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鼠ICOSIg融合蛋白腺病毒的制备及其对胰岛细胞系NIT-1的感染
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作者 许雪青 王丰 +3 位作者 陈雪丹 熊加祥 段文元 白云 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第21期2135-2137,共3页
目的制备mICOSIg腺病毒,研究其对胰岛细胞系NIT-1的感染情况,及可否使后者正确表达分泌mICOSIg。方法从pMIG-ICOSIg质粒上切下ICOSIg融合蛋白的表达框,插入pAdtrack-CMV中构建腺病毒穿梭质粒pAdmICOSIg,在Adeasy-1大肠杆菌中进行同源重... 目的制备mICOSIg腺病毒,研究其对胰岛细胞系NIT-1的感染情况,及可否使后者正确表达分泌mICOSIg。方法从pMIG-ICOSIg质粒上切下ICOSIg融合蛋白的表达框,插入pAdtrack-CMV中构建腺病毒穿梭质粒pAdmICOSIg,在Adeasy-1大肠杆菌中进行同源重组,随后转染293细胞进行病毒颗粒包装。收集病毒后感染NIT-1细胞,用免疫印迹证实mICOSIg在NIT-1细胞中的正确分泌表达。结果ICOSIg编码框被正确构建到pAdtrack-CMV中,并经测序证实无误。目的病毒成功包装出来,并能有效感染胰岛细胞系NIT-1,免疫印迹证实培养上清中存在正确大小的mICOSIg融合蛋白。结论成功制备了mICOSIg腺病毒,该病毒能有效将mICOSIg转入胰岛细胞系NIT-1,并能准确分泌mICOSIg蛋白。为研究1型糖尿病中ICOS信号通路在T细胞破坏胰岛细胞中的作用提供了有效的研究手段。 展开更多
关键词 ICOS 腺病毒 胰岛细胞
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Variation_91720拷贝数变异与食管鳞癌易感性的关联研究
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作者 刘曦 吴园园 +3 位作者 张坤 陶桓晟 官兴颖 杨康 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第24期2437-2440,共4页
目的探讨PIK3CA基因中Variation_91720拷贝数变异(copy number variation,CNV)与中国西南地区汉族人群食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)易感性的关联。方法选取149例中国西南地区ESCC患者和205例年龄、性... 目的探讨PIK3CA基因中Variation_91720拷贝数变异(copy number variation,CNV)与中国西南地区汉族人群食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)易感性的关联。方法选取149例中国西南地区ESCC患者和205例年龄、性别相匹配的健康人群作为研究对象,采用基于Taq Man实时定量PCR检测外周血中Variation_91720拷贝数;基于SYBR Green实时定量PCR检测34例ESCC患者癌及癌旁组织中PIK3CA基因mRNA表达量。结果Variation_91720拷贝数在ESCC患者和对照人群中分布有显著差异(P〈0.01),ESCC患者中Variation_91720拷贝数减少频率显著高于对照人群(P〈0.01,OR=5.617,95%CI=2.750-11.470),是ESCC发生的危险因素;Variation_91720拷贝数增加显著低于对照人群(P=0.028,OR=0.419,95%CI=0.193-0.911),是ESCC发生的保护因素。34例ESCC患者中癌组织的PIK3CA基因mRNA表达量显著高于癌旁组织(P=0.038),基因表达差异与相应的外周血基因组Variation_91720拷贝数变异之间无显著统计学差异(P=0.066)。结论 Variation_91720拷贝数变异与中国西南地区汉族人群ESCC的易感性相关联;其拷贝数减少与增加ESCC的易感性相关而其拷贝数增加与降低ESCC的易感性相关,可能成为ESCC的高危人群筛选和早期诊断生物标记物。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 拷贝数变异 Variation_91720 易感性
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