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题名胸苷激酶基因联合阿昔洛韦对细胞杀伤机制的研究
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作者
吴多斌
王鲁宁
田时雨
张英谦
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机构
中国人民解放军总医院南楼神经科
第一军医大学附属珠江医院神经科
中国人民解放军空军总医院神经科
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出处
《中华老年心脑血管病杂志》
CAS
2002年第4期277-280,共4页
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文摘
目的 了解转染单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (tk)的血管平滑肌细胞在阿昔洛韦 (ACV)的作用下细胞周期及微形态的变化 ,研究细胞死亡的原因。方法 以逆转录病毒为载体向原代培养大鼠颈动脉平滑肌细胞转移tk ,给予ACV ,流式细胞仪观察细胞周期的变化 ,电镜观察细胞微形态的改变。结果 转基因细胞在ACV的作用下 ,出现增生抑制或细胞死亡。非转基因细胞不受影响 ,存活的转基因细胞大部分停留在合成期和分裂前期。电镜发现细胞核染色质浓集 ,核破碎。结论 推测转基因细胞死亡在合成期 ,死亡原因是DNA的大量无功能复制 。
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关键词
胸苷激酶基因
细胞周期
阿昔洛韦
流式细胞术
细胞死亡
ACV
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Keywords
thymidine kinase
cell cycle
acyclovir
flow cytometry
cell death
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分类号
R329.2
[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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题名血管平滑肌细胞基因转移及增生抑制的实验研究
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作者
吴多斌
王鲁宁
田时雨
张英谦
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机构
中国人民解放军总医院老年神经科
第一军医大学附属珠江医院神经科
中国人民解放军空军总医院神经科
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出处
《中华老年心脑血管病杂志》
CAS
2002年第1期46-48,共3页
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文摘
目的 了解逆转录病毒载体介导胸苷激酶基因转染平滑肌细胞的可行性 ,检测不同浓度阿昔洛韦 (aciclovir,ACV)对转基因细胞的杀伤效果 ,为在体转基因治疗动脉硬化提供实验依据。方法 原代培养大鼠颈动脉平滑肌细胞 (smoothmusclecells,SMCs) ,采用病毒上清共培养法进行基因转移 ,用MTT法观察ACV对转基因细胞的杀伤效果。结果 转基因平滑肌细胞获得潮霉素抗性 ,聚合酶链反应 (PCR)扩增出目的基因片段 (395bp) ,未发现辅助病毒结构基因片段 (4 11bp) ,给予ACV对转基因平滑肌细胞有杀伤或抑制效应。结论 以PA317细胞为包装细胞 ,以逆病毒为载体可介导含潮霉素抗性的胸苷激酶基因转染体外培养的平滑肌细胞 ,载体系统安全 ,联合ACV对转基因细胞有杀伤作用 ,杀伤时存在旁观者效应。提示采用转基因方法可以防止脑动脉硬化过程中平滑肌细胞的增殖 ,且具有潜在的应用价值。
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关键词
细胞培养
脑血管疾病
基因治疗
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Keywords
cell culture
cerebrovascular disorder
gene therapy
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分类号
R741.02
[医药卫生—神经病学与精神病学]
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