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端粒重复序列扩增法结合微孔板杂交法定量检测端粒酶活性 被引量:3
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作者 温淑娟 况二胜 黄镇华 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第6期457-458,共2页
目的探讨定量检测端粒酶活性的非放射性检测方法。方法将端粒重复序列扩增测定法(TRAP)与微孔板杂交 相结合建立了非放射性检测方法,对3例正常肝组织和4例肝癌患者治疗前后的肝癌组织、瘤旁组织、肝癌凋亡组织 进行检测。结果... 目的探讨定量检测端粒酶活性的非放射性检测方法。方法将端粒重复序列扩增测定法(TRAP)与微孔板杂交 相结合建立了非放射性检测方法,对3例正常肝组织和4例肝癌患者治疗前后的肝癌组织、瘤旁组织、肝癌凋亡组织 进行检测。结果肝癌组织具有比较高的端粒酶活性,而正常肝组织和瘤旁组织无此酶活性,肝癌凋亡组织端粒酶活性 显著降低。结论 该定量分析方法简单、灵敏、特异性强,可以比较准确地反映组织的端粒酶活性状态。 展开更多
关键词 端粒 重复序列扩增测定法 微孔板杂交 末端转移酶 肝肿瘤
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乙型肝炎病毒特异性核酶与丁型肝炎病毒重组体的构建
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作者 温淑娟 祁学忠 +1 位作者 周荣 黄镇华 《第一军医大学学报》 CSCD 1999年第1期66-68,共3页
目的将重组丁型肝炎病毒基因组作为乙型肝炎病毒特异性核酶的载体,探讨解决核酶在实际应用中的保护性运载、靶向性和特异性问题。方法设计了乙型肝炎病毒特异性锤头型核酶结构,采用重组引物,结合“不对称PCR”和“MegaPri... 目的将重组丁型肝炎病毒基因组作为乙型肝炎病毒特异性核酶的载体,探讨解决核酶在实际应用中的保护性运载、靶向性和特异性问题。方法设计了乙型肝炎病毒特异性锤头型核酶结构,采用重组引物,结合“不对称PCR”和“MegaPrimerPCR”方法将所设计的锤头型核酶基因替代插入到了型肝炎病毒基因组5'端高变区,重组体经PCR初步鉴定后,克隆到T载体(pTAdv)T7启动子下游,经限制性内切酶酶切、序列测定分析。结果与结论证实该重组作为预期的乙型肝炎病毒特异性核酶-丁型肝炎病毒基因组重组体,为进一步的体外切割和细胞内与乙型肝炎病毒相互作用的研究提供了基础。 展开更多
关键词 丁型肝炎病毒 乙型肝炎病毒 核酶重组体 克隆
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