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降钙素基因相关肽单克隆抗体的研制及初步鉴定
被引量：
1
1
作者
陆青
钱学贤
+3 位作者
刘磊
黎梅兰
王素华
施溥涛
《单克隆抗体通讯》
CSCD
1995年第1期48-51,共4页
以人工合成的降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）一牛血清白蛋白（ＢＳＡ）偶联物（ＣＧＲＰ—ＢＳＡ）为免疫原，用微量脾内免疫法免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取其免疫脾细胞与小鼠ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，经间接ＥＬＩＳＡ法筛选、３次克隆...
以人工合成的降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）一牛血清白蛋白（ＢＳＡ）偶联物（ＣＧＲＰ—ＢＳＡ）为免疫原，用微量脾内免疫法免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取其免疫脾细胞与小鼠ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，经间接ＥＬＩＳＡ法筛选、３次克隆化后，获得３株能稳定分泌抗ＣＧＲＰ单克隆抗体的杂交瘤细胞３Ｂ４、７Ｅ１１和８Ｆ２。用琼脂双扩散法鉴定，３Ｂ４为ＩｇＧ１亚类，７Ｅ１１和８Ｆ２均为ＩｇＭ类。杂交瘤细胞的染色体条数在９２～１１４条之间。特异性鉴定表明，３Ｂ４腹水（１：１００）与心钠素、甲状腺降钙素、绒毛膜促性腺激素和血管紧张素Ⅰ等８种抗原均无交叉反应。８Ｆ２腹水、３Ｂ４腹水及７Ｅ１１腹水的效价分别为：１．６×１０－５、３．１×１０－５及１．２５×１０－４。ＭｃＡｂ相加试验及竟争抑制试验均表明，３Ｂ４、７Ｅ１１和８Ｆ２分别识别不同的表位。以Ｗｉｓｔａｒ大白鼠为实验动物，各株杂交瘤细胞的腹水（１：１００）为样品，进行ＭｃＡｂ的动物阻断保护试验。即将大白鼠麻醉后颈动脉插管，单独注射ＣＧＲＰ（３μｇ／０．１ｍｌ只），血压下降６．６６５—９．３３３ｋＰａ；当注入ＣＧＲＰ（３μｇ）加ＭｃＡｂ８Ｆ２（１：１００）时，血压下降１１．９９７ｋｐａ，比?
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关键词
CGRP偶联物
单克隆抗体
降钙素
基因相关肽
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职称材料
大鼠体外肝细胞集落的建立及生长调控研究
被引量：
1
2
作者
汤习锋
周东耀
+1 位作者
徐智民
周晓东
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2003年第2期106-109,113,共5页
目的研究建立体外培养肝细胞集落的关键条件,探讨肝细胞克隆生长的调控机制。方法采用原位预灌流和胶原酶循环灌流分离肝细胞,观察在化学限定培养条件下,肝细胞生长素(HPN)、二甲亚砜(DMSO)及尼克酰胺(NA)对肝细胞DNA合成、有丝分裂象...
目的研究建立体外培养肝细胞集落的关键条件,探讨肝细胞克隆生长的调控机制。方法采用原位预灌流和胶原酶循环灌流分离肝细胞,观察在化学限定培养条件下,肝细胞生长素(HPN)、二甲亚砜(DMSO)及尼克酰胺(NA)对肝细胞DNA合成、有丝分裂象、光镜形态和电镜超微结构的影响。结果肝细胞培养时间进程显示:10 mmol/L NA显著协同HPN促进肝细胞3H-TdR掺入作用,在60和84 h出现2个DNA合成峰;2% DMSO抑制3H-TdR掺入,但在NA共同作用下,肝细胞在132 h表现为DNA合成峰。有丝分裂象显示:HPN+NA+DMSO培养72 h时肝细胞为正常二级分裂,168 h后仍保持相当的有丝分裂活性。光镜下形态及电镜超微结构观察到培养28 d的肝细胞克隆生长特征及增殖潜在性。结论NA及DMSO加入-移除方案可交叉控制HPN作用的肝细胞增殖,所构建的肝细胞克隆生长系统可用于人肝细胞代谢、诱变、细胞中毒及生物转化等研究,并为实施体外克隆肝细胞治疗肝衰竭及遗传性肝疾病提供实验依据。
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关键词
克隆
胶原酶循环灌流
原位预灌流
生长素
细胞培养
肝细胞集落
细胞分裂
肝细胞生长因子
二甲亚砜
烟酰胺
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职称材料
分泌抗过氧化氢酶单克隆抗体的研制及特性鉴定
3
作者
黎梅兰
陆青
+5 位作者
王素华
邱建
洪长江
刘昌玲
董泗建
孙曼荠
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
1994年第3期38-42,共5页
用从微球菌中提取纯化的过氧化氢酶为免疫原，以硝酸纤维膜皮下埋植法免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞和ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，获得１１株能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞系。其中１Ａ１０、３Ｃ５、４Ｅ１２和４Ｆ６四株经连续传代...
用从微球菌中提取纯化的过氧化氢酶为免疫原，以硝酸纤维膜皮下埋植法免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞和ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，获得１１株能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞系。其中１Ａ１０、３Ｃ５、４Ｅ１２和４Ｆ６四株经连续传代三个月、冻存１０个月后复苏，仍能稳定分泌抗体．腹水效价在１０－４～１０－６之间．Ｉｇ类型鉴定，１Ａ１０与４Ｅ１２为ＩｇＧ２ａ，４Ｆ６为ＩｇＧ３亚类，３Ｃ５为ＩｇＭ类．染色体数介于８２～１１０之间．将４株ＭｃＡｂ与溶菌酶、纤维结合蛋白等１１种蛋白及多肽物质做交叉反应试验，均无明显交叉反应．以固相抗原竞争ＥＬＩＳＡ试验和ＥＬＩＳＡ相加试验作位点分析，两法一致表明ＭｃＡｂ４Ｆ６与另３株ＭｃＡｂ１Ａ１０、３Ｃ５和４Ｅ１２所针对的抗原位点有差别。４株ＭｃＡｂ相对亲和力测定结果依次为：４Ｅ１２＞１Ａ１０＞３Ｃ５＞４Ｆ６．用亲和层析柱纯化的４Ｆ６ＭｃＡｂ做过氧化氢酶催化活性试验，发现能激活过氧化氢酶对底物索曼的活性，抑制过氧化氢酶对底物过氧化氢的分解．
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关键词
过氧化氢酶
抗体.单克隆
杂交瘤
ELISA
索曼
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职称材料
题名
降钙素基因相关肽单克隆抗体的研制及初步鉴定
被引量：
1
1
作者
陆青
钱学贤
刘磊
黎梅兰
王素华
施溥涛
机构
第一军医大学
珠江
医院
心内
科
出处
《单克隆抗体通讯》
CSCD
1995年第1期48-51,共4页
文摘
以人工合成的降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）一牛血清白蛋白（ＢＳＡ）偶联物（ＣＧＲＰ—ＢＳＡ）为免疫原，用微量脾内免疫法免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取其免疫脾细胞与小鼠ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，经间接ＥＬＩＳＡ法筛选、３次克隆化后，获得３株能稳定分泌抗ＣＧＲＰ单克隆抗体的杂交瘤细胞３Ｂ４、７Ｅ１１和８Ｆ２。用琼脂双扩散法鉴定，３Ｂ４为ＩｇＧ１亚类，７Ｅ１１和８Ｆ２均为ＩｇＭ类。杂交瘤细胞的染色体条数在９２～１１４条之间。特异性鉴定表明，３Ｂ４腹水（１：１００）与心钠素、甲状腺降钙素、绒毛膜促性腺激素和血管紧张素Ⅰ等８种抗原均无交叉反应。８Ｆ２腹水、３Ｂ４腹水及７Ｅ１１腹水的效价分别为：１．６×１０－５、３．１×１０－５及１．２５×１０－４。ＭｃＡｂ相加试验及竟争抑制试验均表明，３Ｂ４、７Ｅ１１和８Ｆ２分别识别不同的表位。以Ｗｉｓｔａｒ大白鼠为实验动物，各株杂交瘤细胞的腹水（１：１００）为样品，进行ＭｃＡｂ的动物阻断保护试验。即将大白鼠麻醉后颈动脉插管，单独注射ＣＧＲＰ（３μｇ／０．１ｍｌ只），血压下降６．６６５—９．３３３ｋＰａ；当注入ＣＧＲＰ（３μｇ）加ＭｃＡｂ８Ｆ２（１：１００）时，血压下降１１．９９７ｋｐａ，比?
关键词
CGRP偶联物
单克隆抗体
降钙素
基因相关肽
Keywords
CGRP,monoclonal antibody,epitope
分类号
R392－33 [医药卫生—免疫学]
在线阅读
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职称材料
题名
大鼠体外肝细胞集落的建立及生长调控研究
被引量：
1
2
作者
汤习锋
周东耀
徐智民
周晓东
机构
第一军医大学
南方
医院
实验
诊断
科
第一军医大学
珠江
医院
实验
诊断
科
第一军医大学
南方
医院
消化
科
中山医
科
大学
第二附属
医院
医学
实验
中心
出处
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2003年第2期106-109,113,共5页
基金
九五国家重点科技攻关项目(967500166)
四川省卫生厅医学科研课题(920039)~~
文摘
目的研究建立体外培养肝细胞集落的关键条件,探讨肝细胞克隆生长的调控机制。方法采用原位预灌流和胶原酶循环灌流分离肝细胞,观察在化学限定培养条件下,肝细胞生长素(HPN)、二甲亚砜(DMSO)及尼克酰胺(NA)对肝细胞DNA合成、有丝分裂象、光镜形态和电镜超微结构的影响。结果肝细胞培养时间进程显示:10 mmol/L NA显著协同HPN促进肝细胞3H-TdR掺入作用,在60和84 h出现2个DNA合成峰;2% DMSO抑制3H-TdR掺入,但在NA共同作用下,肝细胞在132 h表现为DNA合成峰。有丝分裂象显示:HPN+NA+DMSO培养72 h时肝细胞为正常二级分裂,168 h后仍保持相当的有丝分裂活性。光镜下形态及电镜超微结构观察到培养28 d的肝细胞克隆生长特征及增殖潜在性。结论NA及DMSO加入-移除方案可交叉控制HPN作用的肝细胞增殖,所构建的肝细胞克隆生长系统可用于人肝细胞代谢、诱变、细胞中毒及生物转化等研究,并为实施体外克隆肝细胞治疗肝衰竭及遗传性肝疾病提供实验依据。
关键词
克隆
胶原酶循环灌流
原位预灌流
生长素
细胞培养
肝细胞集落
细胞分裂
肝细胞生长因子
二甲亚砜
烟酰胺
Keywords
hepatocyte clone
cell division
hepatocyte growth factor
dimethyl sulfoxide
niacinamide
分类号
R329 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
分泌抗过氧化氢酶单克隆抗体的研制及特性鉴定
3
作者
黎梅兰
陆青
王素华
邱建
洪长江
刘昌玲
董泗建
孙曼荠
机构
第一军医大学珠江医院实验科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
1994年第3期38-42,共5页
文摘
用从微球菌中提取纯化的过氧化氢酶为免疫原，以硝酸纤维膜皮下埋植法免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞和ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，获得１１株能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞系。其中１Ａ１０、３Ｃ５、４Ｅ１２和４Ｆ６四株经连续传代三个月、冻存１０个月后复苏，仍能稳定分泌抗体．腹水效价在１０－４～１０－６之间．Ｉｇ类型鉴定，１Ａ１０与４Ｅ１２为ＩｇＧ２ａ，４Ｆ６为ＩｇＧ３亚类，３Ｃ５为ＩｇＭ类．染色体数介于８２～１１０之间．将４株ＭｃＡｂ与溶菌酶、纤维结合蛋白等１１种蛋白及多肽物质做交叉反应试验，均无明显交叉反应．以固相抗原竞争ＥＬＩＳＡ试验和ＥＬＩＳＡ相加试验作位点分析，两法一致表明ＭｃＡｂ４Ｆ６与另３株ＭｃＡｂ１Ａ１０、３Ｃ５和４Ｅ１２所针对的抗原位点有差别。４株ＭｃＡｂ相对亲和力测定结果依次为：４Ｅ１２＞１Ａ１０＞３Ｃ５＞４Ｆ６．用亲和层析柱纯化的４Ｆ６ＭｃＡｂ做过氧化氢酶催化活性试验，发现能激活过氧化氢酶对底物索曼的活性，抑制过氧化氢酶对底物过氧化氢的分解．
关键词
过氧化氢酶
抗体.单克隆
杂交瘤
ELISA
索曼
Keywords
catalase
antibody
monoclonal
hybridoma
ELISA
soman
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
降钙素基因相关肽单克隆抗体的研制及初步鉴定
陆青
钱学贤
刘磊
黎梅兰
王素华
施溥涛
《单克隆抗体通讯》
CSCD
1995
1
在线阅读
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职称材料
2
大鼠体外肝细胞集落的建立及生长调控研究
汤习锋
周东耀
徐智民
周晓东
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2003
1
在线阅读
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职称材料
3
分泌抗过氧化氢酶单克隆抗体的研制及特性鉴定
黎梅兰
陆青
王素华
邱建
洪长江
刘昌玲
董泗建
孙曼荠
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
1994
0
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职称材料
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