PBL联合翻转课堂教学法在医学分子生物学实验教学中的探索和应用 被引量：43

1

作者 晏贤春 曹秀丽 +2 位作者 卜歆 韩骅 梁亮 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期115-117,122,共4页

从解决“Dll4胞外区重组蛋白是否能抑制内皮细胞血管形成”这一实际问题出发,探讨基于PBL结合翻转课堂教学法在医学分子生物学实验教学中的应用。与传统孤立地讲授和实施分子生物学实验技术不同,该教学法通过解决科学问题,将DNA提取、PC... 从解决“Dll4胞外区重组蛋白是否能抑制内皮细胞血管形成”这一实际问题出发,探讨基于PBL结合翻转课堂教学法在医学分子生物学实验教学中的应用。与传统孤立地讲授和实施分子生物学实验技术不同,该教学法通过解决科学问题,将DNA提取、PCR、核酸电泳、胶回收等多种常用分子生物学实验技术有机整合,一方面强化实验技术的实际应用,另一方面结合翻转课堂教学模式,进一步增强学生的积极性,提升学生对知识探索的主观能动性,最终达到切实提高学生发现问题、分析问题和解决问题的教学目标。 展开更多

关键词 PBL教学法 翻转课堂 分子生物学 实验教学 教学模式

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生物化学课程思政建设亟需创新科学评价体系

2

作者 药立波 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第1期52-52,共1页

当今高等教育改革创新的重要领域是课程思政建设。生物化学是生命科学和医学教育的主干课程,作为生命科学的共同语言和前沿,其历史和当代的快速发展都为课程提供了丰富的思政素材。近年来,全国高校广泛展开的课程思政案例库编写、混合... 当今高等教育改革创新的重要领域是课程思政建设。生物化学是生命科学和医学教育的主干课程,作为生命科学的共同语言和前沿,其历史和当代的快速发展都为课程提供了丰富的思政素材。近年来,全国高校广泛展开的课程思政案例库编写、混合式教学优化思政效果等一系列教改探索,推动着生物化学课程思政建设不断前行。 展开更多

关键词 课程思政 生命科学 生物化学课程 医学教育 混合式教学 案例库 科学评价体系 教改探索

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"赋能增效"的分子生物学实验教学改革探索 被引量：7

3

作者 张晓 晏贤春 +2 位作者 张瑞 贾林涛 赵晶 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期569-574,共6页

作为生命科学的前沿学科,分子生物学理论、技术发展迅速,而分子生物学实验课程作为理论与实践的关键衔接,在学生思考和创新能力的培养中发挥着重要作用.通过对教学过程的反馈和思考,分析出当前实验教学中存在的痛点问题.我们围绕"... 作为生命科学的前沿学科,分子生物学理论、技术发展迅速,而分子生物学实验课程作为理论与实践的关键衔接,在学生思考和创新能力的培养中发挥着重要作用.通过对教学过程的反馈和思考,分析出当前实验教学中存在的痛点问题.我们围绕"赋能增效"的改革方向,瞄准提高学生动手、思考能力,提升育人实效的优化目标,进行了教学内容的设置优化、课堂时序的组织重构等一系列改革尝试.教学方案的改革显著增加了学生对知识的理解与掌握,赋予学生更强的思考、学习能力的同时,增强了实验课程的教学效果,提升了学生的科学素养. 展开更多

关键词 分子生物学 实验教学 教学改革 科学素养

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基于电子书包智能考试在基础医学课程中的实践与经验

4

作者 王婷 张翔 赵晶 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第9期858-862,共5页

构建智能化校园,促进高等院校信息化改革是当前教育现代化的主要内容之一。考试环节的信息化改革是教育信息化的重要尝试举措。本文探讨了基于电子书包的智能考试模式在提升效率、节约资源、保证公平性等方面的优势,并分析了其在实施过... 构建智能化校园,促进高等院校信息化改革是当前教育现代化的主要内容之一。考试环节的信息化改革是教育信息化的重要尝试举措。本文探讨了基于电子书包的智能考试模式在提升效率、节约资源、保证公平性等方面的优势,并分析了其在实施过程中面临的问题,提出解决方案,以促进其在免疫学、细胞生物学、分子生物学等基础医学课程中的推广和应用,为推动教育信息化进程提供有力支撑。 展开更多

关键词 智能考试 电子书包 智能化校园 教育信息化

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生物化学“TCA”特色课程思政模式的构建与应用 被引量：12

5

作者 赵晶 梁亮 +6 位作者 魏仁吉 王秦豪 张翔 贾林涛 阴继凯 高彬 林燕 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期896-902,共7页

高等教育“四新”建设(新工科、新医科、新农科、新文科)背景下,生物化学课程思政建设质量直接关乎育人成效。本校经过6年生物化学课程思政教学实践,以学科重要名词三羧酸循环中的“TCA”(三羧酸)类比育人的“一心三力”(T-思考力与合... 高等教育“四新”建设(新工科、新医科、新农科、新文科)背景下,生物化学课程思政建设质量直接关乎育人成效。本校经过6年生物化学课程思政教学实践,以学科重要名词三羧酸循环中的“TCA”(三羧酸)类比育人的“一心三力”(T-思考力与合作力、C-鉴别力、A-敬畏心),由此提出生物化学大学科通用的“TCA”特色思政理念,分别引导学生建立正确的认知观、科学观和生命观。同时构建了实现该理念、具有可操作性的实践创新体系,包括“一课三融”教的理念、“成长三思”学的理念、“创学三境”深度学习环境序贯创设,能够满足不同学校学情进而灵活设计高阶教学活动的基本需求。本校应用该模式,构建了突显军医大学特色的“TCA白兰鸽”生物化学思政体系,“白”代表医学,“兰”代表空军,“鸽”代表和平和谐。运用上述教与学的理念、学习环境序贯创设方法,个性化设计瞄准高阶育人目标的三大教学活动,包括“魔力生化圈”共学平台,注重主动建构与个性输出的思维训练;“基础-临床双师大班互动”启学课堂,侧重深度思考与讨论迭代的思辨表达;“虚拟仿真(VR)沉浸式任务”乐学应用,关注应对复杂与纠错担当的思感升华。上述“TCA白兰鸽”育人效果较满意,学生的整合思维、深度学习、反思迭代等高阶能力得到切实锻炼,但同时在实施过程中也遇到一些问题,尚待提出有效的解决思路。 展开更多

关键词 生物化学 TCA思政模式 思考力 合作力 鉴别力 敬畏心

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细胞与分子基础模块化整合课程教学中的思政探索与实践

6

作者 李霞 茹懿 赵晶 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期954-958,共5页

课程思政是现代高等教育的重要组成部分,在医学类等专业课程教学中融入思政教育是落实高校立德树人的重要途径。医学模块化整合课程是目前国内医学院校广泛采用的一种医学教育模式。本文以“细胞与分子基础”整合课程为例,总结了我们在... 课程思政是现代高等教育的重要组成部分,在医学类等专业课程教学中融入思政教育是落实高校立德树人的重要途径。医学模块化整合课程是目前国内医学院校广泛采用的一种医学教育模式。本文以“细胞与分子基础”整合课程为例,总结了我们在该模块化整合课程教学中的思政探索与实践。首先更新教学理念,专业课程与思政协同育人;其次重塑课程目标,知识、能力和素养并重;最后,深入挖掘思政元素,建立了丰富的思政素材库:弘扬中国科学家精神,筑牢政治素养,传承中华优秀传统文化,坚定文化自信,共享诺贝尔奖得主的故事,培养科学精神,以学风和学术规范为镜,强化职业素养,严守伦理和道德底线,提高法治意识。通过以上举措,以专业知识为载体,实现知识、能力与思政教育同向同行,协同育人,同时提升教师的思政意识与能力。 展开更多

关键词 课程思政 细胞与分子基础 模块化整合课程 素养

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链霉亲和素突变体凝胶柱的制备及生物素修饰蛋白纯化 被引量：1

7

作者 陈园坤 伦新新 +6 位作者 李昂 王鹏举 张仪婷 赵晶 王辉 阎博 杨安钢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期304-309,共6页

目的对链霉亲和素(SA)进行定点突变,降低与生物素之间的亲和力,制备SA突变体琼脂糖凝胶柱,并摸索最适洗脱条件,以达到纯化生物素修饰蛋白的目的。方法原核表达SA突变体蛋白使用Ni-NTA纯化树脂进行纯化,将SA突变体蛋白与溴化氰活化琼脂... 目的对链霉亲和素(SA)进行定点突变,降低与生物素之间的亲和力,制备SA突变体琼脂糖凝胶柱,并摸索最适洗脱条件,以达到纯化生物素修饰蛋白的目的。方法原核表达SA突变体蛋白使用Ni-NTA纯化树脂进行纯化,将SA突变体蛋白与溴化氰活化琼脂糖凝胶4FF(CNBr-activated Bestarose TM 4FF)偶联制备凝胶柱。生物素修饰蛋白与凝胶柱孵育后,以不同浓度NaOH对生物素修饰蛋白进行洗脱回收,ELISA检测SA突变体蛋白亲和力。通过Western blot法、考马斯亮蓝染色检测纯化效果。结果成功表达并纯化五种SA突变体,并制备凝胶柱。ELISA结果计算得到SA突变体对生物素修饰蛋白的亲和常数相较野生型SA均有所降低。将生物素修饰蛋白与五种凝胶柱相结合,通过Western blot法和考马斯亮蓝染色结果筛选出SA突变体M2凝胶柱可以在10 mmol/L NaOH洗脱条件下,纯化出生物素修饰蛋白,并且SA突变体M2凝胶柱能够对生物素修饰蛋白进行再次纯化。结论成功制备了SA突变体琼脂糖凝胶柱,为生物素修饰蛋白的纯化提供了可行性方案。 展开更多

关键词 链霉亲和素(SA)突变体 生物素修饰蛋白 纯化 凝胶柱

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“TCA”课程思政模式的育人评价量规体系构建及应用

8

作者 王郢 吕灵慧 +7 位作者 魏仁吉 张翔 茹懿 阎博 沈岚 孙茂 梁亮 赵晶 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第1期53-67,共15页

高等教育“新医科”建设迫切需要科学评价课程育人效果。本文前期建立基础医学课程通用的“TCA”思政模式,以生物化学名词三羧酸循环中的“TCA”(三羧酸)类比育人的“一心三力”(T-思考力与合作力、C-鉴别力、A-敬畏心),引导学生建立正... 高等教育“新医科”建设迫切需要科学评价课程育人效果。本文前期建立基础医学课程通用的“TCA”思政模式,以生物化学名词三羧酸循环中的“TCA”(三羧酸)类比育人的“一心三力”(T-思考力与合作力、C-鉴别力、A-敬畏心),引导学生建立正确的认知观、科学观和生命观。据此,本文进一步探讨如何科学评价“一心三力”育人效果,以反馈“TCA”思政建设质效。针对大班课个体差异化、学习反馈碎片化、元认知升维难测的育人评价难点,采用增值性评价、矩阵化评价、可迁移性评价策略,从思考质量、思维创造性、合作能力、思维迭代性、思维辩证性和岗位责任6个方面评价“一心三力”。通过借鉴和改造教育学和心理学中18个成熟的评价工具,构建包含30个一级指标的评价量规体系(11个新设计、10个部分改构、9个直接采用),同时列出49个二级指标和98个三级指标增强评价过程的可操作性。上述整套“一心三力”评价量规应用于空军军医大学五年制本科生物化学教学,可视化评价魔力生化圈创意作品中体现的思考力与合作力、大班互动双师课堂中体现的鉴别力、高阶虚拟仿真实验任务中体现的敬畏心,结果显示,生化教学对学生的改变不仅有知识的积累,更包括价值观和认知观等育人性目标的实现。课程中加入创意性表现评价、合作学习和临床病例等教学创新,能够使学生人际交往能力、合作能力、思考质量、思维创造性、思维迭代性和思维辩证性等在不同程度上得到提升。生化课程育人的效果具有长效性,能够对学生长远的认知方式和生活方式产生良性变化。由此,借助科学的育人评价量规,教师能够及时知晓教学效果,促进教学决策的进一步优化。 展开更多

关键词 TCA思政模式 量规体系 量化评价 质性评价 思考力 合作力 鉴别力 敬畏心

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肿瘤mRNA疫苗的设计与合成

9

作者 杜曼昕 杨国栋 赵晶 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第9期1235-1238,共4页

个性化设计开发针对特定肿瘤抗原的肿瘤疫苗,对于提升治疗精准度至关重要。肿瘤mRNA疫苗具有攻克这一难题的技术优势,它作为新兴且极具潜力的疫苗类型,近年来在抗肿瘤治疗领域引起了广泛关注。本文综述了肿瘤mRNA疫苗的设计与合成过程,... 个性化设计开发针对特定肿瘤抗原的肿瘤疫苗,对于提升治疗精准度至关重要。肿瘤mRNA疫苗具有攻克这一难题的技术优势,它作为新兴且极具潜力的疫苗类型,近年来在抗肿瘤治疗领域引起了广泛关注。本文综述了肿瘤mRNA疫苗的设计与合成过程,包括抗原选择、RNA序列优化和环化、递送系统的构建等最新进展,并探讨了其面临的挑战和未来发展方向。 展开更多

关键词 mRNA疫苗 肿瘤抗原 序列设计 环状RNA 递送系统

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“荷瘤小鼠模型”在研究生实验课程中的实践应用

10

作者 阎博 张健 路凡 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第7期667-670,共4页

研究生创新计划作为高校教育改革的重要组成部分,旨在联系科研前沿动态,以学科发展的最新研究成果充实更新研究生教学内容,增强教学实践环节,最终实现研究生创新思维能力培养的教学目标。我校生物化学与分子生物学教研室通过前期调研并... 研究生创新计划作为高校教育改革的重要组成部分,旨在联系科研前沿动态,以学科发展的最新研究成果充实更新研究生教学内容,增强教学实践环节,最终实现研究生创新思维能力培养的教学目标。我校生物化学与分子生物学教研室通过前期调研并结合本校学科专业特点,在我校研究生公共选修课中新增《荷瘤小鼠模型》实践教学模块,教学内容包括免疫缺陷小鼠荷瘤模型构建和免疫缺陷小鼠荷瘤活体成像分析。课程利用虚拟仿真、混合式教学和翻转课堂等教学新模式,推动实现医学实验的“泛在学习”,同时在形成性考核中采用新的评价体系,如直接操作观察(DOPS)学生评分系统和小型实验评估活动(Mini-EEX)学员自评表。本课程无论是在教学内容的革新,还是教学方式和评价方式的突破,都能显著增强学员主动探索、自主学习的积极性,为其科研创新思维的形成奠定基础。 展开更多

关键词 研究生创新计划 实践课程改革 荷瘤小鼠模型 创新思维培养

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靶向抑制有氧酵解联合免疫治疗在肾细胞癌中的研究进展

11

作者 张坤 茹梦瑶 +2 位作者 王佳媛 赵菊梅 沈岚 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期74-79,共6页

肿瘤有氧酵解是肿瘤代谢重编程的主要特征之一,这种异常的糖酵解代谢途径为肿瘤生长和增殖提供生物能量和生物原材料。肿瘤细胞不仅通过有氧酵解途径为自身提供生物原材料和能量,还通过免疫微环境逃脱免疫监视,发生免疫逃逸,从而抵抗肿... 肿瘤有氧酵解是肿瘤代谢重编程的主要特征之一,这种异常的糖酵解代谢途径为肿瘤生长和增殖提供生物能量和生物原材料。肿瘤细胞不仅通过有氧酵解途径为自身提供生物原材料和能量,还通过免疫微环境逃脱免疫监视,发生免疫逃逸,从而抵抗肿瘤免疫治疗,促进肿瘤的发生和发展。本文以肾细胞癌的发病机制为背景,阐述其有氧酵解代谢的特征、糖酵解代谢对肿瘤免疫微环境的影响、糖酵解代谢抑制剂对肾细胞癌免疫微环境的影响、糖酵解代谢抑制剂联合免疫检查点抑制剂治疗肾细胞癌的前景与展望。 展开更多

关键词 肾细胞癌 糖酵解 免疫检查点抑制剂 肿瘤免疫治疗 综述

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靶向HER2的通用型CAR-T细胞来源的细胞外囊泡的制备及功能鉴定

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作者 蒙若彤 王鹏举 +9 位作者 赵晓娟 郑瑞 梁思辛 张依婷 董昊 韩玉洁 杨安钢 白占涛 阎博 路凡 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期121-128,共8页

目的 利用可持续传代的T淋巴细胞系,制备携带靶向人表皮生长因子受体2(HER2)蛋白的嵌合抗原受体(CAR)的细胞外囊泡(EV),并检测其对HER2^(+)肿瘤细胞的杀伤能力。方法 采用分子克隆技术构建重组慢病毒质粒。利用成簇的规律间隔的短回文... 目的 利用可持续传代的T淋巴细胞系,制备携带靶向人表皮生长因子受体2(HER2)蛋白的嵌合抗原受体(CAR)的细胞外囊泡(EV),并检测其对HER2^(+)肿瘤细胞的杀伤能力。方法 采用分子克隆技术构建重组慢病毒质粒。利用成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关蛋白9(Cas9)技术和慢病毒感染的方法构建底盘Jurkat细胞。流式细胞术检测底盘Jurkat细胞、嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞和CAR-Jurkat细胞的构建。通过聚乙二醇6000(PEG6000)浓缩方法和细胞挤压方法制备EV;微粒子追踪分析(NTA)和Western blot法鉴定EV。萤光素酶报告基因系统检测细胞和EV对肿瘤细胞的杀伤作用。荧光显微镜观察免疫细胞对EV的吞噬作用。结果 酶切鉴定和基因测序结果表明重组质粒构建成功。流式细胞术结果显示底盘Jurkat细胞、 CAR-T细胞和CAR-Jurkat细胞顺利制备。NTA结果显示制备的EV大小正确。萤光素酶报告基因系统证明CAR-T细胞、 CAR-Jurkat细胞、 CAR-T EV和CAR-Jurkat EV对HER2+肿瘤细胞均具有靶向杀伤能力。荧光显微镜观察表明,提高CD47分子的表达水平能够减弱免疫细胞对通用型CAR-Jurkat EV的吞噬作用。结论 通用型CAR-T细胞来源EV能够靶向杀伤HER2+肿瘤细胞。 展开更多

关键词 嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞 同种异体 底盘细胞 细胞外囊泡

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靶向人表皮生长因子受体2嵌合抗原受体T(HER2-CAR-T)细胞毒性作用的体内外验证

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作者 张仪婷 席文锦 +6 位作者 王鹏举 赵晓娟 郑瑞 梁思辛 蒙若彤 阎博 杨安钢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期289-295,共7页

目的 对靶向人表皮生长因子受体2嵌合抗原受体T(HER2-CAR-T)细胞进行毒理学评估,为其后期HER2-CAR-T细胞治疗的临床上评估提供安全性依据。方法 利用重组慢病毒载体制备HER2-CAR-T细胞,采用软琼脂集落形成实验,观察HER2-CAR-T细胞集落... 目的 对靶向人表皮生长因子受体2嵌合抗原受体T(HER2-CAR-T)细胞进行毒理学评估,为其后期HER2-CAR-T细胞治疗的临床上评估提供安全性依据。方法 利用重组慢病毒载体制备HER2-CAR-T细胞,采用软琼脂集落形成实验,观察HER2-CAR-T细胞集落形成情况并对集落形成率进行统计分析;将HER2-CAR-T细胞悬液与兔红细胞悬液共孵,通过直接观察法以及酶标仪检测法评估红细胞溶解情况;对雄性新西兰兔耳缘静脉注射HER2-CAR-T细胞制剂,通过组织切片染色观察HER2-CAR-T细胞对动物血管的刺激作用;以pMD 2.G载体上的水泡性口炎病毒囊膜糖蛋白(VSV-G)基因为目标序列,利用荧光定量PCR进行慢病毒载体安全性的验证;取接受HER2-CAR-T细胞输注的小鼠心、肝、肺、肾,HE染色观察其病变情况。结果 成功制备了HER2-CAR-T细胞,这些细胞在体外不具备软琼脂集落形成能力,HER2-CAR-T细胞制剂对新西兰兔红细胞不产生溶血现象。新西兰兔耳缘静脉输注HER2-CAR-T细胞后未发现明显血管刺激反应,也未检测到VSV-G的特异性扩增,治疗组小鼠心、肝、肺、肾组织未见明显病变。结论 所制备的HER2-CAR-T细胞具有可靠安全性。 展开更多

关键词 安全性 毒理学 靶向人表皮生长因子2嵌合抗原受体T(HER2-CAR-T)细胞 集落形成实验 溶血 血管刺激性 器官毒性

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脂多糖诱导人和小鼠肠上皮细胞炎症并上调细胞甲基转移酶样蛋白3(METTL3)和METTL14表达 被引量：1

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作者 丁汝昕 李瑞凯 +2 位作者 刘俊丽 张健 韩继明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期308-315,共8页

目的探讨N_(6)-甲基腺苷(m^(6)A)修饰在HIEC-6人肠上皮细胞与MODE-K小鼠肠上皮细胞炎性状态下的变化。方法采用不同剂量的脂多糖(LPS)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激HIEC-6细胞与MODE-K细胞10 h或相同剂量... 目的探讨N_(6)-甲基腺苷(m^(6)A)修饰在HIEC-6人肠上皮细胞与MODE-K小鼠肠上皮细胞炎性状态下的变化。方法采用不同剂量的脂多糖(LPS)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激HIEC-6细胞与MODE-K细胞10 h或相同剂量LPS、IL-1β、IL-6、TNF-α分别刺激HIEC-6细胞与MODE-K细胞(0、3、6、12、24)h。实时定量PCR检测细胞炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达;实时定量PCR和Western blot法分别检测m^(6)A修饰相关分子甲基转移酶样蛋白3(METTL3)、METTL14、METTL16、Wilms瘤1相关蛋白(WTAP)、烷基化修复同源蛋白5(ALKBH5)、脂肪量和肥胖相关蛋白(FTO)、YTH结构域蛋白1(YTHDC1)、YTHDC2的mRNA和蛋白表达。结果与对照组相比,HIEC-6细胞与MODE-K细胞在LPS诱导的时间依赖与剂量依赖模型中IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达水平增高,并同步上调METTL3和METTL14 mRNA与蛋白水平。结论LPS可以诱导肠上皮细胞出现炎症反应,并上调肠上皮细胞中METTL3和METTL14的表达。 展开更多

关键词 炎症性肠病(IBD) N_(6)-甲基腺苷(m^(6)A) 甲基转移酶样蛋白3(METTL3) METTL14

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“代谢整合与调节”一章的在线教学内容升级设计 被引量：8

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作者 赵晶 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1381-1384,共4页

疫情期间在线上教学和教育部金课建设的双重背景下,我校在四年制小班课尝试对生物化学课程的部分教学内容进行优化升级。设计思路是利用慕课将部分基础知识移至课前进行自主学习,以便课堂留出时间由教师组织更能引发学生思考的高阶段教... 疫情期间在线上教学和教育部金课建设的双重背景下,我校在四年制小班课尝试对生物化学课程的部分教学内容进行优化升级。设计思路是利用慕课将部分基础知识移至课前进行自主学习,以便课堂留出时间由教师组织更能引发学生思考的高阶段教学活动。本文以"代谢整合与调节"一章为例,配合慕课的使用设计了一整套升级教学内容的实用做法,涉及4个方面:基于综合归纳的知识内化升级,以思维导图进行理论复述,或者以讨论题驱动整合提炼;基于应用分析的能力训练升级,以情境代入分析题引导学生运用所学理论知识解决实际问题;基于哲学思考的思维引导升级,以教师总结拔高的方式引导学生重视普遍联系和永恒发展对于代谢学习的指导意义;基于情感态度的价值塑造升级,从代谢的整体性和动态性出发,引导学生在分子水平重新认识集体观念和变通意识的重要价值。调查问卷显示,上述4步升级设计的教学效果总体良好,并且针对实施过程中遇到的问题进行了反思。 展开更多

关键词 生物化学 在线教学 知识 能力 思维 价值

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NDRG2通过调控肝癌细胞磷脂和甘油三酯代谢抑制肝细胞癌的生长:基于代谢组学分析 被引量：5

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作者 王佳媛 袁依依 +6 位作者 张坤 孙翔 卜歆 董健 吴有盛 田红英 沈岚 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1765-1773,共9页

目的观察抑癌基因N-Myc下游调控基因2(NDRG2)对人肝癌细胞脂类物质代谢的调控方式及调控特征,阐述NDRG2在肝癌脂质代谢中的作用。方法基于TNMplot数据库分析抑癌基因NDRG2在809例肝细胞癌组织和379例正常肝组织中的表达差异,应用人类蛋... 目的观察抑癌基因N-Myc下游调控基因2(NDRG2)对人肝癌细胞脂类物质代谢的调控方式及调控特征,阐述NDRG2在肝癌脂质代谢中的作用。方法基于TNMplot数据库分析抑癌基因NDRG2在809例肝细胞癌组织和379例正常肝组织中的表达差异,应用人类蛋白质图谱(THPA)分析NDRG2在肝细胞癌的表达水平与患者生存期的关系,以及NDRG2在肿瘤细胞株的表达丰度并筛选肝癌细胞系。利用携带NDRG2 c DNA慢病毒及其对照组慢病毒分别感染人肝细胞癌细胞系HepG2,采用实时荧光定量PCR法检测慢病毒感染后两组细胞中NDRG2基因的mRNA含量;Western blot检测慢病毒感染后两组细胞中NDRG2的蛋白含量,建立NDRG2过表达及其对照组细胞系。利用脂质代谢组学分析NDRG2表达增强对肝癌细胞脂质代谢的调控效应,利用酶联免疫分析试剂盒验证NDRG2表达增强对肝癌细胞磷脂代谢物的影响,利用油红染色验证NDRG2表达增强对肝癌细胞甘油三酯的影响。结果TNMplot数据库结果统计分析发现NDRG2在肝癌组织中表达量对比普通肝组织明显下降(P<0.001);THPA数据库生存分析发现NDRG2 mRNA水平高的患者比NDRG2 mRNA水平低的患者存活时间更长;THPA数据库细胞系RNA表达分析显示在多种肿瘤细胞中,肝细胞癌HepG2中NDRG2表达丰度较高。代谢组学研究发现NDRG2表达增强能够显著调控肝癌细胞HepG2磷脂的含量。其中甘油三酯TG、卵磷脂PC、磷脂酰甘油PG、磷脂酰乙醇胺PE、鞘磷脂酰丝氨酸SM、神经酰胺Cer等变化明显。酶联免疫分析发现NDRG2表达增强能够显著抑制肝癌细胞HepG2内多种磷脂代谢物的含量。油红染色分析发现NDRG2表达增强能够显著抑制肝癌细胞HepG2内甘油三酯的含量。结论抑癌基因NDRG2可以通过调控肝癌细胞磷脂和甘油三酯含量,抑制肝细胞癌的发生与发展。 展开更多

关键词 抑癌基因 NDRG2 磷脂 代谢组学

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小鼠可溶性信号调节蛋白α(SIRPα)胞外段蛋白增强巨噬细胞对L1210白血病细胞的吞噬能力 被引量：4

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作者 林燕 李玉品 +3 位作者 虎崇康 曾令超 梁世倩 韩骅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1057-1062,共6页

目的克隆小鼠信号调节蛋白α(SIRPα)胞外段基因(mSIRPα)并构建其原核表达载体,实现蛋白的可溶性表达后,研究mSIRPα^(ext)在肿瘤免疫调节中的作用。方法利用小鼠淋巴结来源的cDNA扩增mSIRPαext基因,并进一步构建pET32a-SIRPα^(ext)... 目的克隆小鼠信号调节蛋白α(SIRPα)胞外段基因(mSIRPα)并构建其原核表达载体,实现蛋白的可溶性表达后,研究mSIRPα^(ext)在肿瘤免疫调节中的作用。方法利用小鼠淋巴结来源的cDNA扩增mSIRPαext基因,并进一步构建pET32a-SIRPα^(ext)原核表达载体。在实现含有硫氧还蛋白(Trx)标签的重组Trx-mSIRPα^(ext)融合蛋白可溶性表达后,培养小鼠骨髓来源单核细胞并诱导其向巨噬细胞分化,接着将巨噬细胞与羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)标记的L1210白血病细胞共培养,在共培养体系中添加Trx-mSIRPα^(ext)蛋白及Trx对照蛋白,通过免疫荧光细胞化学染色和共聚焦显微镜观察重组蛋白在巨噬细胞吞噬肿瘤细胞中的作用。结果获得纯化的可溶性Trx-mSIRPα^(ext)蛋白,利用体外吞噬实验证明该蛋白可增强巨噬细胞对小鼠L1210白血病细胞的吞噬作用。结论原核表达的Trx-mSIRPα^(ext)蛋白可有效提高巨噬细胞对白血病细胞的吞噬作用,从而发挥抗肿瘤免疫治疗效果。 展开更多

关键词 信号调节蛋白α(SIRPα) CD47 原核表达 吞噬作用 巨噬细胞

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胃癌组织中G9a表达的预后意义及其对胃癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量：3

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作者 李厚雷 赵昕辉 +6 位作者 刘俊 张翔 贺奋飞 张瑞 李纪鹏 杨安钢 吴宏 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期797-802,共6页

目的:探究组蛋白甲基转移酶G9a在胃癌组织中的表达及其与预后的相关性,并观察G9a抑制剂对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:通过Kaplan-Meier Plotter和Oncomine数据库分析G9a在胃癌组织中的表达水平及其与预后的相关性。选用人胃癌细胞... 目的:探究组蛋白甲基转移酶G9a在胃癌组织中的表达及其与预后的相关性,并观察G9a抑制剂对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:通过Kaplan-Meier Plotter和Oncomine数据库分析G9a在胃癌组织中的表达水平及其与预后的相关性。选用人胃癌细胞株SGC-7901和MKN-45为研究对象,Western blotting方法检测细胞中G9a蛋白表达水平,以G9a抑制剂BIX01294处理胃癌细胞,观察细胞形态变化,CCK-8法和集落形成实验检测胃癌细胞增殖能力和集落形成率的变化,流式细胞术检测细胞凋亡的变化。结果:G9a在胃癌组织中高表达(P<0.01),其高表达与预后不良呈正相关(P<0.01)。BIX01294能使胃癌细胞体积缩小、细胞间连接消失,甚至细胞皱缩、变圆、脱落等。BIX01294能显著抑制胃癌细胞集落形成和胃癌细胞的增殖(均P<0.05),同时促进胃癌细胞凋亡(P<0.05)。结论:G9a在胃癌组织中高表达,其高水平表达与预后不良呈正相关;抑制G9a的表达可显著抑制胃癌细胞的增殖和促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 胃癌 SGC-7901细胞 MKN-45细胞 甲基转移酶 G9a 增殖 凋亡

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HER2靶向TRAC和B2M双基因敲除通用型CAR-T细胞的制备及对非小细胞肺癌细胞的杀伤作用 被引量：3

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作者 宋源 李秧 +7 位作者 阎博 左百乐 赵丽君 赵晓娟 王鹏举 王依依 杨安钢 王向鹏 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期432-438,共7页

目的利用同种异体健康人T细胞,制备靶向人表皮生长因子受体2(HER2)的通用型嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞,检测其对HER2阳性肿瘤细胞的杀伤能力。方法构建靶向HER2的人源化单链抗体P1h2 CAR慢病毒表达载体,包装慢病毒感染健康人T细胞获得CA... 目的利用同种异体健康人T细胞,制备靶向人表皮生长因子受体2(HER2)的通用型嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞,检测其对HER2阳性肿瘤细胞的杀伤能力。方法构建靶向HER2的人源化单链抗体P1h2 CAR慢病毒表达载体,包装慢病毒感染健康人T细胞获得CAR-T细胞;利用成簇的规律间隔的短回文重复序列/Cas9核酸酶(CRISPR/Cas9)技术敲除CAR-T的T细胞受体(TCR)和人类白细胞抗原Ⅰ(HLA-Ⅰ),制备靶向HER2的通用型CAR-T细胞,CCK-8试验检测其对HER2阳性肿瘤细胞的杀伤能力。结果制备通用型CAR-T细胞,CAR阳性率为(67.1±1.46)%,TCR和HLA-Ⅰ类分子的敲除率为(86.31±1.78)%。体外杀伤试验显示通用型CAR-T细胞能够有效杀伤HER2阳性肿瘤细胞,其杀伤能力与CAR-T细胞无明显区别。结论成功制备能够靶向杀伤HER2阳性肿瘤细胞的通用型CAR-T细胞,为实现应用通用型同种异体CAR-T细胞治疗HER2阳性肿瘤患者奠定了基础。 展开更多

关键词 同种异体 表皮生长因子受体2 嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞 通用型CAR-T细胞

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miR-101-3p通过靶向抑制斯坦尼钙调节蛋白1(STC1)促进巨噬细胞对人肝癌细胞的吞噬作用 被引量：2

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作者 张静 张晓 +1 位作者 张瑞 杨安钢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期339-344,共6页

目的 探究miR-101-3p能否促进THP-1巨噬细胞对HCCLM3人肝癌细胞的吞噬作用及其机制。方法 通过慢病毒包装、感染和抗性筛选,获得绿色荧光蛋白(GFP)标记并过表达miR-101-3p的HCCLM3人肝癌细胞稳转系(HCCLM3^(GFP)-miR-101-3p),同时使用... 目的 探究miR-101-3p能否促进THP-1巨噬细胞对HCCLM3人肝癌细胞的吞噬作用及其机制。方法 通过慢病毒包装、感染和抗性筛选,获得绿色荧光蛋白(GFP)标记并过表达miR-101-3p的HCCLM3人肝癌细胞稳转系(HCCLM3^(GFP)-miR-101-3p),同时使用佛波酯(PMA)诱导THP-1细胞贴壁分化为M0型巨噬细胞。将两者共培养24 h后收集细胞,运用荧光激活细胞分选法(FACS)检测巨噬细胞吞噬效率。实时定量PCR检测斯坦尼钙调节蛋白1(STC1)、钙网蛋白(CRT)的mRNA表达水平,免疫荧光染色法检测CRT的表达和分布,Western blot法检测STC1、 CRT的蛋白表达水平,双荧光素酶报告基因实验分析miR-101-3p与靶基因的靶向调控关系。结果 过表达miR-101-3p促进THP-1巨噬细胞对HCCLM3肝癌细胞的吞噬作用,miR-101-3p通过靶向STC1进而上调HCCLM3细胞膜表面CRT的表达。结论 miR-101-3p通过靶向抑制STC1进而促进HCCLM3细胞膜表面CRT的表达,增强巨噬细胞对肝癌细胞的吞噬作用。 展开更多

关键词 miR-101-3p 钙网蛋白(CRT) 斯坦尼钙调节蛋白1(STC1) 巨噬细胞 吞噬作用

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