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科研反哺在医学免疫学教学中的实践与探索 被引量：7
1
作者 张溪洋 孙元杰 +2 位作者 杨舒雅 姜东伯 杨琨 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期571-574,共4页
医学免疫学是连接基础实验与临床应用的重要纽带,更是多种前沿学科的交叉点。目前免疫学教学中仍存在教学方式单一和学生科研训练不足等局限性。空军军医大学基础医学院免疫学教研室在免疫学课程中对科研反哺教学进行实践探索,利用科研... 医学免疫学是连接基础实验与临床应用的重要纽带,更是多种前沿学科的交叉点。目前免疫学教学中仍存在教学方式单一和学生科研训练不足等局限性。空军军医大学基础医学院免疫学教研室在免疫学课程中对科研反哺教学进行实践探索,利用科研思维引领教学活动,通过科研平台支撑教学实践,增添科研进展丰富教学内容,设置科研活动激发学生兴趣,增加学生内驱力,提升教学效果,实现教学与科研“双赢”,也为培养能够肩负国之重任的医学创新人才提供助力。 展开更多
关键词 科研反哺 教学实践 医学免疫学 创新
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结核分枝杆菌磷酸二酯酶重组腺病毒黏膜免疫诱导的免疫应答特点
2
作者 代婷 路延之 +6 位作者 赵瑞华 宁唤唤 康健 郝乐冉 李嘉玲 常宇骁 柏银兰 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第1期1-8,共8页
目的结核分枝杆菌(Mtb)耐药菌株的流行加剧了结核病(TB)的全球负担,凸显了对新的TB治疗策略的需求。方法表达环二腺苷酸(c-di-AMP)分解酶磷酸二酯酶B(CnpB)的重组腺病毒疫苗(rAd-CnpB)经黏膜免疫正常小鼠,单独或联合药物免疫治疗Mtb呼... 目的结核分枝杆菌(Mtb)耐药菌株的流行加剧了结核病(TB)的全球负担,凸显了对新的TB治疗策略的需求。方法表达环二腺苷酸(c-di-AMP)分解酶磷酸二酯酶B(CnpB)的重组腺病毒疫苗(rAd-CnpB)经黏膜免疫正常小鼠,单独或联合药物免疫治疗Mtb呼吸道感染小鼠。ELISA检测小鼠血清及肺泡灌洗液(BALF)抗体水平,实时定量PCR检测小鼠肺组织中细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素10(IL-10)转录水平,流式细胞术检测肺、脾CD4^(+)、CD8^(+)T细胞亚群细胞比例,ELISA检测脾细胞抗原刺激后的细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-10、炎症因子IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)分泌水平,平板计数法计数Mtb感染小鼠肺、脾的荷菌数。结果rAd-CnpB滴鼻免疫可诱导小鼠血清高滴度的IgG,以及BALF中IgG和IgA产生,肺、脾T淋巴细胞亚群改变。rAd-CnpB单独或联合药物治疗Mtb感染小鼠可诱导血清IgG水平、BALF中IgA和IgG水平显著增高,rAd-CnpB免疫促进Mtb感染小鼠的脾细胞CnpB抗原特异性的细胞因子和炎症因子分泌。rAd-CnpB单独或联合药物免疫治疗并不显著影响Mtb呼吸道感染小鼠肺、脾荷菌数。结论rAd-CnpB经黏膜免疫可诱导小鼠显著的黏膜、体液免疫反应,并显著增强Mtb感染小鼠中CnpB特异性细胞免疫应答。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌(Mtb) 环核苷酸磷酸二酯酶B(CnpB) 重组腺病毒 免疫治疗
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卡介苗用于小鼠黑色素瘤模型免疫治疗的效应及其机制
3
作者 徐铭泽 宁唤唤 +8 位作者 路延之 康健 彭钰君 张婧瑶 胡家豪 代婷 董梦娟 薛飒 柏银兰 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第6期1420-1426,共7页
目的:探究卡介苗(BCG)和c-di-AMP为佐剂的重组卡介苗(rBCG)用于黑色素瘤小鼠的免疫治疗效果及机制。方法:构建小鼠黑色素瘤细胞B16F10腹股沟皮下注射荷瘤模型,分别采用1×10^(6)CFU BCG和rBCG皮下瘤旁注射免疫治疗3次,观察小鼠生存... 目的:探究卡介苗(BCG)和c-di-AMP为佐剂的重组卡介苗(rBCG)用于黑色素瘤小鼠的免疫治疗效果及机制。方法:构建小鼠黑色素瘤细胞B16F10腹股沟皮下注射荷瘤模型,分别采用1×10^(6)CFU BCG和rBCG皮下瘤旁注射免疫治疗3次,观察小鼠生存情况、肿瘤生长与转移情况;分离小鼠肿瘤组织制备细胞悬液,流式细胞术检测各免疫细胞比例;qRTPCR检测肿瘤组织免疫相关基因转录水平。结果:BCG和rBCG免疫治疗均可显著抑制小鼠黑色素瘤生长,延长小鼠生存时间,且rBCG免疫治疗抑制肿瘤转移的效果优于BCG。两菌株均可显著降低肿瘤生长和转移相关M2型巨噬细胞和髓源性抑制细胞比例。两菌株均能促进肿瘤组织淋巴细胞浸润,rBCG显著促进肿瘤组织B细胞浸润增加。BCG免疫治疗上调肿瘤转移相关细胞因子转录水平,而rBCG治疗并不影响上述基因转录。结论:BCG和rBCG免疫均对小鼠黑色素瘤具有治疗作用,c-diAMP为佐剂的rBCG抑制肿瘤转移的效果优于BCG,其作用机制与调节肿瘤组织内免疫应答水平有关。 展开更多
关键词 卡介苗 重组卡介苗 黑色素瘤 c-di-AMP 免疫治疗
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结核分枝杆菌c-di-AMP磷酸二酯酶重组腺病毒的构建及其诱导的体液免疫应答
4
作者 胡家豪 宁唤唤 +7 位作者 董梦娟 路延之 代婷 张从玥 徐子晴 王姝予 周正言 柏银兰 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第4期364-369,共6页
目的构建表达结核分枝杆菌(M.tb)c-di-AMP磷酸二酯酶CnpB的重组腺病毒(rAd)并检测其诱导的体液免疫应答。方法经密码子优化的M.tb CnpB编码基因克隆入质粒pcADV,获得的重组质粒pcADV-CnpB转染HEK293T细胞,并用Western blot鉴定表达。重... 目的构建表达结核分枝杆菌(M.tb)c-di-AMP磷酸二酯酶CnpB的重组腺病毒(rAd)并检测其诱导的体液免疫应答。方法经密码子优化的M.tb CnpB编码基因克隆入质粒pcADV,获得的重组质粒pcADV-CnpB转染HEK293T细胞,并用Western blot鉴定表达。重组pcADV-CnpB与骨架质粒共转染HEK293T细胞包装获得重组腺病毒rAd-CnpB,以HEK293T细胞扩增rAd-CnpB,Western blot和免疫荧光检测rAd-CnpB表达目的蛋白。以rAd-CnpB滴鼻免疫小鼠,收集小鼠血清与肺泡灌洗液(BALF),ELISA检测抗原特异性抗体水平。结果酶切和测序鉴定表明重组质粒pcADV-CnpB构建成功,该质粒能够在真核细胞中表达。在HEK293T细胞内包装并获得rAd-CnpB,大量扩增并纯化获得滴度为5.53×10^(10) PFU/mL的rAd-CnpB。rAd-CnpB可在HEK293T细胞中表达目的蛋白CnpB。rAd-CnpB滴鼻免疫小鼠,可诱导BALF中CnpB特异性IgG与分泌型IgA水平的增加,同时诱导血清中产生高水平的CnpB特异性IgG。结论成功构建表达M.tb c-di-AMP磷酸二酯酶CnpB的重组腺病毒rAd-CnpB,并且rAd-CnpB经黏膜免疫可诱导抗原特异性体液免疫与黏膜免疫应答,可用于结核病新疫苗的研究。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 重组腺病毒 c-di-AMP 磷酸二酯酶 黏膜免疫
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结核分枝杆菌双组分系统PhoP蛋白的免疫学特性 被引量：1
5
作者 李雪 宁唤唤 +6 位作者 康健 徐铭泽 崔若囡 代婷 路延之 薛飒 柏银兰 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期352-358,共7页
目的探究结核分枝杆菌双组分系统PhoP蛋白的免疫学特性。方法采用生物信息学方法预测PhoP蛋白的B细胞和T细胞表位。将Mtb H37Rv phoP基因克隆到pET-28a(+)原核表达载体上,并将重组质粒转化到E.coli BL21菌株中,经IPTG诱导表达及亲和层... 目的探究结核分枝杆菌双组分系统PhoP蛋白的免疫学特性。方法采用生物信息学方法预测PhoP蛋白的B细胞和T细胞表位。将Mtb H37Rv phoP基因克隆到pET-28a(+)原核表达载体上,并将重组质粒转化到E.coli BL21菌株中,经IPTG诱导表达及亲和层析法纯化获得PhoP重组蛋白。用ELISA分析Mtb感染小鼠和TB患者血清中PhoP特异性抗体水平。PhoP重组蛋白经肌肉注射途径免疫小鼠,分离小鼠多抗血清,用ELISA和Western blot分别检测抗体效价和抗体特异性。分离小鼠脾细胞,用ELISpot和ELISA法分别检测分泌IFN-γ细胞频数及其分泌水平。结果经生物信息学预测发现PhoP含有24个B细胞抗原表位和11个优势T细胞表位。成功构建PhoP原核表达载体并获得纯化的PhoP蛋白。Mtb感染小鼠和TB患者血清中的PhoP特异性抗体显著升高,查准率分别为99.9%和82.5%,特异度均为100%。PhoP免疫小鼠诱导产生高水平特异性抗体,免疫小鼠脾细胞经抗原体外刺激后,IFN-γ的分泌水平和细胞频数均显著增加,IL-2和IL-10分泌水平上调。结论PhoP蛋白可诱导体液免疫应答和Th1型为主的细胞免疫。PhoP蛋白有良好的免疫原性,且具有一定的TB诊断效能。本研究为阐明PhoP在Mtb感染中的作用及其用于TB诊断奠定了一定的基础。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 双组分系统 PHOP 体液免疫应答 细胞免疫应答
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经颈静脉肝内门体分流术在肝硬化食管胃底静脉曲张破裂出血中的应用现状与未来展望 被引量：19
6
作者 吕勇 樊代明 韩国宏 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2022年第6期1229-1233,共5页
食管胃底静脉曲张破裂出血是肝硬化门静脉高压的致命性并发症。经颈静脉肝内门体分流术(TIPS)是治疗门静脉高压并发症的有效手段。TIPS可用于预防复发性或顽固性腹水患者的首次静脉曲张出血。对急性静脉曲张出血高危(Child-Pugh C级<... 食管胃底静脉曲张破裂出血是肝硬化门静脉高压的致命性并发症。经颈静脉肝内门体分流术(TIPS)是治疗门静脉高压并发症的有效手段。TIPS可用于预防复发性或顽固性腹水患者的首次静脉曲张出血。对急性静脉曲张出血高危(Child-Pugh C级<14分、Child-Pugh B级>7分伴内镜下活动性出血或肝静脉压力梯>20 mmHg)的患者,应当尽早行TIPS治疗。对标准治疗失败的急性静脉曲张出血,TIPS是有效的挽救措施。此外,TIPS也是预防静脉曲张再出血的二线选择。 展开更多
关键词 肝硬化 门静脉高压 门体分流术 经颈静脉肝内 食管和胃静脉曲张
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免疫学实验课教学模式和方法的探讨 被引量：4
7
作者 孙元杰 张春梅 +3 位作者 张溪洋 姜东伯 杨舒雅 杨琨 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期858-861,共4页
免疫学实验课是理论课的重要补充,但传统的教学模式和方法相对比较陈旧,一定程度上影响实验课教学质量。我们从免疫学实验课课程设置现状,总结出实验课教学存在的问题,并针对这些问题,对实验课教学模式和方法进行了改进,建立了前导式、... 免疫学实验课是理论课的重要补充,但传统的教学模式和方法相对比较陈旧,一定程度上影响实验课教学质量。我们从免疫学实验课课程设置现状,总结出实验课教学存在的问题,并针对这些问题,对实验课教学模式和方法进行了改进,建立了前导式、贯穿式、科研式相结合为特点的实验教学新模式新方法。并且以多样的教学手段,全程的过程培养,调查问卷等方式检验教学效果。结果表明,有效利用实验教学新模式新方法进行授课,对于提升免疫学课程的整体教学质量,具有重要意义。 展开更多
关键词 教学方法 教学模式 实验课 免疫学
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c-di-AMP为佐剂的重组卡介苗免疫对小鼠白色脂肪的调节作用
8
作者 董梦娟 常宇骁 +8 位作者 宁唤唤 路延之 康健 徐铭泽 代婷 李嘉玲 郝乐冉 张琳娜 柏银兰 《中国人兽共患病学报》 2025年第4期370-375,共6页
目的研究c-di-AMP为佐剂的重组卡介苗(rBCG)调节小鼠附睾白色脂肪(eWAT)代谢及免疫的作用和机制。方法SPF级雄性C57BL/6小鼠经静脉免疫卡介苗(BCG)和重组卡介苗(rBCG),监测小鼠体重变化。分离并称重小鼠eWAT重量,血球仪计血管基质成分(S... 目的研究c-di-AMP为佐剂的重组卡介苗(rBCG)调节小鼠附睾白色脂肪(eWAT)代谢及免疫的作用和机制。方法SPF级雄性C57BL/6小鼠经静脉免疫卡介苗(BCG)和重组卡介苗(rBCG),监测小鼠体重变化。分离并称重小鼠eWAT重量,血球仪计血管基质成分(SVFs)数量。制备小鼠脂肪组织切片,HE染色后显微镜下观察和比较各组小鼠eWAT脂肪细胞大小、数量和形态以及冠状结构(CLS)形成等变化。qRT-PCR检测各组小鼠脂肪代谢相关因子、细胞因子和衰老相关基因的转录水平。结果BCG和rBCG免疫小鼠体重随时间逐渐增加,rBCG免疫诱导eWAT比重增加,SVFs数量降低。HE染色结果显示,BCG免疫促进eWAT脂肪细胞增生和rBCG免疫促进脂肪细胞肥大,BCG和rBCG免疫均可诱导eWAT中CLS形成。qRT-PCR检测结果显示,rBCG免疫可抑制eWAT脂肪分解和能量消耗相关基因表达。BCG免疫对细胞因子转录作用影响不大,而rBCG可诱导IFN-γ和IL-1Ra显著表达,抑制IL-15和IL-2的转录,但不诱导衰老相关基因的表达。结论rBCG免疫可诱导eWAT脂肪细胞肥大,其机制与抑制eWAT脂肪分解及调节细胞因子表达有关。 展开更多
关键词 卡介苗 重组卡介苗 环二腺苷酸 白色脂肪 脂肪代谢 细胞因子
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