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组蛋白H3的22个赖氨酸去甲基化酶对胎鼠棕色脂肪细胞分化的调控作用
被引量：
1
1
作者
武晓慧
徐玉乔
+5 位作者
张丰
郜松
魏佳昶
许久航
李青
苏兴利
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第4期534-541,共8页
【目的】探索胎鼠棕色脂肪细胞分化过程中组蛋白H3赖氨酸残基位点H3k4,H3k9,H3k27,H3k36的22种去甲基化酶的调控作用,为棕色脂肪细胞分化研究提供理论基础。【方法】收集怀孕时间为E13.5~E19.5 d的小鼠胚胎,每个时间点至少取3只胎鼠。...
【目的】探索胎鼠棕色脂肪细胞分化过程中组蛋白H3赖氨酸残基位点H3k4,H3k9,H3k27,H3k36的22种去甲基化酶的调控作用,为棕色脂肪细胞分化研究提供理论基础。【方法】收集怀孕时间为E13.5~E19.5 d的小鼠胚胎,每个时间点至少取3只胎鼠。取肩胛间区棕色脂肪,进行HE染色,镜下观察棕色脂肪细胞的分化情况。Realtime RT-qPCR法检测随着小鼠胚胎的发育成熟,棕色脂肪标志基因Ucp1、Cidea、Prdml6及脂肪细胞分化基因Pparγ的表达情况和棕色脂肪中组蛋白H3的22种赖氨酸去甲基化酶的基因表达情况。Westen blot法检测棕色脂肪组织中Ucp1的蛋白表达。【结果】最早在E14.5 d的胎鼠背部肩胛间区观察到棕色脂肪组织;E18.5 d胎鼠棕色脂肪细胞中出现光镜下可见的脂滴。与E15.5 d相比,Ucp1、Cidea、Prdm16及Pparγ的表达升高(P<0.05);Ucp1的蛋白表达增加(P<0.05)。与E15.5 d相比,H3k4的去甲基化酶中,Jarid1a、Jarid1b、Jarid1d、Lsd1基因表达减少(P<0.05),Jarid1c表达差异无统计学意义(P>0.05)。在H3k9的去甲基化酶中,Jmjd2a、Jmjd2b、Jmjd2c、Phf2、Jmjd1c、Jhdm2a基因表达减少(P<0.05);Phf8、Jhdm2b、Jmjd2d基因表达增加(P<0.05),MINA表达差异无统计学意义(P>0.05)。在H3k36的去甲基化酶中,Jmjd4、Jmjd5、Jhdm1b表达减少(P<0.05),Jhdm1a表达增加(P<0.05)。在H3k27的去甲基化酶中,Jmjd3、Utx、Jhdm1d表达增加(P<0.05)。【结论】在小鼠胚胎期棕色脂肪细胞的分化过程中,H3k4和H3k36去甲基化酶主要表现为基因表达下调,H3k9和H3k27去甲基化酶部分基因表达上调,这些去甲基化酶构成以转录激活和转录延长为主要效应的复杂调控网络。
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关键词
棕色脂肪细胞
分化
组蛋白H3
去甲基化酶
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职称材料
Ezh2通过维持线粒体ATP合成功能促进骨骼肌细胞分化
被引量：
1
2
作者
武晓慧
李青
+4 位作者
徐玉乔
陈佳琪
杨帆
刘婉莹
李凯
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第6期841-849,共9页
【目的】探索组蛋白H3K27me3甲基转移酶Ezh2在间充质干细胞内缺失对小鼠骨骼肌细胞分化及骨骼肌线粒体的影响。【方法】构建Ezh2间充质干细胞条件性敲除小鼠(Ezh2F/FPrx1-Cre)。HE染色、改良Gomori三色染色及四氮唑还原酶染色(NADH-TR)...
【目的】探索组蛋白H3K27me3甲基转移酶Ezh2在间充质干细胞内缺失对小鼠骨骼肌细胞分化及骨骼肌线粒体的影响。【方法】构建Ezh2间充质干细胞条件性敲除小鼠(Ezh2F/FPrx1-Cre)。HE染色、改良Gomori三色染色及四氮唑还原酶染色(NADH-TR)法观察细胞形态及线粒体情况。电镜观察骨骼肌细胞和线粒体超微结构。Western Blot法检测6周龄小鼠骨骼肌细胞中Ezh2、H3K27me3和骨骼肌分化相关基因Myogenin、Myosin、Desmin及线粒体蛋白CytC的蛋白表达量。Realtime RT-qPCR法检测骨骼肌分化相关基因和线粒体相关基因的表达情况。免疫组化染色检测骨骼肌中CytC的表达量,ATP含量测定试剂盒检测骨骼肌细胞内ATP含量。HE和NADH-TR染色观察2周龄小鼠骨骼肌。检测6周龄小鼠棕色脂肪中Ezh2蛋白含量,电镜观察小鼠棕色脂肪中的线粒体。【结果】敲除组骨骼肌中Ezh2及H3K27me3蛋白含量均明显降低。敲除组小鼠的骨骼肌肌纤维粗细不等,部分核内移,骨骼肌分化标志物Myogenin和MhcIIb的mRNA表达明显减少(均P<0.05),Myogenin蛋白表达量减少,NADH-TR和CytC免疫组化染色显示线粒体增加。电镜下敲除组骨骼肌肌原纤维粗细不等,细胞膜下及肌原纤维间线粒体数量明显增加,呈团块状聚集。线粒体无水肿,嵴无明显减少。敲除组线粒体相关基因CytC、Tfam、Pgc1α的mRNA和CytC蛋白表达升高(均P<0.05),但ATP含量明显降低(P<0.05)。2周龄小鼠骨骼肌纤维粗细不等,但NADH含量无差别。电镜下6周龄小鼠棕色脂肪细胞线粒体无数量增加或形态异常。【结论】Ezh2在间充质干细胞阶段对小鼠骨骼肌细胞分化是必须的,并维持线粒体产生ATP的功能。Ezh2缺失小鼠骨骼肌细胞线粒体产生ATP减少,线粒体数量代偿性增加。
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关键词
骨骼肌细胞
分化
EZH2
H3K27me3
线粒体
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职称材料
题名
组蛋白H3的22个赖氨酸去甲基化酶对胎鼠棕色脂肪细胞分化的调控作用
被引量：
1
1
作者
武晓慧
徐玉乔
张丰
郜松
魏佳昶
许久航
李青
苏兴利
机构
西安医学院肥胖与代谢病研究所
空军军医大学第一附属医院病理科暨病理学教研室
空军
军医大学
学员队
西安医学院教务处
出处
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第4期534-541,共8页
基金
国家自然科学基金(81572631,31000559)
西安医学院配套基金(2018PT37)
西安医学院高层次人才科研基金(2018RCYJ01)。
文摘
【目的】探索胎鼠棕色脂肪细胞分化过程中组蛋白H3赖氨酸残基位点H3k4,H3k9,H3k27,H3k36的22种去甲基化酶的调控作用,为棕色脂肪细胞分化研究提供理论基础。【方法】收集怀孕时间为E13.5~E19.5 d的小鼠胚胎,每个时间点至少取3只胎鼠。取肩胛间区棕色脂肪,进行HE染色,镜下观察棕色脂肪细胞的分化情况。Realtime RT-qPCR法检测随着小鼠胚胎的发育成熟,棕色脂肪标志基因Ucp1、Cidea、Prdml6及脂肪细胞分化基因Pparγ的表达情况和棕色脂肪中组蛋白H3的22种赖氨酸去甲基化酶的基因表达情况。Westen blot法检测棕色脂肪组织中Ucp1的蛋白表达。【结果】最早在E14.5 d的胎鼠背部肩胛间区观察到棕色脂肪组织;E18.5 d胎鼠棕色脂肪细胞中出现光镜下可见的脂滴。与E15.5 d相比,Ucp1、Cidea、Prdm16及Pparγ的表达升高(P<0.05);Ucp1的蛋白表达增加(P<0.05)。与E15.5 d相比,H3k4的去甲基化酶中,Jarid1a、Jarid1b、Jarid1d、Lsd1基因表达减少(P<0.05),Jarid1c表达差异无统计学意义(P>0.05)。在H3k9的去甲基化酶中,Jmjd2a、Jmjd2b、Jmjd2c、Phf2、Jmjd1c、Jhdm2a基因表达减少(P<0.05);Phf8、Jhdm2b、Jmjd2d基因表达增加(P<0.05),MINA表达差异无统计学意义(P>0.05)。在H3k36的去甲基化酶中,Jmjd4、Jmjd5、Jhdm1b表达减少(P<0.05),Jhdm1a表达增加(P<0.05)。在H3k27的去甲基化酶中,Jmjd3、Utx、Jhdm1d表达增加(P<0.05)。【结论】在小鼠胚胎期棕色脂肪细胞的分化过程中,H3k4和H3k36去甲基化酶主要表现为基因表达下调,H3k9和H3k27去甲基化酶部分基因表达上调,这些去甲基化酶构成以转录激活和转录延长为主要效应的复杂调控网络。
关键词
棕色脂肪细胞
分化
组蛋白H3
去甲基化酶
Keywords
brown adipocytes
differentiation
histone H3
demethylase
分类号
R364.2 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
Ezh2通过维持线粒体ATP合成功能促进骨骼肌细胞分化
被引量：
1
2
作者
武晓慧
李青
徐玉乔
陈佳琪
杨帆
刘婉莹
李凯
机构
西安医学院肥胖与代谢病研究所
空军军医大学第一附属医院病理科暨病理学教研室
西安医学院临床医学院
出处
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第6期841-849,共9页
基金
国家自然科学基金(81572631,31000559)
西安医学院配套基金项目(2018PT37)
+2 种基金
西安医学院高层次人才科研基金项目(2018RCYJ01),西安医学院2019年省级大学生创新创业训练计划项目(S201911840032)
西安医学院2019年校级大学生创新创业训练计划项目(121519056)
中尼友好拉吉姆医学实验室开放基金(18LJM02)。
文摘
【目的】探索组蛋白H3K27me3甲基转移酶Ezh2在间充质干细胞内缺失对小鼠骨骼肌细胞分化及骨骼肌线粒体的影响。【方法】构建Ezh2间充质干细胞条件性敲除小鼠(Ezh2F/FPrx1-Cre)。HE染色、改良Gomori三色染色及四氮唑还原酶染色(NADH-TR)法观察细胞形态及线粒体情况。电镜观察骨骼肌细胞和线粒体超微结构。Western Blot法检测6周龄小鼠骨骼肌细胞中Ezh2、H3K27me3和骨骼肌分化相关基因Myogenin、Myosin、Desmin及线粒体蛋白CytC的蛋白表达量。Realtime RT-qPCR法检测骨骼肌分化相关基因和线粒体相关基因的表达情况。免疫组化染色检测骨骼肌中CytC的表达量,ATP含量测定试剂盒检测骨骼肌细胞内ATP含量。HE和NADH-TR染色观察2周龄小鼠骨骼肌。检测6周龄小鼠棕色脂肪中Ezh2蛋白含量,电镜观察小鼠棕色脂肪中的线粒体。【结果】敲除组骨骼肌中Ezh2及H3K27me3蛋白含量均明显降低。敲除组小鼠的骨骼肌肌纤维粗细不等,部分核内移,骨骼肌分化标志物Myogenin和MhcIIb的mRNA表达明显减少(均P<0.05),Myogenin蛋白表达量减少,NADH-TR和CytC免疫组化染色显示线粒体增加。电镜下敲除组骨骼肌肌原纤维粗细不等,细胞膜下及肌原纤维间线粒体数量明显增加,呈团块状聚集。线粒体无水肿,嵴无明显减少。敲除组线粒体相关基因CytC、Tfam、Pgc1α的mRNA和CytC蛋白表达升高(均P<0.05),但ATP含量明显降低(P<0.05)。2周龄小鼠骨骼肌纤维粗细不等,但NADH含量无差别。电镜下6周龄小鼠棕色脂肪细胞线粒体无数量增加或形态异常。【结论】Ezh2在间充质干细胞阶段对小鼠骨骼肌细胞分化是必须的,并维持线粒体产生ATP的功能。Ezh2缺失小鼠骨骼肌细胞线粒体产生ATP减少,线粒体数量代偿性增加。
关键词
骨骼肌细胞
分化
EZH2
H3K27me3
线粒体
Keywords
skeletal muscle cells
differentiation
Ezh2
H3K27me3
mitochondria
分类号
R329.1 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
组蛋白H3的22个赖氨酸去甲基化酶对胎鼠棕色脂肪细胞分化的调控作用
武晓慧
徐玉乔
张丰
郜松
魏佳昶
许久航
李青
苏兴利
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2020
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
Ezh2通过维持线粒体ATP合成功能促进骨骼肌细胞分化
武晓慧
李青
徐玉乔
陈佳琪
杨帆
刘婉莹
李凯
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2020
1
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