宫颈癌治疗性多肽疫苗的分子设计及免疫学功能研究 被引量：2

1

作者 徐道华 夏永鹏 +4 位作者 邱宗荫 吴玉章 贾正才 邹丽云 周伟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期449-452,共4页

目的:探讨基于人乳头瘤病毒抗原优势表位的治疗性多肽抗原组分、结构与诱导免疫应答之间的关系。方法:以芴甲氧羰基固相法合成多肽,用高效液相色谱分析多肽的纯度,对所合成的多肽采用质谱进行定性鉴定,用标准51Cr释放试验检测特异性细... 目的:探讨基于人乳头瘤病毒抗原优势表位的治疗性多肽抗原组分、结构与诱导免疫应答之间的关系。方法:以芴甲氧羰基固相法合成多肽,用高效液相色谱分析多肽的纯度,对所合成的多肽采用质谱进行定性鉴定,用标准51Cr释放试验检测特异性细胞毒性T淋巴细胞活性。结果:合成的多肽经纯化后纯度都达到80%以上,经质谱分析,各肽的分子量测定值与理论值相符,所设计的治疗性多肽在体内外均诱导出较强的表位特异性细胞毒性T淋巴细胞活性。结论:在治疗性表位多肽设计中,将辅助性T细胞表位及脂类分子构建于分子内部可提高细胞毒性T淋巴细胞表位肽的免疫原性。 展开更多

关键词 子宫颈癌 表位 治疗性疫苗

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新型抗菌化合物HL-J6与金黄色葡萄球菌PBP1的相互作用研究

2

作者 徐铭琦 史祥睿 +6 位作者 刘威 段浩 魏静 邓炎 江悦 高英英 李海波 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第9期912-921,共10页

目的 探究新型抗菌化合物HL-J6与金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白1(penicillinbinding protein 1, PBP1)的相互作用。方法 以MRSA252基因组DNA为模板,PBP1F/R为上下游引物,以Nde I/Xho I为酶切位点构建表达质粒pET30a-pbp1-39-608。将质... 目的 探究新型抗菌化合物HL-J6与金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白1(penicillinbinding protein 1, PBP1)的相互作用。方法 以MRSA252基因组DNA为模板,PBP1F/R为上下游引物,以Nde I/Xho I为酶切位点构建表达质粒pET30a-pbp1-39-608。将质粒转入大肠杆菌中进行表达并通过亲和层析纯化获得PBP1-39-608蛋白;利用肽聚糖侧链主干肽的硫酯类似物S2d作为底物,测定HL-J6对PBP1-39-608转肽酶活性的抑制作用;用微量热泳动技术(microscale thermophoresis,MST)检测HL-J6与PBP1-39-608的亲和力,并通过细胞热转移实验(cell thermal shift assay,CETSA)确证结合作用;分别利用AutoDock Vina和Desmond软件进行分子对接和动力学模拟,明确HL-J6与PBP1-39-608蛋白的结合模式和关键氨基酸残基。结果 成功构建pET30a-pbp1-39-608重组质粒,诱导表达后,经纯化获得相对分子质量约为65×103的PBP1-39-608蛋白;HL-J6可呈时间依赖性抑制PBP1-39-608的转肽酶活性(P<0.001);HL-J6与PBP1-39-608的结合解离常数Kd约为64.92μmol/L;分子对接结果显示HL-J6通过与ILE-348、ASN-370、THR-516、PHE-423等主要氨基酸残基相互作用结合在PBP1-39-608的活性口袋,结合评分为-8.38 kcal/mol(<-5.00 kcal/mol);动力学模拟结果显示二者结合后50 ns趋于稳定。结论 HL-J6可显著抑制金黄色葡萄球菌PBP1的转肽酶活性,并与其存在稳定的相互作用。 展开更多

关键词 金黄色葡萄球菌 青霉素结合蛋白 HL-J6 重组蛋白:相互作用

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深化医学免疫学实验教学改革的探讨 被引量：27

3

作者 王书峰 郭玲 +1 位作者 张志仁 吴玉章 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1266-1268,共3页

医学免疫学是一门重要的基础医学课程，作为生命科学的前沿学科，与基础医学以及临床医学的各个学科相互交叉和渗透，是沟通基础医学和临床医学的重要桥梁。同时，免疫学作为一门实验学科，其知识更新迅速，且理论知识密切联系实际应用... 医学免疫学是一门重要的基础医学课程，作为生命科学的前沿学科，与基础医学以及临床医学的各个学科相互交叉和渗透，是沟通基础医学和临床医学的重要桥梁。同时，免疫学作为一门实验学科，其知识更新迅速，且理论知识密切联系实际应用。因此，医学免疫学教学不仅要培养学生对免疫学理论的认知能力，更重要的是培养学生严谨的逻辑思维能力及独立的实践操作能力。这就要求我们教学过程中不仅要重视理论教学，同时要加强实践教学［1］，即免疫学实验教学。医学免疫学实验通过实验教学环节，巩固学生对免疫学知识的理解和掌握程度，同时培养学生严谨的科学态度以及分析问题和解决问题的能力。实验教学的质量直接影响学生对免疫学基本理论的认知能力和实践应用能力。 展开更多

关键词 医学免疫学教学 实验教学改革 免疫学实验教学 基础医学课程 认知能力 实践操作能力 逻辑思维能力 临床医学

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多价精子抗原表位肽的设计与免疫效应研究

4

作者 何畏 梁志清 +4 位作者 吴玉章 李玉清 贾正才 周伟 史常旭 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第7期796-798,共3页

目的　开发可供两性使用的多价合成嵌合肽疫苗。方法　选择小鼠精子 /睾丸特异性抗原SP1 7、Cyritestin中特异性氨基酸序列与牛核糖核酸酶非限制性T细胞表位作为骨架 ,按一定连接方式设计、合成新抗原 35肽 ,并与弗氏佐剂混悬后免疫雌性... 目的　开发可供两性使用的多价合成嵌合肽疫苗。方法　选择小鼠精子 /睾丸特异性抗原SP1 7、Cyritestin中特异性氨基酸序列与牛核糖核酸酶非限制性T细胞表位作为骨架 ,按一定连接方式设计、合成新抗原 35肽 ,并与弗氏佐剂混悬后免疫雌性BALB/C小鼠。结果　在 430A固相自动肽合成仪上成功地合成 35肽 ,并经HPLC纯化、质谱鉴定证实其纯度达 95 %以上 ;免疫后小鼠血清特异性IgG抗体滴度最高达 1∶6 0 0 0 ,阴道粘膜冲洗液中特异性IgA抗体滴度最高达 1∶30 0 ;小鼠脾脏淋巴细胞增殖率达 50 %左右 ,淋巴细胞分泌的INF γ和IL 4分别为 60、1 0 8μg/ml;实验组BALB/C雌鼠妊娠率平均降至 60 % ,每胎产仔数平均降低 58%～71 %。结论　含有两种特异性精子抗原中特异性氨基酸序列的新抗原可激发小鼠产生较理想的特异性体液免疫和粘膜免疫 ,并使小鼠受孕率下降 。 展开更多

关键词 多价精子抗原表位肽 免疫效应 肽疫苗 避孕 多价抗生育疫苗

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流感病毒感染人扁桃体类器官的免疫效应 被引量：3

5

作者 李思琪 徐赟 +3 位作者 李红 费蕾 黄小勇 陈永文 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期978-987,共10页

目的 建立人扁桃体免疫类器官模型并探讨流感病毒感染后产生的免疫学效应。方法 经扁桃体腺样体肥大手术摘除后的人扁桃体组织在经过单个核细胞梯度离心后,利用2.5D-Transwell进行体外培养并添加IL-2及Baff等成细胞因子促扁桃体类器官(t... 目的 建立人扁桃体免疫类器官模型并探讨流感病毒感染后产生的免疫学效应。方法 经扁桃体腺样体肥大手术摘除后的人扁桃体组织在经过单个核细胞梯度离心后,利用2.5D-Transwell进行体外培养并添加IL-2及Baff等成细胞因子促扁桃体类器官(tonsil organoids, TO)的形成。通过单细胞转录组测序(single cell RNA sequencing, scRNA-seq)技术,分析流感病毒细胞受体在类器官各细胞亚群的分布;体外感染流感病毒,使用免疫荧光法(IF)和流式细胞术(FCM)检测扁桃体类器官感染病毒后的免疫学效应。结果 于体外成功诱导扁桃体类器官;scRNA-seq分析结果显示流感病毒细胞受体广泛表达于所有的细胞类型中。流感病毒感染48 h后,刺激扁桃体类器官产生大量可分泌特异性IgG抗体的浆细胞和记忆性B细胞。病毒直接感染还促进CD8^(+)T细胞分泌细胞因子TNF-α与IL-2及CD4^(+)T细胞分泌细胞因子TNF-α、IFN-γ和IL-2。结论 人扁桃体类器官在体外可以被成功诱导且在培养第6天左右达到成熟;流感病毒受体广泛分布于人扁桃体类器官的各细胞亚型;流感病毒可通过受体直接感染T细胞,刺激T细胞活化并分泌细胞因子;同时流感病毒直接感染也可促B细胞分化为浆细胞分泌IgG抗体,并在后期诱导记忆性B细胞的形成。 展开更多

关键词 扁桃体类器官 流感病毒 免疫记忆 炎症因子 浆细胞

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穿膜序列对MHC-Ⅰ类限制性CTL表位呈递影响的研究 被引量：3

6

作者 王莉 吴玉章 +4 位作者 林治华 石统东 周伟 贾正才 邹丽云 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1106-1108,共3页

目的 :从时间依赖性抗原呈递动力学的角度研究穿膜序列 (CPP)对 MHC- 类限制性 CTL 表位呈递的影响。 方法 :应用多肽固相合成技术 ,分别合成含 CPP与 H- 2 Kb限制性 CTL 表位 OVA2 57- 2 6 4的融合多肽 ,同时合成该表位 N、C端自然延... 目的 :从时间依赖性抗原呈递动力学的角度研究穿膜序列 (CPP)对 MHC- 类限制性 CTL 表位呈递的影响。 方法 :应用多肽固相合成技术 ,分别合成含 CPP与 H- 2 Kb限制性 CTL 表位 OVA2 57- 2 6 4的融合多肽 ,同时合成该表位 N、C端自然延伸的抗原肽和无关对照肽。采用流式细胞仪 (FACS)分析技术 ,检测抗原呈递细胞 (APC)在不同时相点对上述各抗原肽进行 MHC- 类呈递的情况。结果 :与不含 CPP的抗原肽相比 ,含 CPP的抗原肽中的 CTL 表位更易进入 APC内 MHC- 类呈递途径 ,表现为呈递所需时间明显缩短 (P<0 .0 5 ) ,且同一时相点的呈递强度显著增加 (P<0 .0 5 )。 结论 :在外源性抗原肽中引入穿膜序列可明显促进其 MHC- 类限制性 CTL 表位的呈递效率 。 展开更多

关键词 穿膜序列 MHC-I类 限制性CTL 抗原呈递 动力学分析 肿瘤 免疫疗法

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质粒表达型siRNA对SARS-CoV复制与感染干扰的初步研究 被引量：5

7

作者 李阳 倪兵 +6 位作者 石辛甫 王希良 何仰东 肖宇 姜曼 黎万玲 吴玉章 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期91-94,共4页

目的　构建针对SARS CoV的特异性siRNA质粒 ,利用RNA干扰技术抑制该病毒复制与感染。方法　根据SARS CoV的全长基因序列 ,以 4个不同的部位为靶点 ,分别设计、合成含有 19nt干扰序列的一段寡核苷酸 ,将两两互补的寡核苷酸经退火后所形... 目的　构建针对SARS CoV的特异性siRNA质粒 ,利用RNA干扰技术抑制该病毒复制与感染。方法　根据SARS CoV的全长基因序列 ,以 4个不同的部位为靶点 ,分别设计、合成含有 19nt干扰序列的一段寡核苷酸 ,将两两互补的寡核苷酸经退火后所形成的序列克隆到pSilencer 3 .1 H1载体中 ,构建表达siRNA的质粒。采用脂质体法将质粒转染VeroE6细胞 ,经潮霉素抗性筛选后 ,再对稳定表达的细胞进行细胞病变、病毒空斑形成和MTT实验 ,以观察干扰效应。结果　对所构建的质粒分别测序 ,确定其含有siRNA的序列与预期的特异性干扰序列一致。用不同浓度的SARS CoV感染转染质粒后的细胞 ,与阴性对照相比 ,其细胞病变减轻、活细胞显著增加 ,病毒空斑明显减少。结论　利用RNA干扰能有效的抑制SARS CoV在细胞中的复制 ,并对细胞有保护作用 ,为预防、治疗SARS提供了新的思路和方法。 展开更多

关键词 SARS病毒 RNA干扰 小干扰RNA 基因治疗

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慢性乙型肝炎患者外周血淋巴及单核细胞表面B7-H1表达研究 被引量：3

8

作者 谢谆怡 陈永文 +2 位作者 付晓岚 杨承英 吴玉章 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1635-1637,1641,共4页

目的探讨B7家族共刺激分子B7-H1在慢性乙型病毒性肝炎(乙肝)患者外周血淋巴细胞及单核细胞表面的表达情况。方法利用荧光抗体标记结合多色流式技术,检测慢性乙肝患者外周血T淋巴细胞、B淋巴细胞、单核细胞群体表面B7-H1分子的表达。结... 目的探讨B7家族共刺激分子B7-H1在慢性乙型病毒性肝炎(乙肝)患者外周血淋巴细胞及单核细胞表面的表达情况。方法利用荧光抗体标记结合多色流式技术,检测慢性乙肝患者外周血T淋巴细胞、B淋巴细胞、单核细胞群体表面B7-H1分子的表达。结果在慢性乙肝患者,T、B淋巴细胞表面B7-H1低表达,与健康对照无差异;单核细胞表面B7-H1的表达率为(19.17±11.64)%,显著高于健康对照的(7.30±5.49)%(P<0.01),且B7-H1的表达与患者血浆ALT水平成正相关(r=0.423,P<0.01)。结论慢性乙肝患者外周血T、B淋巴细胞表面B7-H1低表达,单核细胞B7-H1表达上调,且与ALT水平正相关,提示B7-H1可能与乙肝病毒感染慢性化相关。 展开更多

关键词 乙型肝炎 慢性 T淋巴细胞 B淋巴细胞 单核细胞 B7-H1

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能力教学理念及十年实践的体会 被引量：4

9

作者 王晴 吴玉章 朱锡华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期800-802,共3页

关键词 课堂教学 教学理念 素质教育 免疫学教育 动手能力 文字表达能力 思维能力

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宫颈癌治疗性多肽疫苗的合成及其诱导细胞毒性T淋巴细胞效应的研究 被引量：2

10

作者 徐道华 周晨慧 +3 位作者 夏永鹏 邱宗荫 贾正才 周伟 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2007年第2期200-203,共4页

目的:设计并合成宫颈癌治疗性多肽疫苗,并对其免疫学效应进行研究。方法:以芴甲氧羰基固相法合成多肽,用高效液相色谱分析多肽的纯度,对所合成的多肽采用质谱进行鉴定,用标准51Cr释放试验检测各肽在HLA-A2转基因鼠中诱导的表位特异性细... 目的:设计并合成宫颈癌治疗性多肽疫苗,并对其免疫学效应进行研究。方法:以芴甲氧羰基固相法合成多肽,用高效液相色谱分析多肽的纯度,对所合成的多肽采用质谱进行鉴定,用标准51Cr释放试验检测各肽在HLA-A2转基因鼠中诱导的表位特异性细胞毒性T淋巴细胞活性。结果:合成的多肽经纯化后纯度分别为86.5%、81.8%和98.5%,质谱分析各肽的相对分子质量分别为3121、2580和815,与理论值相符。其在HLA-A2转基因鼠中可诱导出强的表位特异性细胞毒性T淋巴细胞活性。结论:合成的多肽为目标肽,将辅助性T细胞表位及脂类分子构建于分子内部可提高细胞毒性T淋巴细胞表位肽的免疫原性。 展开更多

关键词 子宫颈癌 表位 治疗性疫苗 固相合成

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人参总皂苷对MAGE-12的B细胞表位抗体增效作用研究 被引量：2

11

作者 李艳秋 李建春 吴玉章 《中华中医药学刊》 CAS 2007年第4期689-691,共3页

目的:研究人参总皂苷对MAGE-12的B细胞表位抗体的增效作用。方法:将C-57BL/6小鼠随机分为对照组、MAP组、人参总皂苷组,MAP组在预测MAGE-12的B细胞表位序列为QSDEGSSNEEQE(82-93)的基础上,采用4分枝多重抗原肽结构设计合成抗原肽,免疫C-... 目的:研究人参总皂苷对MAGE-12的B细胞表位抗体的增效作用。方法:将C-57BL/6小鼠随机分为对照组、MAP组、人参总皂苷组,MAP组在预测MAGE-12的B细胞表位序列为QSDEGSSNEEQE(82-93)的基础上,采用4分枝多重抗原肽结构设计合成抗原肽,免疫C-57BL/6小鼠,产生多克隆抗体,应用ELISA实验检测多克隆抗体是否为人的抗原肽的特异性抗体。人参总皂苷组在MAP抗原肽免疫小鼠的同时,人参总皂苷灌胃给药,0.2mL/20g,每日1次。结果:免疫C-57BL/6小鼠后可产生MAGE-12的抗原特异性的多克隆抗体,且人参总皂苷组抗体效价高于MAP组,达1∶256。结论:人参总皂苷对MAGE-12的B细胞表位抗体有增效作用。 展开更多

关键词 B细胞表位 表位预测 MAGE-12 人参总皂苷 ELISA 增效

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超抗原诱导T细胞凋亡或增殖的体外研究 被引量：1

12

作者 宋建勋 朱锡华 陈克敏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第9期397-399,共3页

目的：研究抗原递呈细胞（Ａｐｃ） 在超抗原诱导人外周血特异性Ｔ细胞反应中的作用。方法：金黄色葡萄球菌Ａ型肠毒素（ＳＥＡ） 刺激短期人外周血ＳＥＡ 反应Ｔ细胞系的作用中，通过去除或加入Ａｐｃ ，观察细胞形态、ＦＣＭ 检测细... 目的：研究抗原递呈细胞（Ａｐｃ） 在超抗原诱导人外周血特异性Ｔ细胞反应中的作用。方法：金黄色葡萄球菌Ａ型肠毒素（ＳＥＡ） 刺激短期人外周血ＳＥＡ 反应Ｔ细胞系的作用中，通过去除或加入Ａｐｃ ，观察细胞形态、ＦＣＭ 检测细胞亚Ｇ０Ｇ１峰（Ａ０） 大小及１８ ％ ＤＮＡ 琼脂糖凝胶电泳观察凋亡特征条带。结果：ＳＥＡ１ μｇｍｌ 作用１６ ｈ ，能明显诱导短期人外周血ＳＥＡ 反应Ｔ细胞系凋亡，Ａｐｃ 存在能抑制ＳＥＡ 诱导的Ｔ细胞凋亡，细胞处于增殖状态。结论：ＳＥＡ 对作用Ｔ细胞的结局（ 凋亡或增殖）决定于Ａｐｃ 的存在与否。 展开更多

关键词 超抗原 T细胞 抗原递呈细胞 细胞凋亡 细胞增殖

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CTL的免疫识别和效应机制 被引量：2

13

作者 吴玉章 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期171-175,共5页

关键词 T细胞 CTL 免疫识别 免疫应答 免疫颠覆 免疫偏移 免疫耐受

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治疗性疫苗的研究述评 被引量：2

14

作者 吴玉章 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1066-1070,共5页

既往疫苗主要作为疾病特异性预防手段 ,近年来已将其作为疾病特异性治疗手段并进行了大量研究。涉及的领域包括慢性感染性疾病 (如 AIDS、结核、疟疾、人乳头瘤病毒感染 )、消化道溃疡、肿瘤、自身免疫性疾病 (如多发性硬化症、系统性... 既往疫苗主要作为疾病特异性预防手段 ,近年来已将其作为疾病特异性治疗手段并进行了大量研究。涉及的领域包括慢性感染性疾病 (如 AIDS、结核、疟疾、人乳头瘤病毒感染 )、消化道溃疡、肿瘤、自身免疫性疾病 (如多发性硬化症、系统性红斑狼疮、糖尿病 )及认知性疾病 (如阿尔茨海默病、亨延顿舞蹈病、朊病毒病 )等。虽然治疗性疫苗与预防性疫苗的研制策略及技术要求有很大不同 ,但治疗性疫苗在化学成分上也多与致病因子密切相关。 展开更多

关键词 治疗性疫苗 研究 述评

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溶剂诱导黑色素瘤抗原基因-2特定表位多肽异构的LC/MS研究

15

作者 周伟 吴玉章 +3 位作者 边疆 贾正才 唐艳 邹丽云 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期449-453,共5页

研究乙醇、甲醇两种常用溶剂系统对固相合成的黑色素瘤抗原基因 2 (MAGE 2 )的特定表位多肽 (171 179)异构的影响。分别运用乙醇、甲醇溶剂体系以及极性溶剂二甲基亚砜 (DMSO)作对照预处理固相合成的黑色素瘤抗原特异性MAGE 2表位多肽 ... 研究乙醇、甲醇两种常用溶剂系统对固相合成的黑色素瘤抗原基因 2 (MAGE 2 )的特定表位多肽 (171 179)异构的影响。分别运用乙醇、甲醇溶剂体系以及极性溶剂二甲基亚砜 (DMSO)作对照预处理固相合成的黑色素瘤抗原特异性MAGE 2表位多肽 (171～ 179) ,然后用反相高效液相色谱 /质谱联用技术 (RP HPLC/MS)对合成的表位多肽的m/z进行Q1正离子监测扫描分析 ,观察其在不同溶剂系统预处理下的异构情况 ,以选择合理的预处理条件。结果发现采用乙醇及甲醇溶样时MAGE 2表位多肽有异构体产生 ,极性溶剂DMSO溶样的表位多肽未有异构现象发生 ,采用 5 0 % (体积分数 )的乙醇及 5 0 % (体积分数 )的甲醇时也未监测到异构体产生 ;同时发现将已发生异构的乙醇及甲醇溶样溶液用三氟乙酸酸化处理后 ,异构多肽可发生较大的逆转。 展开更多

关键词 液相色谱/质谱联用 黑色素瘤抗原基因-2 表位多肽 异构体 溶剂诱导 黑色素瘤 免疫治疗

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人恶性胶质瘤细胞SHG-44经诺帝诱导分化后形态学改变及差异表达蛋白的质谱分析

16

作者 许建平 卞修武 +2 位作者 陈意生 吴玉章 蒋雪峰 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期378-381,共4页

目的:观察人恶性胶质瘤细胞SHG-44经去甲二氢愈创木酸类似物———诺帝诱导分化后形态学的改变,并分析差异表达蛋白。方法:分别用100、200μmol/L诺帝诱导SHG-44细胞分化,观察处理后24、48、72 h细胞形态学的改变,并与未受刺激的空白对... 目的:观察人恶性胶质瘤细胞SHG-44经去甲二氢愈创木酸类似物———诺帝诱导分化后形态学的改变,并分析差异表达蛋白。方法:分别用100、200μmol/L诺帝诱导SHG-44细胞分化,观察处理后24、48、72 h细胞形态学的改变,并与未受刺激的空白对照组相比较;提取200μmol/L诺帝处理后的SHG-44细胞以及空白对照组细胞总蛋白进行双向电泳,用PDqest7.1软件比较两者间的差异表达蛋白,离子飞行时间质谱仪分析高丰度表达的差异蛋白。结果:200μmol/L诺帝处理后SHG-44细胞的形态学改变较100μmol/L更为明显;处理72 h时细胞分化最为明显。与空白对照组SHG-44细胞相比,经200μmol/L诺帝诱导后,双向电泳发现了23个差异蛋白点,其中21个蛋白点表达下调,2个蛋白点表达上调。质谱分析高丰度表达的差异蛋白分别为:未知蛋白、增殖相关基因A、解链蛋白Up1、交替拼接因子ASF-3、cofilin 1、真核转录启动因子5A、β半乳糖苷酶结合凝集素、Pi类谷光苷肽-S-转移酶。结论:诺帝能诱导人恶性胶质瘤细胞SHG-44分化,并呈一定的时-效及量-效依赖性,分化后的差异蛋白涉及到细胞增殖、分化、凋亡及基因转录调控等多个方面。 展开更多

关键词 去甲二氢愈创木酸 神经胶质瘤 细胞分化 细胞学 光谱分析 质量

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C3b_(AN42)与OVA_(257-264)融合基因的构建及表达产物生物学活性的鉴定

17

作者 许桂莲 郭波 +3 位作者 郑萍 杨菲 邹强 吴玉章 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期651-654,共4页

目的 :探讨补体系统在T细胞活化中的作用。方法 :构建补体组分C3活化片段C3b的受体结合片段C3bAN42 与OVA2 57-2 64CTL表位融合基因表达质粒 ,并对融合蛋白的表达以及生物学活性进行检测。结果 :以重组质粒转染COS 7细胞后 ,用FACS检测... 目的 :探讨补体系统在T细胞活化中的作用。方法 :构建补体组分C3活化片段C3b的受体结合片段C3bAN42 与OVA2 57-2 64CTL表位融合基因表达质粒 ,并对融合蛋白的表达以及生物学活性进行检测。结果 :以重组质粒转染COS 7细胞后 ,用FACS检测融合蛋白在COS 7细胞中得到表达。将转染细胞的培养上清与巨噬细胞系Ana 1共孵育 ,通过激光共聚焦显微镜扫描观察 ,发现融合蛋白可与Ana 1发生特异性结合 ,并且重组的融合蛋白被Ana 1细胞内吞后 ,可释放出表位肽OVA2 57-2 64。后者与MHC Ⅰ类分子结合后 ,以OVA2 57-2 64 MHC Ⅰ类分子复合物的形式被交叉呈递于Ana 1细胞的表面。结论 :C3bAN42 与OVA2 57-2 64CTL表位融合基因在真核细胞中能正确表达 。 展开更多

关键词 C3B OVA257-264 CTL表位 交叉呈递

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小型猪外周血单个核细胞产生IFN-γ频率研究

18

作者 魏静 李晋涛 +1 位作者 张小萍 吴玉章 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期984-986,共3页

通过检测不同日龄小型猪外周血单个核细胞产生IFN-γ的频率,探讨小型猪免疫细胞功能的发育时限。分别取2日龄、1月龄、4月龄、10月龄及3周岁小型猪的外周血,提取单个核细胞,进行胞内细胞因子IFN-γ染色,流式细胞仪检测不同日龄小型猪外... 通过检测不同日龄小型猪外周血单个核细胞产生IFN-γ的频率,探讨小型猪免疫细胞功能的发育时限。分别取2日龄、1月龄、4月龄、10月龄及3周岁小型猪的外周血,提取单个核细胞,进行胞内细胞因子IFN-γ染色,流式细胞仪检测不同日龄小型猪外周血单个核细胞产生IFN-γ的频率。结果显示,2日龄、1月龄、4月龄、10月龄及3周岁小型猪的外周血单个核细胞产生IFN-γ的频率分别为0.85%、1.43%、1.87%、28.76%和29.62%。表明4月龄以下小型猪具有明显的Th2极化倾向,10月龄以上小型猪的免疫细胞功能发育基本成熟。 展开更多

关键词 小型猪 单个核细胞 IFN-Γ

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溶剂诱导固相合成MAGE-2表位多肽异构的LC-MS研究

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作者 周伟 吴玉章 +3 位作者 边疆 贾正才 唐艳 邹丽云 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第z1期7-8,共2页

近年来随着黑色素瘤特异性免疫治疗研究的不断深入,其肿瘤特异性抗原的发现及其细胞毒性T细胞(CTL)表位的预测及鉴定成为特异性免疫治疗及其多肽疫苗研制的重要前提.预测黑色素瘤抗原基因-2(MAGE-2)的HLA-A2限制性CTL表位的方法也日显成... 近年来随着黑色素瘤特异性免疫治疗研究的不断深入,其肿瘤特异性抗原的发现及其细胞毒性T细胞(CTL)表位的预测及鉴定成为特异性免疫治疗及其多肽疫苗研制的重要前提.预测黑色素瘤抗原基因-2(MAGE-2)的HLA-A2限制性CTL表位的方法也日显成熟,预测出的表位其组成通常为10个氨基酸左右的多肽,随后进行固相合成.因不同氨基酸活化方式及偶联效率的差异,通常对合成的表位多肽进行梯度反相高压液相色谱(RP-HPLC-UV)分析制备,以确保下一步细胞功能性研究即细胞杀伤验证的特异性;MAGE-2众多表位多肽都表现较强的疏水性,虽然分析制备前可供疏水肽选择的有机溶剂系统较多,乙醇及甲醇溶剂系统可能最具代表性.当用乙醇或甲醇溶解众多MAGE-2疏水性表位多肽样品后进行色谱分析时发现,合成的MAGE-2表位多肽的RP-HPLC分析时,214 nm峰面积积分百分比都偏小,显示其合成时氨基酸偶联率较低,由此色谱分析结果推出的合成的低偶联率与理论上单个氨基酸99.5%的平均偶联率差距太大;随后的表位氨基酸组成分析也未发现有诸如半胱氨酸等可能导致折叠异构的氨基酸存在;如何消除这一困惑?正基于此,本实验随机选用了固相合成MAGE-2表位(161-169),通过不同溶剂处理后,在LC-MS技术平台上对其反相行为作了初步的研究.…… 展开更多

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AP-1与NF-κB的活化表达与T细胞的无能 被引量：10

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作者 许桂莲 朱锡华 +1 位作者 杨劲 黄云辉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期154-157,共4页

目的 :探讨无能T细胞IL 2产生的缺乏与转录因子AP 1和NF kappaB的关系。方法 :通过提取活化组和无能组T细胞的核蛋白 ,进行凝胶电泳迁移率变动分析实验 (EMSA) ,检测了转录因子AP 1和NF kappaB的表达情况。结果 :与活化组相比 ,无能T细... 目的 :探讨无能T细胞IL 2产生的缺乏与转录因子AP 1和NF kappaB的关系。方法 :通过提取活化组和无能组T细胞的核蛋白 ,进行凝胶电泳迁移率变动分析实验 (EMSA) ,检测了转录因子AP 1和NF kappaB的表达情况。结果 :与活化组相比 ,无能T细胞中AP 1不但表达水平下降 ,且出现组份缺失现象 ;转录因子NF kappaB在无能T细胞中的表达则高于活化组 ,但均有三种复合物存在。结论 :无能T细胞IL 2产生减少或缺乏可能与转录因子AP 1和NF kappaB表达紊乱 (减弱或增强 )以及组份的缺失有关。 展开更多

关键词 无能 AP-1 NF-KAPPAB 活化表达 T细胞

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