目标起始密码子多态性(SCoT)分子标记技术在花生属中的应用 被引量：77

1

作者 熊发前 蒋菁 +5 位作者 钟瑞春 韩柱强 贺梁琼 李忠 庄伟建 唐荣华 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期2055-2061,共7页

花生属分子标记领域的研究远落后于其他物种,而栽培种花生因其遗传基础狭窄,用大多数分子标记技术都难以检测到丰富的分子标记,因此限制了花生属野生种在改良花生栽培种方面的利用以及建立花生分子标记辅助育种技术体系。本文分别对花生... 花生属分子标记领域的研究远落后于其他物种,而栽培种花生因其遗传基础狭窄,用大多数分子标记技术都难以检测到丰富的分子标记,因此限制了花生属野生种在改良花生栽培种方面的利用以及建立花生分子标记辅助育种技术体系。本文分别对花生属4个区组的16份种质资源和8份花生栽培种资源采用与功能基因相关的SCoT分子标记技术研究了花生属种间和栽培种内遗传多样性和亲缘关系。23条SCoT引物在花生属试材基因组中的扩增位点共194个,其中多态性位点130个,多态性达67.01%,通过聚类分析研究了它们之间的亲缘关系;在栽培种内筛选出19条多态性引物,在8份试材基因组中扩增位点198个,其中多态性位点67个,多态性为33.84%,表明SCoT分子标记技术能在花生栽培种内检测出一定程度的DNA多态性。 展开更多

关键词 花生 目标起始密码子多态性 分子标记 遗传多样性

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水稻白转绿突变体的特性、遗传及其育种应用 被引量：8

2

作者 房贤涛 马洪丽 +2 位作者 赵福源 章清杞 张书标 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期1-6,11,共7页

对通过辐射诱变获得的具有白化转绿特性的水稻光温敏核不育突变体的遗传及其生物学特性进行了研究。结果表明,这些突变体可分为3种类型:白化转绿类型(W2、W3、W4和W10),白化转黄绿类型(W9)和白化转绿后期转白复绿类型(W1和W7)。这些突... 对通过辐射诱变获得的具有白化转绿特性的水稻光温敏核不育突变体的遗传及其生物学特性进行了研究。结果表明,这些突变体可分为3种类型:白化转绿类型(W2、W3、W4和W10),白化转黄绿类型(W9)和白化转绿后期转白复绿类型(W1和W7)。这些突变体的白转绿特性都是受一对隐性基因控制,具有与原不育系"培矮64S"相似的农艺性状和育性转换特性,它们的杂种具有与原杂交稻相似的株叶形态、分蘖和株高生长动态,但是它们的产量构成因素依不同的突变系而表现不同,其中W1、W2和W3的杂种有与原杂交稻相似的产量潜力,具有较好的育种应用价值。 展开更多

关键词 水稻 叶色白转绿 光温敏核不育系 生长特性

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利用SMART技术构建烟草茎全长cDNA文库 被引量：4

3

作者 蔡铁城 曾建斌 +4 位作者 陈顺辉 陈华 贺小彦 张冲 庄伟建 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2012年第1期53-57,共5页

以烟草不同生长时期茎混合为材料,采用SMART(switching mechanism at5'end of RNA transcript)技术构建了茎全长cDNA文库.原始文库的库容为5.64×106个独立克隆,重组率达99%以上,插入片段集中在0.75-2.0 kb之间,平均长度约为1.2... 以烟草不同生长时期茎混合为材料,采用SMART(switching mechanism at5'end of RNA transcript)技术构建了茎全长cDNA文库.原始文库的库容为5.64×106个独立克隆,重组率达99%以上,插入片段集中在0.75-2.0 kb之间,平均长度约为1.2 kb.随机挑取部分克隆进行测序,并进行生物信息学分析,37.5%的序列烟草已有报道,62.5%为烟草未报道的基因,45.8%是未知功能的基因,表明所构建文库达到了用于目的基因分离筛选和新基因克隆的建库要求. 展开更多

关键词 烟草 茎 SMART技术 CDNA文库

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果蔗Hsp90基因的电子克隆及序列分析 被引量：4

4

作者 林生 潘大仁 +3 位作者 周以飞 陈观水 张绪璋 张燕云 《热带作物学报》 CSCD 2009年第12期1824-1830,共7页

以克隆到的果蔗HSP90基因片段作为探针,利用电子克隆和序列拼接方法获得一个全长为2097bp的cDNA序列。通过ORF软件分析,预测得到的蛋白质具有698个氨基酸。应用生物信息学对果蔗HSP90蛋白的理化性质、二级结构、疏水性/亲水性、信号肽... 以克隆到的果蔗HSP90基因片段作为探针,利用电子克隆和序列拼接方法获得一个全长为2097bp的cDNA序列。通过ORF软件分析,预测得到的蛋白质具有698个氨基酸。应用生物信息学对果蔗HSP90蛋白的理化性质、二级结构、疏水性/亲水性、信号肽、功能结构域分析及其蛋白功能、高级结构和同源性进行了预测分析。结果表明,该蛋白的相对分子量为80.2ku,在N端有一个ATP结合位点,具有内源ATPase活性。序列分析表明,该蛋白可能具有信号转导、转录调控、胁迫应答、生长因子等功能。利用梢腐病病原Gibberella fujikuroi接种果蔗福安叶片,检测到HSP90基因的转录水平逐渐提高。 展开更多

关键词 果蔗 HSP90基因 电子克隆 生物信息学

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青枯菌诱导的花生根全长cDNA文库的构建 被引量：3

5

作者 张冲 曾建斌 +3 位作者 陈华 姜宝杰 贺小彦 庄伟建 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2013年第10期1941-1946,共6页

以优质抗青枯病花生品种闽花8号为材料,在苗期利用灌根法接种花生青枯菌,分不同时期取根,利用改良的CTAB-LiCl法提取接种和非接种的混合RNA,采用SMART（Switching Mechanism At 5＇end of RNATranscript）技术合成双链cDNA,经SfiⅠ酶切... 以优质抗青枯病花生品种闽花8号为材料,在苗期利用灌根法接种花生青枯菌,分不同时期取根,利用改良的CTAB-LiCl法提取接种和非接种的混合RNA,采用SMART（Switching Mechanism At 5＇end of RNATranscript）技术合成双链cDNA,经SfiⅠ酶切后胶回收纯化双链cDNA,连接到质粒载体pDNR-LIB上,电击转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,成功构建了青枯菌诱导的处理和对照混合全长cDNA文库.经鉴定,初级文库库容为1.78×10 cfu/mL,重组率达到99％以上,插入片段集中在750～2 500 bp之间,平均长度约为1 300 bp,经扩增后的文库滴度为2.97×109 cfu/mL.随机挑取部分克隆测序,利用生物信息学软件进行初步分析获得一些EST数据.说明得到了高质量的全长cDNA文库,这为筛选和克隆青枯菌诱导的胁迫相关基因提供了资源基础. 展开更多

关键词 花生 青枯病 SMART技术 CDNA文库

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烟草优质品种叶片全长cDNA文库的构建和质量分析 被引量：2

6

作者 曾建斌 陈顺辉 +5 位作者 陈华 贺小彦 姜宝杰 张冲 蔡铁城 庄伟建 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第1期85-91,共7页

为研究优质烟叶的分子基础,以翠碧一号不同生长时期的叶片为材料,CTAB法提取总RNA,利用SMART技术合成全长cDNA,之后按经修改的Clontech技术成功构建了烟草叶片全长cDNA文库。经鉴定,初级文库库容为3.85×106个克隆,重组率为100%,重... 为研究优质烟叶的分子基础,以翠碧一号不同生长时期的叶片为材料,CTAB法提取总RNA,利用SMART技术合成全长cDNA,之后按经修改的Clontech技术成功构建了烟草叶片全长cDNA文库。经鉴定,初级文库库容为3.85×106个克隆,重组率为100%,重组子插入片段集中在750-2000 bp之间。随机挑取25个克隆测序后,经生物信息学分析表明,烟草上已经报道的基因占10条,11条为全长基因序列;20条序列有功能注释。综合分析表明,所构建的文库质量较高,达到了基因的分离、筛选和克隆的建库目的。 展开更多

关键词 烟草 叶片 SMART技术 CDNA文库

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拟南芥AtTTG1基因的克隆及用于转化花生的MAR调控表达载体构建 被引量：2

7

作者 陈湘瑜 郑国栋 +1 位作者 黄金堂 庄伟建 《花生学报》 2014年第2期1-6,共6页

黄曲霉毒素污染对花生产业危害巨大,通过基因工程改变花生果种皮结构以提高花生抗黄曲霉能力。根据GenBank中拟南芥AtTTG1基因的cDNA编码区设计引物,通过RT-PCR克隆AtTTG1基因,结果显示,克隆获得的片段长1026bp,与基因库中数据比对相同... 黄曲霉毒素污染对花生产业危害巨大,通过基因工程改变花生果种皮结构以提高花生抗黄曲霉能力。根据GenBank中拟南芥AtTTG1基因的cDNA编码区设计引物,通过RT-PCR克隆AtTTG1基因,结果显示,克隆获得的片段长1026bp,与基因库中数据比对相同,该片段编码341个氨基酸,预测其蛋白分子量为86.96KDa,等电点为4.85。结合实验室已获得的花生果种皮特异启动子S19和MAR序列调控的植物表达载体pLMAR,构建了植物高效表达载体pLMAR-S19-TTG1,并将其导入根癌农杆菌EHA105。为进一步对花生进行遗传转化,获得转基因高抗黄曲霉花生奠定基础。 展开更多

关键词 花生 抗黄曲霉 AtTTG1 基因 核基质结合区(MAR) 果种皮特异启动子 载体构建

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eui基因对水稻光温敏核不育系主要农艺性状的影响 被引量：2

8

作者 马洪丽 谢其男 张书标 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2014年第12期2328-2331,共4页

eui基因具有遗传解除水稻不育系包穗的功能,被誉为杂交稻种子生产的第四遗传因子,现已成功地应用于杂交稻的生产。研究不同eui基因对水稻光温敏核不育系主要农艺性状的影响。结果表明,eui基因具有遗传解除水稻光温敏核不育系包穗的功效... eui基因具有遗传解除水稻不育系包穗的功能,被誉为杂交稻种子生产的第四遗传因子,现已成功地应用于杂交稻的生产。研究不同eui基因对水稻光温敏核不育系主要农艺性状的影响。结果表明,eui基因具有遗传解除水稻光温敏核不育系包穗的功效,可育期解除不育系包穗的遗传效应显著地好于不育期,且eui1基因遗传解除包穗的效应强于eui2基因。eui基因的效应并未影响到光温敏核不育系的育性和花粉不育的类型。 展开更多

关键词 水稻 光温敏核不育系 EUI基因 农艺性状

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果蔗SoSgt1基因的克隆表达与植物反义表达载体的构建 被引量：1

9

作者 林生 潘大仁 +3 位作者 周以飞 陈观水 张绪璋 吴子峰 《热带生物学报》 2010年第1期1-7,共7页

利用不同作物的Sgt1基因的SGS保守区域的氨基酸保守位点设计简并引物,从果蔗的cDNA中克隆分离出果蔗SoSgt1基因片段。以果蔗SoSgt1基因片段为探针,利用电子克隆和序列拼接方法并通过RT-PCR验证获得了一个全长1438bp的cDNA序列。通过ORF... 利用不同作物的Sgt1基因的SGS保守区域的氨基酸保守位点设计简并引物,从果蔗的cDNA中克隆分离出果蔗SoSgt1基因片段。以果蔗SoSgt1基因片段为探针,利用电子克隆和序列拼接方法并通过RT-PCR验证获得了一个全长1438bp的cDNA序列。通过ORF软件分析,预测得到的蛋白质具有362个氨基酸。利用NCBI数据库中的Protein Blast分析SoSgt1蛋白氨基酸序列,得出含有SGT1蛋白的3个典型的保守结构域(TPR,CS和SGS),与其他作物的SGT1蛋白比较具有较高的相似性。利用梢腐病病原Gibberella fujikuroi接种福安果蔗叶片,检测到SoSgt1基因的转录水平逐渐提高,并用果蔗SoSgt1基因的cDNA片段设计2个酶切位点,反向插入到植物真核表达载体pCAMBIA1301,构建反义表达载体pCAM-SGT。 展开更多

关键词 果蔗 SoSgt1基因 克隆 半定量RT-PCR 载体构建

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受青枯菌诱导的花生根酵母双杂交文库构建和AhRRS5互作蛋白的筛选 被引量：12

10

作者 陈玉婷 刘露 +6 位作者 楚盼盼 魏嘉贤 钱慧娜 陈华 蔡铁城 庄伟建 张冲 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期2134-2146,共13页

前期研究报道超表达花生AhRRS5基因能够显著提高烟草抗青枯病水平,为进一步探究NBS-LRR类抗病蛋白AhRRS5在花生应答青枯菌胁迫的信号通路,本研究在构建花生受青枯菌诱导的根部组织均一化三框文库的基础上,通过酵母双杂交技术筛选AhRRS5... 前期研究报道超表达花生AhRRS5基因能够显著提高烟草抗青枯病水平,为进一步探究NBS-LRR类抗病蛋白AhRRS5在花生应答青枯菌胁迫的信号通路,本研究在构建花生受青枯菌诱导的根部组织均一化三框文库的基础上,通过酵母双杂交技术筛选AhRRS5的互作蛋白。通过改良的CTAB法提取青枯菌诱导后不同时间点的花生根部组织样品总RNA,分离纯化mRNA并合成双链cDNA,并基于同源重组方法分别构建酵母双杂交初级和次级文库。构建的酵母双杂交次级cDNA文库库容为1.44×10^(7) cfu mL^(-1),重组率为100%,插入片段大小在1000 bp以上。通过酶切连接法构建pGBKT7-AhRRS5诱饵载体,在酵母细胞中无自激活和毒性活性,与酵母双杂交文库共转酵母Y2H Gold菌株后,经多次筛库和回转验证,最终获得12个候选互作蛋白,这些蛋白涉及到植物生长发育、能量代谢、激素信号转导、胁迫响应等多个方面。通过双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,BiFC)验证了AhSBT1.6和AhRRS5的体内互作。转录组数据显示,花生AhSBT1.6基因在不同组织中表达差异显著;实时荧光定量PCR显示,该基因在抗青枯病花生品种中受青枯菌诱导上调表达,推测AhSBT1.6可能参与调控花生青枯病抗性。研究结果为进一步研究NBS-LRR类抗病蛋白AhRRS5和互作蛋白在花生青枯病抗性防御的作用机制奠定了基础。 展开更多

关键词 花生 青枯病 酵母双杂交 互作蛋白 AhSBT1.6 双分子荧光互补

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花生茎全长cDNA文库的构建与分析 被引量：2

11

作者 陈华 邓烨 +5 位作者 张冲 蔡铁城 熊发前 唐荣华 周双彪 庄伟建 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1765-1772,共8页

为挖掘花生茎中重要的功能基因,了解花生茎生长发育的分子机理,以闽花6号为材料,利用SMART技术成功构建了花生茎不同生育时期混合的全长cDNA文库,并对文库的部分序列进行了测序及分析.结果表明,该文库原始库容为1.25×106 cfu·... 为挖掘花生茎中重要的功能基因,了解花生茎生长发育的分子机理,以闽花6号为材料,利用SMART技术成功构建了花生茎不同生育时期混合的全长cDNA文库,并对文库的部分序列进行了测序及分析.结果表明,该文库原始库容为1.25×106 cfu· mL-1,重组率达100％,插入片段大小为750～2 000 bp,平均插入片段大小为1 000bp,达到文库质量要求.随机挑选50个单克隆进行5＇端测序,共获得50条有效序列.通过与NCBI非冗余蛋白质数据库进行比对和注释,获得已知功能基因或具推测功能的基因29个,未知功能基因9个,新基因12个,其中47个（94％）基因为花生未报道的基因.因此,该文库的构建为克隆和研究花生茎部重要表达基因,从分子水平上揭示花生茎的生长发育规律提供了基础. 展开更多

关键词 花生 SMART技术 全长CDNA文库 茎

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花生叶全长cDNA文库的构建和部分表达序列标签分析 被引量：2

12

作者 陈华 蔡铁城 +5 位作者 张冲 邓烨 熊发前 唐荣华 周双彪 庄伟建 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2014年第6期596-601,共6页

以‘闽花6号’品种为材料,利用SMART技术成功构建了花生叶不同生育时期混合的全长c DNA文库,并对文库的部分序列进行测序及分析.结果表明,该文库原始库容为2.25×106cfu·m L-1,重组率达100%,插入片段大小为750-2000bp,平均插... 以‘闽花6号’品种为材料,利用SMART技术成功构建了花生叶不同生育时期混合的全长c DNA文库,并对文库的部分序列进行测序及分析.结果表明,该文库原始库容为2.25×106cfu·m L-1,重组率达100%,插入片段大小为750-2000bp,平均插入片段大小为1000 bp,达到文库质量要求.随机挑选50个单克隆进行5'端测序,共获得50条有效序列.通过与NCBI非冗余蛋白质数据库进行比对和注释,获得已知功能基因或具推测功能的基因25个,未知功能基因14个,新基因11个,其中49个(98%)基因为花生未报道的基因.参与代谢过程和胁迫响应的基因表达量较高. 展开更多

关键词 花生 SMART技术 全长CDNA文库 叶 表达序列标签

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水稻长穗颈光温敏核不育系福eS1的变异性 被引量：1

13

作者 林龙湘 张书标 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期657-661,共5页

为了明确长穗颈光温敏核不育系福eS1生产过程中产生高秆株和矮秆株的原因,对高秆株和矮秆株的主要农艺性状、遗传和花粉育性等进行了研究。结果表明,在福eS1的生产应用过程中会出现高杆和矮杆2种异型株,它们出现的频率分别约为9.3×... 为了明确长穗颈光温敏核不育系福eS1生产过程中产生高秆株和矮秆株的原因,对高秆株和矮秆株的主要农艺性状、遗传和花粉育性等进行了研究。结果表明,在福eS1的生产应用过程中会出现高杆和矮杆2种异型株,它们出现的频率分别约为9.3×10-5和2.1×10-5。高秆株的株高比福eS1显著提高,株高的增加主要由于倒一节间长、倒二节间长、倒三节间长等的显著提高;高秆株的抽穗期比福eS1提早3～5d。矮秆株的株高比福eS1显著降低,包穗严重,倒一节间长缩短,主要农艺性状与培矮64S相似。遗传分析表明,福eS1中的高秆株仍为原来的长穗颈基因所控制,而矮秆株的产生是由于eui基因发生了回复突变。高秆株在可育期的结实率较福eS1高,在不育期表现出不同程度的可育。结果表明,福eS1中的高秆株是由于其育性转换温度升高,使其在可育期结实好,不育期表现不同程度的可育,导致高秆。 展开更多

关键词 福eS1 高秆株 矮秆株 遗传变异

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龙眼采后果肉劣变的差异表达蛋白分析

14

作者 王晓艳 潘德灼 +4 位作者 钟灿钰 黄榕辉 黄春梅 梁文裕 陈伟 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期391-398,共8页

为探索龙眼(Dimocarpus longan)果肉常温劣变过程中蛋白质的变化,采用蛋白质组学的方法,在‘福眼’龙眼果肉常温劣变过程中发现共有24个2倍差异表达蛋白,其中21个蛋白被成功鉴定。这些蛋白参与了应激反应与防御(56%)、能量与碳代谢(19%... 为探索龙眼(Dimocarpus longan)果肉常温劣变过程中蛋白质的变化,采用蛋白质组学的方法,在‘福眼’龙眼果肉常温劣变过程中发现共有24个2倍差异表达蛋白,其中21个蛋白被成功鉴定。这些蛋白参与了应激反应与防御(56%)、能量与碳代谢(19%)、初级代谢(5%)、蛋白转运(5%)和细胞骨架(5%)等细胞代谢活动。大多数与抗氧化作用密切相关的蛋白质都下调表达,说明龙眼采后果肉的抗氧化能力有所下降,不能有效地缓解ROS积累引起的毒性作用,从而使果肉劣变。此外,与能量代谢相关的蛋白全部下调表达,表明龙眼果实采后果肉劣变可能与能量供应不足有关。这些结果为龙眼采后保鲜技术研究提供科学依据。 展开更多

关键词 龙眼 果肉 劣变 双向电泳 差异蛋白 质谱

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环境胁迫诱导的花生全长cDNA文库的构建及序列分析 被引量：12

15

作者 姜宝杰 陈华 +4 位作者 张冲 邓烨 蔡铁城 石新国 庄伟建 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期545-551,共7页

以花生新品种闽花6号为材料,用生物和非生物因素胁迫处理植株,采用SMART技术构建了花生受低温、干旱、各种激素、缺钙及黄曲霉等胁迫诱导的混合全长cDNA文库,原始文库滴度为8.86×106cfu,重组率达97.6%,插入片段多在1~2kb之间,平均... 以花生新品种闽花6号为材料,用生物和非生物因素胁迫处理植株,采用SMART技术构建了花生受低温、干旱、各种激素、缺钙及黄曲霉等胁迫诱导的混合全长cDNA文库,原始文库滴度为8.86×106cfu,重组率达97.6%,插入片段多在1~2kb之间,平均大小为1300bp。该cDNA文库的构建可用于花生抗逆基因的发掘,为揭示花生抗逆分子机理及花生品种改良奠定基础。 展开更多

关键词 花生 胁迫 SMART技术 全长CDNA文库 抗逆基因

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花生新品种闽花6号的选育及优异性状研究 被引量：14

16

作者 庄伟建 石新国 +4 位作者 陈华 王再兴 官德义 蔡来龙 李毓 《福建农业学报》 CAS 2010年第3期303-309,共7页

闽花6号是福建农林大学以汕油523为母本、以Q6为父本有性杂交选育而成,于2006年通过福建省农作物品种审定委员会认定,2009年通过农业部花生品种鉴定。该品种在福建省及全国花生新品种区域试验中表现为高产稳产、高蛋白、较抗黄曲霉。该... 闽花6号是福建农林大学以汕油523为母本、以Q6为父本有性杂交选育而成,于2006年通过福建省农作物品种审定委员会认定,2009年通过农业部花生品种鉴定。该品种在福建省及全国花生新品种区域试验中表现为高产稳产、高蛋白、较抗黄曲霉。该品种分枝数较多、株高较矮、单株结果数多、饱果数多、出仁率高、籽仁含油量50.08%,蛋白质含量30.63%,属高蛋白品种,脂肪和蛋白质之和高达81.8%。根据福建省花生品种区试数据,应用AMMI模型对参试品种的稳定性分析表明,闽花6号高产、适应性强。对闽花6号进行重要农艺性状的通径分析显示,各性状对产量的直接贡献大小依次为:荚果饱满度>单株结果数>百果重>主茎高>总分枝数>出仁率>侧枝长>百仁重>结果枝数。 展开更多

关键词 花生 闽花6号 选育 遗传特性

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花生果皮全长cDNA文库的构建及初步分析 被引量：8

17

作者 陈华 姜宝杰 +4 位作者 张冲 蔡铁城 曾建斌 邓烨 庄伟建 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2013年第1期57-62,共6页

以闽花6号花生为材料,利用SMART技术构建了花生果皮全长cDNA文库.从花生果皮中分离、纯化的cDNA片段连接到经SfiⅠ酶切的pDNR-LIB载体上,经电击转化获得原始文库,经过涂平板测定和酶切反应快速鉴定表明,原始文库滴度达1.3×107cfu,... 以闽花6号花生为材料,利用SMART技术构建了花生果皮全长cDNA文库.从花生果皮中分离、纯化的cDNA片段连接到经SfiⅠ酶切的pDNR-LIB载体上,经电击转化获得原始文库,经过涂平板测定和酶切反应快速鉴定表明,原始文库滴度达1.3×107cfu,重组率达95.5%,插入片段大小多为750-2000 bp,平均大小在1000 bp左右.随机挑选30个单克隆进行双向测序,获得有效序列25条,序列经GenBank检索和生物信息学比较,17个获得了全长,所占比例为68%.有13条序列与其他植物已知功能氨基酸序列具有较高的相似性.说明得到了高质量的全长cDNA文库,这为筛选和克隆花生果皮特异表达基因和分离果皮特异启动子提供了基础. 展开更多

关键词 果皮 花生 SMART技术 CDNA文库

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利用改进的SMART法构建花生种皮全长cDNA文库 被引量：6

18

作者 陈华 姜宝杰 +3 位作者 张冲 曾建斌 邓烨 庄伟建 《福建农业学报》 CAS 2012年第11期1178-1182,共5页

SMART法是目前全长cDNA文库构建的重要方法之一。在研究多种构建全长cDNA文库的方法基础上,吸收和改进了SMART法,对特异引物和PCR条件进行可行性的优化,成功构建了高质量的花生种皮全长cDNA文库,改进后的方法更经济、简便易行。经过涂... SMART法是目前全长cDNA文库构建的重要方法之一。在研究多种构建全长cDNA文库的方法基础上,吸收和改进了SMART法,对特异引物和PCR条件进行可行性的优化,成功构建了高质量的花生种皮全长cDNA文库,改进后的方法更经济、简便易行。经过涂平板测定和酶切反应快速鉴定表明,原始文库的滴度为1.23×106cfu.mL-1,重组率达93.3%,全长率为59%。插入片段大小多在1.0～2.0kb,所占比例为70%,平均大小在1.1kb左右,采用涂平板均匀扩增得到的扩增文库滴度达到了3.84×109 cfu.mL-1,可用于长期保存。 展开更多

关键词 SMART法 全长CDNA文库 花生种皮

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FAD2和γ-TMT基因双价种子特异表达载体的构建及对花生的转化 被引量：3

19

作者 石新国 陈华 +1 位作者 陈湘瑜 庄伟建 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期202-207,共6页

根据已发表的γ-TMT基因序列(GenBank AF104220),从拟南芥(Arabidopsis thaliana)的cDNA中分离得到γ-TMT基因,根据已发表的油菜(Brassica napus)种子贮藏蛋白基因特异表达的2S启动子(登录号J02798)序列,从油菜DNA中分离得到2S启动子。... 根据已发表的γ-TMT基因序列(GenBank AF104220),从拟南芥(Arabidopsis thaliana)的cDNA中分离得到γ-TMT基因,根据已发表的油菜(Brassica napus)种子贮藏蛋白基因特异表达的2S启动子(登录号J02798)序列,从油菜DNA中分离得到2S启动子。为了同时提高花生中维生素E和油酸含量,构建得到了双价种子特异表达载体pCAMBIA1300AT,它带有FAD2基因反义RNA干扰体和γ-TMT基因的种子特异表达单元。该载体已登录在GenBank上(登录号FJ362601)。通过农杆菌C58介导转化花生品种闽花6号,获得PCR阳性的转化植株。 展开更多

关键词 FAD2 γ-TMT 种子特异表达 转基因花生

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花生品种“闽花6号”的品种特征与推广利用 被引量：3

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作者 王再兴 陈华 +2 位作者 蔡铁城 庄冠雄 庄伟建 《福建农业学报》 CAS 2012年第11期1183-1188,共6页

"闽花6号"花生新品种由福建农林大学育成,2006年初通过福建省农作物品种审定委员会审定;2009年通过农业部花生品种鉴定。根据2003～2010年闽花6号区试、试种及示范推广中的表现,该品种综合性状较突出,高产稳产,适应性较广,较... "闽花6号"花生新品种由福建农林大学育成,2006年初通过福建省农作物品种审定委员会审定;2009年通过农业部花生品种鉴定。根据2003～2010年闽花6号区试、试种及示范推广中的表现,该品种综合性状较突出,高产稳产,适应性较广,较抗黄曲霉菌,蛋白质含量高,果仁等外观品质好,口感好,适合加工利用。本文介绍了闽花6号的品种特征和推广利用价值。 展开更多

关键词 花生 闽花6号 品种特征 推广

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