目的检测干扰素诱导蛋白IFIT1(interferon-induced protein with tetratricopetide repeats1)在小鼠各器官组织的表达状况,并在此基础上探讨颈交感神经阻滞(SB)对烧伤后早期小鼠肝脏IFIT1表达的影响。方法雄性C57/129小鼠50只,分为对照...目的检测干扰素诱导蛋白IFIT1(interferon-induced protein with tetratricopetide repeats1)在小鼠各器官组织的表达状况,并在此基础上探讨颈交感神经阻滞(SB)对烧伤后早期小鼠肝脏IFIT1表达的影响。方法雄性C57/129小鼠50只,分为对照组和SB治疗组,TBSA15%～20%Ⅲ度小鼠烧伤模型,分别于烧伤前、烧伤后1、6、12h和24h取肝组织,采用免疫印迹法(Western blot)观察IFIT1的蛋白表达情况,同时提取正常小鼠心、肝、脾、肺、肾、小肠、淋巴细胞和骨骼肌组织RNA,以RT-PCR检测IFIT1表达情况。结果RT-PCR结果显示IFIT1在正常小鼠各组织均有表达,但组织间的表达量存在差异。Western blot结果表明对照组烧伤后肝组织IFIT1表达显著增高(P<0.01),烧伤后SB治疗组IFIT1表达量较对照组相应时相点降低非常显著(P<0.01)。结论IFIT1在小鼠体内广泛表达。SB对严重创伤的治疗作用可能是通过抑制肝内IFIT1表达来实现的。展开更多
目的：观察小鼠应激相关蛋白IFIT1（Interferon-induced protein with tetratricopetide repeats1）和JAB1（c-Jun平activation共处五项原则domain-binding protein 1）在肝脏的表达的细胞定位及氯胺酮对烧伤后早期肝脏IFIT1和JAB1表达...目的：观察小鼠应激相关蛋白IFIT1（Interferon-induced protein with tetratricopetide repeats1）和JAB1（c-Jun平activation共处五项原则domain-binding protein 1）在肝脏的表达的细胞定位及氯胺酮对烧伤后早期肝脏IFIT1和JAB1表达的影响，初步探讨氯胺酮调节炎症反应的分子机制。方法：将15只健康C57／129小鼠随机分为3组（n=5），正常对照组、烧伤组、烧伤＋氯胺酮组。采用TBSA 15～20％Ⅲ度小鼠烧伤模型；氯胺酮10mg／kg，肌肉注射，烧伤15min给予。分别于烧伤后4h脱臼处死，取肝。采用免疫印迹法（Western blot）察各组肝IFIT1和JAB1的表达情况。取正常对照组肝组织作病理切片，行免疫组织化学方法对IFIT1和JAB1的表达做细胞定位。结果：烧伤组IFIT1表达较正常对照组显著增高（P〈0．01）．烧伤组JAB1表达较正常对照组显著降低（P〈0．01）：氯胺酮治疗组IFIT1表达较正常对照组、烧伤对照组显著降低（P〈0．01）．氯胺酮治疗组JAB1表达较正常对照组显著降低（P〈0．05）、较烧伤组显著升高（P〈0．05）。免疫组织化学方法显示．IFIT1在肝细胞胞浆表达为阳性．JAB1在肝细胞胞浆和胞核均表达为阳性。结论：烧伤早期小鼠肝组织IFIT1表达增高而JJAB1表达降低，氯胺酮可降低烧伤早期小鼠肝组织IFIT1的高表达，增高JAB1表达；氯胺酮可通过调控严重烧伤应激中IFIT1和JAB1的表达而在全身炎性反应综合症（Systemic inflammatory response syndrome SIRS）中发挥作用。展开更多
目的构建抑制大鼠ERp29基因表达的重组质粒,并在IEC-6细胞中发挥作用。方法根据大鼠ERp29的基因序列,设计合成含有发夹结构的寡核苷酸片段,经退火形成双链后克隆至pAVU6+27载体质粒中,对阳性重组子进行酶切和测序鉴定后转染正常IEC-6细...目的构建抑制大鼠ERp29基因表达的重组质粒,并在IEC-6细胞中发挥作用。方法根据大鼠ERp29的基因序列,设计合成含有发夹结构的寡核苷酸片段,经退火形成双链后克隆至pAVU6+27载体质粒中,对阳性重组子进行酶切和测序鉴定后转染正常IEC-6细胞,通过PCR方法对siERp29干扰片段进行鉴定,并采用W estern b lot检测ERp29蛋白水平的表达变化。结果重组质粒经双酶切后,有目的条带出现,提示ERp29干扰片段已克隆至pAVU6+27载体质粒中,DNA测序结果显示插入序列与预先设计完全一致。重组质粒转染IEC-6细胞后经G418筛选,成功获得阳性克隆,W estern b lot结果显示ERp29的蛋白水平表达显著下降。结论成功构建ERp29基因RNA干扰表达质粒,并在IEC-6细胞中发挥抑制作用,这为深入研究该基因在电离辐射中的作用奠定了基础。展开更多
文摘目的检测干扰素诱导蛋白IFIT1(interferon-induced protein with tetratricopetide repeats1)在小鼠各器官组织的表达状况,并在此基础上探讨颈交感神经阻滞(SB)对烧伤后早期小鼠肝脏IFIT1表达的影响。方法雄性C57/129小鼠50只,分为对照组和SB治疗组,TBSA15%～20%Ⅲ度小鼠烧伤模型,分别于烧伤前、烧伤后1、6、12h和24h取肝组织,采用免疫印迹法(Western blot)观察IFIT1的蛋白表达情况,同时提取正常小鼠心、肝、脾、肺、肾、小肠、淋巴细胞和骨骼肌组织RNA,以RT-PCR检测IFIT1表达情况。结果RT-PCR结果显示IFIT1在正常小鼠各组织均有表达,但组织间的表达量存在差异。Western blot结果表明对照组烧伤后肝组织IFIT1表达显著增高(P<0.01),烧伤后SB治疗组IFIT1表达量较对照组相应时相点降低非常显著(P<0.01)。结论IFIT1在小鼠体内广泛表达。SB对严重创伤的治疗作用可能是通过抑制肝内IFIT1表达来实现的。
文摘目的：观察小鼠应激相关蛋白IFIT1（Interferon-induced protein with tetratricopetide repeats1）和JAB1（c-Jun平activation共处五项原则domain-binding protein 1）在肝脏的表达的细胞定位及氯胺酮对烧伤后早期肝脏IFIT1和JAB1表达的影响，初步探讨氯胺酮调节炎症反应的分子机制。方法：将15只健康C57／129小鼠随机分为3组（n=5），正常对照组、烧伤组、烧伤＋氯胺酮组。采用TBSA 15～20％Ⅲ度小鼠烧伤模型；氯胺酮10mg／kg，肌肉注射，烧伤15min给予。分别于烧伤后4h脱臼处死，取肝。采用免疫印迹法（Western blot）察各组肝IFIT1和JAB1的表达情况。取正常对照组肝组织作病理切片，行免疫组织化学方法对IFIT1和JAB1的表达做细胞定位。结果：烧伤组IFIT1表达较正常对照组显著增高（P〈0．01）．烧伤组JAB1表达较正常对照组显著降低（P〈0．01）：氯胺酮治疗组IFIT1表达较正常对照组、烧伤对照组显著降低（P〈0．01）．氯胺酮治疗组JAB1表达较正常对照组显著降低（P〈0．05）、较烧伤组显著升高（P〈0．05）。免疫组织化学方法显示．IFIT1在肝细胞胞浆表达为阳性．JAB1在肝细胞胞浆和胞核均表达为阳性。结论：烧伤早期小鼠肝组织IFIT1表达增高而JJAB1表达降低，氯胺酮可降低烧伤早期小鼠肝组织IFIT1的高表达，增高JAB1表达；氯胺酮可通过调控严重烧伤应激中IFIT1和JAB1的表达而在全身炎性反应综合症（Systemic inflammatory response syndrome SIRS）中发挥作用。
文摘目的构建抑制大鼠ERp29基因表达的重组质粒,并在IEC-6细胞中发挥作用。方法根据大鼠ERp29的基因序列,设计合成含有发夹结构的寡核苷酸片段,经退火形成双链后克隆至pAVU6+27载体质粒中,对阳性重组子进行酶切和测序鉴定后转染正常IEC-6细胞,通过PCR方法对siERp29干扰片段进行鉴定,并采用W estern b lot检测ERp29蛋白水平的表达变化。结果重组质粒经双酶切后,有目的条带出现,提示ERp29干扰片段已克隆至pAVU6+27载体质粒中,DNA测序结果显示插入序列与预先设计完全一致。重组质粒转染IEC-6细胞后经G418筛选,成功获得阳性克隆,W estern b lot结果显示ERp29的蛋白水平表达显著下降。结论成功构建ERp29基因RNA干扰表达质粒,并在IEC-6细胞中发挥抑制作用,这为深入研究该基因在电离辐射中的作用奠定了基础。
