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乙型肝炎病毒X蛋白通过DNMT3A诱导肝癌细胞RUNX3基因高甲基化
被引量：
5
1
作者
林万松
林洁
+3 位作者
林巧燕
周智锋
李洁羽
叶韵斌
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第8期717-721,727,共6页
目的研究肝癌细胞中乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)对抑癌基因Runt相关转录因子3(RUNX3)表达的影响及相关作用机制,探讨乙肝病毒促肝癌发生的表观遗传调控。方法HBx重组表达载体转染5-aza-CdR处理或未处理的Huh7、HepG2肝癌细胞,Western Blot及...
目的研究肝癌细胞中乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)对抑癌基因Runt相关转录因子3(RUNX3)表达的影响及相关作用机制,探讨乙肝病毒促肝癌发生的表观遗传调控。方法HBx重组表达载体转染5-aza-CdR处理或未处理的Huh7、HepG2肝癌细胞,Western Blot及RT-qPCR检测RUNX3的表达,分析RUNX3基因启动子CpG岛甲基化水平。合成DNA甲基转移酶3A的小干扰RNA(siRNA_3A)单独转染或与HBx共转染,检测RUNX3的表达。PCR检测21例手术切除的肝细胞癌新鲜组织标本HBx表达情况,比较HBx阴性与HBx阳性组织样本间RUNX3的表达差异以及启动子甲基化程度。结果过表达HBx可导致肝癌细胞内RUNX3表达下调,且甲基转移酶抑制剂5-aza-CdR可完全阻断HBx对RUNX3的抑制作用。HBx诱导RUNX3基因启动子CpG岛发生高甲基化,但不影响DNA甲基转移酶的表达。siRNA_3A转染肝癌细胞后,RUNX3 mRNA与蛋白表达均显著上调;其与HBx共转染后,逆转了单独HBx对RUNX3的抑制作用。HBx阳性的肝癌组织中RUNX3mRNA表达水平较HBx阴性组低,且RUNX3启动子甲基化程度也相对较高。结论 HBx通过促进RUNX3启动子区域发生高甲基化而抑制其表达,且这一过程是由DNMT3A所介导的。
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关键词
乙型肝炎病毒X蛋白
肝细胞癌
RUNT相关转录因子3
DNA甲基转移酶3A
甲基化
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职称材料
FERMT2在肝癌组织中的表达及其对肝癌细胞生长的调控
被引量：
1
2
作者
林洁
陈小岩
+3 位作者
李洁羽
王丽萍
陈惠玉
林万松
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第12期2157-2164,共8页
目的:观察fermitin家族同源蛋白2(FERMT2)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达,并以体外实验分析FERMT2基因敲除对肝癌细胞生长及相关调控分子表达的影响。方法:采用real-time PCR及免疫组化实验检测FERMT2在HCC及癌旁正常肝组织中的表达情况;...
目的:观察fermitin家族同源蛋白2(FERMT2)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达,并以体外实验分析FERMT2基因敲除对肝癌细胞生长及相关调控分子表达的影响。方法:采用real-time PCR及免疫组化实验检测FERMT2在HCC及癌旁正常肝组织中的表达情况;采用CRISPR/Cas9技术构建FERMT2基因敲除的稳定MHCC97H细胞系,通过WST-1法和流式细胞术比较其与野生型MHCC97H细胞活力、细胞周期和凋亡状态的改变,并采用Western blot检测相关调控蛋白的表达变化。结果:FERMT2在HCC组织中的mRNA和蛋白表达水平均显著高于癌旁组织,且FERMT2蛋白的高表达与HCC患者术后复发有关(P<0.05);成功构建了FERMT2基因敲除的稳定MHCC97H细胞系;与野生型细胞相比,FERMT2基因敲除后细胞活力明显减弱,S期细胞数量明显减少,细胞凋亡增加,且细胞内增殖细胞核抗原、细胞周期蛋白及细胞周期蛋白依赖性激酶2的表达均显著降低(P<0.05);细胞凋亡抑制因子survivin及Bcl2的表达也明显下降(P<0.05),并可检测到cleaved caspase-3。结论:FERMT2在肝癌组织中呈高表达,它可能通过调控细胞周期调节蛋白及抗凋亡蛋白的表达影响肝癌细胞的活力、细胞周期及凋亡,进而在肝癌形成及发展过程中发挥促癌作用。
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关键词
肝细胞癌
CRISPR/Cas9技术
Fermitin家族同源蛋白2
细胞增殖
细胞周期
细胞凋亡
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职称材料
题名
乙型肝炎病毒X蛋白通过DNMT3A诱导肝癌细胞RUNX3基因高甲基化
被引量：
5
1
作者
林万松
林洁
林巧燕
周智锋
李洁羽
叶韵斌
机构
福建省
肿瘤
医院
肿瘤免疫学研究室、
福建省
肿瘤转化
医学
重点实验室
福建省立医院病理科、福建医科大学省立临床医学院
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第8期717-721,727,共6页
基金
国家自然科学基金青年科学基金项目(No.81301444)
福建省中青年教师教育科研项目(No.JB13128)联合资助~~
文摘
目的研究肝癌细胞中乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)对抑癌基因Runt相关转录因子3(RUNX3)表达的影响及相关作用机制,探讨乙肝病毒促肝癌发生的表观遗传调控。方法HBx重组表达载体转染5-aza-CdR处理或未处理的Huh7、HepG2肝癌细胞,Western Blot及RT-qPCR检测RUNX3的表达,分析RUNX3基因启动子CpG岛甲基化水平。合成DNA甲基转移酶3A的小干扰RNA(siRNA_3A)单独转染或与HBx共转染,检测RUNX3的表达。PCR检测21例手术切除的肝细胞癌新鲜组织标本HBx表达情况,比较HBx阴性与HBx阳性组织样本间RUNX3的表达差异以及启动子甲基化程度。结果过表达HBx可导致肝癌细胞内RUNX3表达下调,且甲基转移酶抑制剂5-aza-CdR可完全阻断HBx对RUNX3的抑制作用。HBx诱导RUNX3基因启动子CpG岛发生高甲基化,但不影响DNA甲基转移酶的表达。siRNA_3A转染肝癌细胞后,RUNX3 mRNA与蛋白表达均显著上调;其与HBx共转染后,逆转了单独HBx对RUNX3的抑制作用。HBx阳性的肝癌组织中RUNX3mRNA表达水平较HBx阴性组低,且RUNX3启动子甲基化程度也相对较高。结论 HBx通过促进RUNX3启动子区域发生高甲基化而抑制其表达,且这一过程是由DNMT3A所介导的。
关键词
乙型肝炎病毒X蛋白
肝细胞癌
RUNT相关转录因子3
DNA甲基转移酶3A
甲基化
Keywords
Hepatitis B virus X protein
hepatocellular carcinoma
runt-related transcription factor 3
DNA methyltransferase 3A
methylation
分类号
R373.21 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
FERMT2在肝癌组织中的表达及其对肝癌细胞生长的调控
被引量：
1
2
作者
林洁
陈小岩
李洁羽
王丽萍
陈惠玉
林万松
机构
福建省立医院病理科、福建医科大学省立临床医学院
福建省
肿瘤
医院
肿瘤免疫学研究室
、福建医科大学
附属肿瘤
医院
福建省
转化
医学
重点实验室
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第12期2157-2164,共8页
基金
福建省自然科学基金资助项目(No.2016J01510)
福建省卫生计生委青年科研课题(No.2017-1-2)
文摘
目的:观察fermitin家族同源蛋白2(FERMT2)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达,并以体外实验分析FERMT2基因敲除对肝癌细胞生长及相关调控分子表达的影响。方法:采用real-time PCR及免疫组化实验检测FERMT2在HCC及癌旁正常肝组织中的表达情况;采用CRISPR/Cas9技术构建FERMT2基因敲除的稳定MHCC97H细胞系,通过WST-1法和流式细胞术比较其与野生型MHCC97H细胞活力、细胞周期和凋亡状态的改变,并采用Western blot检测相关调控蛋白的表达变化。结果:FERMT2在HCC组织中的mRNA和蛋白表达水平均显著高于癌旁组织,且FERMT2蛋白的高表达与HCC患者术后复发有关(P<0.05);成功构建了FERMT2基因敲除的稳定MHCC97H细胞系;与野生型细胞相比,FERMT2基因敲除后细胞活力明显减弱,S期细胞数量明显减少,细胞凋亡增加,且细胞内增殖细胞核抗原、细胞周期蛋白及细胞周期蛋白依赖性激酶2的表达均显著降低(P<0.05);细胞凋亡抑制因子survivin及Bcl2的表达也明显下降(P<0.05),并可检测到cleaved caspase-3。结论:FERMT2在肝癌组织中呈高表达,它可能通过调控细胞周期调节蛋白及抗凋亡蛋白的表达影响肝癌细胞的活力、细胞周期及凋亡,进而在肝癌形成及发展过程中发挥促癌作用。
关键词
肝细胞癌
CRISPR/Cas9技术
Fermitin家族同源蛋白2
细胞增殖
细胞周期
细胞凋亡
Keywords
Hepatocellular carcinoma
CRISPR/Cas9 technique
Fermitin family homolog 2
Cell prolifera-tion
Cell cycle
Apoptosis
分类号
R0 [医药卫生]
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
乙型肝炎病毒X蛋白通过DNMT3A诱导肝癌细胞RUNX3基因高甲基化
林万松
林洁
林巧燕
周智锋
李洁羽
叶韵斌
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
FERMT2在肝癌组织中的表达及其对肝癌细胞生长的调控
林洁
陈小岩
李洁羽
王丽萍
陈惠玉
林万松
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017
1
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