目的探讨金丝桃苷对H9C2细胞缺血再灌注损伤的作用及可能机制。方法采用H9C2细胞模拟缺血再灌注模型,缺血液培养45min,再恢复正常达尔伯克改良伊格尔培养液培养4h。将H9C2细胞随机分为对照组,金丝桃苷组,缺血再灌注组,金丝桃苷处理+缺...目的探讨金丝桃苷对H9C2细胞缺血再灌注损伤的作用及可能机制。方法采用H9C2细胞模拟缺血再灌注模型,缺血液培养45min,再恢复正常达尔伯克改良伊格尔培养液培养4h。将H9C2细胞随机分为对照组,金丝桃苷组,缺血再灌注组,金丝桃苷处理+缺血再灌注组(联合组)。光镜观察细胞形态变化,CCK-8法检测细胞活力,Western blot检测磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白水平,自噬相关蛋白LC3Ⅱ、Beclin1和P62以及凋亡相关蛋白裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-3)活性水平,TUNEL染色观察凋亡变化。结果金丝桃苷组与对照组各项指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,缺血再灌注组凋亡指数、caspase-3活性、LC3Ⅱ和Beclin1明显增高,细胞活力、磷酸化AMPK、磷酸化mTOR和P62蛋白明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与缺血再灌注组比较,联合组细胞活力、磷酸化AMPK、磷酸化mTOR和P62蛋白明显增高,凋亡指数、caspase-3活性、LC3Ⅱ和Beclin1明显降低[(11.7±2.8)%vs(27.6±4.5)%,1.4±0.1 vs 2.1±0.3,1.35±0.04 vs 2.17±0.07,1.30±0.18 vs 2.20±0.20,P<0.05]。结论金丝桃苷通过激活AMPK/mTOR信号降低自噬减轻H9C2细胞缺血再灌注损伤。展开更多
文摘目的探讨金丝桃苷对H9C2细胞缺血再灌注损伤的作用及可能机制。方法采用H9C2细胞模拟缺血再灌注模型,缺血液培养45min,再恢复正常达尔伯克改良伊格尔培养液培养4h。将H9C2细胞随机分为对照组,金丝桃苷组,缺血再灌注组,金丝桃苷处理+缺血再灌注组(联合组)。光镜观察细胞形态变化,CCK-8法检测细胞活力,Western blot检测磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白水平,自噬相关蛋白LC3Ⅱ、Beclin1和P62以及凋亡相关蛋白裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-3)活性水平,TUNEL染色观察凋亡变化。结果金丝桃苷组与对照组各项指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,缺血再灌注组凋亡指数、caspase-3活性、LC3Ⅱ和Beclin1明显增高,细胞活力、磷酸化AMPK、磷酸化mTOR和P62蛋白明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与缺血再灌注组比较,联合组细胞活力、磷酸化AMPK、磷酸化mTOR和P62蛋白明显增高,凋亡指数、caspase-3活性、LC3Ⅱ和Beclin1明显降低[(11.7±2.8)%vs(27.6±4.5)%,1.4±0.1 vs 2.1±0.3,1.35±0.04 vs 2.17±0.07,1.30±0.18 vs 2.20±0.20,P<0.05]。结论金丝桃苷通过激活AMPK/mTOR信号降低自噬减轻H9C2细胞缺血再灌注损伤。
