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环磷腺苷效应元件结合蛋白对前列腺癌PC3细胞迁移、侵袭和细胞周期的影响
1
作者
李蕊
杨柳
刘家云
《中国肿瘤生物治疗杂志》
北大核心
2025年第6期587-593,共7页
目的:探讨环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)对前列腺癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:常规培养前列腺癌细胞PC3,用转染试剂将过表达对照质粒,CREB过表达质粒(CREB-oe)、敲减对照序列(si-NC)和si-CREB序列转染至PC3细胞,分为vector,CREB...
目的:探讨环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)对前列腺癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:常规培养前列腺癌细胞PC3,用转染试剂将过表达对照质粒,CREB过表达质粒(CREB-oe)、敲减对照序列(si-NC)和si-CREB序列转染至PC3细胞,分为vector,CREB-oe、si-NC和si-CREB组。用划痕愈合实验、Transwell小室实验和流式细胞术分别检测各组细胞的迁移、侵袭能力和细胞周期情况。用CRISPR/cas9技术构建CREB敲除的PC3细胞,用PC3细胞移植瘤实验检测CREB敲除对移植瘤生长的影响。结果:在PC3细胞中成功地敲减或过表达了CREB(均P <0.01),过表达或敲减CREB均可明显促进或抑制PC3细胞的迁移、侵袭能力(均P <0.01),过表达CREB可促使PC3细胞进入S期,而敲减CREB表达则使PC3细胞阻滞于G1期(均P <0.01)。成功地构建了CREB敲除PC3细胞,敲除CREB可明显抑制PC3细胞移植瘤的生长(P <0.01)。结论:敲减或敲除CREB能够抑制PC3细胞的迁移和侵袭,并使其阻滞于G1期,进而抑制移植瘤的生长。
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关键词
前列腺癌
CRISPR/Cas9
CREB基因
细胞周期
迁移
侵袭
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职称材料
通过CRISPR/Cas9技术抑制TFDP3基因对前列腺癌PC3细胞生物学功能的影响
被引量：
2
2
作者
李蕊
杨柳
+4 位作者
李金洁
刁艳君
苏明权
郝晓柯
刘家云
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第5期443-450,共8页
目的:通过CRISPR/Cas9技术构建前列腺癌PC3细胞TFDP3基因敲除的稳转株,探讨抑制TFDP3表达对PC3细胞周期、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。方法:通过生物信息学筛选sgRNA,通过CRISPR/Cas9技术、构建抑制TFDP3基因表达的sgRNA-Cas9共转染慢...
目的:通过CRISPR/Cas9技术构建前列腺癌PC3细胞TFDP3基因敲除的稳转株,探讨抑制TFDP3表达对PC3细胞周期、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。方法:通过生物信息学筛选sgRNA,通过CRISPR/Cas9技术、构建抑制TFDP3基因表达的sgRNA-Cas9共转染慢病毒,感染PC3细胞后筛选获取稳转细胞株。通过流式细胞术对TFDP3基因敲除的实验组与空白对照组进行细胞周期和凋亡检测,并进一步通过划痕实验和Transwell实验进行细胞迁移和侵袭能力检测。结果:通过生物信息学筛选获得3条sgRNA,其中sgRNA2有明显的抑制前列腺癌细胞基因表达的功能;通过CRISPR/Cas9技术成功构建了基于CRISPR/Cas9介导的TFDP3低表达的PC3细胞稳转株。抑制TFDP3基因表达后,相比于对照组,KO组中G0/G1期细胞百分比增加、G2/M期细胞百分比下降(P<0.05或P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),细胞迁移率明显下降[24 h迁移率:(44.00±1.60)%vs(65.00±4.40)%,P<0.01],穿过聚碳酸酯膜的侵袭细胞数明显下降[(185.89±11.71)vs(248.33±11.95)个,P<0.01]。结论:通过CRISPR/Cas9技术抑制TFDP3基因表达后,PC3细胞发生周期阻滞、凋亡率也有所增加、迁移和侵袭能力显著减弱,提示TFDP3是一个前列腺癌促癌基因。
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关键词
CRISPR/Cas9
TFDP3基因
前列腺癌
PC3细胞
细胞周期
凋亡
迁移
侵袭
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职称材料
题名
环磷腺苷效应元件结合蛋白对前列腺癌PC3细胞迁移、侵袭和细胞周期的影响
1
作者
李蕊
杨柳
刘家云
机构
空军军医大学附属西京医院全军临床医学检验研究所
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
北大核心
2025年第6期587-593,共7页
基金
国家自然科学基金(No.81372747)。
文摘
目的:探讨环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)对前列腺癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:常规培养前列腺癌细胞PC3,用转染试剂将过表达对照质粒,CREB过表达质粒(CREB-oe)、敲减对照序列(si-NC)和si-CREB序列转染至PC3细胞,分为vector,CREB-oe、si-NC和si-CREB组。用划痕愈合实验、Transwell小室实验和流式细胞术分别检测各组细胞的迁移、侵袭能力和细胞周期情况。用CRISPR/cas9技术构建CREB敲除的PC3细胞,用PC3细胞移植瘤实验检测CREB敲除对移植瘤生长的影响。结果:在PC3细胞中成功地敲减或过表达了CREB(均P <0.01),过表达或敲减CREB均可明显促进或抑制PC3细胞的迁移、侵袭能力(均P <0.01),过表达CREB可促使PC3细胞进入S期,而敲减CREB表达则使PC3细胞阻滞于G1期(均P <0.01)。成功地构建了CREB敲除PC3细胞,敲除CREB可明显抑制PC3细胞移植瘤的生长(P <0.01)。结论:敲减或敲除CREB能够抑制PC3细胞的迁移和侵袭,并使其阻滞于G1期,进而抑制移植瘤的生长。
关键词
前列腺癌
CRISPR/Cas9
CREB基因
细胞周期
迁移
侵袭
Keywords
prostate cancer
CRISPR/Cas9
cyclic adenosine monophosphate responsive element binding protein(CREB)gene
cell cycle
migration
invasion
分类号
R737.25 [医药卫生—肿瘤]
R730.54 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
通过CRISPR/Cas9技术抑制TFDP3基因对前列腺癌PC3细胞生物学功能的影响
被引量：
2
2
作者
李蕊
杨柳
李金洁
刁艳君
苏明权
郝晓柯
刘家云
机构
空军军医大学附属西京医院全军临床医学检验研究所
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第5期443-450,共8页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81372747)。
文摘
目的:通过CRISPR/Cas9技术构建前列腺癌PC3细胞TFDP3基因敲除的稳转株,探讨抑制TFDP3表达对PC3细胞周期、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。方法:通过生物信息学筛选sgRNA,通过CRISPR/Cas9技术、构建抑制TFDP3基因表达的sgRNA-Cas9共转染慢病毒,感染PC3细胞后筛选获取稳转细胞株。通过流式细胞术对TFDP3基因敲除的实验组与空白对照组进行细胞周期和凋亡检测,并进一步通过划痕实验和Transwell实验进行细胞迁移和侵袭能力检测。结果:通过生物信息学筛选获得3条sgRNA,其中sgRNA2有明显的抑制前列腺癌细胞基因表达的功能;通过CRISPR/Cas9技术成功构建了基于CRISPR/Cas9介导的TFDP3低表达的PC3细胞稳转株。抑制TFDP3基因表达后,相比于对照组,KO组中G0/G1期细胞百分比增加、G2/M期细胞百分比下降(P<0.05或P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),细胞迁移率明显下降[24 h迁移率:(44.00±1.60)%vs(65.00±4.40)%,P<0.01],穿过聚碳酸酯膜的侵袭细胞数明显下降[(185.89±11.71)vs(248.33±11.95)个,P<0.01]。结论:通过CRISPR/Cas9技术抑制TFDP3基因表达后,PC3细胞发生周期阻滞、凋亡率也有所增加、迁移和侵袭能力显著减弱,提示TFDP3是一个前列腺癌促癌基因。
关键词
CRISPR/Cas9
TFDP3基因
前列腺癌
PC3细胞
细胞周期
凋亡
迁移
侵袭
Keywords
CRISPR/Cas9
TFDP3 gene
prostate cancer
PC3 cell
apoptosis
cell cycle
migration
invasion
分类号
R737.25 [医药卫生—肿瘤]
R730.54 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
环磷腺苷效应元件结合蛋白对前列腺癌PC3细胞迁移、侵袭和细胞周期的影响
李蕊
杨柳
刘家云
《中国肿瘤生物治疗杂志》
北大核心
2025
0
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下载PDF
职称材料
2
通过CRISPR/Cas9技术抑制TFDP3基因对前列腺癌PC3细胞生物学功能的影响
李蕊
杨柳
李金洁
刁艳君
苏明权
郝晓柯
刘家云
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021
2
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