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题名农杆菌介导的建兰品种市长红遗传转化体系的建立
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作者
周彬
曹桦
陆琳
张钰莹
李涵
李东徽
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机构
云南农业大学园林园艺学院
云南省农业科学院花卉研究所
福建省宁德市周宁县林业(花卉)产业发展中心
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出处
《云南农业大学学报(自然科学版)》
北大核心
2025年第4期111-119,共9页
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基金
云南省种子种业联合实验室项目(202205AR070001-05)。
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文摘
【目的】探究农杆菌介导的建兰遗传转化体系。【方法】以建兰品种市长红(Cymbidium ensifolium‘Shizhanghong’)单龙根扩繁得到的根状茎作为试验材料,筛选影响其遗传转化的农杆菌菌株、乙酰丁香酮浓度和抗生素质量浓度,研究影响农杆菌介导建兰遗传转化效率和再生效率的主要因素。【结果】市长红遗传转化的最佳菌株为EHA105,乙酰丁香酮最适浓度为200μmol/L,潮霉素最佳质量浓度为40 mg/L。为保证高转化率和高再生率,市长红的最佳侵染体系为:预培养10 d后,在OD600值为0.4~0.6的农杆菌侵染液中振荡20 min,最后在黑暗条件下共培养3 d。通过筛选的最佳遗传转化条件,经绿色荧光蛋白鉴定、抗生素筛选、PCR和qRT-PCR检测,最终在180个市长红的根状茎中得到17株转基因阳性植株,转化率为9.44%。【结论】本研究建立了农杆菌介导的建兰品种市长红遗传转化体系,为其转基因育种奠定了基础。
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关键词
建兰品种市长红
根状茎
农杆菌侵染
遗传转化
绿色荧光蛋白(GFP)
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Keywords
Cymbidium ensifolium‘Shizhanghong’
rhizome
Agrobacterium infection
genetic trans-formation
green fluorescent protein(GFP)
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分类号
S682.310.1
[农业科学—观赏园艺]
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