宗涛 +5 位作者 高娜 田衍平 陈炜 张俊磊 王嘉丽 安静 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期327-330,共4页

目的构建登革2型病毒(dengue virus serotype2,DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。方法PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染... 目的构建登革2型病毒(dengue virus serotype2,DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。方法PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染Vero细胞,检测目标蛋白的表达。用该表达质粒免疫BALB/c小鼠,制备抗NS2B抗血清。结果成功构建真核表达重组质粒pCAGGS-P7/NS2B,该重组质粒具有良好的免疫原性,免疫小鼠后所获的抗血清,抗体效价达1∶3200,Western blot和间接免疫荧光证实抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。结论通过DNA免疫所制备小鼠抗DV2-NS2B抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。 展开更多

关键词 登革热病毒 病毒非结构蛋白质类 NS2B 小鼠 近交BALBC

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利用酵母双杂交筛选与DAT1的LIM2相互作用的蛋白质 被引量：2

8

作者 惠玲 季朝能 +4 位作者 蔡文琴 顾少华 应康 谢毅 毛裕民 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期410-413,共4页

目的　利用酵母双杂交系统筛选人胎脑组织中能与多巴胺相关转录因子DAT1的LIM2相互作用的蛋白质, 以初步了解DAT1的功能。方法　构建酵母双杂交诱饵质粒pLexA-LIM2,筛选人胎脑cDNA文库,并用酵母交配试验初步 验证。结果　获得3个能... 目的　利用酵母双杂交系统筛选人胎脑组织中能与多巴胺相关转录因子DAT1的LIM2相互作用的蛋白质, 以初步了解DAT1的功能。方法　构建酵母双杂交诱饵质粒pLexA-LIM2,筛选人胎脑cDNA文库,并用酵母交配试验初步 验证。结果　获得3个能与DAT1的第2个LIM结构域LIM2结合的相互作用蛋白,通过酵母结合试验证实了它们在酵母 中的结合。结论　DAT1的第2个LIM结构域LIM2可与唐氏综合征关键区基因2(SimilartoDownsyndromecriticalregion gene2,DSCR2)、钙 整合素结合蛋白(calciumandintegrinbindingprotein,CIB)、和HSPC170(CD34+hematopoieticstem/progenitor cells,HSPCs)结合。 展开更多

关键词 蛋白质 杂交筛选 syndrome INTEGRIN 酵母双杂交系统 protein 相关转录因子 cDNA文库 相互作用蛋白 人胎脑组织 唐氏综合征 cells 诱饵质粒 交配试验 Down 结合蛋白 结构域 LIM 多巴胺 整合素 and 初步 验证

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双环己酮草酰二腙诱导精神分裂症小鼠模型胼胝体有髓神经纤维脱髓鞘的定量观测 被引量：4

9

作者 程国华 彭超 +6 位作者 李永德 王芸 陈林 卢伟 孔吉明 肖岚 唐勇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期598-603,共6页

目的进一步研究双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导精神分裂症动物模型胼胝体内有髓神经纤维的改变及与行为学改变之间的关系。方法 19只雄性C57BL/6小鼠被分为2组,空白对照组(n=10)和CPZ处理组(n=9),分别给予正常鼠饲料和混有0.2%(... 目的进一步研究双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导精神分裂症动物模型胼胝体内有髓神经纤维的改变及与行为学改变之间的关系。方法 19只雄性C57BL/6小鼠被分为2组,空白对照组(n=10)和CPZ处理组(n=9),分别给予正常鼠饲料和混有0.2%(质量分数)CPZ的鼠饲料6周,运用旷场实验、高架十字迷宫实验、Morris水迷宫实验、探孔实验和转棒实验检测小鼠的行为学改变,运用免疫组化、透射电镜、体视学方法研究小鼠的胼胝体和其内有髓神经纤维的改变。结果 CPZ处理组小鼠在行为学实验中表现为:旷场实验中央区活动增多,高架十字迷宫开臂内活动增加(P<0.05),提示CPZ处理小鼠的焦虑行为减少;学习记忆能力、运动能力和基本探索行为并未受到影响(P>0.05)。透射电镜研究发现CPZ模型小鼠胼胝体存在有髓神经纤维脱髓鞘改变。透射电镜和体视学研究发现,CPZ模型小鼠胼胝体体积[(12.66±1.07)mm3]较空白对照组[(13.53±2.79)mm3]无显著性下降(P>0.05),但CPZ模型小鼠胼胝体有髓神经纤维长度密度和总长度[(0.70±0.17)km/mm3和(9.06±2.56)km]均较空白对照组[(1.47±0.17)km/mm3和(19.75±3.70)km]显著下降(P<0.05)。结论 CPZ模型可以出现类似精神分裂症样症状且胼胝体内有髓神经纤维存在脱髓鞘改变。 展开更多

关键词 双环己酮草酰二腙 精神分裂症 行为学实验 胼胝体 脱髓鞘 体视学

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CPZ诱导精神分裂症样模型小鼠海马脱髓鞘改变与行为学变化及其相关性的研究 被引量：2

10

作者 王芸 李永德 +6 位作者 彭超 程国华 陈林 卢伟 孔吉明 肖岚 唐勇 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期129-136,共8页

目的:研究双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导C57BL/6小鼠建立的精神分裂症样模型小鼠海马内有髓神经纤维体积改变及其与行为学改变之间的关系。方法:19只雄性6周龄小鼠,随机分为实验组(9只)和对照组(10只),实验组用含0.2%(质量分数... 目的:研究双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导C57BL/6小鼠建立的精神分裂症样模型小鼠海马内有髓神经纤维体积改变及其与行为学改变之间的关系。方法:19只雄性6周龄小鼠,随机分为实验组(9只)和对照组(10只),实验组用含0.2%(质量分数百分比,w/w)CPZ的混合鼠饲料饲喂6周,建立精神分裂症样小鼠模型;对照组用标准鼠饲料饲喂6周。运用旷场实验、高架十字迷宫实验、Morris水迷宫实验、转棒实验和探孔实验测试行为学改变;髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)免疫组化染色及透射电镜定性观察髓鞘结构变化;体视学方法测量并计算海马总体积及海马内有髓神经纤维体积;统计学方法分析行为学改变与海马内有髓神经纤维体积改变之间的关系。结果:与对照组相比,实验组小鼠体质量下降,差异具有统计学意义(P<0.05);行为学实验结果表明:实验组小鼠存在异常的焦虑行为(P=0.018)及空间认知能力障碍(P=0.037),但运动能力(P=0.443)、探索习性(P=0.306)及学习记忆能力未见受损(P=0.462);MBP免疫组化染色发现海马区域免疫阳性染色变浅;透射电镜定性观察发现海马内有髓神经纤维存在脱髓鞘改变;体视学定量测定发现,实验组小鼠海马总体积未发生显著性改变(P=0.955),而海马内有髓神经纤维体积减小(P=0.009);统计学相关分析发现,闭臂路程百分比和海马内有髓神经纤维体积呈正相关(r s=0.83,P=0.003),开臂路程百分比和海马内有髓神经纤维体积呈负相关(r s=-0.65,P=0.043)。结论:进一步证实CPZ模型小鼠可以出现类似精神分裂症样症状的行为学改变及海马内有髓神经纤维存在脱髓鞘改变,并且发现海马内有髓神经纤维体积和行为学表现间具有一定的相关性。 展开更多

关键词 双环己酮草酰二腙 精神分裂症 行为学实验 海马 脱髓鞘 体视学

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雌激素上调神经营养因子增加雄性小鼠中脑多巴胺神经元数量的实验研究 被引量：2

11

作者 伊宏亮 郭文琼 +4 位作者 孙卫忠 郭亮 黄伟 范晓棠 徐海伟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期663-666,共4页

目的观察雌激素处理对成年雄性小鼠黑质多巴胺神经元数量的影响及可能的调控机制。方法选用雄性C57/BL6小鼠10只,分成对照组、雌激素组(E2),采用免疫组化检测雌激素处理对小鼠黑质多巴胺神经元与calb ind in阳性神经元数量的改变;采用RT... 目的观察雌激素处理对成年雄性小鼠黑质多巴胺神经元数量的影响及可能的调控机制。方法选用雄性C57/BL6小鼠10只,分成对照组、雌激素组(E2),采用免疫组化检测雌激素处理对小鼠黑质多巴胺神经元与calb ind in阳性神经元数量的改变;采用RT-PCR分析雌激素处理对小鼠中脑内多巴胺转运蛋白(DAT)、胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)与脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA水平的影响。结果雌激素处理可以增加小鼠黑质多巴胺神经元数量[E2组(119.7±2.9)个vs对照组(93.5±5.1)个,P=0.004],并增加小鼠中脑内DAT的表达水平(P<0.05),而对calb ind in阳性神经元数量无影响[E2组(88.0±2.0)个vs对照组(86.2±1.5)个]。雌激素处理同时可以上调小鼠中脑内IGF-1R与BDNFmRNA水平(P<0.05)。结论雌激素通过调节IGF-1R与BDNF的表达增加小鼠中脑内多巴胺神经元数量。 展开更多

关键词 雌二醇 TH神经元 calbindin阳性神经元 胰岛素样生长因子1受体 脑源性神经营养因子

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移植诱导中脑NSCs分化的多巴胺能神经元对PD大鼠治疗作用的实验研究 被引量：2

12

作者 余小强 阮怀珍 +3 位作者 蔡文琴 范晓棠 姚忠祥 杨辉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期749-752,共4页

目的　研究移植诱导中脑神经干细胞分化出的多巴胺能神经元对PD大鼠的治疗作用。方法　利用纹状体提取液诱导大鼠胚胎中脑神经干细胞 ,使其部分分化为酪氨酸羟化酶 (TH)阳性的多巴胺能神经元 ,继而把分化后的细胞移植到PD大鼠的纹状体... 目的　研究移植诱导中脑神经干细胞分化出的多巴胺能神经元对PD大鼠的治疗作用。方法　利用纹状体提取液诱导大鼠胚胎中脑神经干细胞 ,使其部分分化为酪氨酸羟化酶 (TH)阳性的多巴胺能神经元 ,继而把分化后的细胞移植到PD大鼠的纹状体内 ,免疫组化法证实移植细胞的存活并以诱发旋转行为的改善来观察其治疗作用。结果　纹状体提取液能够诱导中脑神经干细胞分化出多巴胺能神经元而且这种经诱导后产生的细胞能够在PD大鼠体内长期存活并改善阿卟吗啡诱导的旋转行为。 展开更多

关键词 帕金森病 神经干细胞 神经移植

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17β-雌二醇睾酮三苯氧胺和氨鲁米特对肺腺癌细胞株A549生长增殖的影响 被引量：1

13

作者 周向东 蔡文琴 +2 位作者 肖岚 张吉强 杨忠 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期91-94,共4页

目的　检测肺腺癌细胞株A5 49芳香化酶蛋白表达 ,并探讨 17β 雌二醇 (estrogen ,E2 )、睾酮 (testosterone ,T)、雌激素受体拮抗剂三苯氧胺 (tamoxifen ,TAM)和芳香化酶抑制剂氨鲁米特 (DL Aminoglutethimide ,AMIN)对A5 49细胞生长增... 目的　检测肺腺癌细胞株A5 49芳香化酶蛋白表达 ,并探讨 17β 雌二醇 (estrogen ,E2 )、睾酮 (testosterone ,T)、雌激素受体拮抗剂三苯氧胺 (tamoxifen ,TAM)和芳香化酶抑制剂氨鲁米特 (DL Aminoglutethimide ,AMIN)对A5 49细胞生长增殖的影响。方法　采用免疫组织化学法检测A5 49细胞株芳香化酶蛋白的表达 ,用流式细胞仪和四唑氮法测定加入E2 、T、TAM和AMIN前后细胞周期和细胞数量的变化。结果　A5 49细胞芳香化酶蛋白表达阳性。芳香化酶抑制剂AMIN和 5× 10 - 7mol L的TAM可抑制A5 49细胞的生长 ,使之阻滞于G0 G1 期 (P <0 0 1和P <0 0 0 1)。当将TAM的浓度提高至 5×10 - 6 mol L ,3d后G2 M期细胞明显减少 ,S期细胞明显增多 (P <0 0 0 1) ;与对照组相比 ,E2 和T均能促进A5 49细胞的生长(P <0 0 1和P <0 0 5 ) ;而单独应用TAM或AMIN则可抑制A5 49细胞的生长 (P <0 0 1和P <0 0 5 ) ,且两者可分别抑制E2和T对A5 49细胞的促生长作用 (P <0 0 1)。结论　E2 和T对A5 49细胞有促生长作用 ,TAM和AMIN能抑制A5 49的生长增殖 ,且可拮抗E2 展开更多

关键词 肺肿瘤 雌二醇 睾酮 三苯氧胺 芳香化酶

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体视学技术在视乳头血管的定量分析 被引量：1

14

作者 应希 阴正勤 +1 位作者 王一 孙榆 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期149-150,共2页

目的　观察和测定原发性开角型青光眼患者视神经乳头的血管形态、数量变化 ,探讨血循环障碍对青光眼所致视神经损害的影响并提供病理依据。方法　将青光眼患者和正常人视神经乳头标本连续半薄垂直切片 ,采用计算机图像分析和生物体视学... 目的　观察和测定原发性开角型青光眼患者视神经乳头的血管形态、数量变化 ,探讨血循环障碍对青光眼所致视神经损害的影响并提供病理依据。方法　将青光眼患者和正常人视神经乳头标本连续半薄垂直切片 ,采用计算机图像分析和生物体视学方法测定血管的体积密度、数量密度和相对面积比率。结果　血管的体积密度和相对面积比率均较对照组显著降低 ,而两组的血管数量密度无明显差异。结论　原发性开角型青光眼视乳头筛板区的血管形态发生变化 。 展开更多

关键词 体视学 定量分析 视神经乳头 毛细血管

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不同双环己酮草酰二腙剂量诱导小鼠行为学改变及海马CA1区和DG区内有髓神经纤维改变 被引量：1

15

作者 李永德 王芸 +6 位作者 程国华 彭超 陈林 卢伟 孔吉明 肖岚 唐勇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第13期1331-1336,共6页

目的探讨双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)喂养动物模型作为精神分裂症动物模型的合适剂量和CPZ剂量、海马脱髓鞘改变和行为学改变间的关系。方法使用0.2%、0.3%、0.4%(质量分数)3种剂量CPZ喂养C57BL/6鼠6周,与控制组比较体质量、生存... 目的探讨双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)喂养动物模型作为精神分裂症动物模型的合适剂量和CPZ剂量、海马脱髓鞘改变和行为学改变间的关系。方法使用0.2%、0.3%、0.4%(质量分数)3种剂量CPZ喂养C57BL/6鼠6周,与控制组比较体质量、生存时间和行为学的改变情况,运用免疫组化和光密度比较各组小鼠海马CA1区和DG区内髓鞘改变情况,使用体视学方法研究0.2%CPZ组小鼠海马分区内有髓神经纤维改变情况。结果 0.4%CPZ组小鼠生存时间显著性低于控制组(P<0.01),控制组、0.2%CPZ组和0.3%CPZ组的生存时间无统计学差异(P>0.05)。CPZ喂养组小鼠体质量显著性低于控制组(P<0.05),且剂量越高,体质量丢失越严重。0.2%CPZ组小鼠旷场实验在中央区域的活动显著性增高(P<0.05)。0.2%CPZ组和0.3%CPZ组小鼠海马CA1区MBP染色的平均光密度值显著性低于控制组(P<0.01),0.2%CPZ组小鼠海马DG区MBP染色的平均光密度值显著性低于控制组和0.3%CPZ组(P<0.01)。控制组和0.2%CPZ组海马CA1区和DG区体积无显著性差异(P>0.05)。0.2%CPZ组海马CA1区和DG区内有髓神经纤维长度密度和总长度显著性低于控制组(P<0.05)。结论 0.2%CPZ为用于诱导精神分裂症动物模型的适合CPZ剂量,0.2%CPZ喂养6周可导致小鼠海马CA1和DG区内有髓神经纤维脱髓鞘。 展开更多

关键词 双环己酮草酰二腙 精神分裂症 海马 有髓神经纤维 体视学

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肝脏X受体β对围生期小鼠海马细胞增殖以及放射状胶质细胞纤维形成的影响 被引量：1

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作者 郭亮 黄伟 +2 位作者 徐培 范晓棠 徐海伟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第24期2545-2549,共5页

目的观察肝脏X受体β(liver X receptorβ,LXRβ)对围生期小鼠海马细胞增殖以及放射状胶质细胞纤维形成的影响。方法在胚胎发育18.5 d(E18.5)和生后第2天(P2)行海马免疫组织化学方法检测,分别采用细胞增殖标记增殖细胞核抗原(proliferat... 目的观察肝脏X受体β(liver X receptorβ,LXRβ)对围生期小鼠海马细胞增殖以及放射状胶质细胞纤维形成的影响。方法在胚胎发育18.5 d(E18.5)和生后第2天(P2)行海马免疫组织化学方法检测,分别采用细胞增殖标记增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA),放射状胶质细胞或前体细胞标记Nestin以及放射状胶质细胞标记脑脂质结合蛋白(brain lipid binding protein,BLBP),比较野生小鼠和LXRβ敲除小鼠的表达差异。结果在小鼠E18.5和P2,LXRβ在海马有丰富表达;在小鼠E18.5,LXRβ敲除小鼠中海马齿状回PCNA细胞数量明显减少(P<0.01),BLBP标记的放射状胶质细胞纤维数量减少(P<0.05),胞体无明显改变(P>0.05)。P2与E18.5相比,PCNA阳性细胞数轻微增加,敲除小鼠与野生小鼠相比,PCNA阳性细胞数明显减少(P<0.05);BLBP标记的放射状胶质细胞胞体数量轻微增加,但敲除小鼠与野生小鼠相比,胞体数量无明显改变(P>0.05),纤维数量明显减少(P<0.05),在E18.5和P2,Nestin阳性细胞的分布与BLBP一致,但敲除小鼠中纤维出现断裂。结论 LXRβ参与围生期小鼠海马的细胞增殖以及放射状胶质细胞纤维形成。 展开更多

关键词 肝脏X受体β 放射状胶质细胞 海马 发育

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小鼠STAT3基因干扰质粒的构建及其效果鉴定

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作者 星懿展 李泽桂 +2 位作者 李红丽 李铁石 丁震宇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1022-1025,共4页

目的构建小鼠STAT3基因的特异性RNA干扰质粒,并鉴定其在细胞水平的抑制效果。方法采用DNA载体介导的RNA干扰技术构建小鼠STAT3基因的特异性RNAi质粒(pBS/U6/STAT3siRNA),并通过RT PCR、免疫印迹、免疫细胞化学染色等技术对pBS/U6/STAT3s... 目的构建小鼠STAT3基因的特异性RNA干扰质粒,并鉴定其在细胞水平的抑制效果。方法采用DNA载体介导的RNA干扰技术构建小鼠STAT3基因的特异性RNAi质粒(pBS/U6/STAT3siRNA),并通过RT PCR、免疫印迹、免疫细胞化学染色等技术对pBS/U6/STAT3siRNA的抑制效率进行鉴定。结果经双酶切鉴定筛选出4个阳性干扰质粒,分别转入293T细胞后均可明显降低STAT3的表达,尤以靶向(+2334～+2351)位点的质粒干扰效率最高,达70%。结论小鼠STAT3基因的特异性干扰质粒(pBS/U6/STAT3siRNA)能从蛋白及mRNA水平上特异和高效地抑制STAT3基因的表达。这种DNA载体介导的双链RNA干扰质粒为进一步探究STAT3与胚胎发育的相关功能提供一种有效的研究工具。 展开更多

关键词 pBS/U6/STA33-siRNA STA33 RNAI 小鼠 干扰质粒

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异丙酚对发育期小鼠大脑皮质锥体细胞成熟和树突发育的影响

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作者 黄静 景胜 +5 位作者 包晓航 柳鹏 唐小童 杨振慧 赵敬会 杨天德 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期459-463,共5页

目的探讨异丙酚对小鼠大脑皮质发育阶段神经元成熟和树突发育的影响。方法选用同窝的发育期小鼠按随机数字表法分为3组:1%脂肪乳剂注射对照组,30 mg异丙酚注射组,60 mg异丙酚注射组。于出生后第7天(P7)经腹腔注射。采用免疫荧光方法检... 目的探讨异丙酚对小鼠大脑皮质发育阶段神经元成熟和树突发育的影响。方法选用同窝的发育期小鼠按随机数字表法分为3组:1%脂肪乳剂注射对照组,30 mg异丙酚注射组,60 mg异丙酚注射组。于出生后第7天(P7)经腹腔注射。采用免疫荧光方法检测异丙酚注射注射对P7小鼠大脑皮质内胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)免疫反应阳性的星形胶质细胞及Neu N免疫反应阳性的成熟神经元的变化,MAP2B免疫组化检测锥体细胞形态与数量的变化。运用高尔基染色观察异丙酚对P14小鼠大脑皮质内锥体细胞树突棘总数及亚型数量的变化。结果不同剂量异丙酚对P7小鼠大脑皮质星形胶质细胞和成熟神经元细胞数量均无显著影响,MAP2B免疫组化显示60 mg异丙酚注射显著减低P7小鼠大脑皮质内锥体细胞的数量与树突总数,而30 mg异丙酚注射则无显著改变。高尔基染色结果进一步证实:与对照组比较,60 mg异丙酚注射显著减少P14小鼠大脑皮质锥体细胞树突棘总数(P<0.05)及蘑菇样树突棘数量(P<0.05);30 mg异丙酚注射亦显著减少蘑菇样树突棘数量(P<0.05),而对树突棘总数的影响未达到统计学差异。结论异丙酚单次注射对发育期小鼠大脑皮质成熟神经元及星形胶质细胞数量影响不明显,但高剂量注射对皮质锥体细胞树突的发育与树突棘的成熟有显著抑制作用。 展开更多

关键词 异丙酚 成熟神经元 树突棘 皮质 发育

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生长抑素类似物对胆管癌SK-ChA-1细胞株及其相关基因表达的影响

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作者 陈华 何振平 +1 位作者 马宽生 杨忠 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期598-600,共3页

目的　探讨生长抑素类似物SMS2 0 1 995抑制人胆管癌增殖时对SK ChA 1细胞细胞周期及cyclinD1 和p16蛋白的影响。方法　采用血清饥饿法将SK ChA 1细胞同步化 ,同步化释放后SMS2 0 1 995处理 48h收取不同时相细胞 ,以流式细胞仪 (flowcyt... 目的　探讨生长抑素类似物SMS2 0 1 995抑制人胆管癌增殖时对SK ChA 1细胞细胞周期及cyclinD1 和p16蛋白的影响。方法　采用血清饥饿法将SK ChA 1细胞同步化 ,同步化释放后SMS2 0 1 995处理 48h收取不同时相细胞 ,以流式细胞仪 (flowcytometer)分析细胞周期相分布 ;并同时用免疫组化和原位杂交检测cyclinD1 和p16基因表达水平。结果　SMS处理SK ChA 1细胞后 6、12h可抑制SK ChA 1细胞经血刺激由G0 G1 进入S期。CyclinD1 蛋白表达在SMS处理SK ChA 1细胞后 6h明显减弱。p16蛋白在细胞周期各时相呈稳定性低表达。SK ChA 1细胞cyclinD1 和p16mRNA各时相表达无明显变化。结论　SMS诱导的cyclinD1 蛋白量降低可能与SMS干扰细胞G1 S期转换 ,阻遏SK ChA 展开更多

关键词 生长抑素 人胆管癌SK-ChA-1细胞 细胞周期 基因表达

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登革2型病毒NS1-NS2a基因真核表达载体的构建及鉴定

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作者 陈炜 王嘉丽 +7 位作者 高娜 田衍平 陈宗涛 徐小峰 张俊磊 刘丽梅 江雯 安静 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期557-559,共3页

目的构建登革2型病毒NS1-NS2a基因真核表达质粒。方法RT-PCR扩增NS1-NS2a基因片段后,将其克隆入真核表达载体pReceiver-M01a;通过PCR、酶切、测序和间接免疫荧光染色鉴定重组质粒。结果经PCR扩增、酶切和测序验证,重组质粒构建正确,命名... 目的构建登革2型病毒NS1-NS2a基因真核表达质粒。方法RT-PCR扩增NS1-NS2a基因片段后,将其克隆入真核表达载体pReceiver-M01a;通过PCR、酶切、测序和间接免疫荧光染色鉴定重组质粒。结果经PCR扩增、酶切和测序验证,重组质粒构建正确,命名为pRe-NS1-NS2a;重组质粒转染Vero细胞后,间接免疫荧光染色显示细胞质中有登革2型病毒特异性蛋白的表达。结论成功构建了真核表达质粒pRe-NS1-NS2a。 展开更多

关键词 登革2型病毒 NS1-NS2a基因 真核表达

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