雷公藤内酯醇减少放射性肺纤维化中肌成纤维细胞活化与抑制TGF-β1/ERK/Smad3通路相关 被引量：24

1

作者 张彦伟 张志强 +2 位作者 吴丽贤 张鲁榕 陈纯 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期630-636,共7页

目的通过体内外实验,观察雷公藤内酯醇(TPL)减少放射性肺纤维化中肌成纤维细胞(MFBs)活化与TGF-β1/ERK/Smad3通路的相关性。方法以TGF-β1刺激成纤维细胞建立体外MFBs活化模型,C57BL/6小鼠胸部照射形成体内MFBs活化、放射性肺纤维化模... 目的通过体内外实验,观察雷公藤内酯醇(TPL)减少放射性肺纤维化中肌成纤维细胞(MFBs)活化与TGF-β1/ERK/Smad3通路的相关性。方法以TGF-β1刺激成纤维细胞建立体外MFBs活化模型,C57BL/6小鼠胸部照射形成体内MFBs活化、放射性肺纤维化模型。MFBs活化状态通过检测小鼠成纤维细胞中α-SMA(RT-PCR、Western blot方法)和ColⅠ(RT-PCR、ELISA方法)的表达,通路活性采用Western blot法检测p-ERK、p-Smad3(Ser208)、p-Smad3(Ser423)的水平。ERK siRNA及Smad3 siRNA观察ERK、Smad3在MFBs活化中的地位。结果 TGF-β1激活p-ERK/p-Smad3(Ser208)及p-Smad3(Ser423),诱导成纤维细胞表达α-SMA,活化为MFBs,合成Col I明显增多;使用ERK siRNA及Smad3 siRNA确定了ERK及Smad3均参与α-SMA、ColⅠ的表达,其中ERK可能通过磷酸化Smad3连接区(Ser208)起相关作用。小鼠胸部照射可致肺组织中p-ERK、p-Smad3(Ser208)、p-Smad3(Ser423)的水平上调,α-SMA表达增加,显示多量MFBs活化。TPL对体内和体外实验中ERK、Smad3(Ser208)、Smad3(Ser423)的磷酸化活化均有明显抑制作用,可明显下调α-SMA表达及ColⅠ合成,减少MFBs的活化。结论 TPL可通过抑制TGF-β1/ERK/Smad3通路,减少肺部照射后MFBs活化,从而抑制放射性肺纤维化进展。 展开更多

关键词 雷公藤内酯醇 放射性肺纤维化 肌成纤维细胞 Α-平滑肌肌动蛋白 Ⅰ型胶原蛋白 转化生长因子β1 ERK SMAD3

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瓦他拉尼对乳腺癌耐药蛋白介导的肿瘤多药耐药的逆转研究 被引量：6

2

作者 张志强 魏寅祥 +5 位作者 赵青 任志广 彭晖 李鹏 夏笠 许建华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期774-782,共9页

目的观察新型激酶抑制剂类抗癌药瓦他拉尼(vatalanib)逆转肿瘤细胞多药耐药(MDR)的效果,研究其对乳腺癌耐药蛋白(BCRP)、P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)的作用,探讨其作用机制。方法应用MTS法或SRB法检测瓦他拉尼对耐药细胞... 目的观察新型激酶抑制剂类抗癌药瓦他拉尼(vatalanib)逆转肿瘤细胞多药耐药(MDR)的效果,研究其对乳腺癌耐药蛋白(BCRP)、P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)的作用,探讨其作用机制。方法应用MTS法或SRB法检测瓦他拉尼对耐药细胞与敏感细胞的细胞毒性和逆转MDR的效果;分别以罗丹明(Rh-123)、米托蒽醌(MX)、阿霉素(ADR)为P-gp、BCRP、MRP1的荧光底物,应用流式细胞术检测该药对P-gp、BCRP、MRP1外排功能的影响;应用Western blot检测该药对耐药细胞中BCRP蛋白表达水平的影响,并研究其对细胞增殖相关信号分子的影响;应用qRT-PCR检测其对耐药细胞中BCRP基因表达水平的影响;通过超速离心法制备BCRP转运蛋白的粗膜,检测瓦他拉尼对BCRP的ATPase活性的影响。结果无毒剂量的瓦他拉尼(5μmol·L-1)可有效逆转BCRP高表达的肿瘤细胞株HEK293/ABCG2对MX、ADR和托泊替康(TOPT)的耐药,而对P-gp高表达的肿瘤细胞株K562/A02和MRP1高表达的肿瘤细胞株HEK293/ABCC1的耐药无逆转作用。该药能够下调耐药肿瘤细胞的BCRP基因和蛋白的表达水平,并具有时间和剂量依赖效应,但对BCRP外排MX的功能无明显抑制作用。该药可以激活BCRP的ATPase活性,但并不改变BCRP的构象,对耐药和敏感细胞中AKT和ERK的表达及其磷酸化水平也均无明显影响。结论瓦他拉尼可有效、特异地逆转BCRP介导的肿瘤MDR,其机制可能是通过下调耐药肿瘤细胞中BCRP基因和蛋白的表达来达到逆转MDR的效果。 展开更多

关键词 激酶抑制剂 瓦他拉尼 多药耐药 ABC转运蛋白 乳腺癌耐药蛋白 逆转剂

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姜黄素衍生物C085对K562细胞的作用及机制研究 被引量：6

3

作者 吴莺 陈瑞家 +1 位作者 吴丽贤 许建华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期870-875,共6页

目的研究姜黄素衍生物C085对K562细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法采用MTT法观察C085对细胞增殖的影响;Annexin V-FITC/PI双荧光染色后流式细胞仪检测C085对细胞凋亡的影响;蛋白免疫印迹探讨C085引发K562细胞凋亡的机制,检... 目的研究姜黄素衍生物C085对K562细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法采用MTT法观察C085对细胞增殖的影响;Annexin V-FITC/PI双荧光染色后流式细胞仪检测C085对细胞凋亡的影响;蛋白免疫印迹探讨C085引发K562细胞凋亡的机制,检测其对BCR-ABL及其下游信号转导通路蛋白的磷酸化及对其他凋亡相关蛋白表达的影响;JC-1荧光染色法检测C085对细胞线粒体膜电位的影响。结果 C085在低浓度下抑制K562细胞,IC50只有其母体姜黄素的1/5甚至更低;在24h即对K62细胞有较强的诱导凋亡作用,主要是中、晚期凋亡。与阳性对照药IM相比,诱导凋亡作用明显。对其作用机制研究发现,C085可下调BCR-ABL的自磷酸化和下游信号转导通路蛋白Stat 5和Crkl的磷酸化水平,作用均强于IM。JC-1荧光染色法结果表明,C085通过直接作用于线粒体的PT孔使其开放,下调Bcl-2、上调Bax,诱导细胞凋亡,促凋亡作用强于IM。结论C085可抑制BCR-ABL+K562细胞的生长,与其抑制BCR-ABL蛋白激酶活性,下调相关信号通路;直接作用于线粒体的PT孔使其开放,激活凋亡相关蛋白,诱导细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 C085 姜黄素 IM BCR-ABL 增殖 凋亡 机制

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姜黄素衍生物C1209抑制慢性粒细胞白血病细胞增殖与阻断Hsp90伴侣功能的关系 被引量：5

4

作者 范莹娟 周义湘 +1 位作者 张连茹 许建华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期393-400,共8页

目的研究姜黄素衍生物C1209抑制慢性粒细胞白血病细胞增殖与阻断Hsp90伴侣功能的关系。方法采用荧光光谱法,研究不同浓度C1209与Hsp90、其N端片段(NHsp90)、M端片段(MHsp90)、C端片段(CHsp90)的相互作用,以及不同温度(293 K、303 K、310... 目的研究姜黄素衍生物C1209抑制慢性粒细胞白血病细胞增殖与阻断Hsp90伴侣功能的关系。方法采用荧光光谱法,研究不同浓度C1209与Hsp90、其N端片段(NHsp90)、M端片段(MHsp90)、C端片段(CHsp90)的相互作用,以及不同温度(293 K、303 K、310 K)下,C1209与Hsp90的相互作用;实验选取280 nm为激发波长,290~510 nm的波长范围内进行荧光光谱扫描。采用孔雀绿磷钼酸铵-无机磷检测法,研究C1209对Hsp90-ATPase活性的抑制。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)染色法体外检测C1209对白血病细胞K562及耐伊马替尼(IM)的白血病细胞K562/G01细胞的增殖抑制作用;应用蛋白免疫印迹法检测Hsp90客户蛋白及其下游蛋白、Hsp90分子伴侣的表达。结果C1209解离常数为(14.733±0.713)μmol·L^(-1);C1209与Hsp90之间的主要作用力为静电作用力;C1209与Hsp90的C端片段结合能力最强。当ATP为1 mmol·L^(-1)时,C1209作用于Hsp90的IC50值为11.4μmol·L^(-1)。C1209呈剂量依赖性地抑制K562和K562/G01细胞的增殖,作用24 h的IC50为1.14μmol·L^(-1)和0.56μmol·L^(-1);C1209影响Hsp90的分子伴侣功能,且下调K562和K562/G01细胞中Bcr-Abl、Akt、MEK、ERK、c-Raf及其相应磷酸化蛋白p-Akt、p-MEK、p-ERK等Hsp90客户蛋白及其下游蛋白的表达。结论姜黄素衍生物C1209是Hsp90抑制剂,对K562和耐IM的白血病细胞K562/G01具有明显的增殖抑制作用,可能与其抑制Hsp90的分子伴侣功能、下调Hsp90客户蛋白有关。 展开更多

关键词 C1209 HSP90 ATPASE活性 荧光光谱法 相互作用 抑制作用

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姜黄素衍生物C085与Hsp90及其不同片段相互作用以及对Hsp90 ATPase活性的影响 被引量：3

5

作者 范莹娟 张连茹 +1 位作者 刘洋 许建华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1408-1413,共6页

目的：研究姜黄素衍生物C085与Hsp90的结合作用,及其对Hsp90-ATPase 活性抑制作用。方法采用荧光光谱法,研究不同浓度C085与Hsp90、NHsp90、MHsp90、CHsp90的相互作用以及293K、303K和310K下,C085与Hsp90的相互作用；实验选取280nm为激... 目的：研究姜黄素衍生物C085与Hsp90的结合作用,及其对Hsp90-ATPase 活性抑制作用。方法采用荧光光谱法,研究不同浓度C085与Hsp90、NHsp90、MHsp90、CHsp90的相互作用以及293K、303K和310K下,C085与Hsp90的相互作用；实验选取280nm为激发波长,290-510 nm的波长范围内进行荧光光谱扫描。采用孔雀绿磷钼酸铵-无机磷检测法,研究 C085对 Hsp90-ATPase 活性的抑制。结果C085解离常数为（11．163±0．316）μmol · L-1；C085与Hsp90之间的主要作用力为静电作用力；C085与Hsp90的C端片段结合能力最强。当ATP为1 mmol · L-1时, C085作用于Hsp90的IC50值为6．04μmol · L-1。结论经过荧光光谱分析,可以确定C085与Hsp90的结合机制,且C085能抑制Hsp90-ATPase活性。 展开更多

关键词 C085 HSP90 ATPASE活性 荧光光谱法 相互作用 抑制作用

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姜黄素衍生物C085抑制K562/G01细胞及Bcr-Abl激酶的体外研究 被引量：3

6

作者 吴莺 吴丽贤 许建华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1004-1011,共8页

目的研究姜黄素衍生物C085对K562/G01细胞及野生型和伊马替尼耐药型Bcr-Abl激酶的作用,以期能找到一种对IM耐药点突变激酶有效的酪氨酸激酶抑制剂。方法分别采用MTT法及流式细胞仪检测及观察C085对细胞增殖及凋亡的影响;应用Kinase-Glo... 目的研究姜黄素衍生物C085对K562/G01细胞及野生型和伊马替尼耐药型Bcr-Abl激酶的作用,以期能找到一种对IM耐药点突变激酶有效的酪氨酸激酶抑制剂。方法分别采用MTT法及流式细胞仪检测及观察C085对细胞增殖及凋亡的影响;应用Kinase-Glo~激酶发光检测试剂盒检测C085对4种Abl激酶(WT、T135I、Y253F、Q252H)活性的影响;蛋白免疫印迹检测C085对Bcr-Abl和下游信号转导通路蛋白的磷酸化水平及其他凋亡相关蛋白表达的影响;JC-1荧光染色法检测C085对细胞线粒体膜电位的影响;集落形成法观察C085对CML病人骨髓CD34+细胞增殖的影响。结果 C085低浓度下即可抑制K562/G01的增殖,且可非ATP竞争性地抑制野生型及IM耐药点突变Abl激酶的活性;C085可抑制Bcr-Abl的自磷酸化,下调下游信号转通路蛋白的磷酸化水平和凋亡相关蛋白的表达,作用强于IM,具有明显的量效关系;C085通过直接作用于线粒体的PT孔使其开放,激活凋亡相关蛋白,诱导细胞凋亡,促凋亡作用强于IM;镜下观察及集落数量统计发现,C085可对已经产生IM耐药的CD34^+祖/干细胞集落有明显的抑制作用。结论C085可抑制K562/G01细胞的生长可能与其抑制Bcr-Abl蛋白激酶活性,下调相关信号通路;直接作用于线粒体的PT孔使其开放,激活凋亡相关蛋白,诱导细胞凋亡有关。C085对IM敏感及耐药的白血病细胞均有杀伤作用,有望克服IM的耐药而成为新的TKI。 展开更多

关键词 姜黄素衍生物 C085 CML 伊马替尼耐药 BCR-ABL 突变

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姜黄素与Hsp90相互作用以及对Hsp90ATPase活性的影响 被引量：4

7

作者 范莹娟 许建华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1426-1431,共6页

目的研究姜黄素（curcumin）与Hsp90的结合作用，及其对Hsp90-ATPase活性抑制作用。方法采用荧光光谱实验，选取280nm为激发波长，290—510nm的波长范围内进行荧光光谱扫描，研究不同浓度curcumin与Hsp90的相互作用。采用孔雀绿磷钼酸... 目的研究姜黄素（curcumin）与Hsp90的结合作用，及其对Hsp90-ATPase活性抑制作用。方法采用荧光光谱实验，选取280nm为激发波长，290—510nm的波长范围内进行荧光光谱扫描，研究不同浓度curcumin与Hsp90的相互作用。采用孔雀绿磷钼酸铵一无机磷检测法，研究curcumin对Hsp90-ATPase活性抑制。结果curcumin解离常数为（21．608±1．752）μmol·L^-1L，格尔德霉素（GA）为（17．372±1．200）μmol·L^-1。当ATP为1mmol·L^-1时，GA作用于Hsp90的IC50值为0．38μmol·L^-1，curcumin的IC50值为3．75μmol·L^-1也有较强的Hsp90-ATPase抑制活性。结论经过荧光光谱分析，可以确定curcumin与Hsp90的结合机制，且curcumin能抑制Hsp90-ATPase活性。 展开更多

关键词 姜黄素 HSP90 ATPASE活性 格尔德霉素 荧光光谱 法 相互作用

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新型化合物XN4抑制急性粒细胞白血病细胞增殖与其诱导氧化性的DNA损伤的关系 被引量：2

8

作者 吴丽贤 黄立森 +3 位作者 陈显凌 柯方 郑鸣 许建华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期478-483,共6页

目的研究XN4在体外抑制急性粒细胞白血病细胞(AML)增殖的作用与诱导DNA损伤的关系。方法 MTT法检测XN4对AML细胞增殖抑制作用;流式细胞术检测AML细胞反应性氧自由基(ROS)、DNA损伤、细胞周期和细胞凋亡;Western blot探讨XN4对相关蛋白... 目的研究XN4在体外抑制急性粒细胞白血病细胞(AML)增殖的作用与诱导DNA损伤的关系。方法 MTT法检测XN4对AML细胞增殖抑制作用;流式细胞术检测AML细胞反应性氧自由基(ROS)、DNA损伤、细胞周期和细胞凋亡;Western blot探讨XN4对相关蛋白表达的影响。结果 XN4明显抑制AML细胞增殖,半数抑制率(IC50)分别为(2.79±0.15)μmol·L-1和(2.76±0.20)μmol·L-1;XN4增加细胞ROS水平和r-H2AX的表达,诱导细胞阻滞在S期并增加细胞凋亡率;XN4能增加H2AX、ATM的磷酸化以及Parp和Caspase-3的切割,而减少CDK2和Cyclin E1的表达。结论 XN4通过激活ROS,诱导DNA的损伤和细胞周期S期阻滞,抑制DNA损伤修复和诱导细胞的凋亡,抑制HL-60及KG1α细胞的增殖,抗氧化剂NAC(N-乙酰半胱氨酸)能减少ROS的产生逆转XN4的作用。 展开更多

关键词 急性粒细胞白血病 DNA损伤 细胞周期阻滞 细胞凋亡

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以Hsp90为靶点的4-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)姜黄素抗肿瘤活性研究 被引量：1

9

作者 刘洋 李娜 +1 位作者 吴丽贤 许建华 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1729-1732,共4页

合成4-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)姜黄素(C085),研究其体外抗肿瘤活性和抑制Hsp90作用。以香草醛和姜黄素为原料,微波条件下Knovenagel缩合反应合成了4-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)姜黄素(C085)。以姜黄素为对照,MTT法考察目标化合物对... 合成4-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)姜黄素(C085),研究其体外抗肿瘤活性和抑制Hsp90作用。以香草醛和姜黄素为原料,微波条件下Knovenagel缩合反应合成了4-(4-羟基-3-甲氧基苯亚甲基)姜黄素(C085)。以姜黄素为对照,MTT法考察目标化合物对人乳腺癌细胞SKBr3、人慢性粒细胞白血病急变细胞株K562、人急性髓系白血病细胞株HL-60、人肝肿瘤细胞株Hep G2、小鼠黑色素瘤细胞株B-16、人结肠癌细胞株SW480、人胰腺癌细胞株Bxpc-3、人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y、人胃癌细胞株MGC80-3的抑制活性。对上述细胞株的IC50值依次为0.51、1.26、2.90、0.81、1.77、1.31、8.22、1.93、7.41μmol/L,对多种肿瘤细胞抑制活性明显强于Cur。Western Blot结果表明C085明显下调Hsp90的客户蛋白Her2和AKT的表达水平。分子对接分析也支持C085是Hsp90抑制剂。 展开更多

关键词 热休克蛋白90 姜黄素 4-芳亚甲基姜黄素 抗肿瘤活性 分子对接

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双(3-吗啉丙氧基)姜黄素抗肿瘤活性研究

10

作者 刘洋 陈纯 +1 位作者 张志强 许建华 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期695-698,共4页

合成双(3-吗啉丙氧基)姜黄素(PR1),研究PR1体内外抗肿瘤活性。姜黄素与N-(3-氯丙基)吗啉反应制备PR1,MTT法评价PR1体外对人肾癌细胞OS-RC-2、786-O和人慢性粒细胞白血病耐药细胞KA的抑制增殖活性,考察PR1体内抑制人结肠癌HT29裸鼠移植... 合成双(3-吗啉丙氧基)姜黄素(PR1),研究PR1体内外抗肿瘤活性。姜黄素与N-(3-氯丙基)吗啉反应制备PR1,MTT法评价PR1体外对人肾癌细胞OS-RC-2、786-O和人慢性粒细胞白血病耐药细胞KA的抑制增殖活性,考察PR1体内抑制人结肠癌HT29裸鼠移植性肿瘤活性。PR1体外对肾癌细胞OS-RC-2和786-O抑制活性比姜黄素强,而对白血病耐药细胞KA抑制活性比姜黄素差。PR1体内对BALB/C-nu小鼠HT29皮下移植瘤的抑制作用明显,100 mg/kg·d灌胃的抑制率为55.7%,差别具有显著性(P<0.01),对裸鼠的体重无明显影响。PR1在体内外均有较强抗肿瘤活性。 展开更多

关键词 姜黄素 姜黄素衍生物 双(3-吗啉丙氧基)姜黄素 抗肿瘤活性

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Survivin 反义核酸联合紫杉醇对皮下荷瘤Balb/c 小鼠模型的治疗作用

11

作者 吴丽贤 黄立森 +2 位作者 陈瑞家 田崛 柯方 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期467-471,共5页

目的研究survivin反义核酸与紫杉醇联合应用对皮下荷瘤Bal b/c小鼠模型的治疗作用,并初步探讨对其抗癌作用的机制。方法在Bal b/c小鼠皮下注射C26细胞,建立皮下瘤模型,采用瘤内注射的方式,将实验分空白组(C)、lipo2000对照组(L)、紫杉醇... 目的研究survivin反义核酸与紫杉醇联合应用对皮下荷瘤Bal b/c小鼠模型的治疗作用,并初步探讨对其抗癌作用的机制。方法在Bal b/c小鼠皮下注射C26细胞,建立皮下瘤模型,采用瘤内注射的方式,将实验分空白组(C)、lipo2000对照组(L)、紫杉醇组(T)、survivin反义核酸组(A)、survivin反义核酸联合紫杉醇组(A+T)5个不同组,观察肿瘤的生长状态,TUNEL法检测凋亡细胞,Western blot法检测survivin蛋白表达。结果 1各治疗组均达到了(T/C)<60%,与L组比较差异有统计学意义(P<0.05),体内证实给药干预有效;小鼠瘤重的抑瘤率结果显示,与C组比较,T、A、A+T各给药组均能抑制小鼠瘤重,差异具有统计学意义(P<0.05),从抑制肿瘤质量增长方面而言,二者联合用药[瘤重抑瘤率为(54.16±0.32)%]将紫杉醇[瘤重抑瘤率为(21.82±0.84)%]的抗癌活性提高了59%以上;2TUNEL法检测凋亡细胞:空白对照组几乎没有肿瘤细胞凋亡。T组及A组有一定量的凋亡细胞,以上试验结果提示,紫杉醇具有促进肿瘤细胞凋亡的能力,A+T不仅加强了对肿瘤细胞的杀伤作用,而且二者的协同作用可能对肿瘤耐药性有所影响,最终使得其促肿瘤细胞凋亡的作用尤为显著;3survivin蛋白表达:结果显示,A+T组survivin蛋白的表达明显降低,而不影响β-actin的表达,C组和L组相比无明显变化,T组、A组、A+T组A值的比值分别为0.895±0.011、0.704±0.121、0.345±0.019,经方差分析,A+T组与C、L、A、T组的表达量差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 survivin反义核酸与紫杉醇联合用药,可能通过下调survivin蛋白的表达从而促进肿瘤细胞凋亡,联合用药可降低机体耐药性,发挥协同作用。 展开更多

关键词 皮下荷瘤 SURVIVIN 反义核酸 紫杉醇 联合用药 细胞凋亡

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代谢组学在类风湿关节炎中应用的研究进展 被引量：16

12

作者 卢靖珊 杨渐 +1 位作者 许盈 俞昌喜 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1193-1196,共4页

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种自身免疫性炎症性疾病,影响着全身多个器官和组织。随着研究新技术、新方法的出现,RA的代谢组学研究也取得了一定的进展。该文就代谢组学在RA早期生物标志物筛选、疾病发病机制等方面的应... 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种自身免疫性炎症性疾病,影响着全身多个器官和组织。随着研究新技术、新方法的出现,RA的代谢组学研究也取得了一定的进展。该文就代谢组学在RA早期生物标志物筛选、疾病发病机制等方面的应用进行综述,以期为RA的预防和诊治提供参考。 展开更多

关键词 代谢组学 类风湿关节炎 早期生物标志物 发病机制 诊断 治疗

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BMS-345541对急性粒细胞白血病细胞DNA损伤修复的影响 被引量：6

13

作者 田崛 陈显凌 +3 位作者 庄英婷 范莹娟 许建华 吴丽贤 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期763-769,共7页

目的体外研究BMS-345541对急性粒细胞白血病(AML)细胞DNA损伤修复的影响及其可能的作用机制。方法MTT法检测VP-16作用于AML细胞,加入或不加入BMS-345541对该细胞增殖抑制的影响;流式细胞术检测BMS-345541对AML细胞DNA损伤修复、细胞周... 目的体外研究BMS-345541对急性粒细胞白血病(AML)细胞DNA损伤修复的影响及其可能的作用机制。方法MTT法检测VP-16作用于AML细胞,加入或不加入BMS-345541对该细胞增殖抑制的影响;流式细胞术检测BMS-345541对AML细胞DNA损伤修复、细胞周期阻滞和细胞凋亡的影响;高内涵观察不同处理组γ-H2AX、p-ATM、RAD51募集在断裂位点的焦点情况。结果联合用药组比单用VP-16组对细胞的增殖抑制作用强;流式检测加入BMS-345541组比不加入组的γ-H2AX比例高,且加入BMS-345541组能够抑制VP-16导致的AML细胞G2/M期阻滞,增加细胞的凋亡率;高内涵检测断裂位点的p-ATM及RAD51的荧光焦点,6 h后,加入BMS-345541组比修复组的焦点的平均荧光强度和平均荧光面积高。结论 VP-16导致AML细胞产生DNA损伤,加入BMS-345541,能通过抑制HR通路来抑制细胞DNA损伤修复。 展开更多

关键词 IKKΒ BMS-345541 DNA损伤 Γ-H2AX p-ATM RAD51

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新生霉素通过诱导DNA损伤抑制慢粒白血病细胞增殖 被引量：3

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作者 黄立森 陈显凌 +4 位作者 柯方 许建文 郑鸣 许建华 吴丽贤 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期69-76,共8页

目的研究新生霉素(novobiocin,Nov)在体外抑制慢粒白血病(CML)细胞增殖作用与诱导DNA损伤的关系。方法MTT及羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)染色法检测Nov对CML细胞增殖的影响;流式细胞术检测CML细胞反应性氧自由基(ROS)含量、DN... 目的研究新生霉素(novobiocin,Nov)在体外抑制慢粒白血病(CML)细胞增殖作用与诱导DNA损伤的关系。方法MTT及羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)染色法检测Nov对CML细胞增殖的影响;流式细胞术检测CML细胞反应性氧自由基(ROS)含量、DNA损伤数量、细胞周期阻滞情况和细胞凋亡的比例;Western blot探讨Nov对DNA损伤、细胞周期和细胞凋亡调控通路相关蛋白表达的影响。结果 Nov明显抑制CML细胞增殖,半数抑制率(IC50)分别为(232.50±0.22)μmol·L-1和(237.10±0.13)μmol·L-1,减少CML细胞的增殖分裂代数;Nov增加细胞ROS水平,诱导细胞阻滞在G2/M期并增加凋亡率,呈剂量依赖关系;Nov增加H2AX、ATM、P53的磷酸化水平以及Parp和Caspase-3的切割,而减少CDC25A和CDC25C的表达。结论Nov通过激活ROS产生,诱导CML细胞DNA的损伤和线粒体途径激活的细胞凋亡。 展开更多

关键词 新生霉素 ROS DNA损伤 r-H2AX 细胞周期检测点 细胞周期阻滞 凋亡

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中脑导水管周围灰质腹外侧部星形胶质细胞对糖尿病神经病理性疼痛及痛相关负性情绪的调控作用 被引量：3

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作者 杨澜 陈理 俞昌喜 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2021年第9期695-695,共1页

目的探索中脑导水管周围灰质腹外侧部(vlPAG)星形胶质细胞活化在糖尿病神经病理性疼痛(DNP)及痛相关负性情绪发生、发展及维持过程中的具体作用及特征。方法使用链脲佐菌素(STZ)诱导SD大鼠Ⅰ型糖尿病,复制DNP模型;免疫荧光法观察、Shol... 目的探索中脑导水管周围灰质腹外侧部(vlPAG)星形胶质细胞活化在糖尿病神经病理性疼痛(DNP)及痛相关负性情绪发生、发展及维持过程中的具体作用及特征。方法使用链脲佐菌素(STZ)诱导SD大鼠Ⅰ型糖尿病,复制DNP模型;免疫荧光法观察、Sholl分析评价vlPAG星形胶质细胞在DNP进展过程中的形态和数量变化;采用化学遗传学技术定点定量向vlPAG注射携有星形胶质细胞特异性启动子gfaABC1D及修饰后的人毒蕈碱受体(hM3Dq或hM4Di)基因片段的腺相关病毒;待病毒稳定转染表达后,利用受体的外源性配体氯氮平-N-氧化物(CNO)靶向调控vlPAG星形胶质细胞活性;以机械性异常性疼痛阈值为观察指标,评价星形胶质细胞活化在DNP中的作用;同时,采用旷场试验、高架十字迷宫试验、条件性位置偏爱试验,评价vlPAG星形胶质细胞活化在DNP相关焦虑样、厌恶样情绪中的作用。结果STZ成功诱导高血糖症状后,SD大鼠机械痛阈进行性下降,提示DNP模型复制成功。随着DNP症状加剧,vlPAG星形胶质细胞数量逐渐增多、胞体面积逐渐增大、形态复杂性逐渐增强。化学遗传学手段激活正常大鼠vlPAG星形胶质细胞可诱导神经病理性疼痛样症状(机械痛阈下降);化学遗传学手段抑制DNP模型大鼠vlPAG星形胶质细胞可改善DNP症状(机械痛阈升高)。同时,化学遗传学手段抑制vlPAG星形胶质细胞可减少DNP模型大鼠痛相关焦虑样行为,改善模型动物痛相关厌恶情绪。结论vlPAG星形胶质细胞活化与DNP的发生、发展及维持密切相关,vlPAG星形胶质细胞可能参与了DNP及痛相关负性情绪的编码和调控。 展开更多

关键词 糖尿病神经病理性疼痛 中脑导水管灰质腹外侧部 星形胶质细胞 化学遗传学 痛相关负性情绪

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FW-04-806对HER2阳性胃癌细胞的抗肿瘤活性及其机制研究

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作者 张敏 曹品容 +6 位作者 吴群丹 孔应利 陈丽红 罗燕梅 黄维 许建华 叶敏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1513-1520,共8页

目的研究大环双内酯类化合物FW-04-806对HER2阳性胃癌细胞的抗肿瘤活性及其机制,探讨其与拉帕替尼的联合作用。方法 MTT法检测FW-04-806对HER2阳性胃癌细胞增殖抑制作用;结晶紫染色法检测集落形成抑制能力;流式细胞术检测细胞蛋白表达... 目的研究大环双内酯类化合物FW-04-806对HER2阳性胃癌细胞的抗肿瘤活性及其机制,探讨其与拉帕替尼的联合作用。方法 MTT法检测FW-04-806对HER2阳性胃癌细胞增殖抑制作用;结晶紫染色法检测集落形成抑制能力;流式细胞术检测细胞蛋白表达、凋亡诱导和周期阻滞;免疫共沉淀法检测蛋白间相互作用;免疫组化法观察蛋白的表达变化;免疫印迹法检测细胞增殖和凋亡通路相关蛋白的表达;体内异种移植瘤模型检测抑瘤效果。结果 FW-04-806明显抑制HER2阳性胃癌细胞NCI-N87、OE19的增殖和集落形成能力,半数抑制率(IC50)分别为(24.17±0.02)、(29.61±0.03)μmol·L-1;剂量依赖性诱导阻滞细胞于G2-M期,并增加凋亡比例;200 mg·kg-1实验组对OE19瘤块的抑瘤率为48.0%(P<0.01);诱使Hsp90/CDC37复合物解离;降解HER2、Akt蛋白;抑制HER2、Akt和ERK的磷酸化,增加cleaved caspase-3、cleaved parp的表达;FW-04-806与拉帕替尼体外联用对NCI-N87胃癌细胞具有协同作用,能抑制增殖,提高凋亡比例。结论 FW-04-806对HER2阳性胃癌细胞具有良好的体内、外抗肿瘤活性;与拉帕替尼联合具有协同作用。 展开更多

关键词 FW-04-806 HER2 阳性胃癌 细胞周期 凋亡 增殖抑制 协同作用

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