血液净化对慢性肾功能衰竭患者全段甲状旁腺激素的影响 被引量：42

1

作者 刘俊 刘志强 陶惠琴 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第2期234-235,共2页

目的研究血液灌流和/或血液透析对慢性肾功能衰竭(CRF)患者全段甲状旁腺激素(iPTH)的影响。方法用放射免疫测定法检测40例规律血液透析患者治疗前后iPTH水平。结果血液灌流和/或血液透析后iPTH水平均降低,但血液灌流组降低幅度大于血液... 目的研究血液灌流和/或血液透析对慢性肾功能衰竭(CRF)患者全段甲状旁腺激素(iPTH)的影响。方法用放射免疫测定法检测40例规律血液透析患者治疗前后iPTH水平。结果血液灌流和/或血液透析后iPTH水平均降低,但血液灌流组降低幅度大于血液透析组(P=0.031)。结论血液灌流加血液透析能比单纯血液透析更有效地降低CRF患者iPTH水平。 展开更多

关键词 血液净化 慢性肾功能衰竭 甲状旁腺激素 血液灌流 血液透析

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IgA肾病肾组织内胶原蛋白Ⅳ的分布及意义 被引量：6

2

作者 史跃先 黎磊石 +1 位作者 周虹 白晓洋 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第2期114-117,共4页

研究了107例IgA肾病患者肾组织中胶原蛋白Ⅳ(CⅣ)的分布及其与纤维连接蛋白(Fn)分布及肾脏病理的关系。CⅣ的分布与系膜增生相一致。在新月体、节段性及早、中期球性肾小球硬化区,CⅣ与Fn均增多,肾小管壁及间质CⅣ亦增多。CⅣ在肾小管... 研究了107例IgA肾病患者肾组织中胶原蛋白Ⅳ(CⅣ)的分布及其与纤维连接蛋白(Fn)分布及肾脏病理的关系。CⅣ的分布与系膜增生相一致。在新月体、节段性及早、中期球性肾小球硬化区,CⅣ与Fn均增多,肾小管壁及间质CⅣ亦增多。CⅣ在肾小管上异常增多的程度与肾组织病理改变、肾小管萎缩、间质纤维化及炎细胞浸润呈正相关。本结果表明,新月体及肾小球硬化的发生与CⅣ及Fn在小球内过度聚积有关,肾间质炎性反应可能刺激肾小管上皮细胞大量合成CⅣ并在局部聚集,进而导致肾小管萎缩和纤维化。 展开更多

关键词 IGA 肾病 胶原蛋白Ⅳ 纤维连接素

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单核细胞活化与终末期肾病炎症反应状态的关系 被引量：4

3

作者 梁敏 王力 +3 位作者 侯凡凡 刘俊 刘志强 田建伟 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第8期781-784,共4页

目的研究终末期肾病(ESRD)炎症反应状态及其与单核细胞活化之间的关系。方法166例ESRD病人分为慢性肾功能不全非透析组(CRF,n=63)、持续性不卧床腹膜透析组(CAPD,n=16)和血液透析组(HD,n=87);测定各组以及血液透析前后血浆单核细胞活化... 目的研究终末期肾病(ESRD)炎症反应状态及其与单核细胞活化之间的关系。方法166例ESRD病人分为慢性肾功能不全非透析组(CRF,n=63)、持续性不卧床腹膜透析组(CAPD,n=16)和血液透析组(HD,n=87);测定各组以及血液透析前后血浆单核细胞活化指标,包括新喋呤、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β),以及血浆急性时相蛋白(APP)水平,包括C反应蛋白(CRP)和血清淀粉样A物质(SAA)。结果3组ESRD病人血浆单核细胞活化指标及APP水平均比正常对照组升高(P均<0.05),HD组血浆CRP和SAA含量高于CRF组(P均<0.05),且SAA水平高于CAPD组(P<0.05);CRF组血浆TNFα、IL-1β、新喋呤以及CRP和SAA含量与血清肌酐水平呈正相关(P<0.05),与肌酐清除率(Ccr)呈负相关(P均<0.05);在以Ccr矫正后进行相关分析,血浆CRP含量与新喋呤、TNF-α和IL-1β浓度呈正相关(r值分别为0.287、0.314、0.262,P<0.05),血浆SAA含量与新喋呤浓度呈正相关(r=0.306,P<0.05);糖尿病与非糖尿病患者相比上述指标均无显著性差异(P>0.05);单次透析后血浆TNFα、IL-1β以及CRP和SAA含量比透析前显著升高(P<0.05),新喋呤浓度无显著性变化(P>0.05)。结论ESRD时存在以APP升高为特点的慢性炎症反应,血液透析具有进一步的促进作用,这种异常宿主反应可能与单核细? 展开更多

关键词 终末期肾病 透析 炎症 单核细胞

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原位PCR技术检测肾组织乙肝病毒DNA的临床价值 被引量：6

4

作者 李刚 王力 周展眉 《实用医学杂志》 CAS 2003年第12期1312-1313,共2页

目的 :探讨原位PCR技术检测肾组织乙肝病毒DNA的可靠性。方法 :将肾活检确诊为乙肝病毒相关性肾炎患者 5 9例与血清单纯HBsAb阳性且肾组织未查到HBsAg病人 15 2例的肾组织PCR检查结果 ,按照诊断试验的研究方法进行比较。结果 :PCR检测... 目的 :探讨原位PCR技术检测肾组织乙肝病毒DNA的可靠性。方法 :将肾活检确诊为乙肝病毒相关性肾炎患者 5 9例与血清单纯HBsAb阳性且肾组织未查到HBsAg病人 15 2例的肾组织PCR检查结果 ,按照诊断试验的研究方法进行比较。结果 :PCR检测肾组织HBVDNA的假阳性率 5 3 2 9% ,假阴性率 49 15 % ,诊断符合率47 87%。结论 :原位PCR检测肾组织中HBVDNA有较高的假阳性率和假阴性率 。 展开更多

关键词 原位PCR技术 检测 肾组织 乙肝病毒DNA 乙肝病毒相关性肾炎

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缺血性急性肾衰肾小管上皮细胞微丝的改变及其机制 被引量：1

5

作者 罗正茂 林沁 +1 位作者 张训 侯凡凡 《第一军医大学学报》 CSCD 1999年第6期559-562,共4页

目的了解缺血时肾小管上皮细胞 (TEC)微丝的改变 ,并探讨此改变的机制。方法用双肾蒂钳夹法建立缺血性急性肾衰模型 ,采用电镜和免疫组化法观察缺血 5、15和 45min时TEC微丝肌动蛋白的改变 ,并用高效液相色谱法测试细胞内三磷酸腺苷 (A... 目的了解缺血时肾小管上皮细胞 (TEC)微丝的改变 ,并探讨此改变的机制。方法用双肾蒂钳夹法建立缺血性急性肾衰模型 ,采用电镜和免疫组化法观察缺血 5、15和 45min时TEC微丝肌动蛋白的改变 ,并用高效液相色谱法测试细胞内三磷酸腺苷 (ATP)水平。结果缺血 5min即有细胞微丝肌动蛋白的损害 ,微绒毛融合、断裂 ,随着缺血时间的延长 ,微丝损伤加重 ,极性丧失 ,由细胞尖端分布变为胞浆内弥漫分布 ,微绒毛消失 ,与此同时细胞内ATP水平也迅速降低 ,微丝紊乱程度与ATP的下降呈一致。结论肾TEC微丝结构和极性的改变可能与细胞内ATP水平相关。 展开更多

关键词 肾小管上皮细胞 微丝肌动蛋白 肾缺血 肾功能衰竭

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细胞间粘附分子-1单抗防治初发期急性肾小管坏死的实验研究 被引量：1

6

作者 刘俊 王力 王小宁 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第8期748-750,共3页

目的探讨白细胞的粘附在初发期急性肾小管坏死(ATN)的病理生理学过程中所起的作用。方法Wistar雄性大鼠32只,随机分为4组。肌肉注射甘油制作ATN动物模型,应用细胞间粘附分子-1单抗防治初发期大鼠ATN,观察其肾脏病理学及血尿素氮和血肌... 目的探讨白细胞的粘附在初发期急性肾小管坏死(ATN)的病理生理学过程中所起的作用。方法Wistar雄性大鼠32只,随机分为4组。肌肉注射甘油制作ATN动物模型,应用细胞间粘附分子-1单抗防治初发期大鼠ATN,观察其肾脏病理学及血尿素氮和血肌酐变化。结果给药24 h后治疗组血肌酐值[(412.31±94.42)μmol/L]明显低于CD3对照组血肌酐[(990.21±171.25)μmol/L](P<0.05)。模型组与CD3对照组可见明显肾小管坏死,而治疗组仅2例出现较轻的坏死灶。结论白细胞的粘附在ATN发病过程中具有重要作用,应用细胞间粘附分子-1单抗阻断白细胞的粘附能明显减轻肾脏病理改变。 展开更多

关键词 粘附分子 单克隆抗体 急性肾小管坏死

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腹膜透析抢救慢性肾功能衰竭伴多器官功能障碍的临床探讨

7

作者 钟伟强 杨永铭 +2 位作者 刘冠贤 杨铁城 谭志明 《实用医学杂志》 CAS 1999年第4期290-291,共2页

慢性肾功能衰竭（ＣＲＦ）的病人并发其它器官功能障碍时，往往病情危重，死亡率极高，我们应用腹膜透析（ＰＤ）进行治疗ＣＲＦ并发多器官衰竭，取得满意的效果，总结如下。１资料和方法１１一般资料２４例中，男１８例，女６例，年... 慢性肾功能衰竭（ＣＲＦ）的病人并发其它器官功能障碍时，往往病情危重，死亡率极高，我们应用腹膜透析（ＰＤ）进行治疗ＣＲＦ并发多器官衰竭，取得满意的效果，总结如下。１资料和方法１１一般资料２４例中，男１８例，女６例，年龄４８～６５岁，平均年龄５３±９岁... 展开更多

关键词 肾功能衰竭 腹膜透析 急救 多器官功能障碍

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改良制片法在肾穿刺标本快速诊断中的应用

8

作者 周展眉 王国保 +1 位作者 王力 耿舰 《第一军医大学学报》 CSCD 1999年第5期484-484,共1页

目的肾穿刺标本常规制片时间长、步骤繁琐，故本研究探讨一种肾穿刺组织快速制片的新方法。材料与方法２５例肾组织标本用微波固定，酒精环已酮混合液快速脱水、包埋切片。结果制片时间仅为１．２ｈ，约是经典方法的１／５，且染色效果... 目的肾穿刺标本常规制片时间长、步骤繁琐，故本研究探讨一种肾穿刺组织快速制片的新方法。材料与方法２５例肾组织标本用微波固定，酒精环已酮混合液快速脱水、包埋切片。结果制片时间仅为１．２ｈ，约是经典方法的１／５，且染色效果好，结构清晰。结论这种改良的制片法缩短了制片时间，有助于疾病的快速诊断，是一种值得推广的新技术。 展开更多

关键词 肾穿刺 病理 制片法

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狼疮性肾炎合并急性肾衰的临床及病理分析

9

作者 王者非 王国保 +1 位作者 张晓峰 童俊荣 《第一军医大学学报》 CSCD 2000年第1期59-60,共2页

；目的与方法通过对２５例狼疮性肾炎并急性肾衰患者的回顾性分析，探讨其临床、病理特点及治疗措施。结果病人均属狼疮活动状态，肾脏病理改变以Ⅳ型较多见，且预后还与受累脏器的多少及损害程度相关。大剂量甲基强的松龙及环磷酰胺联... ；目的与方法通过对２５例狼疮性肾炎并急性肾衰患者的回顾性分析，探讨其临床、病理特点及治疗措施。结果病人均属狼疮活动状态，肾脏病理改变以Ⅳ型较多见，且预后还与受累脏器的多少及损害程度相关。大剂量甲基强的松龙及环磷酰胺联合冲击治疗，总有效率６０％。结论　狼疮性肾炎并急性肾衰是肾科的危重症，而早期的强有力治疗可望改善预后。 展开更多

关键词 狼疮性肾炎 急性肾功能衰竭 甲基强的松龙

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肝病变程度和维生素K1对慢性肾功能衰竭病人肝活检术后出血的影响 被引量：1

10

作者 杨小兵 蒋建平 张训 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第7期787-788,共2页

目的 探讨肝脏病变程度及维生素K1对慢性肾功能衰竭病人肝活检术后出血的影响。方法 选择92例合并慢性乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒感染的肾移植术前血液透析患者接受肝穿刺活检,以半定量积分法评价肝组织炎症和纤维化程度,其中34例肝活... 目的 探讨肝脏病变程度及维生素K1对慢性肾功能衰竭病人肝活检术后出血的影响。方法 选择92例合并慢性乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒感染的肾移植术前血液透析患者接受肝穿刺活检,以半定量积分法评价肝组织炎症和纤维化程度,其中34例肝活检术前使用维生素K1 10mg肌肉注射,2次/d,连续3 d。结果 92例患者肝活检术后出血11例(12.0％)。其中34例术前使用维生素K1者出血4例、58例未使用维生素K1者出血7例,两者无显著差异(P>0.05);术后出血与肝脏病理分级、分期之间无差别(P>0.05)。结论 慢性肾功能衰竭患者肝穿刺后出血的发生率较高,穿刺前使用维生素K1并不能明显降低术后出血发生率,术后出血与肝脏病变程度无明显相关关系。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒 出血 肝/组织学 维生素K1

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糖化和氧化产物修饰的蛋白质促进兔主动脉粥样斑块形成 被引量：16

11

作者 郭志坚 侯凡凡 +3 位作者 刘尚喜 张卫茹 周展眉 刘志强 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期127-130,共4页

目的 :探讨晚期糖基化终产物 (AGE)和晚期蛋白质氧化产物 (AOPP)对动脉粥样硬化斑块形成的影响。方法 :5 0只 1 2周龄新西兰白兔被随机分为 5组 (每组 1 0只 ) ,除对照组外均以高胆固醇饲料喂养并分别注射或不注射兔血清白蛋白及AGE或A... 目的 :探讨晚期糖基化终产物 (AGE)和晚期蛋白质氧化产物 (AOPP)对动脉粥样硬化斑块形成的影响。方法 :5 0只 1 2周龄新西兰白兔被随机分为 5组 (每组 1 0只 ) ,除对照组外均以高胆固醇饲料喂养并分别注射或不注射兔血清白蛋白及AGE或AOPP修饰的兔血清白蛋白。 1 0周后处死动物 ,取血清测血脂、AGE和AOPP水平 ;取主动脉全段 ,以苏丹IV染色 ,PHOTOSHOP○R软件分析粥样斑块占主动脉壁的相对面积 ;显微镜下测量粥样斑块的平均厚度。结果 :(1 )AGE和AOPP组主动脉全段的动脉粥样斑块相对面积 (5 0 .1 %± 7.4 %和 6 2 .4 %±8.8% )均明显大于单纯胆固醇喂饲组 (2 9.8%± 6 .3% )和白蛋白组 (2 0 .9%± 6 .4 % ) (P均 <0 .0 5 )。 (2 )AGE和AOPP组胸主动脉段粥样斑块的平均厚度 [(1 4 7.7± 1 3.1 ) μm和 (1 38.1± 1 3.0 ) μm]均明显大于单纯胆固醇喂饲组 [(85 .7± 1 5 .0 ) μm和白蛋白组 [(95 .5± 1 5 .7) μm](P均 <0 .0 5 ) ;(3) 4个喂饲高胆固醇饲料组的血脂水平无明显差异 ,注射AGE或AOPP的动物血清中AGE或AOPP水平明显增高 ,且与斑块相对面积呈正相关 (AGE与斑块相对面积 :r=0 .4 0 8,P =0 .0 0 5 ;AOPP与斑块相对面积 :r =0 .5 95 ,P =0 .0 0 0 )。结论 :AGE和AOPP促进高胆固醇动物动脉粥样斑块? 展开更多

关键词 糖基化终产物 蛋白质氧化产物 动脉粥样硬化 血清白蛋白 动物模型 慢性肾功能衰竭

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晚期糖基化终产物受体的结构和功能 被引量：21

12

作者 赵善超 侯凡凡 姜勇 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期71-73,共3页

晚期糖基化终产物受体 (RAGE)是一种膜蛋白 ,属于免疫球蛋白家族 ,由 4 0 0多个氨基酸组成 ,分子量为 35kD ,分胞外段、跨膜段和胞内段 ,在单核巨噬细胞、血管内皮细胞、肾系膜细胞、神经细胞及平滑肌细胞等细胞中普遍表达。RAGE作为信... 晚期糖基化终产物受体 (RAGE)是一种膜蛋白 ,属于免疫球蛋白家族 ,由 4 0 0多个氨基酸组成 ,分子量为 35kD ,分胞外段、跨膜段和胞内段 ,在单核巨噬细胞、血管内皮细胞、肾系膜细胞、神经细胞及平滑肌细胞等细胞中普遍表达。RAGE作为信号转导受体介导晚期糖基化终产物 (AGE)和其配体在细胞表面结合 ,激活细胞内多种信号转导机制 ,在糖尿病慢性并发症、透析相关性淀粉样变 (DRA)、阿尔采末病 (AD)、动脉粥样硬化等疾病发生中起重要作用。对RAGE结构和功能的认识可能为这些疾病的防治提供新的靶位 。 展开更多

关键词 晚期糖基化终产物受体 结构-功能研究 信号转导

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人类关节滑膜A型和B型细胞的分离和体外培养 被引量：13

13

作者 蒋建平 杨铁城 +1 位作者 侯凡凡 朱志刚 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第1期52-55,F003,共5页

目的建立一种有效分离、培养高纯度人类关节滑膜Ａ、Ｂ型细胞的方法。方法胶原酶和胰蛋白酶联合消化人关 节滑膜组织碎片，细胞悬液经 １２０目筛网滤过，与 ＣＤ１４ ｍｉｃｒｏｂｅａｄｓ混合孵育后通过磁性 ＭＡＣＳ分离柱收集非粘附... 目的建立一种有效分离、培养高纯度人类关节滑膜Ａ、Ｂ型细胞的方法。方法胶原酶和胰蛋白酶联合消化人关 节滑膜组织碎片，细胞悬液经 １２０目筛网滤过，与 ＣＤ１４ ｍｉｃｒｏｂｅａｄｓ混合孵育后通过磁性 ＭＡＣＳ分离柱收集非粘附细 胞及粘附细胞进行培养。用光镜、电镜、细胞免疫化学、流式细胞仪法鉴定该两种细胞类型。结果分离培养的滑膜细胞 纯度达９８％以上；粘附细胞具有巨噬细胞的特性，抗ＣＤ６８、ＣＤ１４阳性，符合巨噬细胞样滑膜细胞（Ａ型细胞）的特征； 非粘附细胞具有成纤维细胞的特性，抗Ｖｉｍｅｎｔｉｎ、Ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ阳性，符合成纤维细胞样滑膜细胞（Ｂ型细胞）的特征。结 论胶原酶和胰蛋白酶联合消化，兔疫磁柱法是一种确切有效的分离人类关节滑膜Ａ、Ｂ型细胞的方法。 展开更多

关键词 关节滑膜细胞 体外培养 免疫磁性法 A型细胞 B型细胞

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抗人晚期糖基化终产物受体胞外段不同表位单克隆抗体的制备 被引量：6

14

作者 朱平 唐磊 +3 位作者 赵善超 卢晓 候凡凡 富宁 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第2期129-132,共4页

目的 制备抗人晚期糖基化终产物受体(RAGE)胞外段单克隆抗体。方法 用纯化人重组RAGE胞外段(氨基酸序列23～342)免疫Balb／c小鼠，取其脾细胞与NS—1融合制备杂交瘤，经筛选和两次克隆化，从制备的腹水中纯化单克隆抗体。结果和结论 获... 目的 制备抗人晚期糖基化终产物受体(RAGE)胞外段单克隆抗体。方法 用纯化人重组RAGE胞外段(氨基酸序列23～342)免疫Balb／c小鼠，取其脾细胞与NS—1融合制备杂交瘤，经筛选和两次克隆化，从制备的腹水中纯化单克隆抗体。结果和结论 获得两株杂交瘤细胞B2．2和E10，其分泌单抗的亚型均为IgG2b。经ELISA、Westernblot和流式细胞仪鉴定，证明两株单抗均可结合重组RAGE及表达于细胞表面的RAGE，且两株抗体识别的位点为远隔表位，所建立的双夹心法可用于检测可溶性重组RAGE。这两株抗体将为研究RAGE相关疾病提供有效的工具。 展开更多

关键词 抗人晚期糖基化终产物受体 单克隆抗体 制备 RAGE胞外段 远隔表位 流式细胞仪 鉴定

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改良的胶原酶滑膜细胞分离培养法 被引量：11

15

作者 彭卫华 侯凡凡 +1 位作者 蒋建平 张训 《第一军医大学学报》 CSCD 2000年第5期469-470,共2页

目的 探讨一种改良的滑膜细胞培养法。方法 修剪、收集关节滑膜层，依次以胶原酶、0.2%胰蛋白酶、0.2%胰蛋白酶-0.02%EDTANa2消化，100目筛网过滤，D-hanks液洗网后培养，行显微镜、电镜、ABC法免疫组化鉴定。结果 培养的细胞具有成纤... 目的 探讨一种改良的滑膜细胞培养法。方法 修剪、收集关节滑膜层，依次以胶原酶、0.2%胰蛋白酶、0.2%胰蛋白酶-0.02%EDTANa2消化，100目筛网过滤，D-hanks液洗网后培养，行显微镜、电镜、ABC法免疫组化鉴定。结果 培养的细胞具有成纤维细胞样形态和特征，免疫组化染色示vimentin阳性、CD68阴性，纯度达98%以上，符合B型滑膜细胞特点。结论 改良的胶原酶消化法是一种有效的滑膜细胞培养方法。 展开更多

关键词 细胞培养 滑膜细胞 胶原酶 透析相关性泻粉样变

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人腹膜间皮细胞的分离培养 被引量：7

16

作者 刘宏发 臧燕 +1 位作者 侯凡凡 王力 《第一军医大学学报》 CSCD 1999年第5期435-437,共3页

目的体外培养的人腹膜间皮细胞（ＨＰＭＣ）是研究腹膜功能的有用模型，我们为此建立了一种改良消化法，以从人大网膜分离腹膜间皮细胞。方法用０．２％胰蛋白酶－０．０２％ＥＤＴＡＮａ２消化人大网膜组织碎片，细胞悬液经１００目筛... 目的体外培养的人腹膜间皮细胞（ＨＰＭＣ）是研究腹膜功能的有用模型，我们为此建立了一种改良消化法，以从人大网膜分离腹膜间皮细胞。方法用０．２％胰蛋白酶－０．０２％ＥＤＴＡＮａ２消化人大网膜组织碎片，细胞悬液经１００目筛网滤过后进行培养：瑞士姬姆萨染色观察细胞形态，计算细胞纯度：免疫组化（ＡＢＣ法）鉴定细胞。结果分离培养的细胞光镜下呈铺路鹅卵石状，纯度达９５％以上。细胞表面标志鉴定显示角蛋白、波形蛋白抗原阳性，第Ⅷ因子相关抗原、白细胞ＣＤ４５抗原阴性，证实分离培养的确是ＨＰＭＣ。结论胰蛋白酶消化法是一种简单实用的分离ＨＰＭＣ的方法。 展开更多

关键词 大网膜 人腹膜间皮细胞 分离 培养 HPMC

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人晚期糖基化终产物受体胞质内段融合蛋白表达载体的构建与表达 被引量：7

17

作者 赵善超 刘靖华 +4 位作者 李志杰 秦清和 邓鹏 侯凡凡 姜勇 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第12期1314-1316,共3页

目的构建人晚期糖基化终产物受体胞质内段(hRAGE-C)GST融合蛋白的重组原核基因表达载体并进行表达与纯化,研究其功能并鉴定与其相互作用的蛋白。方法采用PCR方法扩增hRAGE基因编码区的胞质内段,并将其重组于pGEX-KG载体中。重组质粒经PC... 目的构建人晚期糖基化终产物受体胞质内段(hRAGE-C)GST融合蛋白的重组原核基因表达载体并进行表达与纯化,研究其功能并鉴定与其相互作用的蛋白。方法采用PCR方法扩增hRAGE基因编码区的胞质内段,并将其重组于pGEX-KG载体中。重组质粒经PCR、酶切、序列鉴定分析后,转化大肠杆菌BL21,以异丙基β-D硫代半乳糖(IPTG)诱导产生hRAGE胞质内段的GST融合蛋白。结果PCR、酶切和测序结果表明所克隆的GST/hRAGE-C原核表达载体完全正确,继而表达、纯化获得了相对分子质量约35 000的融合蛋白(符合预期大小)。结论将hRAGE胞质内段构建于含有GST标记的载体上并获得融合蛋白的高效表达。 展开更多

关键词 人晚期糖基化终产物受体 融合蛋白 载体 基因表达

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终末糖基化产物对培养的人脐静脉内皮细胞粘附分子表达的影响 被引量：7

18

作者 刘宏 侯凡凡 梁敏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1934-1937,共4页

目的:探讨终末糖基化产物在糖尿病动脉粥样硬化(AS)形成中的作用机理。方法:分离正常人脐静 脉内皮细胞(HUVECs),将终末糖基化终产物(AGE)修饰的人血清白蛋白(AGE-HSA)、人血清白蛋白(HSA)与HU VECs在体外共同培养,并用荧光单克隆抗体染... 目的:探讨终末糖基化产物在糖尿病动脉粥样硬化(AS)形成中的作用机理。方法:分离正常人脐静 脉内皮细胞(HUVECs),将终末糖基化终产物(AGE)修饰的人血清白蛋白(AGE-HSA)、人血清白蛋白(HSA)与HU VECs在体外共同培养,并用荧光单克隆抗体染色,流式细胞仪定量检测细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、血管细胞粘 附分子-1(VCAM-1)的表达。结果:正常人HUVEC表达ICAM-1和VCAM-1。AGE-HSA能以时间和剂量依赖的 方式上调ICAM-1、VCAM-1的表达(P<0．05),而HSA对HUVECs上述粘附分子的表达均无影响。结论:AGE能上 调HUVECs粘附分子的表达,从而促进AS时单核／巨噬细胞的浸润。 展开更多

关键词 糖基化终产物 高级 动脉硬化 内皮细胞 胞间粘附分子1

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免疫化学染色图像分析法检测细胞核因子κB 被引量：9

19

作者 张桂林 刘尚喜 +1 位作者 邓燕 申洪 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第5期498-500,共3页

目的探讨一种简便、安全、可定量的细胞核因子κB(NF-κB)活性的检测方法。方法以晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白(HSA-AGE)刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC),NF-κB/p65免疫化学染色后,分析细胞NF-κB/p65核/浆的阳性染色比,以经典的... 目的探讨一种简便、安全、可定量的细胞核因子κB(NF-κB)活性的检测方法。方法以晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白(HSA-AGE)刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC),NF-κB/p65免疫化学染色后,分析细胞NF-κB/p65核/浆的阳性染色比,以经典的凝胶迁徙率泳动分析法作对照。结果HSA-AGE可激活HUVECNF-κB,呈时间、剂量依赖关系,两种方法检测的趋势一致。结论免疫化学染色的图像分析法可用于定量检测NF-κB的活性。 展开更多

关键词 细胞核因子κB/检测 晚期糖基化终产物 凝胶迁徙率泳动分析 免疫化学

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促炎症细胞因子刺激人类关节滑膜B型细胞表达粘附分子 被引量：2

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作者 蒋建平 侯凡凡 张训 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期69-72,共4页

目的 :透析相关性淀粉样变 (DRA)病人关节滑膜组织粘附分子表达增强 ,并与局部炎细胞浸润密切相关。旨在探讨DRA时诱导滑膜细胞粘附分子表达上调的机制。方法 :分离正常人关节滑膜B型细胞 ,与晚期糖基化终产物修饰的 β2微球蛋白 (AGE ... 目的 :透析相关性淀粉样变 (DRA)病人关节滑膜组织粘附分子表达增强 ,并与局部炎细胞浸润密切相关。旨在探讨DRA时诱导滑膜细胞粘附分子表达上调的机制。方法 :分离正常人关节滑膜B型细胞 ,与晚期糖基化终产物修饰的 β2微球蛋白 (AGE β2 m)、天然 β2 m、肿瘤坏死因子 α(TNF α)、白细胞介素 1β(IL 1β)在体外共同培养 ,用荧光单克隆抗体染色 ,流式细胞仪检测定量分析滑膜B型细胞表面细胞间粘附分子 1(ICAM 1)、血管细胞间粘附分子 1(VCAM 1)、E 选择素 (E selectin)的表达。结果 :正常关节滑膜B型细胞表达ICAM 1、VCAM 1,但不表达E selectin。IL 1β、TNF α能以时间和剂量依赖的方式上调滑膜B型细胞ICAM 1、VCAM 1的表达 ,但无诱导E selectin表达的作用。AGE β2 m和 β2 m对B型细胞粘附分子的表达无直接影响。结论 :DRA时关节组织存在的促炎症细胞因子可能上调滑膜细胞粘附分子的表达 ,从而促使局部的单核细胞浸润。 展开更多

关键词 关节滑膜 粘附分子 细胞因子 B型细胞 晚期糖基化终产物 Β2微球蛋白 透析相关性淀粉样变

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