一种简易高效的大鼠胰岛分离纯化方法 被引量：18

1

作者 张桦 蔡德鸿 +2 位作者 徐春生 陈宏 刘宏 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第2期129-131,F003,共4页

目的探索一种高效、高纯度大鼠胰岛分离纯化方法，并研究纯化后的胰岛细胞在体内外环境中的基本生物学功 能状况。方法采用 Ｈａｎｋｓ液经胰管内注射法机械性扩张破坏大鼠胰腺的腺泡组织点后将其剪碎置于含 １ｇ／Ｌ胶原酶 的 Ｈａｎｋ... 目的探索一种高效、高纯度大鼠胰岛分离纯化方法，并研究纯化后的胰岛细胞在体内外环境中的基本生物学功 能状况。方法采用 Ｈａｎｋｓ液经胰管内注射法机械性扩张破坏大鼠胰腺的腺泡组织点后将其剪碎置于含 １ｇ／Ｌ胶原酶 的 Ｈａｎｋｓ 液中，于 ３７℃中静止消化 ２５～３０ｍｉｎ后移入含 １０％胎牛血清的 ＲＭＰＩ－１６４０完全培养液中，２４℃短期培养， Ｆｉｃｏｌｌ－４００非连续密度梯度液离心纯化胰岛，纯化后的胰岛进行异种移植。结果经Ｆｉｃｏｌｌ－４００纯化后，平均每只成年 Ｗｉｓｔａｒ大鼠胰腺能获得 ９２０～ｌ ２３０个胰岛，纯度可达 ９８％以上；在葡萄糖刺激下胰岛素释放量约为基础分泌水平的 ２．２ 倍（Ｐ＜０．００１）纯化后的胰岛异种移植可逆转实验性糖尿病ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的高血糖平均达（８．７±１．６）ｄ。结论胰腺消化 物经短期培养后再进行胰岛纯化的方法具有耗酶量少、技术难度小、胰岛纯度和产率及活率高的特点，是一种简便易行 的高效分离纯化方法． 展开更多

关键词 胰岛 纯化 培养 胰岛移植 分离 大鼠

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月经性偏头痛与女性激素关系的研究 被引量：20

2

作者 田新良 朱福兴 +2 位作者 童名瑞 田时雨 王军 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第5期257-259,共3页

本文采用放射免疫法测定42例月经性偏头痛发作期(Ⅰ组)和38例间歇期(Ⅱ组)患者血清雌二醇(E_2)、孕酮(p)及泌乳素(PRL)的含量,并以20例非月经性偏头痛发作期(Ⅲ组)及25例正常人(Ⅳ组)作为对照。结果表明,Ⅰ组与Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组对比,血清E_... 本文采用放射免疫法测定42例月经性偏头痛发作期(Ⅰ组)和38例间歇期(Ⅱ组)患者血清雌二醇(E_2)、孕酮(p)及泌乳素(PRL)的含量,并以20例非月经性偏头痛发作期(Ⅲ组)及25例正常人(Ⅳ组)作为对照。结果表明,Ⅰ组与Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组对比,血清E_2浓度均明显下降(P<0.01),而Ⅱ组E_2明显回升到正常范围。各组的P浓度比较均无显著差异(P>0.05)。PRL在Ⅰ、Ⅱ组均增高,仅Ⅰ组与Ⅳ组比较有显著差异(P<0.05)。本文重点讨论了女性激素尤其是雌二醇撤退对诱发月经性偏头痛所起的作用。 展开更多

关键词 偏头痛 月经性偏头痛 女性激素

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三种不同免疫抑制剂对胰岛细胞功能的影响 被引量：9

3

作者 赵德明 张桦 +1 位作者 陈宏 蔡德鸿 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第2期151-152,共2页

目的观察免疫抑制剂对体外培养胰岛细胞活力的影响,探讨免疫抑制剂对胰岛移植物功能的影响。方法应用体外纯化后培养的SD大鼠胰岛细胞,采用噻唑蓝法测定在不同浓度免疫抑制剂作用下胰岛细胞活力的变化。结果低剂量雷帕霉素对胰岛细胞活... 目的观察免疫抑制剂对体外培养胰岛细胞活力的影响,探讨免疫抑制剂对胰岛移植物功能的影响。方法应用体外纯化后培养的SD大鼠胰岛细胞,采用噻唑蓝法测定在不同浓度免疫抑制剂作用下胰岛细胞活力的变化。结果低剂量雷帕霉素对胰岛细胞活力无明显影响,1 ng/ml以上雷帕霉素能引起胰岛细胞活力降低;低剂量和高剂量daclizumab和FTY720对胰岛细胞的活力均无明显影响。结论雷帕霉素对胰岛细胞有直接损伤作用,这种损伤程度与浓度呈正相关,daclizumab和FTY720对胰岛细胞无明显毒性。 展开更多

关键词 免疫抑制剂 细胞功能 细胞活力 胰岛细胞 移植 糖尿病

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氨基胍对白介素-1β损伤的离体大鼠胰岛细胞的保护作用 被引量：4

4

作者 陈宏 蔡德鸿 +2 位作者 王梅 刘宏 叶仁青 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第7期628-630,共3页

目的：观察氨基胍（ＡＧ）对白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）诱导的胰岛细胞损害的作用。方法：应用体外单层培养的大鼠胰岛细胞，分别检测ＩＬ－１β、ＡＧ及其联合对胰岛细胞亚硝酸盐生成、胰岛素分泌以及胞内ＤＮＡ、胰岛素含量和细... 目的：观察氨基胍（ＡＧ）对白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）诱导的胰岛细胞损害的作用。方法：应用体外单层培养的大鼠胰岛细胞，分别检测ＩＬ－１β、ＡＧ及其联合对胰岛细胞亚硝酸盐生成、胰岛素分泌以及胞内ＤＮＡ、胰岛素含量和细胞活性的影响。结果：以ＩＬ－１β诱导，胰岛细胞亚硝酸盐生成量显著增加；同时胰岛素基础分泌以及葡萄糖刺激的胰岛素释放均明显减少；胰岛细胞内ＤＮＡ、胰岛素含量及细胞活性（ＭＴＴ值）均显著下降（均Ｐ＜００１）；ＡＧ能阻断这些抑制效应（均Ｐ＜０．０１）。结论：ＩＬ－１β通过一氧化氮（ＮＯ）介导对胰岛细胞有细胞活性抑制和毒性效应。ＡＧ可能是一种有效的ｉＮＯＳ抑制剂，通过阻断ＮＯ生成起到细胞保护作用。 展开更多

关键词 一氧化氮 糖尿病 IL-1β 糖尿病 IDDM 氨基胍

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高度糖基化终产物对破骨细胞酸性磷酸酶和抗酒石酸酸性磷酸酶活性的影响 被引量：3

5

作者 蔡德鸿 陈宏 张桦 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2002年第4期300-302,345,共4页

目的　观察高度糖基化终产物 (AGE)对破骨细胞酸性磷酸酶 (ACP)和抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRACP)活性的影响。方法　用人血清白蛋白和葡萄糖恒温孵育制备人AGE蛋白 ,应用酶消化法从人髂骨松质骨分离培养破骨细胞。将AGE蛋白与培养的破骨细... 目的　观察高度糖基化终产物 (AGE)对破骨细胞酸性磷酸酶 (ACP)和抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRACP)活性的影响。方法　用人血清白蛋白和葡萄糖恒温孵育制备人AGE蛋白 ,应用酶消化法从人髂骨松质骨分离培养破骨细胞。将AGE蛋白与培养的破骨细胞共同孵育 ,通过酶动力学法测定培养液ACP和TRACP活性。结果　低浓度AGE蛋白 (50～ 2 0 0 μg ml)对破骨细胞ACP和TRACP活性无显著影响 ,而高浓度 (50 0～ 1 0 0 0 μg ml)则使ACP和TRACP活性显著增高 ,且ACP活性的增高主要来自TRACP活性的增高。结论　上述结果提示AGE蛋白可能促进破骨细胞的破骨功能。 展开更多

关键词 高度糖基化终产物 破骨细胞 酸性磷酸酶 抗酒石酸酸性磷酸酶 AGE ACP TRACP 酶消化法 糖尿病 骨质疏松

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高度糖基化终产物与骨质疏松 被引量：6

6

作者 陈宏 蔡德鸿 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2002年第2期186-188,共3页

关键词 高度糖基化终产物 骨质疏松 AGE AGE抑制剂 骨细胞生物学 骨微结构 糖尿病

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超抗原SEB体外诱导胸腺细胞凋亡的研究 被引量：2

7

作者 丁丽 蔡德鸿 蒋定文 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期121-123,共3页

目的 :观察超抗原SEB能否在APC的辅助下体外诱导胸腺细胞凋亡 ,并研究其机制。方法 :SEB作用于与APC混合培养的胸腺细胞 ,用DNA凝胶电泳、DNA片段测定等判定胸腺细胞凋亡并作定量分析 ;用间接免疫荧光法标记并以流式细胞仪检测Fas、Fas... 目的 :观察超抗原SEB能否在APC的辅助下体外诱导胸腺细胞凋亡 ,并研究其机制。方法 :SEB作用于与APC混合培养的胸腺细胞 ,用DNA凝胶电泳、DNA片段测定等判定胸腺细胞凋亡并作定量分析 ;用间接免疫荧光法标记并以流式细胞仪检测Fas、FasL的表达。结果 :SEB处理组胸腺细胞有凋亡表现且凋亡率明显高于对照组 ,Fas、FasL的表达明显高于对照组。结论 :SEB可以于体外在APC辅助下诱导胸腺细胞凋亡 ,Fas、FasL的高表达可能在凋亡中起重要作用 。 展开更多

关键词 超抗原 胸腺细胞 细胞凋亡

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胰岛素抵抗的基础及临床 被引量：2

8

作者 梁少俊 蔡德鸿 《实用医学杂志》 CAS 2004年第11期1216-1217,共2页

关键词 胰岛素抵抗 IR 生物学反应 血糖

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介入性栓塞治疗甲状腺机能亢进症 被引量：1

9

作者 彭志康 刘亚洪 +4 位作者 蔡德鸿 卢蔚芳 全显跃 叶仁青 王丽芝 《中国医学影像学杂志》 CSCD 2002年第4期267-268,共2页

目的 :探索甲状腺动脉栓塞治疗甲状腺机能亢进 (简称甲亢 )的临床效果。材料和方法 :对 19例甲亢患者经甲状腺动脉超选择性插管 ,采用PVA ,硬脑膜微粒及钢圈栓塞治疗。结果 :甲状腺动脉超选择性插管、全部栓塞成功 ,13例甲亢症状缓解及T... 目的 :探索甲状腺动脉栓塞治疗甲状腺机能亢进 (简称甲亢 )的临床效果。材料和方法 :对 19例甲亢患者经甲状腺动脉超选择性插管 ,采用PVA ,硬脑膜微粒及钢圈栓塞治疗。结果 :甲状腺动脉超选择性插管、全部栓塞成功 ,13例甲亢症状缓解及T3、T4降至正常 ,所有的病例甲状腺体积有不同程度缩小 ,无严重并发症发生。结论 :甲状腺动脉栓塞治疗甲亢是安全、有效的方法。 展开更多

关键词 甲状腺机能亢进 甲状腺动脉栓塞 介入放射学

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脉冲电磁场疗法在骨病治疗中的应用 被引量：2

10

作者 杨帆 《中国康复理论与实践》 CSCD 1999年第3期131-133,共3页

关键词 骨病 电磁疗法 脉冲电磁场 适应证

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尼克酰胺对白介素-1β损伤的离体大鼠胰岛细胞的保护作用

11

作者 陈宏 蔡德鸿 王梅 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 1999年第1期36-39,共4页

目的 观察尼克酰胺（ＮＡ）对白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）诱导的胰岛细胞损害的保护作用。方法应用体外单层培养的大鼠胰岛细胞，分别检测ＩＬ－１β，ＮＡ（１０，２０ｍｍｏｌ／Ｌ）及其联合对胰岛细胞亚硝酸盐生成，胰岛素分泌... 目的 观察尼克酰胺（ＮＡ）对白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）诱导的胰岛细胞损害的保护作用。方法应用体外单层培养的大鼠胰岛细胞，分别检测ＩＬ－１β，ＮＡ（１０，２０ｍｍｏｌ／Ｌ）及其联合对胰岛细胞亚硝酸盐生成，胰岛素分泌以及胞内ＤＮＡ，胰岛素含量和细胞活性的影响。结果 由ＩＬ－１β诱导的胰岛细胞亚硝酸盐生成量显著增加，同时胰岛素基础分泌以及葡萄糖刺激的胰岛素释放均明显减少；胰岛细胞内 ＤＮＡ，胰岛素含量及细胞活性（ＭＴＴ值）均显著下降（Ｐ均＜０．００１）；较高浓度及其的 ＮＡ（２０ ｍｍｏｌ／Ｌ）能阻断这些抑制作用（Ｐ均＜ ０．００１）；而较低浓度的 ＮＡ（１０ ｍｍｏｌ／Ｌ）虽不能阻断 ＩＬ－１β诱导的 ＮＯ生成对葡萄糖刺激的胰岛素释放的抑制作用，但对 ＩＬ－１β介导的其它抑制作用仍呈现保护性效应（Ｐ均＜ ０．００１）。结论 一氧化氮（ＮＯ）虽然参与ＩＬ－１β诱导的胰岛细胞的损害过程，但可能不是唯一的效应分子。ＮＡ可能通过包括抑制ＮＯ生成等多方面机制，实现对ＩＬ－１β诱导的胰岛细胞损害的保护作用。 展开更多

关键词 保护作用 尼克酰胺 白细胞介素-1 一氧化氮 胰岛细胞 动物实验 胰岛素依赖型糖尿病

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睾丸Sertoli细胞构建人工免疫赦免区的研究启示

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作者 张桦 徐春生 蔡德鸿 《医学与哲学》 2001年第3期19-21,共3页

异源胰岛细胞移植中免疫排斥的问题一直是制约胰岛移植成功运用于临床的主要障碍。最近有研究表明 ,睾丸Sertoli细胞能够表达有效诱导免疫排斥细胞凋亡的Fas配体。因此 ,通过人工方式为异体移植细胞构建一个类似的局部免疫赦免微环境将... 异源胰岛细胞移植中免疫排斥的问题一直是制约胰岛移植成功运用于临床的主要障碍。最近有研究表明 ,睾丸Sertoli细胞能够表达有效诱导免疫排斥细胞凋亡的Fas配体。因此 ,通过人工方式为异体移植细胞构建一个类似的局部免疫赦免微环境将成为可能。 展开更多

关键词 胰岛移植 免疫赦免区 FAS配体 睾丸 细胞移植免疫 实验研究

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绝经后骨质疏松与OPG/RANKL/RANK系统的相关研究

13

作者 杨力 蔡德鸿 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2004年第4期501-503,465,共4页

骨在整个生命过程都在不断的重建中,骨重建的过程就是破骨细胞(osteoclast,OC)吸收旧骨和成骨细胞(osteoblast,OB)形成新骨的过程,两者紧密偶联,在正常情况下保持动态平衡.当骨重建不平衡时,可导致代谢性骨病如骨质疏松(osteoporosis,OP... 骨在整个生命过程都在不断的重建中,骨重建的过程就是破骨细胞(osteoclast,OC)吸收旧骨和成骨细胞(osteoblast,OB)形成新骨的过程,两者紧密偶联,在正常情况下保持动态平衡.当骨重建不平衡时,可导致代谢性骨病如骨质疏松(osteoporosis,OP)等的发生.近年来的研究发现许多激素、细胞因子等,均通过直接或间接地调节护骨素(osteoprotegerin,OPG)、核因子κβ受体活化因子配体(receptor activator of NF-κβligand,RANKL)的表达,调控OPG、RANLKL和核因子-κβ受体活化因子(receptor activator of NF-κβ,RANK)之间的比例,从而介导OC生成并维持其功能而达到抗骨质疏松或致骨质疏松的作用.说明OPG/RANKL/RANK系统是OC分化和维持功能的最终调节因子.现就绝经后骨质疏松与OPG/RANKL/RANK系统的关系作一综述. 展开更多

关键词 OPG 绝经后骨质疏松 骨重建 RANKL 相关研究 代谢性骨病 正常 破骨细胞 OC 成骨细胞

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胰岛素对正常人血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa表达的影响及机制 被引量：3

14

作者 彭必友 董为人 +2 位作者 汪吉仪 薛耀明 蔡德鸿 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第9期943-945,共3页

目的探讨胰岛素对正常人血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa表达的影响及其机制。方法建立全血血小板膜GPⅡb/Ⅲa表达的流式细胞术测定方法,观察胰岛素以及一氧化氮合酶抑制剂硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)、鸟苷酸环化酶(GC)抑制剂亚甲蓝(MB)分... 目的探讨胰岛素对正常人血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa表达的影响及其机制。方法建立全血血小板膜GPⅡb/Ⅲa表达的流式细胞术测定方法,观察胰岛素以及一氧化氮合酶抑制剂硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)、鸟苷酸环化酶(GC)抑制剂亚甲蓝(MB)分别及与胰岛素联合作用下对血小板膜GPⅡb/Ⅲa表达的影响。结果(1)胰岛素对正常人静息血小板膜GPⅡb/Ⅲa表达无明显影响;而显著抑制凝血酶、胶原活化的血小板膜GPⅡb/Ⅲa的上调表达,且该效应呈剂量和时间依赖性;(2)L-NAME、MB几乎完全阻断胰岛素对血小板膜GPⅡb/Ⅲa表达的抑制效应。结论胰岛素可通过NOS→NO→GC→GMP通路抑制血小板膜GPⅡb/Ⅲa的表达。 展开更多

关键词 胰岛素 正常人 血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa 流式细胞术 一氧化氮

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雌、孕激素对去卵巢大鼠肝脏维生素D受体mRNA表达的影响 被引量：1

15

作者 周筠 叶仁清 +1 位作者 蔡德鸿 张桦 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第6期521-523,共3页

目的探讨雌、孕激素对去卵巢大鼠维生素D受体mRNA的影响。方法25只成年SD雌性大鼠,随机分为Sham组(假手术组)、OVX组(单纯去卵巢组)、OVX+E组(去卵巢+补充雌激素组)、OVX+P组(去卵巢+补充孕激素组)OVX+E+P组(去卵巢+补充雌、孕激素组),... 目的探讨雌、孕激素对去卵巢大鼠维生素D受体mRNA的影响。方法25只成年SD雌性大鼠,随机分为Sham组(假手术组)、OVX组(单纯去卵巢组)、OVX+E组(去卵巢+补充雌激素组)、OVX+P组(去卵巢+补充孕激素组)OVX+E+P组(去卵巢+补充雌、孕激素组),每组5只。喂养3个半月后处死,取肝脏检测1,25-二羟维生素D3受体mRNA。结果与去卵巢组比较:(1)雌激素对去卵巢大鼠肝脏1, 25-二羟维生素D3受体mRNA的表达有显著上调作用;(2)雌、孕激素联合用药组1, 25-二羟维生素D3受体mRNA的表达介于单用雌激素和孕激素之间;(3)孕激素对去卵巢大鼠肝脏1,25-二羟维生素D3受体mRNA的表达无显著上调。结论雌激素能促进去卵巢大鼠肝脏1, 25-二羟维生素D3受体的表达。 展开更多

关键词 大鼠 肝脏 维生素D受体 mRNA 雌激素类 孕激素类 卵巢切除术 骨化三醇

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免疫抑制剂对人胰岛细胞活性的影响 被引量：1

16

作者 赵德明 张桦 +3 位作者 陈宏 曾龙驿 翁建平 蔡德鸿 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期995-996,共2页

目的了解免疫抑制剂对人胰岛细胞活性的影响,探讨其在胰岛移植中的作用。方法体外分离、纯化人胰岛细胞,与不同浓度、不同种类的免疫抑制剂共同培养后,通过MTT法检测细胞活性。结果低浓度的雷帕霉素对胰岛细胞活性没有影响,高浓度(≥1ng... 目的了解免疫抑制剂对人胰岛细胞活性的影响,探讨其在胰岛移植中的作用。方法体外分离、纯化人胰岛细胞,与不同浓度、不同种类的免疫抑制剂共同培养后,通过MTT法检测细胞活性。结果低浓度的雷帕霉素对胰岛细胞活性没有影响,高浓度(≥1ng/ml)的雷帕霉素显著降低胰岛细胞活性。赛尼哌和FTY720无论是高浓度还是低浓度对胰岛细胞活性均无影响。结论雷帕霉素对胰岛细胞有毒性作用,其程度与雷帕霉素浓度有关,赛尼哌和FTY720对胰岛细胞无明显毒性作用。 展开更多

关键词 免疫抑制剂 胰岛细胞 四畔盐比色法

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