多普勒超声与超声造影评价兔类风湿性关节炎模型滑膜病变 被引量：15

1

作者 陈树强 叶真 +4 位作者 刘晖 曾锦树 许翔 包中涛 郑擎 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2016年第11期1639-1643,共5页

目的探讨多普勒超声与CEUS评估兔类风湿性关节炎（RA）模型膝关节滑膜病理改变及早期诊断活动性滑膜炎的价值。方法将30只新西兰兔随机分为两组,对模型组（n=25）以卵蛋白诱导建立双膝关节RA模型,对照组（n=5）相应时间点仅注射生理盐... 目的探讨多普勒超声与CEUS评估兔类风湿性关节炎（RA）模型膝关节滑膜病理改变及早期诊断活动性滑膜炎的价值。方法将30只新西兰兔随机分为两组,对模型组（n=25）以卵蛋白诱导建立双膝关节RA模型,对照组（n=5）相应时间点仅注射生理盐水。对两组均于多普勒超声和CEUS检查后进行病理检查。以病理检查为金标准,评价多普勒超声及CEUS对活动性滑膜炎的诊断效能,并分析多普勒超声血流分级、CEUS增强程度分级与滑膜炎病理评分的相关性。结果模型组23只兔建模成功,46个膝关节均出现不同程度红肿,模型组多普勒超声与CEUS均可反映滑膜炎症。对照组膝关节均无明显变化。多普勒超声对兔RA模型膝关节活动性滑膜炎的诊断敏感度、特异度、准确率分别为80.56%（29/36）、60.00%（6/10）、76.09%（35/46）;CEUS分别为94.44%（34/36）、90.00%（9/10）、93.47%（43/46）;两种方法的敏感度、特异度、准确率差异均有统计学意义（χ^2=6.35、4.25、5.11,P均〈0.05）。多普勒超声血流分级（rs=0.557,P〈0.05）、CEUS增强程度分级（rs=0.715,P〈0.01）均与滑膜炎病理评分呈正相关。结论多普勒超声和CEUS均可反应兔RA模型膝关节滑膜病理改变,CEUS对活动性滑膜炎的诊断效能更优。 展开更多

关键词 关节炎 类风湿 模型 动物 兔 超声检查 病理学

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中国福建省福州地区地中海贫血孕妇基因类型分析 被引量：8

2

作者 林珺芳 曾志勇 +3 位作者 杨阿碰 郑玲 芮红兵 陈君敏 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期1303-1306,共4页

目的:研究中国福建省福州地区地中海贫血孕妇基因类型。方法:对孕妇进行血常规检测或血红蛋白电泳检测,阳性者采用跨跃断裂点PCR技术及PCR-反向点杂交法进行α地中海贫血基因检测,采用PCR-反向点杂交法进行β地中海贫血基因检测。结果:... 目的:研究中国福建省福州地区地中海贫血孕妇基因类型。方法:对孕妇进行血常规检测或血红蛋白电泳检测,阳性者采用跨跃断裂点PCR技术及PCR-反向点杂交法进行α地中海贫血基因检测,采用PCR-反向点杂交法进行β地中海贫血基因检测。结果:645例确诊为地中海贫血孕妇中,412例为α地中海贫血(63.9%);201例为β地中海贫血(31.2%);32例α/β复合地中海贫血(4.9%)。α地中海贫血基因检测中共检测出12种基因型,--SEA/αα最为常见(265例,64.32%),其后依次为α3.7/αα83例(20.14%),-α4.2/αα32例(7.77%),αQSα/αα8例(1.94%);β地中海贫血基因检测中共检测出10种基因型,CD41-42/N最为常见(62例,30.84%),其后依次为CD17/N 56例(27.86%),IVS-II-654/N 32例(15.92%),-28/N 21例(10.45%);α/β复合地中海贫血基因检测中共检测出9种复合基因型,--SEA/αα复合CD41-42/N最为常见(6例,18.75%),其后依次为-α3.7/αα复合CD41-42/N 5例(15.62%),--SEA/αα复合CD17/N 5例(15.62%)。结论:中国福建省福州地区孕妇α、β地中海贫血基因型主要为--SEA/αα、α3.7/αα、CD41-42/N及CD17/N等。对福建省福州地区孕妇应加强地中海贫血筛查及产前基因诊断。 展开更多

关键词 地中海贫血 福州 基因检测

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miR-204通过靶向Sirt1/p53信号通路抑制霍奇金淋巴瘤细胞增殖 被引量：11

3

作者 郑晓强 芮红兵 张光辉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1557-1564,共8页

目的:探讨微小RNA-204(miR-204)对霍奇金淋巴瘤细胞增殖的作用,并研究其初步机制。方法:采用RT-qPCR检测霍奇金淋巴瘤组织中miR-204和Sirt1 mRNA的表达水平。在L428细胞中分别转染miR-204模拟物(miR-204 mimic)、 Sirt1 小干扰RNA( Sirt... 目的:探讨微小RNA-204(miR-204)对霍奇金淋巴瘤细胞增殖的作用,并研究其初步机制。方法:采用RT-qPCR检测霍奇金淋巴瘤组织中miR-204和Sirt1 mRNA的表达水平。在L428细胞中分别转染miR-204模拟物(miR-204 mimic)、 Sirt1 小干扰RNA( Sirt1 siRNA)和miR-204 mimic+pcDNA3.1-Sirt1后,CCK-8法与BrdU实验分别检测细胞活力和BrdU掺入量;Western blot检测Sirt1和乙酰化p53(acetylated p53, ac-p53)的表达水平。双萤光素酶报告基因法验证miR-204与Sirt1的靶向关系。结果:霍奇金淋巴瘤组织中miR-204低表达,Sirt1 mRNA高表达。与对照组相比,L428细胞转染miR-204 mimic或 Sirt1 siRNA后,细胞活力、BrdU掺入量及Sirt1和ac-p53表达水平均显著降低( P <0.05)。与单纯miR-204 mimic转染组相比,miR-204 mimic+pcDNA3.1-Sirt1共转染组L428细胞活力、BrdU掺入量Sirt1和ac-p53蛋白表达水平均显著升高( P <0.05)。双萤光素酶报告基因实验结果表明,Sirt1 是miR-204的靶基因。结论: miR-204对L428细胞增殖的抑制作用可能是通过抑制Sirt1表达和促进ac-p53上调来实现的。 展开更多

关键词 微小RNA-204 霍奇金淋巴瘤 Sirt1蛋白 P53蛋白 细胞增殖

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H3K27me3和EZH2在弥漫大B细胞淋巴瘤疗效预测中的意义 被引量：6

4

作者 邓玉洁 陈刚 +5 位作者 朱伟峰 陈晓辉 洪华兰 黄理明 施烯 陈君敏 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期159-165,共7页

目的:探讨H3K27me3及其甲基转移酶EZH2在对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)近期疗效和远期预后的预测意义。方法:收集福建省肿瘤医院102例初治DLBCL石蜡标本,利用TMA技术已制成的组织芯片,应用免疫组织化学方法检测H3K27me3、EZH2、BCL-2等蛋... 目的:探讨H3K27me3及其甲基转移酶EZH2在对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)近期疗效和远期预后的预测意义。方法:收集福建省肿瘤医院102例初治DLBCL石蜡标本,利用TMA技术已制成的组织芯片,应用免疫组织化学方法检测H3K27me3、EZH2、BCL-2等蛋白表达,收集临床治疗后评价情况和随访信息,并结合组织芯片检测H3K27me3、EZH2、BCL-2表达情况,生存分析应用Kaplan-Meier法,Pearson相关性分析EZH2与H3K27me3表达及BCL-2的相关性,spearman相关分析上述指标与不同疗效间的相关性,比较EZH2、H3K27me3表达及两者共表达与患者疗效及预后关系。结果:EZH2高表达者占61.8%,与H3K27me3及BCL-2蛋白高表达均正相关。H3K27me3高表达及H3K27me3/EZH2共表达组完全缓解(CR)和总有效(OR)率均低于低表达组(P<0.001),OS、PFS均差于低表达组(P<0.001);在RCHOP组中,EZH2低表达者CR和OR率均高于高表达者(P=0.003,P=0.019),OS和PFS均优于高表达者。结论:在部分DLBCL存在EZH2高表达及H3K27me3/EZH2共表达,该类型治疗反应差,生存期短。EZH2低表达患者群体使用RCHOP方案的近期疗效及远期生存率较高表达者有改善。 展开更多

关键词 弥漫大B细胞淋巴瘤 EZH2 H3K27me3 疗效预测

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利用Gateway技术构建重组腺病毒pAd-NK4 被引量：6

5

作者 阙文忠 陈君敏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期462-467,共6页

目的利用Gateway技术构建含人肝细胞生长因子(HGF)NK4基因的重组腺病毒载体。方法以含有HGF/NK4基因的质粒为模板PCR扩增NK4基因,将回收的NK4PCR产物片段克隆至腺病毒穿梭载体pYr-adshuttle-6获得重组质粒pYr-adshuttle-6-NK4。从该重... 目的利用Gateway技术构建含人肝细胞生长因子(HGF)NK4基因的重组腺病毒载体。方法以含有HGF/NK4基因的质粒为模板PCR扩增NK4基因,将回收的NK4PCR产物片段克隆至腺病毒穿梭载体pYr-adshuttle-6获得重组质粒pYr-adshuttle-6-NK4。从该重组质粒上,利用LR同源重组将NK4-IRES-EGPF表达框转移至腺病毒骨架质粒pAD/BL-DEST,获得重组腺病毒质粒pAd-NK4-IRES-EGFP。该质粒经pacI线性化后转染293包装细胞,获得重组腺病毒rAd-NK4-IRES-EGFP。采用TCID 50(tissue cell infectiousdosage 50,TCID 50)法测定重组腺病毒滴度。重组腺病毒分别经酶切和PCR等方法进行鉴定。荧光显微镜观察转染效果。结果证实腺病毒载体中含有NK4基因的目的片段;病毒滴度为6.3×1011 PFU.L-1;荧光显微镜发现该重组腺病毒能在HEK293细胞中高效的表达。结论利用Gateway技术可以快速地构建同时表达NK4蛋白和绿色荧光的重组腺病毒,为下一步开展关于NK4基因的肿瘤治疗提供了基础。 展开更多

关键词 腺病毒 GATEWAY技术 人肝细胞生长因子 NK4 基因治疗 肿瘤

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H3K27的三甲基化蛋白在初治弥漫大B细胞淋巴瘤的表达及对预后的影响 被引量：4

6

作者 邓玉洁 陈刚 +3 位作者 朱伟峰 芮红兵 洪华兰 陈君敏 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1379-1385,共7页

目的:探讨H3K27me3在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的表达及对预后的影响。方法:收集福建省肿瘤医院102例初治DLBCL石蜡标本,利用TMA技术制成组织芯片,免疫组织化学方法检测H3K27me3等蛋白的表达,收集临床数据和随访信息,用Kaplan-Meier... 目的:探讨H3K27me3在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的表达及对预后的影响。方法:收集福建省肿瘤医院102例初治DLBCL石蜡标本,利用TMA技术制成组织芯片,免疫组织化学方法检测H3K27me3等蛋白的表达,收集临床数据和随访信息,用Kaplan-Meier法分析治疗水平,用Cox比例风险模型分析预后因素,比较不同表达与患者临床病例特征及预后关系。结果:DLBCL组织芯片位点完整。H3K27me3高表达者占59.8%,与老年(>60岁)、ECOG≥2、侵犯结外病灶数目≥2、高LDH、IPI高-中风险组相关。H3K27me3高表达组治疗完全缓解(CR)率和总有效(OR)率均低于低表达组,分别为20%vs 57.5%和41.8%vs 90%(P<0.001);高表达组中位生存时间21.5个月,较低表达组中位生存期明显缩短(P<0.0001)。COX多因素分析显示,H3K27me3高表达是DLBCL预后不良的危险因素(P=0.007)。结论:TM A技术可用于DLBCL组织芯片构建,部分DLBCL存在H3K27me3高表达。该类型患者对治疗反应差,生存期短,检测H3K27me3蛋白表达对预测DLBCL预后具有一定临床价值。 展开更多

关键词 弥漫大B细胞淋巴瘤 组织芯片 H3K27me3

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Ad-NK4增强人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞对硼替佐米化疗敏感性的作用 被引量：4

7

作者 阙文忠 陈君敏 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期1079-1085,共7页

目的:观察Ad-NK4能否增强RPMI 8226细胞对硼替佐米(BOR)的化疗敏感性。方法:细胞-基质粘附实验和RPMI 8226细胞-ECV 304细胞粘附实验检测Ad-NK4对RPMI 8226细胞粘附的影响;Western blot检测粘附和侵袭相关蛋白MMP2、MMP3、MMP7、VEGF表... 目的:观察Ad-NK4能否增强RPMI 8226细胞对硼替佐米(BOR)的化疗敏感性。方法:细胞-基质粘附实验和RPMI 8226细胞-ECV 304细胞粘附实验检测Ad-NK4对RPMI 8226细胞粘附的影响;Western blot检测粘附和侵袭相关蛋白MMP2、MMP3、MMP7、VEGF表达的变化;MTT法检测Ad-NK4对细胞增殖的影响;PI流式细胞术检测Ad-NK4对细胞凋亡的影响;Western Blot检测Cleaved caspase-3、BAX和BCL-2蛋白表达水平的变化。结果:两种细胞粘附实验均显示Ad-NK4可显著抑制RPMI 8226细胞粘附,且与Erk信号通路和JAK/STAT信号通路显著相关(P<0.05);Ad-NK4能明显降低RPMI 8226细胞MMP-2、MMP-3和VEGF蛋白的表达水平(P<0.05),但对M M P-7的蛋白表达水平无明显影响(P>0.05)。Ad-NK4和BOR联用的细胞抑制率和诱导凋亡比例均显著高于单用Ad-NK4或BOR。同样,Ad-NK4和BOR联用组Cleaved caspase-3和BAX蛋白水平均明显高于单独作用组,而BCL-2蛋白水平却相反,同时在联用组BAX/BCL-2比率增加。结论:通过活化Caspase-3和上调BAX/BCL-2比率的途径,Ad-NK4可增强BOR体外抗骨髓瘤RPM I 8226细胞作用。 展开更多

关键词 Ad-NK4 多发性骨髓瘤 RPMI 8226细胞 硼替佐米 细胞凋亡

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迷迭香酸通过调控PI3K通路诱导急性T细胞白血病Jurkat细胞自噬和细胞凋亡 被引量：3

8

作者 郑晓强 董金凤 芮红兵 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1771-1775,共5页

目的:探究迷迭香酸(RA)对急性T细胞白血病Jurkat细胞存活的作用及机制。方法:将细胞随机分为Jurkat组、RA (5μmol/L)组、RA (10μmol/L)组和RA (20μmol/L)组,分别用0、5、10和20μmol/L的RA处理细胞,CCK8检测培养不同时间的细胞增殖倍... 目的:探究迷迭香酸(RA)对急性T细胞白血病Jurkat细胞存活的作用及机制。方法:将细胞随机分为Jurkat组、RA (5μmol/L)组、RA (10μmol/L)组和RA (20μmol/L)组,分别用0、5、10和20μmol/L的RA处理细胞,CCK8检测培养不同时间的细胞增殖倍数,克隆形成实验检测细胞增殖,流式检测细胞凋亡,免疫印迹检测Beclin1、P62、LC3、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt和m TOR的表达,免疫荧光检测LC3的表达。结果:RA处理细胞4 d后,RA (5、10、20μmol/L)组细胞增殖倍数与Jurkat组比较明显降低,存活细胞数明显减少,细胞凋亡率明显升高;同时与Jurkat组比较,RA (5、10、20μmol/L)组细胞Beclin1表达水平和LC3Ⅱ/LCⅠ的比值明显降低,P62表达水平明显升高,LC3阳性表达与Jurkat组比较也明显减少;此外,RA (5、10、20μmol/L)还能显著降低p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt的比值和m TOR的表达水平。结论:RA可诱导急性T淋巴白血病Jurkat细胞自噬和细胞凋亡,作用机制可能与抑制PI3K/Akt通路激活有关。 展开更多

关键词 迷迭香酸 T细胞白血病 自噬性死亡 JURKAT细胞

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假鼻疽伯克霍尔德菌败血症1例 被引量：1

9

作者 康日辉 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期170-170,共1页

1材料患者,李某,男,46岁,以＂反复畏冷、发热伴双膝酸痛40d,全身皮疹4d＂为主诉于2010-06-17入院。于40d前出现畏冷、寒战、发热,体温最高达39℃,伴有双膝关节酸痛,退热后缓解。无头痛、咽痛、咳嗽、胸痛、腹痛、腹泻、尿频、关节红肿... 1材料患者,李某,男,46岁,以＂反复畏冷、发热伴双膝酸痛40d,全身皮疹4d＂为主诉于2010-06-17入院。于40d前出现畏冷、寒战、发热,体温最高达39℃,伴有双膝关节酸痛,退热后缓解。无头痛、咽痛、咳嗽、胸痛、腹痛、腹泻、尿频、关节红肿、皮疹等。 展开更多

关键词 假鼻疽伯克霍尔德菌 败血症 全身皮疹 关节酸痛 关节红肿 发热

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系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞CD1c的表达

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作者 芮红兵 康日辉 +6 位作者 叶德富 卓光生 陈君敏 薜原 郑玲 朱月永 林珺芳 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期797-799,共3页

目的 :研究系统性红斑狼疮 (SLE)患者外周血淋血细胞CD1c的表达情况及与疾病活动性之间的关系。方法 :用流式细胞仪检测了 4 7例SLE患者外周血淋巴细胞CD1c的表达及淋巴细胞表型分析 ,并评价与疾病活动性的关系。结果 :SLE活动组病人CD1... 目的 :研究系统性红斑狼疮 (SLE)患者外周血淋血细胞CD1c的表达情况及与疾病活动性之间的关系。方法 :用流式细胞仪检测了 4 7例SLE患者外周血淋巴细胞CD1c的表达及淋巴细胞表型分析 ,并评价与疾病活动性的关系。结果 :SLE活动组病人CD1c+ 细胞百分率显著增高 (P <0 0 5 ) ,CD4 + 细胞百分率显著降低 (P <0 0 1) ,CD3+ 、CD8+ 细胞百分率正常 ,CD2 0 + 细胞数增高 (P <0 0 1)。稳定期病人CD1c+ 细胞百分率正常 ,CD4 + 、CD8+ 、CD2 0 + 细胞百分率均正常。SLE患者CD1c细胞阳性率与患者SLEDAI的评分有显著的相关性 (r=0 6 8,P <0 0 1) ,与抗dsDNA抗体的表达有显著相关性 (r =0 36 ,P <0 0 5 ) ,与抗心磷脂抗体的表达有显著的相关性 (r=0 6 4 ,P <0 0 1) ,与血清C3水平有显著相关性 (r =- 0 35 ,P <0 0 5 )。活动期病人经治疗后CD1c的表达明显下降。结论 :系统性红斑狼疮患者外周血CD1c表达与疾病的活动性明显相关 ,CD1c可能在SLE脂类抗原及核酸类抗原的递呈及抗双链DNA抗体、抗磷脂抗体的产生中起重要作用。 展开更多

关键词 系统性红斑狼疮 CD1 流式细胞术

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骨髓间充质干细胞抑制淋巴瘤细胞增殖的实验研究

11

作者 杨阿碰 唐灵涛 陈君敏 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1610-1615,共6页

间充质干细胞(MSC)具有向肿瘤细胞定向迁移并且抑制肿瘤细胞的特性,然而其分子机理目前尚不清楚。本研究主要探讨B7-H4在骨髓MSC细胞株C3H10 T1/2(C3H10)体外对淋巴瘤细胞株EL-4增殖的影响。应用细胞免疫荧光法检测C3H10细胞中B7-H4的... 间充质干细胞(MSC)具有向肿瘤细胞定向迁移并且抑制肿瘤细胞的特性,然而其分子机理目前尚不清楚。本研究主要探讨B7-H4在骨髓MSC细胞株C3H10 T1/2(C3H10)体外对淋巴瘤细胞株EL-4增殖的影响。应用细胞免疫荧光法检测C3H10细胞中B7-H4的表达情况;利用脂质体转染法将绿色荧光素标记的FAM-siRNA转染C3H10细胞,通过荧光显微镜及流式细胞仪检测并评估siRNA的转染效率;利用RT-PCR方法测定不同浓度的siRNA-B7-H4干预C3H10细胞后B7-H4的mRNA表达水平;将单独培养的EL-4细胞作为对照组,B7-H4不同程度沉默后的C3H10细胞与EL-4细胞共培养作为实验组,48 h后通过倒置显微镜观察及CCK-8检测法比较EL-4细胞的增殖情况。结果表明:利用INTERFERinTM转染试剂转染C3H10的效率可达到72.43%,C3H10细胞中高表达B7-H4,利用siRNA技术使B7-H4表达下调可逆转C3H10对淋巴瘤细胞株EL-4增殖的抑制作用。结论:骨髓MSC细胞株C3H10可能通过表达B7-H4发挥对淋巴瘤细胞株EL-4增殖的抑制作用,这将为临床治疗淋巴瘤提供新靶点、新方向。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 淋巴瘤 B7-H4

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自噬调节药物对多发性骨髓瘤细胞增殖、凋亡和自噬的影响 被引量：7

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作者 王纪珍 陈君敏 +1 位作者 曾志勇 邱东飚 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期817-823,共7页

目的:探讨自噬调节药物包括自噬激活剂(雷帕霉素)、自噬抑制剂(羟氯喹和3-甲基腺嘌呤)对人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226增殖、凋亡和自噬的影响。方法:采用不同浓度雷帕霉素(RAPA)、羟氯喹(HCQ)、3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理RPMI 8226细胞,用... 目的:探讨自噬调节药物包括自噬激活剂(雷帕霉素)、自噬抑制剂(羟氯喹和3-甲基腺嘌呤)对人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226增殖、凋亡和自噬的影响。方法:采用不同浓度雷帕霉素(RAPA)、羟氯喹(HCQ)、3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理RPMI 8226细胞,用CCK-8法检测药物对细胞增殖的作用,流式细胞术检测药物作用24 h后细胞凋亡率,应用单丹磺酰戊二胺(MDC)染色观察自噬小体数量,Western blot检测各组细胞自噬相关蛋白LC-3b和凋亡相关蛋白(caspase-3、PARP和BCL-2)的表达情况。结果:RAPA和HCQ可呈时间及剂量依赖性抑制RPMI8226细胞的增殖,并增加细胞的凋亡,而3-MA无明显抑制细胞增殖作用,也无诱导凋亡作用。MDC染色结果显示,细胞内自噬泡数量随着RAPA浓度的提高逐渐增多,而随着HCQ和3-MA浓度升高自噬泡数量却逐渐减少。Western blot结果显示,RAPA可诱导自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和凋亡蛋白caspase-3及PARP表达上调,但抑制抗凋亡蛋白BCL-2表达;HCQ抑制LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和BCL-2表达,但可上调caspase-3和PARP表达;3-MA可下调LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达,但对caspase-3、PARP及BCL-2表达均未显示明显影响。结论:RAPA能抑制RPMI8226细胞增殖,诱导RPMI8226细胞凋亡和自噬,HCQ则在抑制自噬和增殖的同时也可诱导凋亡,3-MA可抑制细胞自噬但对细胞增殖和凋亡影响不大。 展开更多

关键词 自噬 雷帕霉素 羟氯喹 3-MA 骨髓瘤细胞

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DAPT对骨髓瘤细胞RPMI8226增殖和凋亡的影响 被引量：4

13

作者 原莹莹 曾志勇 陈君敏 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期922-925,共4页

本研究旨在探讨DAPT对人多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226体外增殖的抑制作用及相关机制。用CCK-8法检测RPMI8226细胞的增殖率,用流式细胞术检测凋亡率,用Western blot法检测RPMI8226细胞Notchl、Hes1蛋白表达情况。结果表明,DAPT 0.5-5.0μm... 本研究旨在探讨DAPT对人多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226体外增殖的抑制作用及相关机制。用CCK-8法检测RPMI8226细胞的增殖率,用流式细胞术检测凋亡率,用Western blot法检测RPMI8226细胞Notchl、Hes1蛋白表达情况。结果表明,DAPT 0.5-5.0μmol/L作用于RPMI8226细胞24-72 h后,细胞增殖水平明显下降,呈时间和浓度依赖性(r=1.000)。不同浓度的DAPT能诱导RPMI8226细胞发生凋亡,与对照组相比差异有统计学显著性;随着DAPT浓度的增加,Notch1、Hes1蛋白的表达逐渐下调(rNotch=-0.979,rHes1=-0.988)。结论:DAPT能够抑制RPMI8226细胞的增殖,其机制可能与RPMI8226细胞中Notch1、Hes1蛋白的下调有关。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 RPMI8226细胞 DAPT NOTCH信号通路

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DLL4基因对白血病细胞株K562细胞中YY1和c-Myc蛋白表达及细胞增殖的影响 被引量：3

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作者 石丽芳 芮红兵 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第6期1399-1403,共5页

本研究旨在探讨Notch的配体DLL4基因在白血病细胞株K562中对转录因子YY1和原癌基因c-Myc蛋白表达及细胞生长的影响。实验分正常对照组、阴性对照组(转染质粒pBudCE4.1)和实验组(转染质粒pBudCE4.1-DLL4)。转染后48小时,用免疫印迹法和... 本研究旨在探讨Notch的配体DLL4基因在白血病细胞株K562中对转录因子YY1和原癌基因c-Myc蛋白表达及细胞生长的影响。实验分正常对照组、阴性对照组(转染质粒pBudCE4.1)和实验组(转染质粒pBudCE4.1-DLL4)。转染后48小时,用免疫印迹法和免疫细胞化学法检测外源性DLL4瞬时转染表达水平及YY1和c-Myc蛋白的表达水平;用细胞计数试剂盒-8法检测各组细胞的增殖;转染后48小时用流式细胞仪检测各组细胞的周期分布和凋亡。结果表明,在各组K562细胞中均检测到DLL4、YY1和c-Myc蛋白的表达,实验组的DLL4、YY1和c-Myc蛋白表达量比两个对照组显著增多(p<0.05);实验组K562细胞的生长速度明显低于对照组;实验组较对照组G0/G1期细胞增多(p<0.001),凋亡率增加(p<0.001)。结论:DLL4基因能增加细胞转录因子YY1和原癌基因c-Myc蛋白的表达,诱导细胞生长速度减慢、细胞周期停滞于G0/G1期,并能增高凋亡率增加。 展开更多

关键词 DLL4基因 K562细胞 YY1蛋白 -Myc蛋白 白血病

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调节自噬治疗多发性骨髓瘤的研究进展 被引量：4

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作者 杨炳钦 陈君敏 曾志勇 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期700-703,共4页

自噬是真核生物中细胞对异常蛋白质、细胞器降解的过程,其对正常的细胞与肿瘤细胞的生存都有重要影响。研究表明,自噬广泛存在于骨髓瘤细胞的生命活动中,其不仅能保护骨髓瘤细胞,也能诱导其死亡,对骨髓瘤细胞的生存、增殖、侵袭与迁移... 自噬是真核生物中细胞对异常蛋白质、细胞器降解的过程,其对正常的细胞与肿瘤细胞的生存都有重要影响。研究表明,自噬广泛存在于骨髓瘤细胞的生命活动中,其不仅能保护骨髓瘤细胞,也能诱导其死亡,对骨髓瘤细胞的生存、增殖、侵袭与迁移以及多发性骨髓瘤的治疗起着重要的作用。本文就调节自噬水平在治疗多发性骨髓瘤中的研究进展作一综述。 展开更多

关键词 自噬 多发性骨髓瘤 治疗

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NS-398联合硼替佐米对人多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞的增殖抑制作用 被引量：3

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作者 阙文忠 陈君敏 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期1426-1430,共5页

目的:观察NS-398能否增强多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞对硼替佐米(BOR)的化疗敏感性。方法:NS-398与BOR联用后,用MTT法测定对体外培养的RPMI 8226细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测对细胞周期和凋亡的影响;ELISA法检测细胞的Caspase-3活... 目的:观察NS-398能否增强多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞对硼替佐米(BOR)的化疗敏感性。方法:NS-398与BOR联用后,用MTT法测定对体外培养的RPMI 8226细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测对细胞周期和凋亡的影响;ELISA法检测细胞的Caspase-3活性;Cox-2试剂盒定量检测各组细胞Cox-2的活性。结果:NS-398联合BOR对RPMI 8226细胞的增殖抑制率大于单用组(Q>0.85);NS-398联合BOR使RPMI 8226细胞阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率明显高于单用组(Q>1.15);NS-398联合BOR组细胞的Caspase-3的活性高于单用组(Q>1.15)。结论:NS-398具有协同增强BOR体外抗骨髓瘤RPMI 8226细胞的作用。 展开更多

关键词 NS-398 RPMI 8226细胞 硼替佐米 细胞增殖 协同作用

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HIV-1整合酶142-288氨基酸蛋白的表达、纯化及抗原性鉴定

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作者 顾园园 叶德富 +1 位作者 陈君敏 姚小剑 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期616-620,共5页

目的构建人类免疫缺陷病毒I型(HIV-1)整合酶(IN)142-288氨基酸蛋白的原核表达系统,对其进行表达、纯化及抗原性评价。方法采用PCR方法以野生型HIV-1IN表达质粒为模板扩增IN142-288氨基酸cDNA片段。BamHI与XhoI双酶切消化后连接到表达载... 目的构建人类免疫缺陷病毒I型(HIV-1)整合酶(IN)142-288氨基酸蛋白的原核表达系统,对其进行表达、纯化及抗原性评价。方法采用PCR方法以野生型HIV-1IN表达质粒为模板扩增IN142-288氨基酸cDNA片段。BamHI与XhoI双酶切消化后连接到表达载体pGEX-4T1中,构建pGEX-4T1-IN142-288质粒,并进行双酶切与测序鉴定。将该质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达产物经液相层析纯化。将纯化后的IN142-288蛋白免疫BALB/c小鼠,对其抗原性进行评价。结果pGEX-4T1-IN142-288质粒经过双酶切后可见清晰的载体条带和438bp插入的外源基因片段。SDS-PAGE和Western-blot方法对纯化的分析,可见一约40kDa的蛋白条带。ELISA法检测免疫小鼠的抗血清,结果显示3只小鼠均产生了较高滴度的抗体;Western-blot结果显示1号小鼠抗血清可以识别变性转移至NC膜上的野生型HIV-1IN。结论成功构建了pGEX-4T1-IN142-288质粒,在原核表达系统中表达的IN142-288多肽抗原具有良好的抗原性。 展开更多

关键词 人类免疫缺陷病毒I型 整合酶 蛋白纯化

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