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轴突导向蛋白4B(SEMA4B)通过增加肿瘤组织巨噬细胞和调节性T细胞促进肺癌细胞生长
被引量：
1
1
作者
姜俊
张瑞
+1 位作者
杨安钢
任新玲
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第1期56-62,共7页
目的探讨轴突导向蛋白4B(SEMA4B)能否调控肺癌细胞的生长。方法构建SEMA4B过表达病毒载体,并建立稳定过表达SEMA4B的Lewis肺癌(LLC)细胞株。采用实时定量PCR检测过表达的LLC细胞SEMA4B的表达水平。采用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)法检测...
目的探讨轴突导向蛋白4B(SEMA4B)能否调控肺癌细胞的生长。方法构建SEMA4B过表达病毒载体,并建立稳定过表达SEMA4B的Lewis肺癌(LLC)细胞株。采用实时定量PCR检测过表达的LLC细胞SEMA4B的表达水平。采用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)法检测SEMA4B对体外培养的LLC细胞增殖的影响。检测LLC细胞移植瘤小鼠模型中SEMA4B对LLC细胞生长的影响。采用流式细胞术检测SEMA4B对肿瘤免疫微环境中CD4^+CD25^+FOXP3^+调节性T细胞(Treg)的百分比。免疫组织化学染色法检测瘤组织CD31、增殖细胞核抗原(PCNA)、 CC趋化因子配体2(CCL2)及F4/80^+巨噬细胞的表达。结果成功建立了SEMA4B过表达细胞株, SEMA4B过表达促进LLC细胞增殖,过表达组的移植瘤瘤块体积明显大于对照组。过表达组瘤组织CD31表达水平升高、巨噬细胞和Treg增加、 CCL2升高。结论 SEMA4B通过增加肿瘤组织巨噬细胞、 Treg数量,促进肿瘤血管形成,从而促进肺癌细胞的增殖和肿瘤生长。
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关键词
肺癌
轴突导向蛋白4B(SEMA4B)
肿瘤免疫微环境
血管形成
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职称材料
双定位信号增强工程化蛋白线粒体靶向性呈递
2
作者
周冰倩
李尚朴
+5 位作者
王旭
孟祥宇
邓竞荣
邢金良
王建刚
徐坤
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第11期937-946,共10页
有效传递工程化改造的蛋白进入线粒体对开发高效的线粒体DNA编辑工具、实现线粒体疾病精准治疗具有重要意义。本研究选取eGFP和Cas9基因,在其上游或/和下游引入不同的线粒体定位信号(mitochondrial localization signal,MLS)序列,分别...
有效传递工程化改造的蛋白进入线粒体对开发高效的线粒体DNA编辑工具、实现线粒体疾病精准治疗具有重要意义。本研究选取eGFP和Cas9基因,在其上游或/和下游引入不同的线粒体定位信号(mitochondrial localization signal,MLS)序列,分别构建了相应的工程化蛋白表达载体。将不同表达载体转染HEK293T细胞后,利用荧光共定位实验和免疫印迹实验分析不同工程化蛋白的线粒体靶向性呈递效果。结果显示,相比单端添加MLS的eGFP和Cas9蛋白,双端MLS改造均显著提高了工程化蛋白的线粒体靶向性呈递效率。推测双MLS策略可增强工程化蛋白的线粒体靶向性,为以后开发高效的线粒体DNA编辑工具奠定了理论基础。
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关键词
线粒体疾病
线粒体DNA编辑
工程化蛋白
线粒体定位信号
线粒体靶向
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职称材料
题名
轴突导向蛋白4B(SEMA4B)通过增加肿瘤组织巨噬细胞和调节性T细胞促进肺癌细胞生长
被引量：
1
1
作者
姜俊
张瑞
杨安钢
任新玲
机构
空军
军医大学
附属一院呼吸内科
空军军医大学肿瘤生物学国家重点实验室
空军军医大学肿瘤生物学国家重点实验室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第1期56-62,共7页
基金
国家自然科学基金(81871880)。
文摘
目的探讨轴突导向蛋白4B(SEMA4B)能否调控肺癌细胞的生长。方法构建SEMA4B过表达病毒载体,并建立稳定过表达SEMA4B的Lewis肺癌(LLC)细胞株。采用实时定量PCR检测过表达的LLC细胞SEMA4B的表达水平。采用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)法检测SEMA4B对体外培养的LLC细胞增殖的影响。检测LLC细胞移植瘤小鼠模型中SEMA4B对LLC细胞生长的影响。采用流式细胞术检测SEMA4B对肿瘤免疫微环境中CD4^+CD25^+FOXP3^+调节性T细胞(Treg)的百分比。免疫组织化学染色法检测瘤组织CD31、增殖细胞核抗原(PCNA)、 CC趋化因子配体2(CCL2)及F4/80^+巨噬细胞的表达。结果成功建立了SEMA4B过表达细胞株, SEMA4B过表达促进LLC细胞增殖,过表达组的移植瘤瘤块体积明显大于对照组。过表达组瘤组织CD31表达水平升高、巨噬细胞和Treg增加、 CCL2升高。结论 SEMA4B通过增加肿瘤组织巨噬细胞、 Treg数量,促进肿瘤血管形成,从而促进肺癌细胞的增殖和肿瘤生长。
关键词
肺癌
轴突导向蛋白4B(SEMA4B)
肿瘤免疫微环境
血管形成
分类号
Q279 [生物学—细胞生物学]
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
双定位信号增强工程化蛋白线粒体靶向性呈递
2
作者
周冰倩
李尚朴
王旭
孟祥宇
邓竞荣
邢金良
王建刚
徐坤
机构
西北农林科技
大学
动物科技学院
空军军医大学肿瘤生物学国家重点实验室
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第11期937-946,共10页
基金
农业生物育种重大专项(编号:2023ZD04074,2023ZD04051)
肿瘤生物学国家重点实验室开放基金(编号:CBSKL2022ZDKF11)资助。
文摘
有效传递工程化改造的蛋白进入线粒体对开发高效的线粒体DNA编辑工具、实现线粒体疾病精准治疗具有重要意义。本研究选取eGFP和Cas9基因,在其上游或/和下游引入不同的线粒体定位信号(mitochondrial localization signal,MLS)序列,分别构建了相应的工程化蛋白表达载体。将不同表达载体转染HEK293T细胞后,利用荧光共定位实验和免疫印迹实验分析不同工程化蛋白的线粒体靶向性呈递效果。结果显示,相比单端添加MLS的eGFP和Cas9蛋白,双端MLS改造均显著提高了工程化蛋白的线粒体靶向性呈递效率。推测双MLS策略可增强工程化蛋白的线粒体靶向性,为以后开发高效的线粒体DNA编辑工具奠定了理论基础。
关键词
线粒体疾病
线粒体DNA编辑
工程化蛋白
线粒体定位信号
线粒体靶向
Keywords
mitochondrial diseases
mtDNA editing
protein engineering
mitochondrial localization signal
mitochondrial targeting
分类号
Q343 [生物学—遗传学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
轴突导向蛋白4B(SEMA4B)通过增加肿瘤组织巨噬细胞和调节性T细胞促进肺癌细胞生长
姜俊
张瑞
杨安钢
任新玲
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
双定位信号增强工程化蛋白线粒体靶向性呈递
周冰倩
李尚朴
王旭
孟祥宇
邓竞荣
邢金良
王建刚
徐坤
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
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已选择
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