凝胶图像光密度分析系统在分子生物学研究中的应用 被引量：3

1

作者 周俊岭 杨德立 +2 位作者 方向东 王泽仿 王小宁 《第一军医大学学报》 CSCD 1998年第1期73-76,共4页

关键词 凝胶图像 光密度分析系统 分子生物学 GDAS

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人血管内皮生长因子受体Flt-1胞外区2-3loop在Pichia.pastoris酵母中的表达、纯化及其生物学活性研究 被引量：5

2

作者 马骊 王小宁 +3 位作者 张智清 周小明 曾革非 陈爱君 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期61-65,共5页

目的 :研究人Flt 1胞外区 2 3loopcDNA在Pichia pastoris酵母中的表达 ,获得高效表达的具有生物学活性的重组Flt 1(2 3)。方法 :采用PCR扩增Flt 1(2 3)基因 ,经DNA序列分析后 ,插入含AOX1启动子和α分泌信号肽序列的Pichia pastoris... 目的 :研究人Flt 1胞外区 2 3loopcDNA在Pichia pastoris酵母中的表达 ,获得高效表达的具有生物学活性的重组Flt 1(2 3)。方法 :采用PCR扩增Flt 1(2 3)基因 ,经DNA序列分析后 ,插入含AOX1启动子和α分泌信号肽序列的Pichia pastoris酵母表达载体中 ,构建重组质粒pPIC9K Flt 1(2 3) ,转化酵母宿主菌GS115 ,筛选His+ Muts 表型转化子 ,摇瓶培养 ,1%甲醇诱导表达。表达产物经CM SepharoseFF阳离子交换层析和SephacrylS 10 0分子筛层析纯化后 ,测定其生物学活性。结果 :SDS PAGE分析显示 ,表达产物以可溶性分子形式存在于上清中 ,诱导 4d的表达量达上清总蛋白的 6 0 %以上。ELISA及Westernblot实验表明 ,表达产物具有良好的抗原性和特异性。经CM SepharoseFF阳离子交换层析和SephacrylS 10 0分子筛层析纯化后 ,Flt 1(2 3)纯度达到 90 %以上。生物学活性检测证实其具有结合hVEGF1 6 5 的能力和抑制hVEGF1 6 5 对HUVEC的促增殖功能。结论 :获得了具有生物学活性的可溶性重组Flt 1受体胞外区 2 3loop小片段 ,为进一步的动物实验和临床应用打下了基础。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子 FLT-1 基因表达 PICHIA.PASTO

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VEGF_(165)cDNA在酵母中的表达、纯化及其生物学活性研究 被引量：6

3

作者 马骊 王小宁 +3 位作者 张智清 陈爱君 姚立红 姜忠良 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期24-28,共5页

目的研究人 ＶＥＧＦ１６５基因在 Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ酵母中的表达，获得高效表达、具有生物学活性的重组ｈＶＥＧＦ１６５。方法采用ＰＣＲ扩增ｈＶＥＧＦ１６５基因，经ＤＮＡ序列分析后，插入含ＡＯＸ１启动子和α分泌... 目的研究人 ＶＥＧＦ１６５基因在 Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ酵母中的表达，获得高效表达、具有生物学活性的重组ｈＶＥＧＦ１６５。方法采用ＰＣＲ扩增ｈＶＥＧＦ１６５基因，经ＤＮＡ序列分析后，插入含ＡＯＸ１启动子和α分泌信号肽序列的Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ酵母表达载体中，构建重组质粒ｐＰＩＣ９Ｋ／ｈＶＥＧＦ１６５。经转化酵母宿主菌ＫＭ７１，筛选多拷贝整合转化子，摇瓶培养，用 １０ ｍＬ／Ｌ甲醇诱导表达。表达产物经Ｈｅｐａｒｉｎ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ６Ｂ亲和层析纯化后，以人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）测定其生物学活性。结果ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析显示，表达产物以可溶性分子的形式存在于上清中，诱导４ｄ的表达量达上清中总蛋白的６０％以上。 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ表明，表达产物具有良好的抗原性和特异性。经Ｈｅｐ－ａｒｉｎ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ６Ｂ亲和层析纯化， ｒｈＶＥＧＦ１６５的纯度可达到９０％以上。生物学活性检测证实，其具有刺激脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）增殖的活性。结论在 Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ表达系统中，实现了ｈＶＥＧＦ１６５的高效分泌性表达。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子 毕赤巴斯德酵母

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重组B7-2腺病毒载体的构建及其诱导小鼠抗肝癌免疫的初步研究 被引量：1

4

作者 黄洪莲 王小宁 +6 位作者 钱其军 沈峰 谢天培 施乐华 陈汉 吴孟超 郭亚军 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期330-333,共4页

探讨重组腺病毒介导的Ｂ７２基因转染对小鼠肝癌细胞免疫原性的影响。构建Ｂ７２的重组腺病毒载体，通过重组腺病毒介导，将Ｂ７２和ｌａｃＺ基因分别转染小鼠肝癌细胞Ｈｅｐａ１６，并在不同时相检测Ｂ７２和ｌａｃＺ基因的... 探讨重组腺病毒介导的Ｂ７２基因转染对小鼠肝癌细胞免疫原性的影响。构建Ｂ７２的重组腺病毒载体，通过重组腺病毒介导，将Ｂ７２和ｌａｃＺ基因分别转染小鼠肝癌细胞Ｈｅｐａ１６，并在不同时相检测Ｂ７２和ｌａｃＺ基因的表达水平，建立小鼠肝癌肿瘤模型，在小鼠体内观察Ｂ７２基因转染对小鼠肝癌免疫原性的影响。成功地构建了Ｂ７２的重组腺病毒载体，用Ｂ７２及ｌａｃＺ重组腺病毒分别转染小鼠肝癌细胞，转染后４ｈ开始检测到Ｂ７２或ｌａｃＺ表达，其表达量逐渐升高至４８～７２ｈ达高峰后逐渐降低。经２次／ｗ肿瘤内注射，共５次Ｂ７２治疗后，肝癌体积明显缩小，与对照生理盐水组及ｌａｃＺ组相比，有显著差异。小鼠肝癌组织中Ｂ７２的表达能增强其免疫原性，减少其致瘤性。 展开更多

关键词 免疫基因治疗 重组腺病毒 B7-2腺病毒 肝肿瘤

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论机遇在科学研究中的重要作用——tk基因/GCV对肿瘤细胞体外杀伤机制新假设的形成与验证 被引量：1

5

作者 吴小兵 董小岩 《医学与哲学》 1997年第3期146-148,共3页

论机遇在科学研究中的重要作用———ｔｋ基因／ＧＣＶ对肿瘤细胞体外杀伤机制新假设的形成与验证第一军医大学分子生物学研究所（广州５１０５１５）吴小兵第一军医大学分子免疫学研究所（广州５１０５１５）董小岩笔者从１９９４年初... 论机遇在科学研究中的重要作用———ｔｋ基因／ＧＣＶ对肿瘤细胞体外杀伤机制新假设的形成与验证第一军医大学分子生物学研究所（广州５１０５１５）吴小兵第一军医大学分子免疫学研究所（广州５１０５１５）董小岩笔者从１９９４年初开始从事“逆转录病毒介导的ＨｙＴＫ... 展开更多

关键词 TK基因 肿瘤细胞 杀伤机制 机遇 科学研究

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rhIL-2/GM-CSF融合蛋白抗体制备、鉴定及其生物学活性研究

6

作者 林来兴妹 周明乾 +2 位作者 陈泽洪 张亚莉 王小宁 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1103-1105,共3页

目的 :制备 rh IL - 2 / GM- CSF融合蛋白的抗体 ,并观察该抗体的特异性及对融合蛋白生物学活性的影响。方法 :用纯化的融合蛋白 (rh IL - 2 / GM- CSF)作为抗原 ,免疫新西兰兔后制备抗血清 ,用 EL ISA和 Dot- EL ISA检测抗体滴度和特... 目的 :制备 rh IL - 2 / GM- CSF融合蛋白的抗体 ,并观察该抗体的特异性及对融合蛋白生物学活性的影响。方法 :用纯化的融合蛋白 (rh IL - 2 / GM- CSF)作为抗原 ,免疫新西兰兔后制备抗血清 ,用 EL ISA和 Dot- EL ISA检测抗体滴度和特异性。用依赖株细胞增殖实验检测抗体对 rh IL - 2 / GM- CSF生物学活性的影响。 结果 :此抗体效价高 ,特异性好 ,不仅与融合蛋白(rh IL - 2 / GM- CSF)、IL - 2以及 GM- CSF发生反应 ,而且能够竞争抑制 rh IL - 2 / GM- CSF的生物学活性。 结论 :此抗体可用于融合蛋白 (rh IL - 2 / GM- CSF) 展开更多

关键词 RHIL-2 GM-CSF 融合蛋白 抗体 制备 鉴定 生物学活性 白细胞介素-2 粒-巨噬细胞集落刺激因子

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腺病毒B7-1治疗小鼠肝癌及其免疫机理的初步研究

7

作者 黄洪莲 王小宁 +4 位作者 车小燕 钱其军 崔贞福 郭亚军 吴孟超 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第3期161-164,共4页

为了探讨肿瘤原位转染共刺激分子Ｂ７－１对小鼠肝癌的治疗作用及其机理，本文在建立了小鼠肝癌模型的基础上，采用表达小鼠Ｂ７－１的重组腺病毒直接瘤体内注射，结果可显著抑制小鼠肝癌的生长，明显延长荷瘤小鼠的存活期。肝癌组织Ｈ... 为了探讨肿瘤原位转染共刺激分子Ｂ７－１对小鼠肝癌的治疗作用及其机理，本文在建立了小鼠肝癌模型的基础上，采用表达小鼠Ｂ７－１的重组腺病毒直接瘤体内注射，结果可显著抑制小鼠肝癌的生长，明显延长荷瘤小鼠的存活期。肝癌组织ＨＥ染色及免疫组织化学分析发现，经重组腺病毒ｍＢ７－１治疗的肿瘤内大片组织坏死出血，坏死组织与未坏死组织交界处有大量淋巴细胞浸润，浸润淋巴细胞表现为ＣＤ３＋，ＣＤ８＋，ＦａｓＬ＋和ｐｅｒｆｏｒｉｎ＋。ＲＴ－ＰＣＲ显示，ＦａｓＬ和穿孔素ｍＲＮＡ表达呈阳性。 展开更多

关键词 肝肿瘤 免疫机理 腺病毒 B7-1 治疗

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产植酸酶青霉菌株的分离及其生物学特性的初步研究 被引量：1

8

作者 陈旭 方向东 +2 位作者 刁志宏 李全贞 钟英长 《第一军医大学学报》 CSCD 1998年第2期112-115,共4页

从霉变的菜籽粕中筛选出具有产生植酸酶、降解植酸能力的青霉菌株P7。在液态发酵条件下，48h植酸降解率达96％。采用DEAE－52柱层析技术部分纯化植酸酶，对其生物学特征的研究表明：该植酸酶的最适反应温度为60℃，最适反应酸碱度为pH5.... 从霉变的菜籽粕中筛选出具有产生植酸酶、降解植酸能力的青霉菌株P7。在液态发酵条件下，48h植酸降解率达96％。采用DEAE－52柱层析技术部分纯化植酸酶，对其生物学特征的研究表明：该植酸酶的最适反应温度为60℃，最适反应酸碱度为pH5.0，测得酶的米氏常数为0．25mmol／L。 展开更多

关键词 青霉 植酸 植酸酶 生物学特征 饲料

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雷公藤内酯醇抗移植排斥反应的研究 被引量：7

9

作者 邹小明 方向东 +3 位作者 罗爱武 李全启 李金声 王小宁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第3期201-204,共4页

应用小鼠同种异位心肌移植模型,证实雷公藤内酯醇(triptolide,Tri)可明显延长移植心的存活期。对T淋巴细胞增殖活性影响的实验结果表明,Tri对ConA激活的淋巴细胞转化及特异性抗原激活的混合淋巴细胞反应均有明显地抑制作用;同时,Tri对C... 应用小鼠同种异位心肌移植模型,证实雷公藤内酯醇(triptolide,Tri)可明显延长移植心的存活期。对T淋巴细胞增殖活性影响的实验结果表明,Tri对ConA激活的淋巴细胞转化及特异性抗原激活的混合淋巴细胞反应均有明显地抑制作用;同时,Tri对ConA诱导的IL2产生无影响,但对IL2受体的表达有明显地抑制作用。 展开更多

关键词 雷公藤内酯醇 心肌移植 排斥反应 免疫抑制

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BALB/C小鼠对不同佐剂SARS灭活疫苗的早期免疫反应 被引量：6

10

作者 熊盛 王一飞 +13 位作者 刘新建 张美英 张传海 刘石生 冉延超 杨红宇 李久香 陆家海 张庶民 万卓越 鄢心革 郑焕英 孟民杰 范江林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期413-417,共5页

目的 :研究含不同佐剂的SARS灭活疫苗免疫小鼠后 ,小鼠的早期细胞免疫和体液免疫反应。方法 :灭活的SARS冠状病毒F6 9株分别与弗氏佐剂、氢氧化铝、CpG佐剂配伍 ,制备灭活疫苗。接种 6周龄SPF级BALB C小鼠。定时采血 ,分析小鼠外周血中C... 目的 :研究含不同佐剂的SARS灭活疫苗免疫小鼠后 ,小鼠的早期细胞免疫和体液免疫反应。方法 :灭活的SARS冠状病毒F6 9株分别与弗氏佐剂、氢氧化铝、CpG佐剂配伍 ,制备灭活疫苗。接种 6周龄SPF级BALB C小鼠。定时采血 ,分析小鼠外周血中CD4 + 、CD8+ T细胞亚群动态变化 ,同时测定鼠血清中特异性IgG抗体及抗体的病毒中和活性。结果 :由3种佐剂制备的SARS灭活疫苗免疫小鼠后 ,CD4 + 、CD8+ T细胞百分比升高或无明显改变 ,CD4 CD8比值无显著性改变。其中 ,弗氏佐剂疫苗免疫小鼠的CD4 + T细胞百分比升高较明显 ,且在一段时间内 ,维持在一个较高的水平 ;铝佐剂疫苗免疫小鼠后 ,未观察到明显T细胞亚群改变 ;而CpG佐剂疫苗免疫小鼠的CD8+ T细胞百分比改变较其它佐剂疫苗改变更明显。与此相异的是 ,3种疫苗均可诱导小鼠产生较高滴度特异性IgG抗体 ,并且所产生的抗体具有中和活性。在初免后第 34天 ,3种佐剂组的IgG抗体滴度分别为 1∶1 2 80 0、1∶32 0 0和 1∶1 6 0 0 ,中和效价分别为 1∶2 5 6 0、1∶96 0和 1∶32 0。结论 :SARS灭活疫苗接种小鼠后 ,可诱导较强的体液免疫反应 ,同时轻度上调CD4 + 、CD8+ T细胞活性 ,程度因佐剂而异。 展开更多

关键词 SAPS 灭活疫苗 T细胞亚群 IGG抗体 中和活性

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重组人白细胞介素-2/粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子融合蛋白的纯化及复性研究 被引量：3

11

作者 林来兴妹 周明乾 +4 位作者 陈泽洪 胡志明 刘菁 黄树琪 王小宁 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第4期245-247,共3页

目的 研究重组人白细胞介素－２／粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＩＬ－２／ＧＭ－ＣＳＦ）融合蛋白纯化及复性的最佳条 件。方法 常规方法提取包涵体，用本室专利技术提纯，复性后样品经 ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦ离子交换... 目的 研究重组人白细胞介素－２／粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＩＬ－２／ＧＭ－ＣＳＦ）融合蛋白纯化及复性的最佳条 件。方法 常规方法提取包涵体，用本室专利技术提纯，复性后样品经 ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦ离子交换层析，获得融合蛋 白。结果获得具有生物活性的融合蛋白，其纯度达到９５％。结论 此工艺操作简便，纯化效果好，获得率高。 展开更多

关键词 白细胞介素-2 粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子 融合蛋白 包涵体 纯化 复性

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微柱高效液相色谱分析基因工程药物rhG-CSF肽谱的应用研究 被引量：5

12

作者 周俊岭 方向东 +3 位作者 王泽仿 黄树其 杨德立 王小宁 《第一军医大学学报》 CSCD 1998年第2期138-140,共3页

用二硫代苏糖醇还原基因工程药物产品中的二硫键，并用碘乙酰胺封闭巯基，再用胰蛋白酶裂解，经微柱高效液相色谱分离分析rhG－CSF产品的肽谱，3个批号批间结果完全一致。该方法具有系统操作误差小，用样品量少，较常现高效液相色谱检... 用二硫代苏糖醇还原基因工程药物产品中的二硫键，并用碘乙酰胺封闭巯基，再用胰蛋白酶裂解，经微柱高效液相色谱分离分析rhG－CSF产品的肽谱，3个批号批间结果完全一致。该方法具有系统操作误差小，用样品量少，较常现高效液相色谱检测灵敏度高，重视性好的优点。是适用于基因工程药物产品肽谱分析，衡量产品生产纯化工艺稳定性比较优秀的方法之一。 展开更多

关键词 微柱高效液相色谱 基因工程药物 RHG-CSF 肽谱

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IL-2-PE40、CsA、雷公藤治疗角膜移植排斥反应实验研究 被引量：5

13

作者 吴京 周国筠 +2 位作者 付瑞 王小宁 高基民 《眼科研究》 CSCD 1998年第4期251-253,共3页

目的采用ＩＬ２ＰＥ４０、ＣｓＡ、雷公藤对角膜移植排斥反应进行实验性治疗。方法以Ｗｉｓｔａｒ大鼠异种角膜异位移植为模型，比较ＩＬ２ＰＥ４０、ＣｓＡ、雷公藤的免疫抑制疗效，同时测外周血Ｔ淋巴细胞亚群及Ｔ淋巴细胞集... 目的采用ＩＬ２ＰＥ４０、ＣｓＡ、雷公藤对角膜移植排斥反应进行实验性治疗。方法以Ｗｉｓｔａｒ大鼠异种角膜异位移植为模型，比较ＩＬ２ＰＥ４０、ＣｓＡ、雷公藤的免疫抑制疗效，同时测外周血Ｔ淋巴细胞亚群及Ｔ淋巴细胞集落形成数。结果ＩＬ２ＰＥ４０、ＣｓＡ、雷公藤均可推迟排斥反应的发生时间。ＩＬ２ＰＥ４０能明显减弱Ｔ淋巴细胞集落形成能力，Ｔ细胞集落数术前为２０１±１８．９，术后第５天为２１３±１９．４，而ＣｓＡ、雷公藤无该方面作用。结论ＩＬ２ＰＥ４０较ＣｓＡ、雷公藤特异性高，且提示有可能在更高层次上抑制排斥反应的发生。 展开更多

关键词 IL-2-PE40 CSA 雷公藤 角膜移植 排斥反应

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IL2－GMCSF融合蛋白高效表达条件的初步研究 被引量：5

14

作者 黄树其 林来兴妹 +5 位作者 齐锡位 殷志新 刘新垣 方向东 高基民 王小宁 《第一军医大学学报》 CSCD 1996年第3期224-226,共3页

已构建好的白细胞介素２－粒／巨噬细胞集落刺激因子（ＩＬ２－ＧＭＣＳＦ）融合基因载体，转化大肠杆菌ＤＨ５α，进行热诱导表达条件的研究。工程菌在３０℃培养活化至ＯＤ６００ｎｍ＝０．５±０．１时，融合蛋白的表达率最为稳... 已构建好的白细胞介素２－粒／巨噬细胞集落刺激因子（ＩＬ２－ＧＭＣＳＦ）融合基因载体，转化大肠杆菌ＤＨ５α，进行热诱导表达条件的研究。工程菌在３０℃培养活化至ＯＤ６００ｎｍ＝０．５±０．１时，融合蛋白的表达率最为稳定；而后转为４２℃热诱导４±０．５ｈ，蛋白表达效率最高。 展开更多

关键词 IL2-GMCSF 融合基因 融合蛋白 高效表达

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角质细胞生长因子2的优化表达及纯化研究 被引量：3

15

作者 林来兴妹 孟晓静 +5 位作者 王小宁 吉程程 罗林 亦伟 龙滨 张钧 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第S1期11-13,共3页

目的优化工程菌的表达,比较肝素亲和层析、离子交换层析两种方法的角质细胞生长因子2（keratinocyte growthfactor,KGF-2）的纯化产量及纯度,以获取高效的提纯工艺。方法工程菌分别进行生长密度和诱导时间的实验,并将细茵裂解液上两种... 目的优化工程菌的表达,比较肝素亲和层析、离子交换层析两种方法的角质细胞生长因子2（keratinocyte growthfactor,KGF-2）的纯化产量及纯度,以获取高效的提纯工艺。方法工程菌分别进行生长密度和诱导时间的实验,并将细茵裂解液上两种层析柱进行分步洗脱,收集目标蛋白,进行电泳分析。结果获得高表达KGF-2工程菌,表达率为29％;用两种层析方法获得电泳纯KGF-2。结论 离子交换层析在纯化过程中具有一定优势。 展开更多

关键词 角质细胞生长因子2 纯化

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受体编辑/修正——免疫识别与耐受的新模式 被引量：6

16

作者 王小宁 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1071-1074,共4页

发生在中枢未成熟 T、B细胞中的受体编辑和外周成熟 T、B细胞中的受体修正是近年提出的免疫耐受的新机制。在这一机制中 ,自身抗原应答 T、B细胞 ,其抗原受体特异性可通过基因再重排而改变 ,一方面免于被机体清除 ,另一方面又增加了抗... 发生在中枢未成熟 T、B细胞中的受体编辑和外周成熟 T、B细胞中的受体修正是近年提出的免疫耐受的新机制。在这一机制中 ,自身抗原应答 T、B细胞 ,其抗原受体特异性可通过基因再重排而改变 ,一方面免于被机体清除 ,另一方面又增加了抗原受体的多样性。与克隆选择学说不同 ,选择不仅仅是细胞水平上的选择 ,而且也是分子水平上的选择。此过程需要某些细胞和细胞因子的参与。 展开更多

关键词 受体编辑 受体修正 免疫耐受 免疫识别

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IL-2-PE40抑制大鼠角膜上皮细胞MHC抗原表达的研究 被引量：1

17

作者 吴京 黄发明 王小宁 《眼科新进展》 CAS 2002年第1期4-5,共2页

目的　了解正常大鼠角膜细胞在体外经 γ-干扰素诱导后 ,M HC- 、 类抗原异常表达的情况 ,并观察比较 IL- 2 -PE4 0、Cs A对角膜细胞 M HC- 、 类抗原异常表达的免疫抑制作用。方法　采用 ACA S- 570粘附式细胞分析仪和免疫荧光技术 ... 目的　了解正常大鼠角膜细胞在体外经 γ-干扰素诱导后 ,M HC- 、 类抗原异常表达的情况 ,并观察比较 IL- 2 -PE4 0、Cs A对角膜细胞 M HC- 、 类抗原异常表达的免疫抑制作用。方法　采用 ACA S- 570粘附式细胞分析仪和免疫荧光技术 ,对体外原代培养经γ-干扰素诱导后的正常大鼠角膜上皮细胞 M H C- 、 类抗原表达的相对量进行测定 ,并在培养液中加入新型免疫抑制剂 IL- 2 - PE4 0及 Cs A,进一步测定角膜细胞 MH C- 、 类抗原的表达量。结果　未加入 γ-干扰素 ,MH C- 类抗原的表达量为 98.1± 13 .9,MH C- 类抗原无表达 ,经 γ-干扰素诱导后 MH C- 类抗原的表达量为 10 0 6.1±2 6.2 ,MH C- 类抗原的表达量为 997.2± 2 3 .1,有显著性差异。 IL - 2 - PE4 0组 MH C- 类抗原表达量为 618.9± 2 1.3 ,M HC- 类抗原表达量为 691.3± 2 2 .1,Cs A组 MH C- 类抗原表达量为 62 3 .6± 2 2 .1,M HC- 类抗原表达量为 689.3± 2 5.0 ,两者分别与注射用水组比较 ,有显著性差异 ,两者之间比较差异不显著。结论　在体外 ,γ-干扰素可诱导角膜上皮细胞 MH C- 、 类抗原的异常表达 ;IL- 2 - PE4 0及 Cs A均能不同程度地抑制这种表达。 展开更多

关键词 大鼠 角膜移植 主要组织相容性复合体抗原 白细胞介素-2-绿脓杆菌毒素

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丙型肝炎病毒的垂直传播研究

18

作者 李珉珉 刘叔文 +1 位作者 王珊珊 王小宁 《第一军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1290-1292,共3页

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)的垂直传播机制。方法选择6对抗-HCV与HCV RNA均阳性的母亲与胎儿,2对父亲抗-HCV与HCV RNA阳性、母亲阴性的胎儿为研究对象,检测父、母亲与子代HCV的感染标志,同时比较两代间所携HCV的基因型别与HCV C/E1区的... 目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)的垂直传播机制。方法选择6对抗-HCV与HCV RNA均阳性的母亲与胎儿,2对父亲抗-HCV与HCV RNA阳性、母亲阴性的胎儿为研究对象,检测父、母亲与子代HCV的感染标志,同时比较两代间所携HCV的基因型别与HCV C/E1区的序列同源性。结果6对母亲与胎儿HCV RNA阳性,基因型均一致,其中5对基因型别属Ⅱ型,1对属Ⅲ型。母亲与子代间所携HCV C/E1区的序列同源性极高,与其他母亲间、胎儿间的HCV同源性显著差异。2对父亲HCV RNA 阳性其胎儿未检测到HCV RNA。结论母亲与子代间存在出生前期的HCV的垂直传播。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 垂直传播 检测 预防 母婴传播 父婴传播

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共刺激分子CD28单克隆抗体制备的新策略

19

作者 车小燕 林来兴妹 +2 位作者 陈伟平 聂飚 邱庆林 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第6期411-413,共3页

目的发展一种制备抗人ＣＤ２８单克隆抗体的新方法。方法构建编码人ＣＤ２８基因的逆转录病毒表达系统，感染 ＢＡＬＢ／ｃ小鼠骨髓瘤细胞ＮＳ－ｌ，使其细胞膜表达ＣＤ２８抗原并用于免疫小鼠，制备单克隆抗体。结果获得分泌抗人 ＣＤ... 目的发展一种制备抗人ＣＤ２８单克隆抗体的新方法。方法构建编码人ＣＤ２８基因的逆转录病毒表达系统，感染 ＢＡＬＢ／ｃ小鼠骨髓瘤细胞ＮＳ－ｌ，使其细胞膜表达ＣＤ２８抗原并用于免疫小鼠，制备单克隆抗体。结果获得分泌抗人 ＣＤ２８单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为Ｅ６６－３Ｓ，ＩｇＧ亚类鉴定为ＩｇＧ１。该株单抗能够特异性识别ＣＤ２８阳性的Ｔ细 胞，并完全阻断标准ＣＤ２８抗体与细胞表面ＣＤ２８抗原结合。在亚剂量分裂原的共刺激下，具有促进Ｔ淋巴细胞活化和 增殖作用。结论Ｅ６６－３Ｓ具有高度特异性和共刺激活性，为临床免疫治疗奠定了基础，同时，也为进一步制备其它膜抗 原的单克隆抗体提供了一种新途径． 展开更多

关键词 抗原 CD28 单克隆抗体 多发性骨髓瘤 逆转录病毒体 共刺激分子

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细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)的研究进展

20

作者 刘宏 方向东 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1997年第3期65-67,共3页

ＣＴＬＡ－４是Ｔ细胞上的一种跨膜受体，与ＣＤ２８共同享有Ｂ７分子配体，而ＣＴＬＡ－４与Ｂ７分子结合后诱导Ｔ细胞无反应性，参与免疫反应的负调节。基因重组的ＣＴＬＡ－４Ｉｇ可在体内外有效、特异地抑制细胞和体液免疫反应，对... ＣＴＬＡ－４是Ｔ细胞上的一种跨膜受体，与ＣＤ２８共同享有Ｂ７分子配体，而ＣＴＬＡ－４与Ｂ７分子结合后诱导Ｔ细胞无反应性，参与免疫反应的负调节。基因重组的ＣＴＬＡ－４Ｉｇ可在体内外有效、特异地抑制细胞和体液免疫反应，对移植排斥反应及各种自身免疫性疾病有显著的治疗作用，毒副作用极低，是目前被认为较有希望的新的免疫抑制药物。 展开更多

关键词 CTLA-4 T细胞 细胞毒性 研究进展

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