检索结果-维普期刊中文期刊服务平台

二穗短柄草钙依赖型蛋白激酶基因BdCDPK14克隆及表达分析被引量：2: 1; 作者韦淑亚赵旭东 +1 位作者杨广笑何光源《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期761-767,共7页; 【目的】克隆分析二穗短柄草钙依赖型蛋白激酶(CDPK)基因BdCDPK14,并检测其在干旱胁迫下的表达量,为揭示钙依赖型蛋白激酶的抗旱调控机制打下基础。【方法】根据NCBI检索结果设计特异引物,以二穗短柄草cDNA为模板,采用PCR扩增二穗短柄草... 展开更多; 关键词二穗短柄草 BdCDPK14基因克隆生物信息学分析干旱胁迫表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

二穗短柄草钙依赖型蛋白激酶BdCDPK4基因的克隆及其编码蛋白质的生物信息学分析被引量：2: 2; 作者韦淑亚赵旭东 +2 位作者王会平杨广笑何光源《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第2期345-352,共8页; 二穗短柄草(Brachypodium distachyon L.)因与小麦、大麦等有很高的同源性,作为新型禾本科模式生物吸引了越来越多的研究者。试验采用基因克隆技术分离了二穗短柄草Bd CDPK4基因的编码区序列,并采用生物信息学方法分析了该基因及其编码... 展开更多; 关键词 CDPKS BdCDPK4 多序列比对生物信息学分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

反向PCR法扩增花粉特异表达基因PSG076启动子被引量：1: 3; 作者陈泠苏佩佩 +5 位作者佟汉文刘易科朱展望杨广笑高春保何光源《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期309-314,共6页; PSG076基因是从奥地利小麦品种‘Ferdinand’中分离的花粉特异性表达基因,功能未知。为获得可用于小麦基因工程的花粉特异性启动子,采用优化的反向PCR法分离PSG076启动子,获得了起始密码子上游约1.4 kb的启动子序列。生物信息学分析显示... 展开更多; 关键词小麦花粉特异性启动子反向PCR 序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

人干扰素α-2b基因在烟草中的表达研究: 4; 作者崔翠菊赵稳 +5 位作者周璇谭翼李肖杨广笑汪越胜何光源《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期81-86,共6页; 应用PCR的技术从质粒pAIFN中扩增人干扰素α-2b(Human interferon α-2b,HuIFN α-2b)编码基因,将其连接到pBI121双元载体构建植物真核表达载体pBIFN;用冻融法将该载体转染根癌农杆菌LBA4404;并用叶盘浸染法转化烟草叶片,经转化的烟草... 展开更多; 关键词烟草转基因人干扰素Α-2B 根癌农杆菌; 在线阅读下载PDF 职称材料

水稻钙依赖型蛋白激酶OsCPK9基因启动子的克隆及在烟草中的瞬时表达分析被引量：3: 5; 作者韦淑亚刘小东 +5 位作者张莹莹赵旭东罗青晨刘虎杨广笑何光源《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第2期261-267,共7页; 植物钙依赖型蛋白激酶(CDPK)调控钙信号途径下游组分,与植物的生长发育及各种逆境生理过程密切相关。通过对本课题组克隆的水稻OsCPK9基因的cDNA序列与NCBI中的水稻基因组数据库进行比对、定位,结合生物信息学的方法,预测到基因上游的... 展开更多; 关键词水稻 OsCPK9 启动子 GUS活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

小麦avenin-like type-B基因启动子的分离及表达载体的构建: 6; 作者宋斐陈泠 +4 位作者孙杨柳王菲菲汪越胜杨广笑何光源《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期1-4,共4页; 根据已知的小麦ALP type-B基因序列,采用反向PCR技术,从小麦品种鄂恩1号(En1)中克隆得到了ALP type-B基因的上游启动子序列1664 bp。通过PLACE和plantCARE等数据库对所克隆的启动子进行生物信息学分析,发现该启动子除具备启动子的基本... 展开更多; 关键词小麦胚乳特异性基因启动子植物表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

小麦avenin-like type-B基因启动子的克隆及功能验证: 7; 作者宋斐陈泠 +4 位作者王菲菲孙杨柳汪越胜杨广笑何光源《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第15期156-158,F0003,共4页; 为深入研究ALPtype-B基因的调控机理及胚胎特异性表达特性,采用农杆菌转化技术,将含有ALPtype-B基因启动子的双元表达载体转化烟草。对阳性转基因烟草植株进行GUS组织化学检测定性分析。结果显示,小麦ALPtype-B基因启动子可驱动报告基... 展开更多; 关键词小麦 ALP type—B 胚乳特异性烟草农杆菌侵染; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名二穗短柄草钙依赖型蛋白激酶基因BdCDPK14克隆及表达分析被引量：2: 1; 作者韦淑亚赵旭东杨广笑何光源; 机构武汉职业技术学院生物工程学院科技部国际科技合作基地(基因工程)/分子生物物理学教育部重点实验室/华中科技大学生命科学与技术学院; 出处《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期761-767,共7页; 基金湖北省自然科学研究计划项目(B2016581) 教育部高校博士学科点专项科研基金项目(20120142110075) +1 种基金武汉职业技术学院博士科研基金项目(2016BS001); 文摘【目的】克隆分析二穗短柄草钙依赖型蛋白激酶(CDPK)基因BdCDPK14,并检测其在干旱胁迫下的表达量,为揭示钙依赖型蛋白激酶的抗旱调控机制打下基础。【方法】根据NCBI检索结果设计特异引物,以二穗短柄草cDNA为模板,采用PCR扩增二穗短柄草CDPK基因家族成员BdCDPK14,利用在线分析软件对BdCDPK14基因编码蛋白进行生物信息学分析,并采用RT-PCR检测PEG-6000干旱胁迫下的BdCDPK14基因表达量。【结果】从二穗短柄草叶片中克隆获得的BdCDPK14基因(Gen Bank登录号XM_003564390)片段长度1750 bp,其开放阅读框(ORF)1545 bp,编码514个氨基酸,其编码蛋白分子量56.78 kD,理论等电点5.45,脂肪指数78.21,不稳定指数38.66,属于稳定蛋白。BdCDPK14蛋白与小麦TaCPK13蛋白(ABY59018)的亲缘关系最近,含有4个EF-hands结构、蛋白酪氨酸激酶结构域、脂多糖激酶家族、ATP结合区域、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶激活区和预测跨膜区等结构域,主要由无规卷曲和α-螺旋构成,位于叶绿体和细胞质膜上。在PEG-6000干旱胁迫下,BdCDPK14基因在胁迫3 h内的相对表达量无明显变化,胁迫6 h后相对表达量开始升高,至胁迫12 h时的相对表达量最高。【结论】克隆获得的BdCDPK14基因为二穗短柄草CDPK基因家族成员之一,参与其抗干旱胁迫反应,可作为候选基因用于二穗短柄草抗旱机制研究。; 关键词二穗短柄草 BdCDPK14基因克隆生物信息学分析干旱胁迫表达; Keywords Brachypodium distachyon BdCDPK14 gene clone bioinformatics analysis drought stress expression; 分类号 Q949.714.2 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名二穗短柄草钙依赖型蛋白激酶BdCDPK4基因的克隆及其编码蛋白质的生物信息学分析被引量：2: 2; 作者韦淑亚赵旭东王会平杨广笑何光源; 机构武汉职业技术学院生物工程学院应用生物技术研究所科技部国际科技合作基地(基因工程); 出处《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第2期345-352,共8页; 基金高校博士点专项科研基金(20120142110075) 湖北省教育厅自然科学研究计划项目(B2016581) +1 种基金武汉职业技术学院校级博士科研基金(2016BS001); 文摘二穗短柄草(Brachypodium distachyon L.)因与小麦、大麦等有很高的同源性,作为新型禾本科模式生物吸引了越来越多的研究者。试验采用基因克隆技术分离了二穗短柄草Bd CDPK4基因的编码区序列,并采用生物信息学方法分析了该基因及其编码的蛋白质的序列特征、结构和功能。结果表明,分离了BdCDPK4基因1 851 bp的cDNA序列(Gen Bank登录号为XM_003559516),编码区长度为1 752 bp,编码583个氨基酸,分子量为64.78 ku,等电点为9.12,含有N端可变区、蛋白激酶区、自抑制区、EF手型结构、类似钙调素等结构域。亚细胞定位预测位于叶绿体和液泡上。进化树分析结果显示,该蛋白与小麦Ta CDPK19蛋白的同源性最近。根据各物种间CDPKs蛋白的高同源性,结合小麦TaCDPK19基因被高盐和小麦白粉病菌Blumeria graministritici(Bgt)诱导,推测Bd CDPK4基因也可能参与逆境胁迫下的信号传导途径,在抗逆等生物学过程中发挥重要功能。; 关键词 CDPKS BdCDPK4 多序列比对生物信息学分析; Keywords CDPKs BdCDPK4 multiple sequence alignment bioinformatics analysis; 分类号 Q949.714.2 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名反向PCR法扩增花粉特异表达基因PSG076启动子被引量：1: 3; 作者陈泠苏佩佩佟汉文刘易科朱展望杨广笑高春保何光源; 机构华中科技大学生命科学与技术学院中英HUST-RRes基因工程和基因组学联合实验室湖北省农业科学院粮食作物研究所; 出处《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期309-314,共6页; 基金科技部国际合作重点项目(2009DFB30340) 博士后科学基金(20100471125); 文摘 PSG076基因是从奥地利小麦品种‘Ferdinand’中分离的花粉特异性表达基因,功能未知。为获得可用于小麦基因工程的花粉特异性启动子,采用优化的反向PCR法分离PSG076启动子,获得了起始密码子上游约1.4 kb的启动子序列。生物信息学分析显示,该启动子除含有与花粉特异性表达相关的调控元件AGAAA和GTGA外,还含有花粉特异性表达相关的数量元件AGGTCA和AAATGA,推测其为活性较强的花粉特异性启动子。实验中对反向PCR方法的优化可提高扩增侧翼未知序列的效率,特别适用于启动子序列的扩增。; 关键词小麦花粉特异性启动子反向PCR 序列分析; Keywords Wheat； Pollen-specific promoter； Inverse-PCR； Sequence analysis; 分类号 Q781 [生物学—分子生物学] Q523.8 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人干扰素α-2b基因在烟草中的表达研究: 4; 作者崔翠菊赵稳周璇谭翼李肖杨广笑汪越胜何光源; 机构华中科技大学生命科学与技术学院中英HUST-RRes基因工程和基因组学联合实验室; 出处《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期81-86,共6页; 基金国家科技重大专项--优质转基因小麦新品种培育(2008zx08002-004) 973预研项目(2008CB117014); 文摘应用PCR的技术从质粒pAIFN中扩增人干扰素α-2b(Human interferon α-2b,HuIFN α-2b)编码基因,将其连接到pBI121双元载体构建植物真核表达载体pBIFN;用冻融法将该载体转染根癌农杆菌LBA4404;并用叶盘浸染法转化烟草叶片,经转化的烟草叶片的组织培养,诱导愈伤获得再生植株。通过应用PCR,RT-PCR,Wes-tern blot和WISH/VSV方法检测获得的烟草再生植株,结果表明HuIFN α-2b基因已成功整合进烟草核基因组并表达出具有活性的HuIFN α-2b蛋白。本文对HuIFN α-2b基因在烟草核系统中的表达进行了研究,为进一步在烟草叶绿体系统中该基因的表达研究奠定了基础。; 关键词烟草转基因人干扰素Α-2B 根癌农杆菌; Keywords Tobacco transformation Human interferon α-2b gene Agrobacterium tumefaciens; 分类号 Q26 [生物学—细胞生物学] Q943.1 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名水稻钙依赖型蛋白激酶OsCPK9基因启动子的克隆及在烟草中的瞬时表达分析被引量：3: 5; 作者韦淑亚刘小东张莹莹赵旭东罗青晨刘虎杨广笑何光源; 机构科技部国际科技合作基地(基因工程); 出处《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第2期261-267,共7页; 基金杂交水稻国家重点实验室(武汉大学)开放课题基金(KF201302) 教育部科学技术研究重点项目(109105) +1 种基金河南省教育厅自然科学研究计划项目(2009B210005); 文摘植物钙依赖型蛋白激酶(CDPK)调控钙信号途径下游组分,与植物的生长发育及各种逆境生理过程密切相关。通过对本课题组克隆的水稻OsCPK9基因的cDNA序列与NCBI中的水稻基因组数据库进行比对、定位,结合生物信息学的方法,预测到基因上游的一段启动子序列。进而利用PCR的方法从水稻‘日本晴’(Oryza sativa L.cv.Nipponbare)基因组DNA中克隆到了水稻OsCPK9基因5’端上游约2 kb的DNA序列,命名为POsCPK9。PLANTCARE在线分析表明,POsCPK9序列除包含植物启动子所必备的基本元件如TATAbox和CAAT-box外,还含有多个与逆境和信号物质相关的顺式表达元件。将克隆到的POsCPK9取代pBI121中的CaMV 35S启动子,构建成POsCPK9与GUS的融合表达载体POsCPK9-GUS;通过农杆菌介导的方法在烟草的根、茎、叶中进行瞬时表达。结果显示,该启动子驱动的GUS基因在烟草的根、茎、叶中都有不同程度的表达。说明OsCPK9基因上游2 kb具有启动子活性。; 关键词水稻 OsCPK9 启动子 GUS活性; Keywords rice OsCPK9 promoter GUS activity; 分类号 S511 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小麦avenin-like type-B基因启动子的分离及表达载体的构建: 6; 作者宋斐陈泠孙杨柳王菲菲汪越胜杨广笑何光源; 机构华中科技大学生命科学与技术学院中英HUST-Rres基因工程和基因组学联合实验室/科技部国际科技合作基地(基因工程)/教育部分子生物物理重点实验室湖北省农科院粮食作物研究所; 出处《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期1-4,共4页; 基金国家转基因重大专项(2011ZX08010004-004); 文摘根据已知的小麦ALP type-B基因序列,采用反向PCR技术,从小麦品种鄂恩1号(En1)中克隆得到了ALP type-B基因的上游启动子序列1664 bp。通过PLACE和plantCARE等数据库对所克隆的启动子进行生物信息学分析,发现该启动子除具备启动子的基本元件如TATA-box、CAAT-box等外,还含有胚乳特异性表达的特有元件如Endosperm motif、GCN4-like motif(GLM)、RY motif和G-box等。用ALP type-B启动子置换质粒pBI121上的35S启动子,将其与gus基因连接构建植物表达载体。; 关键词小麦胚乳特异性基因启动子植物表达载体; Keywords wheat endosperm-specific gene promoter plant expression vector; 分类号 Q755 [生物学—分子生物学] S512.1 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小麦avenin-like type-B基因启动子的克隆及功能验证: 7; 作者宋斐陈泠王菲菲孙杨柳汪越胜杨广笑何光源; 机构华中科技大学生命科学与技术学院中英HUST-Rres基因工程和基因组学联合实验室/科技部国际科技合作基地(基因工程)/教育部分子生物物理重点实验室华中科技大学生命科学与技术学院中英HUST-Rres基因工程和基因组学联合实验室/科技部国际科技合作基地基因工程/教育部分子生物物理重点实验室湖北省农科院粮食作物研究所; 出处《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第15期156-158,F0003,共4页; 基金国家转基因重大专项(2011ZX08002-004); 文摘为深入研究ALPtype-B基因的调控机理及胚胎特异性表达特性,采用农杆菌转化技术,将含有ALPtype-B基因启动子的双元表达载体转化烟草。对阳性转基因烟草植株进行GUS组织化学检测定性分析。结果显示,小麦ALPtype-B基因启动子可驱动报告基因在烟草种子的胚乳中特异表达,在其他组织中没有表达。; 关键词小麦 ALP type—B 胚乳特异性烟草农杆菌侵染; Keywords wheat ALP type-B endosperm-specific tobacco agrobacterium infection; 分类号 Q755 [生物学—分子生物学] S512.1 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	二穗短柄草钙依赖型蛋白激酶基因BdCDPK14克隆及表达分析	韦淑亚赵旭东杨广笑何光源	《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心	2017	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	二穗短柄草钙依赖型蛋白激酶BdCDPK4基因的克隆及其编码蛋白质的生物信息学分析	韦淑亚赵旭东王会平杨广笑何光源	《浙江农业学报》 CSCD 北大核心	2017	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	反向PCR法扩增花粉特异表达基因PSG076启动子	陈泠苏佩佩佟汉文刘易科朱展望杨广笑高春保何光源	《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	人干扰素α-2b基因在烟草中的表达研究	崔翠菊赵稳周璇谭翼李肖杨广笑汪越胜何光源	《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心	2011	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	水稻钙依赖型蛋白激酶OsCPK9基因启动子的克隆及在烟草中的瞬时表达分析	韦淑亚刘小东张莹莹赵旭东罗青晨刘虎杨广笑何光源	《浙江农业学报》 CSCD 北大核心	2014	3	在线阅读下载PDF 职称材料
6	小麦avenin-like type-B基因启动子的分离及表达载体的构建	宋斐陈泠孙杨柳王菲菲汪越胜杨广笑何光源	《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	小麦avenin-like type-B基因启动子的克隆及功能验证	宋斐陈泠王菲菲孙杨柳汪越胜杨广笑何光源	《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料