正交试验优选山茱萸超临界CO_2萃取条件及萃取物GC-MS分析的研究

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作者 陈华 张惠静 +1 位作者 张梦军 肖正华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1079-1082,共4页

目的优选山茱萸超临界CO2萃取条件及萃取物GC-MS分析。方法采用正交试验,考察萃取压力、萃取温度、CO2流量和时间四因素对山茱萸超临界CO2萃取物得率的影响并对萃取物成分进行GC-MS分析。结果①CO2萃取的最佳条件为:萃取压力35MPa,萃取... 目的优选山茱萸超临界CO2萃取条件及萃取物GC-MS分析。方法采用正交试验,考察萃取压力、萃取温度、CO2流量和时间四因素对山茱萸超临界CO2萃取物得率的影响并对萃取物成分进行GC-MS分析。结果①CO2萃取的最佳条件为:萃取压力35MPa,萃取温度50℃,CO2流量20L/h,萃取时间2h。GC-MS共分离出72个峰,鉴定了其中32种物质,占总组分的84.27%.主要成分为棕榈酸、9,12-十八碳二烯酸、9-十八碳烯酸及其相关酯类。结论优选了山茱萸超临界CO2萃取条件并对萃取物进行了GC-MS分析。 展开更多

关键词 山茱萸 超临界CO2萃取技术 正交试验 气相色谱-质谱联用技术

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从银杏叶中提取银杏黄酮甙的工艺比较及实验优化 被引量：9

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作者 张梦军 覃仁辉 +1 位作者 聂金媛 李志良 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第14期1272-1274,共3页

目的　选择微波辅助提取银杏黄酮甙的最佳条件 ,并对银杏黄酮甙的微波辅助提取法与常用的热浸泡法进行对比研究。方法　采用热浸泡法及微波辅助法提取银杏黄酮甙 ,同时对微波法进行正交和均匀实验优化 ,并用分光光度法测定提取干膏中的... 目的　选择微波辅助提取银杏黄酮甙的最佳条件 ,并对银杏黄酮甙的微波辅助提取法与常用的热浸泡法进行对比研究。方法　采用热浸泡法及微波辅助法提取银杏黄酮甙 ,同时对微波法进行正交和均匀实验优化 ,并用分光光度法测定提取干膏中的黄酮甙含量。结果　正交和均匀实验优化获得的最佳条件下的提取率和黄酮纯度基本相当。正交实验的最佳提取率为 2 12 .4mg g ,纯度为 61.9%;均匀实验的最佳提取率为 2 16.2mg g ,纯度为 5 7.1%。而热浸泡的提取率仅为 114 .6mg g ,纯度为 40 .1%。结论　微波辅助提取法的提取率和产物纯度均有显著提高 ,结果表明它是一种合适的提取法。 展开更多

关键词 银杏黄酮甙 微波辅助提取法 均匀设计 正交设计

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毛发水解液中混合氨基酸的分离富集方法研究 被引量：6

3

作者 张莉 李文 +1 位作者 肖正华 张世德 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第11期849-851,共3页

目的：研究毛发水解液中混合氨基酸的分离富集方法。方法：本文采用离子交换法ＵＳ双柱串联的方式使除盐和氨基酸的富集同时完成。结果：混合氨基酸成品纯度大于９９％ ，回收率为５４．２１％ 。结论：离子交换法是一种较简便有效的分... 目的：研究毛发水解液中混合氨基酸的分离富集方法。方法：本文采用离子交换法ＵＳ双柱串联的方式使除盐和氨基酸的富集同时完成。结果：混合氨基酸成品纯度大于９９％ ，回收率为５４．２１％ 。结论：离子交换法是一种较简便有效的分离富集混合氨基酸的方法。 展开更多

关键词 毛发 水解 氨基酸 分离 富集

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不同来源茶树油抑制LPS诱导TNF-α释放的体外实验 被引量：10

4

作者 王懿 王振维 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期324-327,共4页

目的比较国产和进口茶树油(tea tree oil,TTO)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导炎症的抑制作用。方法四唑盐(MTT)比色实验筛选无细胞毒性作用的TTO溶液浓度;各浓度TTO水溶液按量效和时效关系预处理细胞后,测定LPS激活RAW264.7细胞... 目的比较国产和进口茶树油(tea tree oil,TTO)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导炎症的抑制作用。方法四唑盐(MTT)比色实验筛选无细胞毒性作用的TTO溶液浓度;各浓度TTO水溶液按量效和时效关系预处理细胞后,测定LPS激活RAW264.7细胞分泌肿瘤坏死因子-α(tumor necrotic factor-alpha,TNF-α)的浓度,以观察国产和进口TTO水溶液对LPS诱导炎症的抑制效果。结果浓度低于0.001%的国产和进口TTO溶液对细胞无毒性作用;0.000125%～0.001%进口TTO和0.00025%～0.001%国产TTO各浓度组均能非常显著地抑制LPS诱导细胞释放TNF-α;0.00025%进口和国产TTO分别在3h和6h内对细胞有显著的保护作用。结论国产和进口TTO对LPS诱导的炎症均有显著抑制效果。 展开更多

关键词 茶树油 脂多糖 肿瘤坏死因子-Α 抑制作用

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茶树油灭活脊髓灰质炎病毒的试验观察 被引量：14

5

作者 王懿 王振维 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第13期1169-1170,共2页

目的　观察茶树油 (teatreeoil,TTO)对脊髓灰质炎病毒 (poliovirus ,PV)的杀灭效果 ,了解TTO对病毒的灭活能力。方法　根据消毒技术规范指定的方法 ,采用细胞感染试验测定病毒与各浓度TTO溶液作用前后感染细胞的滴度。结果　 0 .5 %TTO... 目的　观察茶树油 (teatreeoil,TTO)对脊髓灰质炎病毒 (poliovirus ,PV)的杀灭效果 ,了解TTO对病毒的灭活能力。方法　根据消毒技术规范指定的方法 ,采用细胞感染试验测定病毒与各浓度TTO溶液作用前后感染细胞的滴度。结果　 0 .5 %TTO作用 40min和 60min能分别灭活PV 4.3 3log10和 5 .5log10 ;1.0 %TTO作用 40min和 60min能灭活PV 5 .3 3log10和 5 .5log10。结论　TTO对悬液中的PV有明显的杀灭作用。 展开更多

关键词 茶树油(TTO) 脊髓灰质炎病毒 抗病毒活性

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二次微分示波极谱法测定血镉 被引量：3

6

作者 肖正华 阳明福 +1 位作者 李文 王巧玲 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期196-197,共2页

目的 :建立一种快速测定血镉的方法。方法 :二次微分示波极谱法。结果 :用本方法进行8次测定 ,其相对标准偏差RSD=3.34 %。在线性分析中 ,其线性方程为Y=2.90 +0.61X ,相关系数为r=0.9948 ,镉浓度在3.12×10 -9～2.35×10 -7 g... 目的 :建立一种快速测定血镉的方法。方法 :二次微分示波极谱法。结果 :用本方法进行8次测定 ,其相对标准偏差RSD=3.34 %。在线性分析中 ,其线性方程为Y=2.90 +0.61X ,相关系数为r=0.9948 ,镉浓度在3.12×10 -9～2.35×10 -7 g/ml范围内具有良好的线性关系 ,其检测下限为3.12×10 -9g/ml。样品回收率为94.00 %～105.33 %。结论 :本方法所用试剂简单 ,操作方便、快速 ,灵敏度高 ,可用于临床中快速测定血镉。 展开更多

关键词 钙中毒 血清诊断 二次微分 示波极谱法

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微流控免疫芯片富集/捕获肠出血性大肠杆菌O157∶H7的研究 被引量：2

7

作者 管潇 张惠静 +3 位作者 毕颖楠 张莉 郝敦玲 韦劲宇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期887-890,共4页

目的探讨基于免疫微珠的微流控芯片识别捕获EHEC O157：H7的效率。方法采用化学共价连接的方法将抗EHEC O157：H7抗体固定于粒径为50txm的玻璃微珠上，再将微珠填充于PDMS／玻璃复合芯片中，建立由流体控制、免疫反应构成的细菌分选芯... 目的探讨基于免疫微珠的微流控芯片识别捕获EHEC O157：H7的效率。方法采用化学共价连接的方法将抗EHEC O157：H7抗体固定于粒径为50txm的玻璃微珠上，再将微珠填充于PDMS／玻璃复合芯片中，建立由流体控制、免疫反应构成的细菌分选芯片；通过对进样流速、冲洗流速及冲洗时间的优化，在降低芯片对细菌的非特异性吸附的同时，增加芯片的特异性捕获效率。结果在10μl／min和5min的最佳冲洗流速和冲洗时间下，该芯片在10min内可完成对EHEC O157：H7的捕获，捕获效率达到40．00％-63．96％，且实验组与对照组有统计学差异（P〈0．01）。结论本研究构建的EHEC O157：H7识别芯片具有较高的捕获效率。 展开更多

关键词 微流控芯片 免疫微珠 细菌捕获

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人体液和发样中微量锌铜的双波长分光光度法同时测定 被引量：2

8

作者 张世德 夏仕文 魏明竟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期259-261,共3页

锌、铜是人体必需微量元素,人体液和组织中锌铜含量的变化与某些疾病的发生、发展关系密切。如急性白血症和各种感染急症中血清铜浓度增高,血清铜的测定可用于Wilson氏综合症的诊断;短身材和侏儒综合症与锌缺乏有关。

关键词 锌 铜 分光光度法 血液 尿 毛发

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机械拉伸下人肺上皮细胞增殖及整联蛋白再分布 被引量：2

9

作者 张惠静 杨力 +2 位作者 蔡绍皙 卢晓 王远亮 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第14期1254-1257,共4页

目的　探讨机械拉伸应变对人肺上皮细胞增殖及其膜受体———整联蛋白α5、β1 再分布的调控作用。方法　建立体外周期性拉伸装置 ,应用流式细胞术测定细胞的增殖活性 ,激光共聚焦显微镜分析整联蛋白α5、β1 再分布。结果　在应变为 15... 目的　探讨机械拉伸应变对人肺上皮细胞增殖及其膜受体———整联蛋白α5、β1 再分布的调控作用。方法　建立体外周期性拉伸装置 ,应用流式细胞术测定细胞的增殖活性 ,激光共聚焦显微镜分析整联蛋白α5、β1 再分布。结果　在应变为 15 % ,频率为 2 0次 min、40次 min的拉伸刺激下 ,2 4h后 ,细胞的增殖活性指数明显降低 ,H72 7细胞的DNA合成受到显著抑制。在 40次 min的拉伸频率下 ,整联蛋白α5、β1 的分布发生重组并向基底层转移 ,形成局部粘附连接。结论　整联蛋白α5、β1 展开更多

关键词 机械应力 人肺上皮细胞 整联蛋白 粘着斑

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循环肿瘤细胞检测技术的发展现状及展望 被引量：3

10

作者 张惠静 毕颖楠 郝敦玲 《中国测试》 CAS 2010年第5期1-4,共4页

循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cells,CTCs)存在于肿瘤患者外周血中,特异、敏感地检测CTCs对肿瘤患者的预后评价和临床的个体化治疗均有重要意义。该文在综述CTCs的富集、筛选和鉴定技术的基础之上,对微流控芯片技术在这一领域的应用... 循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cells,CTCs)存在于肿瘤患者外周血中,特异、敏感地检测CTCs对肿瘤患者的预后评价和临床的个体化治疗均有重要意义。该文在综述CTCs的富集、筛选和鉴定技术的基础之上,对微流控芯片技术在这一领域的应用做了重点阐述。 展开更多

关键词 循环肿瘤细胞 检测 微流控芯片

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脲酶-Fe_3O_4磁性纳米粒子的制备及表征 被引量：1

11

作者 肖正华 任建敏 +2 位作者 张梦军 王云霞 王振维 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第13期1412-1414,共3页

目的应用微乳法制备脲酶-Fe3O4磁性纳米粒子并初步探讨其相关特性,以期获得一种合适的口服脲酶制剂。方法以碳化二亚胺为耦联剂,制备脲酶-Fe3O4磁性纳米粒子,后用Bradford蛋白测定方法测定脲酶耦联量;运用TEM测定其粒径,用FTIR来检测脲... 目的应用微乳法制备脲酶-Fe3O4磁性纳米粒子并初步探讨其相关特性,以期获得一种合适的口服脲酶制剂。方法以碳化二亚胺为耦联剂,制备脲酶-Fe3O4磁性纳米粒子,后用Bradford蛋白测定方法测定脲酶耦联量;运用TEM测定其粒径,用FTIR来检测脲酶与Fe3O4磁性纳米粒子的耦联。结果Fe3O4磁性纳米粒子与脲酶耦联后,其粒径稍有增大;Fe3O4磁性纳米粒子耦联脲酶的量与其粒径大小、碳化二亚胺/Fe3O4纳米粒子(W/W)等因素有关,粒径越小,耦联剂用量越大,耦联脲酶的量越高;Fe3O4磁性纳米粒子平均粒径为180nm,当温度为4℃,碳化二亚胺与Fe3O4磁性纳米粒子用量比为1∶2(W/W)时,脲酶的耦联率约为4·75%(W/W);固定化脲酶的活性约保留原酶活性的30%。结论Fe3O4磁性纳米粒子可用于酶、蛋白质等药物的固定化。 展开更多

关键词 纳米粒子 FE3O4 脲酶

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PELA-BSA微球体外释药特性与释药方程 被引量：2

12

作者 任建敏 肖正华 张梦军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期173-175,共3页

目的　研究白蛋白PELA微球的体外释药特性 ,得出释药方程。方法　应用复乳法制备牛白蛋白PELA微球 ,探讨亲水相大分子 β CD、PEG、明胶对“爆释作用”影响 ,并对实验数据应用计算机拟合 ,获得通用的微球释药方程。 结果　内水相的亲水... 目的　研究白蛋白PELA微球的体外释药特性 ,得出释药方程。方法　应用复乳法制备牛白蛋白PELA微球 ,探讨亲水相大分子 β CD、PEG、明胶对“爆释作用”影响 ,并对实验数据应用计算机拟合 ,获得通用的微球释药方程。 结果　内水相的亲水大分子在提高微球蛋白运载量、成球率的同时 ,可降低牛白蛋白爆释率 65 %以上 ;运用计算机编程得出的释药方程 ,其释药量随时间t的指数成正比 ,t的指数值大多在 1 2和 1范围内。结论　通用释药方程更符合控释微球的实际释药 ,适用性更广。 展开更多

关键词 微球 可生物降解

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RGD多肽功能化的微流控芯片识别/捕获肿瘤细胞的研究 被引量：1

13

作者 毕颖楠 张惠静 +1 位作者 管潇 邓金 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第22期2256-2258,共3页

目的探讨经RGD多肽功能化后的微流控芯片系统识别/捕获肿瘤细胞的效果。方法采用化学共价连接的方法固定RGD多肽,建立由流体控制系统、免疫反应系统构成的细胞识别芯片系统,用于细胞的筛选/捕获;选用不同密度的细胞进行进样试验,考察不... 目的探讨经RGD多肽功能化后的微流控芯片系统识别/捕获肿瘤细胞的效果。方法采用化学共价连接的方法固定RGD多肽,建立由流体控制系统、免疫反应系统构成的细胞识别芯片系统,用于细胞的筛选/捕获;选用不同密度的细胞进行进样试验,考察不同细胞密度对通道内细胞数量的影响,并讨论不同的孵育时间对细胞捕获的影响。结果随着进样细胞密度的增加,进入通道内的细胞明显增多;此功能化后的芯片系统在15min内对A549的捕获率为90%,在20min内可完全将细胞捕获于管壁。结论经RGD多肽修饰的微流控芯片系统可在短时间内对A549细胞进行有效的筛选,且在细胞数量很低时,也能对其进行捕获。 展开更多

关键词 生物功能化 微流控芯片 细胞捕获

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氨气敏电极终点法测定腺苷脱氨酶活性 被引量：1

14

作者 阳明福 李文 +1 位作者 张世德 牟绍洪 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期59-61,共3页

目的：建立血清腺苷脱氨酶传感器分析方法。方法：血清样品与腺苷溶液恒温反应３０ｍｉｎ。三氯乙酸终止反应，调溶液ｐＨ值９．０，氨气敏电极测定，标准曲线法定量。结果：线性范围５～１００Ｕ／Ｌ，日内、日间相对标准偏差（ＲＳＤ... 目的：建立血清腺苷脱氨酶传感器分析方法。方法：血清样品与腺苷溶液恒温反应３０ｍｉｎ。三氯乙酸终止反应，调溶液ｐＨ值９．０，氨气敏电极测定，标准曲线法定量。结果：线性范围５～１００Ｕ／Ｌ，日内、日间相对标准偏差（ＲＳＤ）分别为２．８６％、３．９２％，平均回收率１０１．７％。结论：方法线性范围宽，准确度高，重现性好，且操作简便，无需较多的酶试剂，可用于临床样品测定。 展开更多

关键词 腺苷脱氨酶 活性 氨气敏电极 终点法

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磁共振单克隆抗体免疫靶向对比剂McAb-DMP的制备

15

作者 陈伟 张绍祥 +1 位作者 丁仕义 任建敏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期634-635,共2页

目的　探讨磁共振单克隆抗体靶向对比剂McAb DMP的制备方法。方法　以葡聚糖为载体 ,采用氧化法制备免疫靶向磁性微粒。结果　制备的磁性纳米微粒与单抗相比保持了较高的结合活性和免疫活性。结论　合成CEA单克隆抗体标记磁性微粒 ,保... 目的　探讨磁共振单克隆抗体靶向对比剂McAb DMP的制备方法。方法　以葡聚糖为载体 ,采用氧化法制备免疫靶向磁性微粒。结果　制备的磁性纳米微粒与单抗相比保持了较高的结合活性和免疫活性。结论　合成CEA单克隆抗体标记磁性微粒 ,保证了结合活性免疫活性 。 展开更多

关键词 磁共振 单克隆抗体 免疫靶向 对比剂 McAb-DMP 制备 葡聚糖 磁性微粒

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机械拉伸对人肺上皮细胞粘附及[Ca^(2+)]i的影响

16

作者 张惠静 秦建 +3 位作者 蔡绍皙 卢晓 王远亮 杨力 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期953-956,共4页

目的　探讨周期性拉伸应变对人肺上皮细胞H72 7的力学性质及其 [Ca2 + ]i的调控作用。方法　应用微管吸吮系统测定细胞与基底间的粘附力和细胞的铺展面积 ,用荧光探针Fluo 3 /AM测定拉伸应变对人肺上皮细胞H72 7[Ca2 + ]i的影响。结果... 目的　探讨周期性拉伸应变对人肺上皮细胞H72 7的力学性质及其 [Ca2 + ]i的调控作用。方法　应用微管吸吮系统测定细胞与基底间的粘附力和细胞的铺展面积 ,用荧光探针Fluo 3 /AM测定拉伸应变对人肺上皮细胞H72 7[Ca2 + ]i的影响。结果　在应变为 15 %,频率为 40次 min的拉伸刺激下 ,与其静态对照组相比 ,细胞与基底间的粘附力和细胞的铺展面积均增加 ;拉伸 5min后 ,[Ca2 + ]i比对照组有明显增加 ,用三七总皂苷阻断胞内Ca2 + 离子通道后 ,细胞对应变的响应仍表现出 [Ca2 + ]i的升高 ,但与未加三七总皂苷的实验组相比 ,[Ca2 + ]i响应应变后的升高由原来的 3 .4倍的增加降低为 1.5倍的增加。结论　在人肺上皮细胞H72 7响应周期性拉伸应变的过程中 ,[Ca2 + ]i的升高既有胞外钙内流的参与 ,也有胞内钙库的释放作用 。 展开更多

关键词 拉伸 人肺上皮细胞 粘附 胞内钙

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微波消解-光度法测定肺组织中磷含量

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作者 熊刚 张莉 +1 位作者 肖正华 张世德 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期394-395,共2页

目的研究肺组织中磷的分析方法。方法利用微波处理试样 ,并采用光度法测定消解液中的磷含量。结果该法的测定结果与湿法消化、干法消化相当 ;磷钼蓝的最大吸收波长为800nm ,表观摩尔吸光系数为2.32×104 L·mol-1·cm-1,磷... 目的研究肺组织中磷的分析方法。方法利用微波处理试样 ,并采用光度法测定消解液中的磷含量。结果该法的测定结果与湿法消化、干法消化相当 ;磷钼蓝的最大吸收波长为800nm ,表观摩尔吸光系数为2.32×104 L·mol-1·cm-1,磷在0～1μg/ml内符合比尔定律。结论本法具有快速 ,灵敏度、准确度、精密度高的优点 ,适用于生物试样中磷的测定。 展开更多

关键词 肺组织 磷 微波消解法 光度法

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茜素红S线扫极谱法测定人血清白蛋白

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作者 阳明福 李文 王云霞 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期446-448,共3页

目的　建立人血清白蛋白的电化学分析方法。方法　以茜素红S为电化学活性探针 ,与HSA在pH 4 0的柠檬酸 Na2 HPO4 缓冲溶液中反应 ,通过检测茜素红S反应前后电流的变化测定HSA。结果　以 10 - 5mol L茜素红S为探针 ,线扫极谱测定HSA的... 目的　建立人血清白蛋白的电化学分析方法。方法　以茜素红S为电化学活性探针 ,与HSA在pH 4 0的柠檬酸 Na2 HPO4 缓冲溶液中反应 ,通过检测茜素红S反应前后电流的变化测定HSA。结果　以 10 - 5mol L茜素红S为探针 ,线扫极谱测定HSA的线性范围为 5～ 60 0mg L ,检测限 0 8mg L ,相对标准偏差 3 8% ,样品测定回收率 97%～ 10 8% ,平均回收率为 10 4 2 %。结论　茜素红S线扫极谱法测定人血清白蛋白 ,灵敏、准确、线性范围宽 ,需样量少 ,且操作简便 ,可用于临床样品测定。 展开更多

关键词 茜素红S线扫极谱法 测定 血清 白蛋白

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