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HBeAg结合蛋白4剪切体HBeBP4A基因酵母表达载体的构建及表达研究
1
作者
张健康
成军
+3 位作者
郭江
刘春艳
赵龙凤
洪源
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期213-215,共3页
目的在真核生物酵母细胞中表达乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白4基因剪切体HBeBP4A基因。方法以pcDNATM3.1/myc-HisA-HBeBP4A重组质粒作为模板,经RT-PCR扩增HBeBP4A基因,克隆到pGEM-T载体中并测序鉴定,酶切回收后连接到酵母表达质粒pGBKT7中...
目的在真核生物酵母细胞中表达乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白4基因剪切体HBeBP4A基因。方法以pcDNATM3.1/myc-HisA-HBeBP4A重组质粒作为模板,经RT-PCR扩增HBeBP4A基因,克隆到pGEM-T载体中并测序鉴定,酶切回收后连接到酵母表达质粒pGBKT7中并转化酵母AH109,色氨酸缺陷型培养基(SD/-Trp)上筛选阳性菌落,提取酵母蛋白质,行SDS-PAGE电泳和Western blotting分析。结果成功扩增出HBeBP4A基因,测序结果符合GenBank报告序列。酶切回收的HBeBP4A基因片段成功克隆入酵母表达载体pGBKT7并转化入酵母细胞AH109中,Western blotting分析显示该基因在酵母细胞中表达,表达产物相对分子量为61.37kD。结论成功构建了HBeBP4A酵母表达载体,并在酵母细胞中表达。
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关键词
肝炎病毒
乙型
肝炎e抗原
乙型
剪切体
基因表达
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题名
HBeAg结合蛋白4剪切体HBeBP4A基因酵母表达载体的构建及表达研究
1
作者
张健康
成军
郭江
刘春艳
赵龙凤
洪源
机构
山西医科大学第一医院消化内科
北京地坛医院传染病研究所
空军太原干休所卫生所
山西医科大学第一医院感染病科
出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期213-215,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(30371288)
国家重点基础研究项目(973项目)(2004CB518908)
北京市自然科学基金项目(5042024)
文摘
目的在真核生物酵母细胞中表达乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白4基因剪切体HBeBP4A基因。方法以pcDNATM3.1/myc-HisA-HBeBP4A重组质粒作为模板,经RT-PCR扩增HBeBP4A基因,克隆到pGEM-T载体中并测序鉴定,酶切回收后连接到酵母表达质粒pGBKT7中并转化酵母AH109,色氨酸缺陷型培养基(SD/-Trp)上筛选阳性菌落,提取酵母蛋白质,行SDS-PAGE电泳和Western blotting分析。结果成功扩增出HBeBP4A基因,测序结果符合GenBank报告序列。酶切回收的HBeBP4A基因片段成功克隆入酵母表达载体pGBKT7并转化入酵母细胞AH109中,Western blotting分析显示该基因在酵母细胞中表达,表达产物相对分子量为61.37kD。结论成功构建了HBeBP4A酵母表达载体,并在酵母细胞中表达。
关键词
肝炎病毒
乙型
肝炎e抗原
乙型
剪切体
基因表达
Keywords
hepatitis B virus
hepatitis B e antigens
spliced variant
gene expression
分类号
R341.3 [医药卫生—基础医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HBeAg结合蛋白4剪切体HBeBP4A基因酵母表达载体的构建及表达研究
张健康
成军
郭江
刘春艳
赵龙凤
洪源
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
0
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