构建经基因工程改造的Ara h 2表达载体,表达并纯化该蛋白,鉴定其过敏原性。将花生主要过敏原Arah 2基因序列进行颠换,并将颠换后的序列进行合成,再将合成后的基因克隆到原核表达载体pET-32a(+)上,然后转入Origami宿主表达菌中;利用Isopr...构建经基因工程改造的Ara h 2表达载体,表达并纯化该蛋白,鉴定其过敏原性。将花生主要过敏原Arah 2基因序列进行颠换,并将颠换后的序列进行合成,再将合成后的基因克隆到原核表达载体pET-32a(+)上,然后转入Origami宿主表达菌中;利用Isopropylβ-D-1-Thiogalactopyranoside(IPTG)诱导表达;通过Ni2+亲和层析纯化目的蛋白;Western blotting和ELISA鉴定该重组蛋白的过敏原性。测序结果表明合成后的序列成功整合到原核表达载体pET-32a(+)上。重组的目的蛋白纯化后经SDS-PAGE鉴定,蛋白大小与理论值相符。Western blotting和ELISA结果均表明经基因工程改造的Ara h 2(F-Ara h 2)蛋白与重组的Ara h 2(R-Ara h 2)蛋白相比,结合花生过敏患者混合血清中IgE显著降低。成功构建经基因工程改造的Ara h 2表达载体,初步的体外实验表明该基因表达的重组蛋白具有低致敏原性。展开更多
目的:观察成人慢性牙周炎应用中药清热消炎固齿缓释剂治疗前后龈沟液中细胞外弹性蛋白酶EA-S(elastase in supernatant)和细胞内弹性蛋白酶EA-P(elastase in the pellet)水平的变化。方法:挑选40例慢性成人牙周炎患者,将患者的左右两颗...目的:观察成人慢性牙周炎应用中药清热消炎固齿缓释剂治疗前后龈沟液中细胞外弹性蛋白酶EA-S(elastase in supernatant)和细胞内弹性蛋白酶EA-P(elastase in the pellet)水平的变化。方法:挑选40例慢性成人牙周炎患者,将患者的左右两颗患牙随机分为实验组和对照组,基础治疗后实验组使用清热消炎固齿缓释剂,实验时间持续4周,1周1次。对照组不使用清热消炎固齿缓释剂,最后测试对比两实验小组治疗前后龈沟液中的EA-S和EA-P水平。结果:实验组和对照组在治疗后龈沟液中EA-S和EA-P总量和浓度均明显降低(P<0.01),治疗前后实验组与对照组龈沟液中EA-S和EA-P总量和浓度变化有显著性差异,实验组优于对照组(P<0.01)。结论:基础治疗和清热消炎固齿缓释剂联合应用对成人慢性牙周炎的治疗在降低龈沟液中EA方面优于单纯的基础治疗。展开更多
文摘构建经基因工程改造的Ara h 2表达载体,表达并纯化该蛋白,鉴定其过敏原性。将花生主要过敏原Arah 2基因序列进行颠换,并将颠换后的序列进行合成,再将合成后的基因克隆到原核表达载体pET-32a(+)上,然后转入Origami宿主表达菌中;利用Isopropylβ-D-1-Thiogalactopyranoside(IPTG)诱导表达;通过Ni2+亲和层析纯化目的蛋白;Western blotting和ELISA鉴定该重组蛋白的过敏原性。测序结果表明合成后的序列成功整合到原核表达载体pET-32a(+)上。重组的目的蛋白纯化后经SDS-PAGE鉴定,蛋白大小与理论值相符。Western blotting和ELISA结果均表明经基因工程改造的Ara h 2(F-Ara h 2)蛋白与重组的Ara h 2(R-Ara h 2)蛋白相比,结合花生过敏患者混合血清中IgE显著降低。成功构建经基因工程改造的Ara h 2表达载体,初步的体外实验表明该基因表达的重组蛋白具有低致敏原性。
文摘目的:观察成人慢性牙周炎应用中药清热消炎固齿缓释剂治疗前后龈沟液中细胞外弹性蛋白酶EA-S(elastase in supernatant)和细胞内弹性蛋白酶EA-P(elastase in the pellet)水平的变化。方法:挑选40例慢性成人牙周炎患者,将患者的左右两颗患牙随机分为实验组和对照组,基础治疗后实验组使用清热消炎固齿缓释剂,实验时间持续4周,1周1次。对照组不使用清热消炎固齿缓释剂,最后测试对比两实验小组治疗前后龈沟液中的EA-S和EA-P水平。结果:实验组和对照组在治疗后龈沟液中EA-S和EA-P总量和浓度均明显降低(P<0.01),治疗前后实验组与对照组龈沟液中EA-S和EA-P总量和浓度变化有显著性差异,实验组优于对照组(P<0.01)。结论:基础治疗和清热消炎固齿缓释剂联合应用对成人慢性牙周炎的治疗在降低龈沟液中EA方面优于单纯的基础治疗。
