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利用TAC系统构建多个光合同化物运输蛋白基因转化载体和水稻的遗传转化 被引量:1
1
作者 苏军 林美坤 +2 位作者 杜琳 洪海强 王锋 《福建农业学报》 CAS 2010年第1期1-7,共7页
采用人工染色体(TAC)多基因组装载体系统,将一组与水稻光合同化物运输转化有关基因构建在同一载体上,这些基因分别是蔗糖转运蛋白基因(OsSUT5),单糖转运蛋白(OsMST4)、细胞壁转化酶(OsCIN3)和ATP/ADP转运蛋白(OAAT),获得了包含这4个基... 采用人工染色体(TAC)多基因组装载体系统,将一组与水稻光合同化物运输转化有关基因构建在同一载体上,这些基因分别是蔗糖转运蛋白基因(OsSUT5),单糖转运蛋白(OsMST4)、细胞壁转化酶(OsCIN3)和ATP/ADP转运蛋白(OAAT),获得了包含这4个基因的植物表达载体pTAC747H-OAAT-SUT5-CIN3-MST4,质粒大小近30 kb。通过农杆菌转化法,将基因导入水稻,以探讨这些基因对水稻光合同化物运输和转化的调控作用。 展开更多
关键词 水稻 多基因表达载体 遗传转化
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亚洲栽培稻起源分化的遗传学研究(综述) 被引量:9
2
作者 陈文炳 《上海农业学报》 CSCD 1999年第3期42-48,共7页
从遗传学角度回顾了亚洲栽培稻( Oryza sativa L.)起源进化研究简史,并结合作者的研究结果,阐述了国内外研究者在不同时期,以不同方法对亚洲栽培稻起源进化、系统分化和分类等研究所取得的成果,并对其进行比较、评... 从遗传学角度回顾了亚洲栽培稻( Oryza sativa L.)起源进化研究简史,并结合作者的研究结果,阐述了国内外研究者在不同时期,以不同方法对亚洲栽培稻起源进化、系统分化和分类等研究所取得的成果,并对其进行比较、评述。主要内容包括两种分类法和两个起源假说。本文还探讨了目前水稻起源进化研究方法上存在的问题和解决的办法。 展开更多
关键词 栽培稻 分类 起源 分化 遗传学 亚洲栽培稻
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亚洲栽培稻(Oryza sativa)起源分化的遗传学研究综述
3
作者 陈文炳 《福建农业科技》 1998年第S1期3-6,共4页
本文从遗传学角度回顾了亚洲栽培稻(Oryzasativa)起源进化研究简史,并结合本文作者几年来的研究结果,阐述了国内外研究者在不同时期,以不同方法,对亚洲栽培稻起源进化、系统分化和分类等研究所取得的成果并对其进行比... 本文从遗传学角度回顾了亚洲栽培稻(Oryzasativa)起源进化研究简史,并结合本文作者几年来的研究结果,阐述了国内外研究者在不同时期,以不同方法,对亚洲栽培稻起源进化、系统分化和分类等研究所取得的成果并对其进行比较、评述。主要内容包括两种分类法和两个起源假说。本文还探讨了目前水稻起源进化研究方法上存在的问题和解决的办法。 展开更多
关键词 栽培稻 起源 分化 分类
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农杆菌介导籼稻明恢86高效稳定转化体系的建立 被引量:38
4
作者 苏军 胡昌泉 +3 位作者 翟红利 颜静宛 陈在杰 王锋 《福建农业学报》 CAS 2003年第4期209-213,共5页
以籼稻恢复系明恢86为材料,探讨受体材料、愈伤代龄、预培养时间、筛选时间等因素对转化效率的影响,并建立了高效稳定的农杆菌介导籼稻转化体系。转化技术参数如下,水稻花后15 d幼胚诱导的胚性愈伤(2~6代),作为转化受体材料,经4 d预培... 以籼稻恢复系明恢86为材料,探讨受体材料、愈伤代龄、预培养时间、筛选时间等因素对转化效率的影响,并建立了高效稳定的农杆菌介导籼稻转化体系。转化技术参数如下,水稻花后15 d幼胚诱导的胚性愈伤(2~6代),作为转化受体材料,经4 d预培养,农杆菌侵染30 min,共培养3 d后,在30 mg·L-1潮霉素筛选出抗性愈伤,抗性愈伤经50 mg·L-1潮霉素筛选10~15 d后立即分化,幼胚的胚性愈伤转化频率可达6.98%,并且能够周年转化。 展开更多
关键词 农杆菌介导 籼稻 恢复系 明恢86 转化体系 转化效率 受体材料 愈伤代龄 预培养时间 筛选时间
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农杆菌介导法获得转可溶性淀粉合成酶基因籼稻 被引量:19
5
作者 胡昌泉 徐军望 +3 位作者 苏军 陈在杰 朱祯 王锋 《福建农业学报》 CAS 2003年第2期65-68,共4页
采用农杆菌介导法将胚乳特异性表达谷蛋白1(Glutelin1,Gtl)基因控制下的可溶性淀粉合成酶基因sss导入籼稻恢复系明恢86,共获得53个独立转化再生植株。PCR检测表明,sss基因已整合进水稻的基因组中。直链淀粉含量测定结果表明,转基因植株... 采用农杆菌介导法将胚乳特异性表达谷蛋白1(Glutelin1,Gtl)基因控制下的可溶性淀粉合成酶基因sss导入籼稻恢复系明恢86,共获得53个独立转化再生植株。PCR检测表明,sss基因已整合进水稻的基因组中。直链淀粉含量测定结果表明,转基因植株后代直链淀粉含量较对照有较大幅度的下降。 展开更多
关键词 籼稻 可溶性淀粉合成酶基因 转基因 农杆菌介导法 直链淀粉含量
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3种ELISA法定量检测转cry1Ac基因水稻Cry1Ac蛋白的比较研究 被引量:9
6
作者 秦崇涛 陈在杰 +1 位作者 苏军 王锋 《福建农业学报》 CAS 2003年第4期258-263,共6页
用从细菌中分离的纯品CryIAe蛋白作为抗原成功制备出了效价较高的CryIAe蛋白的兔多抗,对制备的抗体的免疫学分析表明,其与CryIAc有极显著的免疫交叉反应.并在对转cryIAc基因水稻的检测中具有良好的特异性。用戊二醛一步法对纯化的IgG进... 用从细菌中分离的纯品CryIAe蛋白作为抗原成功制备出了效价较高的CryIAe蛋白的兔多抗,对制备的抗体的免疫学分析表明,其与CryIAc有极显著的免疫交叉反应.并在对转cryIAc基因水稻的检测中具有良好的特异性。用戊二醛一步法对纯化的IgG进行了碱性磷酸酶标记。应用制备的抗体进行了直接法、间接法和双抗夹心法等ELISA方法检测转cryIAc基因水稻中Bt的含量,结果表明直接法和间接法ELISA只能定性而不能定量测定转cryIAc基因水稻,而双抗夹心法是一种比较理想的定量检测水稻中Bt含量的方法。同时确定了双抗夹心法的各项具体条件。 展开更多
关键词 转基因 水稻 细菌 CryIAe蛋白 抗原 抗体 免疫交叉反应 cryIAc基因 BT蛋白 直接法 间接法 双抗夹心法 ELISA
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糙米直链淀粉含量透射式近红外定标方程的建立 被引量:7
7
作者 胡昌泉 苏军 +2 位作者 陈建民 陈在杰 王锋 《福建农业学报》 CAS 2004年第1期54-57,共4页
收集直链淀粉含量变幅较大的水稻材料265份,探讨用1255型透射式近红外(NIT)分析仪和WinIsI Ⅱ软件建立糙米直链淀粉定标方程的可行性。结果表明,糙米直链淀粉近红外测定值与化学法测定值之间有较高的相关性和较低的误差,建立了较好参数... 收集直链淀粉含量变幅较大的水稻材料265份,探讨用1255型透射式近红外(NIT)分析仪和WinIsI Ⅱ软件建立糙米直链淀粉定标方程的可行性。结果表明,糙米直链淀粉近红外测定值与化学法测定值之间有较高的相关性和较低的误差,建立了较好参数的定标方程,交叉验证相关系数0.821;方程定标误差1.822;预测盲样标准误差1.957,实现了快速、无损评价糙米直链淀粉含量,提高水稻品质育种效率。 展开更多
关键词 糙米 直链淀粉含量 透射式近红外分析仪 定标方程 WinIsIⅡ软件 品质育种 水稻
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rbel正、反义基因改变籼稻直链淀粉含量的研究 被引量:11
8
作者 吴方喜 谢华安 +4 位作者 苏军 胡昌泉 陈建民 孙东发 王锋 《福建农业学报》 CAS 2006年第2期150-153,共4页
用农杆菌介导法将水稻淀粉分支酶1正、反义基因rbe1分别导入籼稻恢复系明恢81中。PCR和Southern杂交检测表明:rbe1已整合进水稻基因组中。T_0代种子直链淀粉含量测定结果表明:转rbe1正向表达结构的明恢81直链淀粉含量总体上明显下降,... 用农杆菌介导法将水稻淀粉分支酶1正、反义基因rbe1分别导入籼稻恢复系明恢81中。PCR和Southern杂交检测表明:rbe1已整合进水稻基因组中。T_0代种子直链淀粉含量测定结果表明:转rbe1正向表达结构的明恢81直链淀粉含量总体上明显下降,转rbe1反向表达结构的明恢81直链淀粉含量总体上明显上升。 展开更多
关键词 水稻 直链淀粉含量 转基因 水稻淀粉分支酶1
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获得基因侧翼序列位点信息的几种扩增方法 被引量:8
9
作者 颜静宛 林琳 王锋 《福建农业学报》 CAS 2005年第B12期125-129,共5页
侧翼序列是指染色体中特定位点两侧的DNA序列。在现代分子生物学技术研究中,常常需要对已知位点的侧翼序列进行分析或克隆,以研究基因的遗传表达调控。该文对近年来发展的几种侧翼序列扩增技术进行简述。
关键词 侧翼序列 扩增方法 染色体 分子生物学
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水稻生殖发育突变体fro1(t)的形态发生及基因定位 被引量:3
10
作者 陈在杰 吴煜兵 +2 位作者 陈少游 刘华清 王锋 《福建农业学报》 CAS 2010年第6期677-683,共7页
水稻的花发育是稻米形成的基础,研究水稻花发育的机制具有十分重要的意义。在水稻组培后代中发现一个生殖发育突变体,暂命名为function of reproductive organ(fro1(t)),主要性状为内、外稃片扭曲变形抱合,小穗外形酷似辣椒,但小穗始终... 水稻的花发育是稻米形成的基础,研究水稻花发育的机制具有十分重要的意义。在水稻组培后代中发现一个生殖发育突变体,暂命名为function of reproductive organ(fro1(t)),主要性状为内、外稃片扭曲变形抱合,小穗外形酷似辣椒,但小穗始终闭合不开花;副颖多数退化;浆片转变成薄叶状;雄蕊花丝膨大扭曲,花药表面扭曲变形,无花粉,雄蕊个数2~6枚,部分雄蕊转化为底部为叶状,顶部有类似柱头的雌蕊状器官;子房发育正常,但是多数花柱融合,柱头簇生,3~4个。扫描电镜结果显示,决定fro1(t)性状的基因调控着水稻花分生组织的分化及花器官决定的特化。利用图位克隆等技术对基因进行定位,最终将该突变位点定位在水稻8号染色体长臂上InDel0802和RM23432标记之间,目的基因与两个标记的遗传距离分别为0.58cM和1.3cM。据以上结果推测,该基因可能是一个调控水稻各轮花器官发育的新基因。 展开更多
关键词 水稻 花发育 突变体 fro1(t) 基因定位
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一种快速稳定制备水稻PCR模板的方法 被引量:6
11
作者 周淑芬 苏军 +1 位作者 肖华山 王锋 《福建农业学报》 CAS 2004年第2期113-116,共4页
研究建立了一种用碱处理磨碎水稻叶片快速制备PCR模板的方法,该方法简单快速、稳定可靠、扩增效 果好,对待测植株的损伤小;而且用于制备模板的样品不受叶龄的限制,低温保存后的样品和制备好的DNA模板 也不影响其扩增效果。因此,该方法... 研究建立了一种用碱处理磨碎水稻叶片快速制备PCR模板的方法,该方法简单快速、稳定可靠、扩增效 果好,对待测植株的损伤小;而且用于制备模板的样品不受叶龄的限制,低温保存后的样品和制备好的DNA模板 也不影响其扩增效果。因此,该方法在转基因水稻的大规模筛选与鉴定方面更经济有效。 展开更多
关键词 水稻 PCR模板 制备技术
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几个转基因抗虫水稻种质产量性状的配合力研究 被引量:3
12
作者 陈建民 罗家密 +1 位作者 欧育磊 王锋 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期488-492,497,共6页
以3个转双价抗虫基因水稻种质与5个非抗虫恢复系材料为亲本,按NC II设计配制杂交组合,分析7个产量性状的配合力。结果表明:(1)所考查性状的一般配合力和特殊配合力均达显著或极显著水平,其中株高、有效穗、穗长和每穗粒数等性状以加性... 以3个转双价抗虫基因水稻种质与5个非抗虫恢复系材料为亲本,按NC II设计配制杂交组合,分析7个产量性状的配合力。结果表明:(1)所考查性状的一般配合力和特殊配合力均达显著或极显著水平,其中株高、有效穗、穗长和每穗粒数等性状以加性效应为主,千粒重、结实率和单株产量等性状受基因的非加性效应影响较大。(2)非抗虫恢复系对杂种一代的性状形成起主要作用。(3)亲本各性状的一般配合力和特殊配合力之间没有明显的对应关系,一般配合力与亲本自身的表现值则有一定的相关性,说明在育种研究中必须注意亲本自身性状的改良。 展开更多
关键词 双价抗虫水稻 种质 产量性状 配合力分析
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小白菜再生和农杆菌介导转化体系的建立 被引量:8
13
作者 苏军 段榕琦 +2 位作者 胡昌泉 王锋 李永平 《福建农业学报》 2002年第4期241-243,共3页
探讨植物激素、外植体类型、抗生素、外植体预培养时间、共培养时间等多因素对小白菜再生体系和转化体系建立的影响。结果表明,基本(播种)培养基中添加6-BA3mg·L-1+NAA0.3mg·L-1,有助于提高不定芽的诱导频率;带柄子叶的不定... 探讨植物激素、外植体类型、抗生素、外植体预培养时间、共培养时间等多因素对小白菜再生体系和转化体系建立的影响。结果表明,基本(播种)培养基中添加6-BA3mg·L-1+NAA0.3mg·L-1,有助于提高不定芽的诱导频率;带柄子叶的不定芽再生频率显著地高于下胚轴;将外植体预培养2d后,再感染,转化频率较高;共培养2d有助于提高转化效果。经优化组合这些技术参数,初步建立了小白菜农杆菌介导的转化体系,获得了转抗虫基因sck的小白菜植株。PCR检测结果证明,sck基因已整合到小白菜的基因组中。 展开更多
关键词 小白菜 再生 农杆菌介导转化体系
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水稻密码子优化的cry1Ca基因在大肠杆菌中表达、纯化及抗体制备 被引量:2
14
作者 林智敏 陈在杰 +4 位作者 胡太蛟 胡昌泉 颜静宛 苏军 王锋 《福建农业学报》 CAS 2011年第1期24-28,共5页
将水稻偏好密码子优化并人工合成抗虫基因cry1Ca通过限制性内切酶酶切的方法构建原核表达载体pET-28bca,成功表达了带6个组氨酸标签的His-cry1Ca融合蛋白,其表达量约占菌体总蛋白的24%,表达的融合蛋白主要以包涵体的形式存在。对包涵体... 将水稻偏好密码子优化并人工合成抗虫基因cry1Ca通过限制性内切酶酶切的方法构建原核表达载体pET-28bca,成功表达了带6个组氨酸标签的His-cry1Ca融合蛋白,其表达量约占菌体总蛋白的24%,表达的融合蛋白主要以包涵体的形式存在。对包涵体蛋白进行可溶性处理,亲和纯化出带6个组氨酸标签的融合蛋白,将其作为抗原免疫家兔获得了滴度(ELISA)为l∶50 000的抗血清,并具有较强的特异性。 展开更多
关键词 cry1Ca基因 原核表达 融合蛋白 多克隆抗体
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转基因水稻环境安全研究进展 被引量:3
15
作者 陈睿 苏军 《福建农业学报》 CAS 2006年第4期384-388,共5页
随着抗虫、抗病、抗除草剂、抗逆境和高产优质的转基因水稻从实验室逐渐走向开放环境,转基因水稻可能带来的环境安全问题已引起了广泛的关注。本文就近年来我国转基因水稻环境安全方面的研究工作进行了综述,主要包括转基因漂移及其生态... 随着抗虫、抗病、抗除草剂、抗逆境和高产优质的转基因水稻从实验室逐渐走向开放环境,转基因水稻可能带来的环境安全问题已引起了广泛的关注。本文就近年来我国转基因水稻环境安全方面的研究工作进行了综述,主要包括转基因漂移及其生态风险,转基因对非靶标生物和生物多样性的影响,转基因对土壤生物群落的影响及转基因水稻本身杂草化风险等方面,旨在为转基因水稻的生物安全研究和转基因水稻商品化提供科学参考。 展开更多
关键词 水稻 转基因 环境安全
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核酸免疫制备豇豆胰蛋白酶抑制剂抗体的制备及初步应用 被引量:1
16
作者 胡太蛟 苏军 +3 位作者 胡昌泉 陈在杰 林天龙 王锋 《福建农业学报》 CAS 2005年第2期104-107,共4页
通过构建pcDNA3.1-CpTI真核表达载体,肌肉注射免疫Balb/c纯系小鼠,获得特异性的核酸免疫CpTI 抗体,其效价达1:800,所获抗体可与纯化的CpTI蛋白发生特异性反应,检测OD405值和包被蛋白量相关系数为0.9961;间接法测定转cpti基因水稻结果表... 通过构建pcDNA3.1-CpTI真核表达载体,肌肉注射免疫Balb/c纯系小鼠,获得特异性的核酸免疫CpTI 抗体,其效价达1:800,所获抗体可与纯化的CpTI蛋白发生特异性反应,检测OD405值和包被蛋白量相关系数为0.9961;间接法测定转cpti基因水稻结果表明,核酸免疫制备的抗体能与转基因水稻CpTI蛋白产生特异性反应, 可用于转基因水稻cpti基因表达的定性测定。 展开更多
关键词 核酸免疫 抗体制备 CPTI
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转基因水稻育种研究的现状、问题及其发展策略 被引量:11
17
作者 王锋 《福建农业学报》 CAS 2000年第S1期141-144,共4页
作者结合近年来从事转基因水稻育种的研究工作 ,简要综述水稻转基因研究进展 ,分析转基因水稻育种中存在的问题 。
关键词 水稻 基因工程 育种
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莲藕组织培养与微繁殖技术初探 被引量:7
18
作者 张建福 王锋 《上海农业科技》 2002年第6期17-18,共2页
关键词 莲耦 组织培养 微繁殖技术
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不同浓度硒对辣木生长及硒反应基因表达的影响 被引量:1
19
作者 罗金水 陈在杰 +3 位作者 潘迎芬 林晓兰 武英 陈振东 《福建热作科技》 2020年第4期5-8,共4页
以印度辣木为供试材料,以改良的霍格兰营养液为基本营养液,采用水培方法研究不同浓度硒酸钠(0、0.0004、0.004、0.04、0.4、4 mg/L)对辣木生长以及APS、APR3、SIR、CS、SL、SM、SMT52、AHL、ACL、SAT、AKN4和IMPase共12个硒反应基因表... 以印度辣木为供试材料,以改良的霍格兰营养液为基本营养液,采用水培方法研究不同浓度硒酸钠(0、0.0004、0.004、0.04、0.4、4 mg/L)对辣木生长以及APS、APR3、SIR、CS、SL、SM、SMT52、AHL、ACL、SAT、AKN4和IMPase共12个硒反应基因表达的影响。结果表明:辣木在不同浓度硒溶液中培养,低浓度硒(不高于0.4 mg/L)促进辣木根茎生长,高浓度硒(不低于4 mg/L)抑制辣木生长,甚至引起中毒死亡;随着硒浓度加大,植株硒含量不断提高,其硒反应基因出现不同程度表达,其中APS、CS、AKN4、SMT、AHL、SAT52、APR3、SL和IPMase基因表达先增强后减弱,SIR、ACL的表达受到明显抑制,且硒浓度越高抑制越明显,SM的表达则没有明显的规律性。因此,辣木是一种非硒积累的富硒植物。 展开更多
关键词 辣木 硒反应基因
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一个水稻茎叶优势表达锌指基因启动子的克隆及功能分析
20
作者 郑娅珊 袁国强 +1 位作者 刘华清 王锋 《福建农业学报》 CAS 2009年第1期1-5,共5页
通过RT-PCR分析,鉴定了一个在水稻茎、叶中特异表达的锌指基因OsZF153。利用PCR扩增了OsZF153基因上游约2 kb启动子区,构建了启动子与GUS的融合表达载体pCZF153P-GUS。pCZF153P-GUS转基因T0植株GUS活性分析显示:转基因植株的根、茎、叶... 通过RT-PCR分析,鉴定了一个在水稻茎、叶中特异表达的锌指基因OsZF153。利用PCR扩增了OsZF153基因上游约2 kb启动子区,构建了启动子与GUS的融合表达载体pCZF153P-GUS。pCZF153P-GUS转基因T0植株GUS活性分析显示:转基因植株的根、茎、叶、颖壳中检测到GUS活性,其中茎和叶GUS表达活性较强,而根和颖壳表达较弱,在雄蕊和雌蕊及种子不同发育阶段中没有检测到GUS活性,表明OsZF153启动子是一个水稻非生殖器官表达,且在茎、叶中优势表达的启动子。 展开更多
关键词 水稻 锌指基因 OsZF153 茎叶 优势表达
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