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Hg2+和Pb2+对中国鲎N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的影响
1
作者 林建城 罗新明 林娟娟 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期236-243,共8页
节肢动物蜕皮与N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.52,NAGase)密切相关。为了探究Hg^2+和Pb^2+这2种重金属离子对节肢动物NAGase的影响,以中国鲎(Tachypleus tridentatus)为材料,从其内脏分离提取了NAGase。利用酶促反应动力学方法,研... 节肢动物蜕皮与N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.52,NAGase)密切相关。为了探究Hg^2+和Pb^2+这2种重金属离子对节肢动物NAGase的影响,以中国鲎(Tachypleus tridentatus)为材料,从其内脏分离提取了NAGase。利用酶促反应动力学方法,研究Hg^2+和Pb^2+对中国鲎NAGase的影响;通过对酶荧光发射光谱的测定,研究NAGase酶蛋白经Hg^2+和Pb^2+作用后的空间构象变化。结果表明,Hg^2+和Pb^2+对中国鲎NAGase均有较强的抑制作用,Hg^2+对NAGase的抑制作用强于Pb^2+,Hg^2+和Pb^2+对NAGase的抑制作用均表现为可逆过程,其中Hg^2+对NAGase的抑制属于竞争性抑制作用,抑制常数K I为22.68μmol·L^-1,Hg^2+只与游离酶结合,不与酶-底物络合物结合;而Pb^2+对NAGase的抑制是属于竞争性-非竞争性混合型抑制作用,抑制常数K I和K IS分别为19.13 mmol·L^-1和75.23 mmol·L^-1,Pb^2+与游离酶的亲和力相比与酶-底物络合物的亲和力更强。NAGase经Hg^2+和Pb^2+作用后荧光发射强度均降低,但荧光发射峰值并没有发生位移,说明Hg^2+和Pb^2+对中国鲎NAGase的抑制作用均为酶蛋白空间构象的变化所致。这证明了Hg^2+和Pb^2+对中国鲎NAGase活力具调控作用。 展开更多
关键词 HG^2+ PB^2+ 中国鲎 N-乙酰-Β-D-氨基葡萄糖苷酶 抑制作用 构象变化
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