重组胰岛素样生长因子-Ⅰ促进辐射损伤小鼠血小板水平的恢复 被引量：2

1

作者 陈石磊 陈芳 +4 位作者 许杨 王崧 王艾平 粟永萍 王军平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第22期2340-2344,共5页

目的观察重组人胰岛素样生长因子-Ⅰ(recombinant human insulin-like growth factor-Ⅰ,rhIGF-Ⅰ)对辐射损伤小鼠血小板水平的促恢复作用及其可能机制。方法健康BALB/c小鼠按完全随机法分为3组,其中2组小鼠接受全身一次性5 Gyγ射线辐... 目的观察重组人胰岛素样生长因子-Ⅰ(recombinant human insulin-like growth factor-Ⅰ,rhIGF-Ⅰ)对辐射损伤小鼠血小板水平的促恢复作用及其可能机制。方法健康BALB/c小鼠按完全随机法分为3组,其中2组小鼠接受全身一次性5 Gyγ射线辐照后,rhIGF-Ⅰ处理组连续7 d皮下注射rhIGF-Ⅰ,另一组(辐照对照组)及正常未辐照组皮下注射等量生理盐水。辐照后不同时相点尾静脉采血检测血常规,辐照后第14天病理切片观察骨髓组织变化;流式细胞仪分析未辐照小鼠Sca+-Ⅰ细胞经rhIGF-Ⅰ处理后CD41阳性率变化及rhIGF-Ⅰ对辐照所致巨核祖细胞凋亡的影响。结果rhIGF-Ⅰ处理组小鼠在辐照后11～17 d期间血小板数量显著高于辐照对照组(P<0.01)。体外分离培养的rhIGF-Ⅰ处理组Sca+-Ⅰ细胞CD41阳性率及c-kit+细胞阳性率分别为(24.10±2.43)%、(47.84±6.02)%,显著高于空白对照组(15.40±3.25)%和辐照对照组(24.68±5.83)%;巨核祖细胞辐照后给予rhIGF-Ⅰ处理,其凋亡率为(38.76±2.85)%,也明显低于辐照对照组的(50.58±4.32)%,上述结果差异均具有统计学意义(P<0.05)。此外,病理切片显示,rhIGF-Ⅰ处理组小鼠骨髓有核细胞和巨核细胞数目也显著高于辐照对照组。结论 rhIGF-Ⅰ可能通过促进造血干细胞向巨核细胞分化并抑制巨核祖细胞凋亡,从而保护辐照所致的巨核细胞损伤并促进血小板水平的恢复。 展开更多

关键词 胰岛素样生长因子-Ⅰ 辐照损伤 血小板

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新型异黄酮T1对辐射引起的造血损伤的防护作用 被引量：1

2

作者 郝玉徽 罗圣霖 +4 位作者 刘晶 任洞 邹德兴 李蓉 粟永萍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期878-882,共5页

目的探讨新型异黄酮化合物(T1)对雄性SD大鼠由辐射引起的造血系统损伤的防护作用。方法将60只SD大鼠分为正常对照组、辐射组、T1预防组和T1治疗组,每组15只。4.5 Gy60Coγ射线一次性全身照射大鼠(正常对照组除外),T1预防组和T1治疗组大... 目的探讨新型异黄酮化合物(T1)对雄性SD大鼠由辐射引起的造血系统损伤的防护作用。方法将60只SD大鼠分为正常对照组、辐射组、T1预防组和T1治疗组,每组15只。4.5 Gy60Coγ射线一次性全身照射大鼠(正常对照组除外),T1预防组和T1治疗组大鼠分别在照射前和照射后按剂量为10 mg/kg腹腔注射T1溶液,辐射组在受照后不给予任何处理。动态观察各组大鼠受照前后体质量和外周血WBC 4周内的变化,比较照后1周和4周各组骨髓的病理学变化,并利用比色法测量照后1周各组肝脏组织抗氧化酶的活性。结果受照大鼠的体质量与正常对照组相比,体质量明显减轻(P<0.05);在照后第1、4、5天,T1预防组和T1治疗组的WBC明显高于辐射组(P<0.05),在T1预防组和T1治疗组间差异不明显,从第6天开始,WBC进入恢复期,除正常对照组外,各组WBC无明显差异(P>0.05);受照后1周,辐射组骨髓造血细胞明显减少伴脂肪组织显著增生,T1预防组和T1治疗组损伤相对较轻;在T1预防组,肝脏匀浆CAT、GSH-Px活力较辐射组明显升高,MDA水平明显降低(4.06±0.19vs5.61±0.46,P<0.05)。结论 T1可以减缓照后WBC的下降速度,使WBC的回升时间提前,并对辐射造成的骨髓损伤具有一定的防护作用,其机制可能与消除体内过量有害自由基有关。 展开更多

关键词 新型异黄酮 辐射防护 造血细胞

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照前给予去甲肾上腺素增强电离辐射对小鼠血小板生成能力的损伤作用

3

作者 李凤菊 杜长虹 +5 位作者 杨可 雷鑫 汤勇 陈石磊 许杨 王军平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期724-730,共7页

目的探讨去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)对电离辐射(ionizing radiation,IR)损伤小鼠血小板水平的影响作用。方法 80只健康雄性C57BL/6小鼠按完全随机的方法分为未辐射对照组(PBS)、未辐射给药组(NE)、辐射对照组(PBS+IR)和辐射给药组... 目的探讨去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)对电离辐射(ionizing radiation,IR)损伤小鼠血小板水平的影响作用。方法 80只健康雄性C57BL/6小鼠按完全随机的方法分为未辐射对照组(PBS)、未辐射给药组(NE)、辐射对照组(PBS+IR)和辐射给药组(NE+IR),每组20只小鼠。给药组给予腹腔注射NE(1.5 mg/kg),对照组给予腹腔注射等体积PBS,处理24 h后辐射组进行全身一次性6 Gyγ射线照射。辐射后不同时间点尾静脉采血检测小鼠血常规,并于辐射后第9天使用HE染色观察小鼠骨髓变化,流式细胞术分析小鼠骨髓造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSCs)比例变化以及巨核细胞凋亡、周期的变化。结果未辐射时,NE组小鼠给药后3~10 d血小板数量显著高于PBS组(P<0.05);HSCs占骨髓Lineage细胞的比例:NE组为(1.44±0.08)%,PBS组为(1.05±0.10)%,两组差异具有统计学意义(P<0.05);同时,NE也具有促进离体培养小鼠HSCs的增殖,并且在药物浓度100 nmol/m L的范围内具有剂量效应依赖关系;HE染色显示,NE组的骨髓有核细胞和巨核细胞数目显著高于PBS组(P<0.05);巨核系祖细胞周期的结果显示,NE组G0/G1期细胞百分比减少约(12.10±3.12)%、S期细胞比例增加约(8.78±1.05)%,与PBS组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。辐射后,NE+IR组小鼠7~25d血小板数量低于PBS+IR组(P<0.05);HSCs占骨髓Lineage细胞的比例:NE+IR组为(0.07±0.01)%,PBS+IR组为(0.27±0.03)%,两组差异具有统计学意义(P<0.05);HE染色结果显示,NE+IR组的骨髓有核细胞和巨核细胞数目显著低于PBS+IR组(P<0.05);巨核祖细胞凋亡结果显示,NE+IR组凋亡率为(84.46±5.09)%,明显高于PBS+IR组[(54.18±3.18)%,(P<0.05)]。结论去甲肾上腺素使造血干细胞、巨核祖细胞过度活化,从而增加了小鼠对电离辐射的敏感性,使血小板生成减少。 展开更多

关键词 去甲肾上腺素 血小板 辐射损伤

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金属硫蛋白和锌对急性贫铀中毒大鼠的解毒效果研究 被引量：3

4

作者 任泂 李蓉 +4 位作者 刘晶 陈世国 邹德兴 郝玉徽 粟永萍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期311-314,共4页

目的探索金属硫蛋白和锌对急性贫铀中毒的解毒效果。方法给予Wistar大鼠贫铀溶液造成急性贫铀中毒的动物模型,利用ZnSO4和金属硫蛋白(metallothionein,MT)解毒。Wistar大鼠70只,随机分为7组,每组10只:①正常组(N);②贫铀组(DU);③ZnSO4... 目的探索金属硫蛋白和锌对急性贫铀中毒的解毒效果。方法给予Wistar大鼠贫铀溶液造成急性贫铀中毒的动物模型,利用ZnSO4和金属硫蛋白(metallothionein,MT)解毒。Wistar大鼠70只,随机分为7组,每组10只:①正常组(N);②贫铀组(DU);③ZnSO4预防组(Zn-P);④MT预防组(MT-P);⑤ZnSO4治疗组(Zn-T);⑥MT治疗组(MT-T);⑦ZnSO4预防+MT治疗组(Zn+MT)。测定血、尿和肾脏标本的铀含量。观察内/外源性的MT作用对大鼠急性贫铀中毒的解毒效果,同时观察不同解毒措施对血常规和肝、肾功能的影响以及肾脏病理学变化。结果Zn预防组、MT预防组和MT治疗组均有明显的解毒效果[肾脏和尿液中贫铀含量明显增高(P<0.05)],其中又以Zn预防组的解毒效果最好,病理变化较轻。同时发现在使用MT或Zn进行干预的各个干预组中,没有表现出明显的血常规和肝、肾功能指标的改变。结论预防性给予ZnSO4诱导产生内源性金属硫蛋白,能更好发挥对贫铀中毒的解毒效果。 展开更多

关键词 金属硫蛋白 锌 贫铀 解毒

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含邻苯二酚基团的黄酮化合物促排急性贫铀中毒效果的研究 被引量：2

5

作者 李蓉 任洞 +5 位作者 杨峥嵘 刘晶 艾国平 徐辉 粟永萍 程天民 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第24期2251-2253,共3页

目的寻找对急性贫铀中毒促排效果较好的含邻苯二酚基团的黄酮类化合物。方法给予Wistar大鼠贫铀20mg/kg,立即给予黄酮类化合物10mg/kg,连续3d,并设邻苯二酚类化合物8102及DMSO做为对照。3d后做肾功能检测和肾脏、肝脏、骨髓、脾脏等病... 目的寻找对急性贫铀中毒促排效果较好的含邻苯二酚基团的黄酮类化合物。方法给予Wistar大鼠贫铀20mg/kg,立即给予黄酮类化合物10mg/kg,连续3d,并设邻苯二酚类化合物8102及DMSO做为对照。3d后做肾功能检测和肾脏、肝脏、骨髓、脾脏等病理观察。结果8102和F1组血清肌酐和尿素氮含量显著下降,F2、T1和T2组的肌酐浓度也显著降低。病理观察显示,T2组肾脏、肝脏几乎无明显损伤;8102和T1次之;F1和QU组肾损伤较重;DMSO组的损伤最重,但较贫铀组轻。结论T2对贫铀敏感器官的保护最好;F1可改善肾功能。这两种化合物均具有做为贫铀促排剂的潜能。 展开更多

关键词 贫铀 促排 黄酮类化合物 邻苯二酚基团

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中药膏剂“CYG”促猪大面积全厚皮肤缺损创面愈合的研究

6

作者 闫国和 侯爱莲 +5 位作者 孙慧勤 廖彬 方海立 程天民 王军平 粟永萍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第24期2409-2413,共5页

目的观测中药膏剂"CYG"对大面积全厚皮肤缺损创面的促愈效果并探讨其促愈机制。方法贵州小型猪7只,每只背部脊柱两侧近脊柱均有全厚皮肤缺损创面(大小10.5cm×8.5cm)各2个,共28个创面。右侧的14个创面用中药膏剂"CYG... 目的观测中药膏剂"CYG"对大面积全厚皮肤缺损创面的促愈效果并探讨其促愈机制。方法贵州小型猪7只,每只背部脊柱两侧近脊柱均有全厚皮肤缺损创面(大小10.5cm×8.5cm)各2个,共28个创面。右侧的14个创面用中药膏剂"CYG"治疗作实验组,同体左侧创面作对照。观察伤后7周内各创面愈合时间、愈合率及愈合过程病理变化,并通过S-P法层粘蛋白(Laminin)免疫组化染色观测其肉芽组织内血管生成变化,免疫组化染色、RT-PCR法检测转化生长因子-β1(transforming growth factor beta one,TGF-β1)表达。结果伤后7～44d,治疗组与对照组创面平均残留面积及愈合残留面积百分率比较,差异有统计学意义(P<0.01),治疗组于伤后32～34d完全愈合,较对照组提前10～12d,且创面质地细腻、平整。愈合过程中治疗组肉芽组织生长早且旺盛,肉芽组织中Laminin、成纤维细胞、毛细血管及胶原含量丰富;治疗组各时相点创面TGF-β1表达较对照组低,同组TGF-β1表达:中期(伤后15～35d)>早期(伤后7～14d)>晚期(伤后66～49d)。结论中药膏剂"CYG"对大面积全厚皮肤缺损创面有良好促愈作用,且创面愈合质量高,并可能对创面瘢痕形成具抑制作用。 展开更多

关键词 种植体螺丝 折断 无损取出

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周细胞在创面修复早期血管生成中的分布与意义 被引量：4

7

作者 孙慧勤 冯一梅 +4 位作者 章容 王明科 郭德玉 阎国和 邹仲敏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1135-1139,共5页

目的研究周细胞在创面修复肉芽组织血管生成过程中出现、分布规律与意义。方法采用常规免疫组化、双重免疫组化染色,电镜技术及形态定量分析方法观测小鼠皮肤全层切割伤模型(1～9d),特别是早期1、3、5、7d创面修复肉芽组织内血管生成过... 目的研究周细胞在创面修复肉芽组织血管生成过程中出现、分布规律与意义。方法采用常规免疫组化、双重免疫组化染色,电镜技术及形态定量分析方法观测小鼠皮肤全层切割伤模型(1～9d),特别是早期1、3、5、7d创面修复肉芽组织内血管生成过程中,周细胞的出现、分布规律。离体采用转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导分化的周细胞前体细胞10T1/2模型,观察其在细胞外基质胶立体培养的变化。结果周细胞可见于肉芽组织血管生成早期(1～7d),且周细胞阳性染色的细胞数较内皮细胞多。肉芽组织内毛细血管和周细胞的数量在伤后持续增加,直到伤后5d达峰值。周细胞在肉芽组织中还可形成条索状、腔样结构;离体培养的周细胞在细胞外基质胶内能够形成管腔样结构。结论周细胞参与了肉芽组织早期血管生成过程并可形成腔样结构,可能在血管生成中具有主导或引导作用。 展开更多

关键词 肉芽组织 血管生成 周细胞 创面修复

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慢病毒介导 shRNA 沉默鼠肝星状细胞 TGFβ1 对 α1Ⅰ型胶原表达的影响 被引量：4

8

作者 张荣华 闫国和 +1 位作者 汪国建 粟永萍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期456-460,共5页

目的构建大鼠转化生长因子β1(transforming growth factor,TGFβ1)基因RNA干扰慢病毒载体,并观测其对大鼠肝星状细胞HSC-T6的TGFβ1基因沉默效应与对Ⅰ型胶原α1(alpha-1 typeⅠcollagen,Col1α1)表达的影响。方法针对大鼠TGFβ1基因CD... 目的构建大鼠转化生长因子β1(transforming growth factor,TGFβ1)基因RNA干扰慢病毒载体,并观测其对大鼠肝星状细胞HSC-T6的TGFβ1基因沉默效应与对Ⅰ型胶原α1(alpha-1 typeⅠcollagen,Col1α1)表达的影响。方法针对大鼠TGFβ1基因CDs序列,筛选3个干扰靶点,合成其3对小干扰RNA(siRNA),将各对siRNA分别转入HSC-T6细胞,采用RT-PCR法从3对siRNA中筛选出最佳siRNA,设计并合成针对最佳siRNA靶序列的shRNA,退火形成双链,与载体pGreenPuro连接,构建pGreenPuro/TGFβ1 shRNA慢病毒载体,予以酶切与测序鉴定。pGreenPuro/TGFβ1 shRNA慢病毒载体经293细胞包装,将包装产生的高感染力的慢病毒颗粒感染HSC-T6细胞,倒置显微镜观察经感染的HSC-T6细胞的GFP表达情况,在mRNA与蛋白水平检测重组慢病毒pGreenPuro/TGFβ1 shRNA对HSC-T6细胞的TGFβ1基因的沉默效应及对Col1α1表达的影响。结果筛选到TGFβ1基因的最佳干扰靶序列。酶切与测序结果证实,构建pGreenPuro/TGFβ1 shRNA慢病毒载体成功。HSC-T6细胞经pGreenPuro/TGFβ1 shRNA慢病毒感染48 h后,RT-PCR检测未见TGFβ1基因表达,Col1α1基因较弱表达;Western blot检测显示TGFβ1、Col1α1蛋白表达均非常弱。结论成功构建大鼠TGFβ1基因RNA干扰慢病毒载体,该载体能有效沉默HSC-T6细胞的TGFβ1基因,并抑制Col1α1的表达。 展开更多

关键词 转化生长因子Β1 Ⅰ型胶原α1 RNA干扰 小分子 慢病毒载体

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CXCR4基因转染对大鼠真皮多能干细胞生物学性状的影响 被引量：2

9

作者 宗兆文 程天民 +4 位作者 冉新泽 粟永萍 李楠 董世武 史春梦 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第1期22-24,共3页

目的:观察CXCR4基因转染对大鼠真皮多能干细胞(dermal multipotent stem cells,dMSCs)分化、增殖、迁移等生物学性状的影响。方法:分别采用荧光激活细胞分类法、绘制细胞生长曲线法、细胞培养分化诱导法和Transwell小室培养体系中化学... 目的:观察CXCR4基因转染对大鼠真皮多能干细胞(dermal multipotent stem cells,dMSCs)分化、增殖、迁移等生物学性状的影响。方法:分别采用荧光激活细胞分类法、绘制细胞生长曲线法、细胞培养分化诱导法和Transwell小室培养体系中化学趋化法,观察CXCR4基因转染后,CXCR4阳性细胞数目以及dMSCs增殖、分化和迁移能力的变化情况。结果:CXCR4基因转染后,CXCR4阳性dMSCs数目明显高于对照组(P<0.05),dMSCs增殖能力略高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);从Transwell小室上层迁移到下层的dMSCs明显高于对照组(P<0.05)。同时,转染CXCR4基因的dMSCs可向成脂、成骨、成肌细胞方向分化。结论:CXCR4基因转染后,dMSCs中CXCR4表达增加,并有效地增强其迁移能力,且未影响dMSCs的增殖和分化能力。 展开更多

关键词 多能干细胞 真皮 CXCR4 基因转染

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沉默转化生长因子β1对肝星状细胞-T6生长及增殖的影响 被引量：1

10

作者 张荣华 闫国和 +1 位作者 汪国建 粟永萍 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1315-1318,1324,共5页

目的观察沉默转化生长因子β1(TGFβ1)对肝星状细胞(HSC)-T6生长及增殖的影响。方法用具有高效感染力的TGFβ1 shRNA慢病毒液感染HSC-T6细胞,以未经感染或经空病毒感染的HSC-T6细胞作对照。倒置荧光显微镜下观察HSC-T6细胞绿色荧光蛋白(... 目的观察沉默转化生长因子β1(TGFβ1)对肝星状细胞(HSC)-T6生长及增殖的影响。方法用具有高效感染力的TGFβ1 shRNA慢病毒液感染HSC-T6细胞,以未经感染或经空病毒感染的HSC-T6细胞作对照。倒置荧光显微镜下观察HSC-T6细胞绿色荧光蛋白(GFP)的表达变化;CCK-8法检测TGFβ1 shRNA慢病毒对HSC-T6细胞生长及增殖的影响;RT-PCR和Western blotting分别检测HSC-T6细胞TGFβ1及增殖细胞核抗原(PCNA)基因及其编码蛋白的表达,并予以定量分析。结果经TGFβ1 shRNA慢病毒感染的HSCT6细胞显著表达GFP。CCK-8法检测结果显示:经TGFβ1 shRNA慢病毒感染的HSC-T6细胞的生长及增殖慢于对照细胞,培养48 h后差异有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR和Western blotting检测结果显示:TGFβ1shRNA慢病毒能有效沉默HSC-T6细胞TGFβ1,并下调其核抗原PCNA基因及其编码蛋白的表达,与对照细胞的差异有统计学意义(P<0.01)。结论沉默TGFβ1能明显抑制HSC-T6的生长及增殖,并下调其核抗原PCNA的表达。 展开更多

关键词 转化生长因子Β1 增殖细胞核抗原 肝星状细胞-T6 生长 增殖

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间充质干细胞表述中需要注意的几个问题 被引量：2

11

作者 史春梦 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第14期1327-1328,共2页

关键词 间充质干细胞 多潜能间(基)质细胞

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氧化石墨烯对人胚胎干细胞诱导的视网膜色素上皮细胞活性的影响

12

作者 曾玉晓 吴畏 +2 位作者 徐海伟 阴正勤 史春梦 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1410-1415,共6页

目的探索氧化石墨烯(graphene oxide,GO)对人胚胎干细胞(human embryonic stem cell,h ESC)诱导的视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial,RPE)活性的影响。方法 h ESCs通过自发分化法诱导为RPE细胞,通过免疫荧光法和透射电镜... 目的探索氧化石墨烯(graphene oxide,GO)对人胚胎干细胞(human embryonic stem cell,h ESC)诱导的视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial,RPE)活性的影响。方法 h ESCs通过自发分化法诱导为RPE细胞,通过免疫荧光法和透射电镜对其进行鉴定后,将h ESC-RPE细胞与浓度分别为0、12.5、25、50和100μg/m L的GO共培养24 h,采用CCK-8试剂盒检测其细胞活力,与浓度为50μg/m L的GO共培养24 h,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞内反应性活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果 h ESC分化的RPE细胞,呈典型的铺路石样形态,细胞间连接紧密,胞浆富含色素颗粒;免疫荧光检测表达RPE细胞早晚期及紧密连接的标记,并具有吞噬感光外节能力;电镜观察到顶端的微绒毛,细胞呈单层;GO经原子力显微镜检测,说明制备的氧化石墨烯溶液以单层为主;经紫外-可见吸收以及拉曼光谱测试表明石墨经过强氧化之后,其有序的结构遭到破坏,产生了许多缺陷和出现了大量的无序结构;CCK-8细胞活性检测结果显示各组均无统计学差异;细胞凋亡和氧化应激实验中与空白组之间差异没有统计学意义。结论 GO对于h ESC-RPE细胞生物相容性好,提示其有望作为RPE细胞的纳米载体。 展开更多

关键词 人胚胎干细胞 RPE细胞 氧化石墨烯 细胞活性

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RNA解旋酶p68在真皮多能干细胞增殖调控中的作用

13

作者 王少军 粟永萍 +1 位作者 刘知人 史春梦 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期735-738,共4页

目的研究RNA解旋酶p68在真皮多能干细胞(dermal multipotent stem cells,DMSCs)增殖过程中的表达特点,并探讨其在创伤愈合中的意义。方法通过免疫细胞化学和Western blot方法检测p68在DMSCs不同生长状态的表达特点,早期伤口液刺激对DMSC... 目的研究RNA解旋酶p68在真皮多能干细胞(dermal multipotent stem cells,DMSCs)增殖过程中的表达特点,并探讨其在创伤愈合中的意义。方法通过免疫细胞化学和Western blot方法检测p68在DMSCs不同生长状态的表达特点,早期伤口液刺激对DMSCs中p68表达的影响并通过MTT法检测DMSCs增殖的变化,进一步通过RNAi抑制p68表达之后检测细胞增殖的变化特点。结果增殖活跃的DMSCs中p68表达较强,饥饿以后,p68表达降低;伤后1 d伤口液可明显促进DMSCs中p68的表达及细胞增殖(P<0.01);RNAi抑制p68表达之后DMSCs增殖明显受抑(P<0.01)。结论RNA解旋酶p68参与DMSCs的增殖调控,创伤微环境在修复细胞的启动中可能发挥作用。 展开更多

关键词 RNA解旋酶p68 真皮多能干细胞 创伤愈合 伤口液

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C-Mpl基因对骨骼代谢的影响及其机制

14

作者 汤勇 费丹莹 +3 位作者 陈芳 胡梦佳 李凤菊 王军平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第23期2263-2269,共7页

目的观察C-Mpl对骨骼代谢平衡的影响,并对其机制进行初步研究。方法以6月龄野生型(WT)小鼠和C-Mpl敲除小鼠(C-Mpl-/-)作为研究对象。采用Micro-CT扫描,进行股骨远端骨小梁参数分析,包括骨密度(BMD)、骨体积与组织体积比(BV/TV)、骨小梁... 目的观察C-Mpl对骨骼代谢平衡的影响,并对其机制进行初步研究。方法以6月龄野生型(WT)小鼠和C-Mpl敲除小鼠(C-Mpl-/-)作为研究对象。采用Micro-CT扫描,进行股骨远端骨小梁参数分析,包括骨密度(BMD)、骨体积与组织体积比(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数目(Tb.N)、骨小梁分离度(Tb.Sp)和结构模型指数(SMI)。通过三点弯曲试验记录股骨生物力学强度,Von Kossa及茜素红矿化染色观察骨矿化水平,微板法检测血清钙、磷水平变化。TRAP染色观察破骨细胞数量,体外流式细胞仪检测破骨细胞凋亡。流式细胞仪检测破骨细胞的ROS含量,q PCR和Western blot分析p38、p-p38、Fox O1和Nrf2表达变化。结果 Micro-CT扫描结果提示,与WT小鼠比较,C-Mpl-/-小鼠股骨干骺端松质骨明显增多,BMD、BV/TV、Tb.N显著升高,而Tb.Sp和SMI明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);Tb.Th两组差异无统计学意义。生物力学分析结果显示,C-Mpl-/-小鼠断裂负荷和刚度明显低于WT小鼠(P<0.05)。C-Mpl-/-小鼠股骨Von Kossa染色和成骨细胞茜素红染色均弱于WT小鼠,且血清中钙、磷含量亦明显低于WT小鼠(P<0.05)。TRAP染色结果显示,与WT小鼠相比较,C-Mpl-/-小鼠破骨细胞数量显著减少(8.667±1.202 vs 18.000±1.732,P<0.05)。流式细胞仪检测发现,C-Mpl-/-小鼠破骨细胞凋亡率较WT小鼠明显增加[(14.54±1.17)%vs(5.38±0.56)%,P<0.05],且C-Mpl-/-小鼠破骨细胞的ROS水平明显低于WT小鼠破骨细胞(6 833.0±176.4 vs 12 933.0±202.8,P<0.05)。q PCR结果显示C-Mpl-/-小鼠破骨细胞中Fox O1和Nrf2表达水平较WT小鼠破骨细胞明显降低(P<0.05),Western blot结果也证实C-Mpl-/-小鼠破骨细胞中p-p38、Fox O1和Nrf2表达均显著下降(P<0.05)。结论 C-Mpl基因对骨骼代谢存在一定影响,C-Mpl敲除显著加速小鼠体内破骨细胞的凋亡,抑制破骨细胞生成,最终可能导致C-Mpl-/-小鼠的骨骼衰老速度和骨质疏松程度均明显减慢。 展开更多

关键词 C-Mp1 骨小梁 破骨细胞 细胞凋亡

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