灵芝多糖肽对糖尿病肾病小鼠肾脏抗氧化应激及免疫炎症的作用及机制研究 被引量：1

1

作者 蒋丹容 康晓平 +2 位作者 林冬梅 王联福 游育红 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第1期39-45,共7页

目的:研究灵芝多糖肽(GLPP)对糖尿病肾病小鼠肾脏的抗氧化应激和免疫炎症的作用及机制。方法:采用链脲佐菌素联合高糖高脂饮食建立C57雄性小鼠糖尿病肾病模型,将造模成功的60只糖尿病肾病小鼠分为模型组、氯沙坦组、GLPP组(低、中、高... 目的:研究灵芝多糖肽(GLPP)对糖尿病肾病小鼠肾脏的抗氧化应激和免疫炎症的作用及机制。方法:采用链脲佐菌素联合高糖高脂饮食建立C57雄性小鼠糖尿病肾病模型,将造模成功的60只糖尿病肾病小鼠分为模型组、氯沙坦组、GLPP组(低、中、高剂量组)、GLPP高剂量+氯沙坦组,每组10只,正常饮食喂养的10只小鼠作为空白组,氯沙坦组给予10 mg/kg氯沙坦灌胃,GLPP低、中、高剂量组分别给予50、100、200 mg/kg GLPP灌胃,GLPP高剂量+氯沙坦组给予200 mg/kg GLPP+10 mg/kg氯沙坦灌胃,空白组、模型组灌胃生理盐水。灌胃后观察小鼠饮食量、饮水量、肾脏病理、结构及肾小管上皮细胞凋亡情况,并分析小鼠血生化指标、免疫炎症、氧化应激指标水平、细胞凋亡/周期调控蛋白表达量。结果:与空白组比较,模型组血生化指标Scr、BUN、TC、TG、GSP升高(P<0.05),炎症指标IL-6、TNF-α、MCP-1水平降低(P<0.05),氧化应激指标MDA升高,TAOC、GSH-PX、SOD降低(P<0.05),肾小管上皮细胞凋亡率升高(P<0.05),Bax、Caspase-3、P53、P21表达量均升高,Bcl-2、Cyclin D1表达量降低(P<0.05)。与模型组比较,氯沙坦组、GLPP各剂量组、GLPP高剂量+氯沙坦组Scr、BUN、TC、TG、GSP、IL-6、TNF-α、MCP-1、MDA水平、肾小管上皮细胞凋亡率、Bax、Caspase-3、P53、P21表达量均降低,T-AOC、SOD、GSH-PX水平、Bcl-2、Cyclin D1表达量均升高,肾病理改变有所改善,线粒体肿胀程度减轻,其中GLPP高剂量+氯沙坦组改善效果最显著(P<0.05)。结论:GLPP可逆转糖尿病肾病小鼠肾损伤,可能与减轻肾脏氧化应激、免疫炎症损伤来抑制肾小管上皮细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 灵芝多糖肽 糖尿病肾病 肾脏损伤 氧化应激 免疫炎症

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新型化合物XN4抑制急性粒细胞白血病细胞增殖与其诱导氧化性的DNA损伤的关系 被引量：2

2

作者 吴丽贤 黄立森 +3 位作者 陈显凌 柯方 郑鸣 许建华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期478-483,共6页

目的研究XN4在体外抑制急性粒细胞白血病细胞(AML)增殖的作用与诱导DNA损伤的关系。方法 MTT法检测XN4对AML细胞增殖抑制作用;流式细胞术检测AML细胞反应性氧自由基(ROS)、DNA损伤、细胞周期和细胞凋亡;Western blot探讨XN4对相关蛋白... 目的研究XN4在体外抑制急性粒细胞白血病细胞(AML)增殖的作用与诱导DNA损伤的关系。方法 MTT法检测XN4对AML细胞增殖抑制作用;流式细胞术检测AML细胞反应性氧自由基(ROS)、DNA损伤、细胞周期和细胞凋亡;Western blot探讨XN4对相关蛋白表达的影响。结果 XN4明显抑制AML细胞增殖,半数抑制率(IC50)分别为(2.79±0.15)μmol·L-1和(2.76±0.20)μmol·L-1;XN4增加细胞ROS水平和r-H2AX的表达,诱导细胞阻滞在S期并增加细胞凋亡率;XN4能增加H2AX、ATM的磷酸化以及Parp和Caspase-3的切割,而减少CDK2和Cyclin E1的表达。结论 XN4通过激活ROS,诱导DNA的损伤和细胞周期S期阻滞,抑制DNA损伤修复和诱导细胞的凋亡,抑制HL-60及KG1α细胞的增殖,抗氧化剂NAC(N-乙酰半胱氨酸)能减少ROS的产生逆转XN4的作用。 展开更多

关键词 急性粒细胞白血病 DNA损伤 细胞周期阻滞 细胞凋亡

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灵芝多糖肽对人脐静脉内皮细胞氧化损伤的保护作用 被引量：24

3

作者 杨丽娟 游育红 +1 位作者 林志彬 林云峰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期657-660,共4页

目的研究灵芝多糖肽对人脐静脉内皮细胞(HU-VECs)氧化损伤的保护作用。方法原代培养人脐静脉内皮细胞,CD31免疫荧光法鉴定细胞。以叔丁基氢过氧化物(tBOOH)为氧化剂损伤细胞,造成氧化损伤模型,培养液中加入不同浓度灵芝多糖(6.125、12.5... 目的研究灵芝多糖肽对人脐静脉内皮细胞(HU-VECs)氧化损伤的保护作用。方法原代培养人脐静脉内皮细胞,CD31免疫荧光法鉴定细胞。以叔丁基氢过氧化物(tBOOH)为氧化剂损伤细胞,造成氧化损伤模型,培养液中加入不同浓度灵芝多糖(6.125、12.5、25、50、100mg·mL-1),以CCK-8法检测细胞存活率;Hoechst333258检测细胞氧化损伤引起的凋亡;比色法检测Caspase-3活性变化;电镜检测细胞及细胞器形态学改变。结果灵芝多糖(6.125、12.5、25、50、100mg·mL-1)可减轻叔丁基氢过氧化物对HUVECs的氧化损伤,CCK-8检测灵芝多糖给药组,HUVEC细胞存活率增加。Hoechst33258检测给药组细胞凋亡数量较损伤组减少。比色法检测损伤组Caspase-3活性明显增高,给药组较损伤组减少。电镜可见灵芝多糖给药组减轻细胞器的氧化损伤,减少细胞凋亡。结论灵芝多糖肽(GLPP)对人脐静脉内皮细胞氧化损伤具有保护作用。 展开更多

关键词 灵芝多糖肽 人脐静脉内皮细胞 氧化损伤 抗氧化剂 叔丁基氢过氧化物 Hoechst33258 CASPASE3

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黄癸素诱导小鼠黑色素瘤B16细胞凋亡的研究 被引量：22

4

作者 林菁 彭华毅 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1630-1634,共5页

目的探讨黄癸素诱导小鼠黑色素瘤B16细胞凋亡的作用。方法应用MTT法检测黄癸素对体外培养的B16细胞增殖的抑制作用,观察量效及时效关系;通过Rhodamine123染色、琼脂糖凝胶电泳、Hoechst33258染色、caspase-3和caspase-8活性检测,观察黄... 目的探讨黄癸素诱导小鼠黑色素瘤B16细胞凋亡的作用。方法应用MTT法检测黄癸素对体外培养的B16细胞增殖的抑制作用,观察量效及时效关系;通过Rhodamine123染色、琼脂糖凝胶电泳、Hoechst33258染色、caspase-3和caspase-8活性检测,观察黄癸素诱导细胞凋亡的作用和机制。结果黄癸素抑制B16细胞的增殖,具有明显的时间依赖性和浓度依赖性,作用24、48、72h的IC50分别为16.59、9.29和6.22mg·mL-1;B16细胞经黄癸素处理后,出现染色质固缩、DNALadder等凋亡表现,Rhodamine123染色荧光降低和caspase-3、caspase-8活性增强,提示黄癸素引起线粒体膜电位降低可能触发caspases级联反应而导致细胞凋亡。结论黄癸素可抑制B16细胞增殖,诱导B16细胞凋亡。 展开更多

关键词 黄癸素 B16细胞 罗丹明123 Hoechst33258 DNALadder CASPASE 凋亡

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灵芝多糖肽对ECV304细胞氧化损伤的保护作用 被引量：20

5

作者 游育红 林志彬 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1510-1513,共4页

目的研究灵芝多糖肽对ECV304氧化损伤的保护作用。方法培养ECV304细胞,以叔丁基氢过氧化物(tBOOH)为氧化剂损伤细胞,造成氧化损伤模型,培养液中加入不同浓度灵芝多糖(12.5、25、50、100mg.L-1),以MTT法测细胞存活率;以光镜、电镜检测细... 目的研究灵芝多糖肽对ECV304氧化损伤的保护作用。方法培养ECV304细胞,以叔丁基氢过氧化物(tBOOH)为氧化剂损伤细胞,造成氧化损伤模型,培养液中加入不同浓度灵芝多糖(12.5、25、50、100mg.L-1),以MTT法测细胞存活率;以光镜、电镜检测细胞形态学改变及线粒体损伤;用AnnexinV/PI双标记细胞,流式细胞检测细胞凋亡的百分率。结果灵芝多糖(12.5、25、50、100mg.L-1)可减少叔丁基氢过氧化物对ECV304的氧化损伤,MTT检测灵芝多糖给药组,ECV304细胞存活率增加。光镜下可见细胞损伤减少,电镜可见灵芝多糖(50mg.L-1,温育24h)减轻细胞器如线粒体氧化损伤,减少细胞凋亡。细胞流式检测表明:对照组、给药组、损伤组总凋亡百分率分别2.24%±0.43%、24%±6.4%(P<0.01)、82.1%±7.9%。结论灵芝多糖肽(GLPP)对ECV304细胞氧化损伤具有保护作用。 展开更多

关键词 灵芝多糖肽 ECV304 氧化损伤 线粒体 凋亡 流式细胞

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姜黄素-聚维酮固体分散体的抗肿瘤作用及其对血管形成的影响(英文) 被引量：4

6

作者 陈纯 黄秀旺 +1 位作者 蔡华晶 许建华 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1029-1036,共8页

目的:观察姜黄素-聚维酮固体分散体新剂型(Cur-K30)的体内外抗肿瘤作用及其对肿瘤血管形成的影响。方法:应用MTT法测定Cur-K30体外对多种肿瘤细胞的抑制作用;观察Cur-K30不同剂量[50,100,200mg/(kg·d)]口服给药对小鼠荷瘤模型的抑... 目的:观察姜黄素-聚维酮固体分散体新剂型(Cur-K30)的体内外抗肿瘤作用及其对肿瘤血管形成的影响。方法:应用MTT法测定Cur-K30体外对多种肿瘤细胞的抑制作用;观察Cur-K30不同剂量[50,100,200mg/(kg·d)]口服给药对小鼠荷瘤模型的抑瘤作用;应用免疫组织化学方法检测瘤组织的微血管密度(CD34)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达,并应用Imageproplus免疫组织化学软件定量分析。结果:Cur-K30抑制多种肿瘤细胞的增殖,其48h的IC50为6.6～12.12μg/mL;200mg/(kg·d)Cur-K30灌胃对小鼠肝癌H22移植瘤、小鼠黑色素瘤B16移植瘤和裸鼠SW480的抑制率分别为43.2%,53.1%,59.8%,抑瘤率高于同剂量姜黄素(Cur)混悬液灌胃组,差别均具有统计学意义(P<0.01);200mg/(kg.d)Cur-K30组的瘤组织中CD34和VEGF的表达较对照组明显下调(P<0.01)。结论:Cur-K30具有明显的体内抗肿瘤作用,其对裸鼠人癌细胞SW480移植瘤的抑制作用显著。Cur-K30的抗肿瘤作用可能与其下调瘤组织中VEGF的表达及抑制肿瘤血管生成有关。 展开更多

关键词 姜黄素 固体分散体 抗肿瘤 抗血管形成

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人脑星形细胞肿瘤CD133和巢蛋白阳性细胞的分布特征 被引量：1

7

作者 胡胜利 杨丽娟 +3 位作者 林志雄 王伟 何理盛 康德智 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2009年第5期484-488,共5页

目的探讨CDl33和巢蛋白阳性细胞在人脑星形细胞肿瘤中的分布特征。方法采集不同级别星形细胞肿瘤标本31例,免疫组织化学染色检测其胶质瘤干细胞标志物CD133和巢蛋白表达水平,光学显微镜下观察CD133和巢蛋白阳性细胞在不同级别星形细胞... 目的探讨CDl33和巢蛋白阳性细胞在人脑星形细胞肿瘤中的分布特征。方法采集不同级别星形细胞肿瘤标本31例,免疫组织化学染色检测其胶质瘤干细胞标志物CD133和巢蛋白表达水平,光学显微镜下观察CD133和巢蛋白阳性细胞在不同级别星形细胞肿瘤中的分布特征。结果不同级别肿瘤之间和同一肿瘤不同区域之间CD133阳性细胞的分布呈现极大变异性,低级别星形细胞肿瘤完全不表达或仅单个细胞表达,高级别星形细胞肿瘤成簇表达,其特异性分布特征为CDl33阳性细胞围绕微血管分布,单个细胞贴附于血管外壁,在肿瘤周围水肿区域亦可呈散在分布而不贴附于血管外壁;簇状或:巢状分布的CD133阳性细胞均位于近血管区域,CD133阳性细胞形态亦不尽一致,无论是新生发芽的肿瘤性血管内皮细胞还是成熟的血管内皮细胞均不表达CD133。巢蛋白阳性细胞在不同级别肿瘤之间和同一肿瘤不同区域之间具有与CD133阳性细胞相似的分布特征,但新生发芽的肿瘤性血管内皮细胞巢蛋白表达阳性;变性肿瘤中巢蛋白阳性细胞可呈"开屏状"分布,而CD133阳性细胞未见类似分布。结论 CD133和巢蛋白阳性细胞在人脑星形细胞肿瘤中呈现近微血管分布和富集于肿瘤周围水肿区域的分布特征,新生发芽的肿瘤性血管内皮细胞巢蛋白表达阳性。 展开更多

关键词 脑肿瘤 星形细胞瘤 肿瘤干细胞 免疫组织化学

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内皮抑素对胶质瘤病理特征影响的实验研究

8

作者 杨丽娟 翁绳美 +1 位作者 陈崇宏 林志雄 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1356-1361,共6页

目的探讨内皮抑素对胶质瘤病理特征的影响及分子药理学机制。方法利用经抗性筛选可表达内皮抑素的C6细胞裸鼠皮下注射制作胶质瘤模型,光镜和电镜观察其病理特征,ELISA法检测瘤组织中VEGF含量。结果转染有内皮抑素cDNA片段的C6胶质瘤组织... 目的探讨内皮抑素对胶质瘤病理特征的影响及分子药理学机制。方法利用经抗性筛选可表达内皮抑素的C6细胞裸鼠皮下注射制作胶质瘤模型,光镜和电镜观察其病理特征,ELISA法检测瘤组织中VEGF含量。结果转染有内皮抑素cDNA片段的C6胶质瘤组织中VEGF含量明显低于仅转染有空载体的C6胶质瘤组(P<0.01)。前者肿瘤边界清楚,瘤体未见明显的出血和囊性变,瘤体和瘤周均无明显的水肿;瘤组织内血管稀少,未见类微血管样结构;瘤体内可见大片不规则坏死,但坏死灶周和瘤周均无明显的血管反应,瘤周侵袭少见,可见凋亡瘤细胞;血管内皮细胞胞质内未见内VVO样结构,基板不连续,基底膜疏松。而仅转染有空载体的C6胶质瘤瘤周血管反应明显,瘤体和瘤周水肿严重,瘤细胞可侵袭瘤周组织,瘤内组织明显出血坏死,且可见瘤细胞形成类微血管样结构,血管内皮细胞胞质内VVO样结构较多,水肿越明显VVO样结构越多见,并与移植瘤组织中VEGF表达相一致,血管基板完整、连续,多数基质疏松,呈多层排列,外层可见少量胶原纤维。所观察的几种肿瘤中的微血管内皮细胞孔窗及血管周胶原纤维与转染的目的基因无明显的关系,且内皮细胞的凋亡均不明显。结论内皮抑素不会直接诱导胶质瘤组织内血管内皮细胞的凋亡,但可通过诱导VEGF的表达的下调而抑制瘤周血管反应和肿瘤新血管的生成。 展开更多

关键词 胶质瘤 内皮抑素/分子药理学 病理学 组织重构

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Survivin 反义核酸联合紫杉醇对皮下荷瘤Balb/c 小鼠模型的治疗作用

9

作者 吴丽贤 黄立森 +2 位作者 陈瑞家 田崛 柯方 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期467-471,共5页

目的研究survivin反义核酸与紫杉醇联合应用对皮下荷瘤Bal b/c小鼠模型的治疗作用,并初步探讨对其抗癌作用的机制。方法在Bal b/c小鼠皮下注射C26细胞,建立皮下瘤模型,采用瘤内注射的方式,将实验分空白组(C)、lipo2000对照组(L)、紫杉醇... 目的研究survivin反义核酸与紫杉醇联合应用对皮下荷瘤Bal b/c小鼠模型的治疗作用,并初步探讨对其抗癌作用的机制。方法在Bal b/c小鼠皮下注射C26细胞,建立皮下瘤模型,采用瘤内注射的方式,将实验分空白组(C)、lipo2000对照组(L)、紫杉醇组(T)、survivin反义核酸组(A)、survivin反义核酸联合紫杉醇组(A+T)5个不同组,观察肿瘤的生长状态,TUNEL法检测凋亡细胞,Western blot法检测survivin蛋白表达。结果 1各治疗组均达到了(T/C)<60%,与L组比较差异有统计学意义(P<0.05),体内证实给药干预有效;小鼠瘤重的抑瘤率结果显示,与C组比较,T、A、A+T各给药组均能抑制小鼠瘤重,差异具有统计学意义(P<0.05),从抑制肿瘤质量增长方面而言,二者联合用药[瘤重抑瘤率为(54.16±0.32)%]将紫杉醇[瘤重抑瘤率为(21.82±0.84)%]的抗癌活性提高了59%以上;2TUNEL法检测凋亡细胞:空白对照组几乎没有肿瘤细胞凋亡。T组及A组有一定量的凋亡细胞,以上试验结果提示,紫杉醇具有促进肿瘤细胞凋亡的能力,A+T不仅加强了对肿瘤细胞的杀伤作用,而且二者的协同作用可能对肿瘤耐药性有所影响,最终使得其促肿瘤细胞凋亡的作用尤为显著;3survivin蛋白表达:结果显示,A+T组survivin蛋白的表达明显降低,而不影响β-actin的表达,C组和L组相比无明显变化,T组、A组、A+T组A值的比值分别为0.895±0.011、0.704±0.121、0.345±0.019,经方差分析,A+T组与C、L、A、T组的表达量差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 survivin反义核酸与紫杉醇联合用药,可能通过下调survivin蛋白的表达从而促进肿瘤细胞凋亡,联合用药可降低机体耐药性,发挥协同作用。 展开更多

关键词 皮下荷瘤 SURVIVIN 反义核酸 紫杉醇 联合用药 细胞凋亡

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BMS-345541对急性粒细胞白血病细胞DNA损伤修复的影响 被引量：6

10

作者 田崛 陈显凌 +3 位作者 庄英婷 范莹娟 许建华 吴丽贤 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期763-769,共7页

目的体外研究BMS-345541对急性粒细胞白血病(AML)细胞DNA损伤修复的影响及其可能的作用机制。方法MTT法检测VP-16作用于AML细胞,加入或不加入BMS-345541对该细胞增殖抑制的影响;流式细胞术检测BMS-345541对AML细胞DNA损伤修复、细胞周... 目的体外研究BMS-345541对急性粒细胞白血病(AML)细胞DNA损伤修复的影响及其可能的作用机制。方法MTT法检测VP-16作用于AML细胞,加入或不加入BMS-345541对该细胞增殖抑制的影响;流式细胞术检测BMS-345541对AML细胞DNA损伤修复、细胞周期阻滞和细胞凋亡的影响;高内涵观察不同处理组γ-H2AX、p-ATM、RAD51募集在断裂位点的焦点情况。结果联合用药组比单用VP-16组对细胞的增殖抑制作用强;流式检测加入BMS-345541组比不加入组的γ-H2AX比例高,且加入BMS-345541组能够抑制VP-16导致的AML细胞G2/M期阻滞,增加细胞的凋亡率;高内涵检测断裂位点的p-ATM及RAD51的荧光焦点,6 h后,加入BMS-345541组比修复组的焦点的平均荧光强度和平均荧光面积高。结论 VP-16导致AML细胞产生DNA损伤,加入BMS-345541,能通过抑制HR通路来抑制细胞DNA损伤修复。 展开更多

关键词 IKKΒ BMS-345541 DNA损伤 Γ-H2AX p-ATM RAD51

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灵芝多糖肽对培养乳大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用 被引量：6

11

作者 毛慧慧 游育红 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期398-403,共6页

目的研究灵芝多糖肽（GLPP）对培养乳大鼠心肌细胞缺氧/复氧（H/R）损伤的保护作用。方法用出生1~3 d的SD乳大鼠进行心肌细胞原代培养,取培养3~4 d的心肌细胞分为正常对照组、H/R组和GLPP给药组（12.5,25,50和100 mg·L-1）。MTT法... 目的研究灵芝多糖肽（GLPP）对培养乳大鼠心肌细胞缺氧/复氧（H/R）损伤的保护作用。方法用出生1~3 d的SD乳大鼠进行心肌细胞原代培养,取培养3~4 d的心肌细胞分为正常对照组、H/R组和GLPP给药组（12.5,25,50和100 mg·L-1）。MTT法检测细胞存活率;电镜检测细胞形态改变和线粒体损伤;用AnnexinⅤ-FITC/PI双标记细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡百分率;以Fluo-3/AM荧光指示剂负载,用激光扫描共聚焦显微镜观察心肌细胞内钙离子荧光强度变化;以活性氧（ROS）敏感的荧光探针2,7-二氢二氯荧光素（DCFH-DA）标记细胞,激光共聚焦显微镜下观察ROS含量变化。结果与正常对照组比较,H/R组细胞存活率降低（P〈0.05）;GLPP 12.5,25,50和100 mg·L-1组细胞存活率与H/R组比较明显增加（P〈0.01）。与正常对照组比较,H/R组可见线粒体损伤,GLPP给药组可以减轻线粒体损伤。流式细胞仪检测结果表明,与正常对照组比较,H/R组细胞凋亡率增加（P〈0.01）;GLPP组与H/R组比较细胞凋亡率明显减小（P〈0.01）。与正常对照组比较,H/R组[Ca2＋]i增加,细胞内ROS含量增高（P〈0.01）;与H/R组比较,GLPP给药组细胞[Ca2＋]i减少,细胞内ROS含量降低（P〈0.01）。结论GLPP对H/R损伤的乳大鼠心肌细胞具有保护作用,其作用机制可能与减少细胞内自由基含量和减轻细胞内钙超负荷有关。 展开更多

关键词 灵芝多糖肽 心肌细胞 缺氧 复氧 细胞凋亡 细胞内钙离子 活性氧

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新生霉素通过诱导DNA损伤抑制慢粒白血病细胞增殖 被引量：3

12

作者 黄立森 陈显凌 +4 位作者 柯方 许建文 郑鸣 许建华 吴丽贤 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期69-76,共8页

目的研究新生霉素(novobiocin,Nov)在体外抑制慢粒白血病(CML)细胞增殖作用与诱导DNA损伤的关系。方法MTT及羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)染色法检测Nov对CML细胞增殖的影响;流式细胞术检测CML细胞反应性氧自由基(ROS)含量、DN... 目的研究新生霉素(novobiocin,Nov)在体外抑制慢粒白血病(CML)细胞增殖作用与诱导DNA损伤的关系。方法MTT及羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)染色法检测Nov对CML细胞增殖的影响;流式细胞术检测CML细胞反应性氧自由基(ROS)含量、DNA损伤数量、细胞周期阻滞情况和细胞凋亡的比例;Western blot探讨Nov对DNA损伤、细胞周期和细胞凋亡调控通路相关蛋白表达的影响。结果 Nov明显抑制CML细胞增殖,半数抑制率(IC50)分别为(232.50±0.22)μmol·L-1和(237.10±0.13)μmol·L-1,减少CML细胞的增殖分裂代数;Nov增加细胞ROS水平,诱导细胞阻滞在G2/M期并增加凋亡率,呈剂量依赖关系;Nov增加H2AX、ATM、P53的磷酸化水平以及Parp和Caspase-3的切割,而减少CDC25A和CDC25C的表达。结论Nov通过激活ROS产生,诱导CML细胞DNA的损伤和线粒体途径激活的细胞凋亡。 展开更多

关键词 新生霉素 ROS DNA损伤 r-H2AX 细胞周期检测点 细胞周期阻滞 凋亡

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钙蛋白酶小亚基Capn4在鼻咽癌细胞CNE2中DNA损伤修复的作用 被引量：1

13

作者 王慧 王丰 +1 位作者 吴丽贤 郑鸣 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第3期291-295,共5页

目的研究钙蛋白酶小亚基Capn4对放射所致的鼻咽癌细胞CNE2在DNA损伤修复中的作用及可能影响的修复通路。方法选取鼻咽癌细胞CNE2与293T细胞在37℃、5%CO_2条件下培养,Western blot法检测Capn4在不同细胞中蛋白表达水平;构建sh RNA下调Ca... 目的研究钙蛋白酶小亚基Capn4对放射所致的鼻咽癌细胞CNE2在DNA损伤修复中的作用及可能影响的修复通路。方法选取鼻咽癌细胞CNE2与293T细胞在37℃、5%CO_2条件下培养,Western blot法检测Capn4在不同细胞中蛋白表达水平;构建sh RNA下调Capn4表达的CNE2细胞并以Western blot法验证;高内涵细胞成像分析仪分析γ-H2AX在放射后的CNE2细胞及下调Capn4表达的CNE2细胞中的平均荧光强度;非同源末端连接(NHEJ)通路特异性的质粒EJ5-GFP用Fugen6 HD转入空载的CNE2细胞及下调Capn4的CNE2细胞,用高内涵细胞成像分析仪检测GFP的阳性率,观察下调Capn4对放射诱导的鼻咽癌细胞DNA损伤NHEJ修复通路的影响。结果 Capn4在鼻咽癌细胞系中表达明显高于正常细胞(P<0.01);sh RNA确实下调Capn4在鼻咽癌细胞中的表达;下调Capn4表达对放射造成的CNE2细胞DNA损伤修复有抑制作用(P<0.01);下调Capn4表达能够抑制CNE2细胞DNA损伤后NHEJ通路的修复(P<0.01)。结论 Capn4在鼻咽癌细胞CNE2中高表达,下调Capn4的表达能抑制放射所致的DNA损伤修复,这种作用可能是通过抑制NHEJ通路实现的。 展开更多

关键词 Capn4 鼻咽癌 放射 SHRNA NHEJ通路

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姜黄素对酵母细胞影响的荧光分析 被引量：1

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作者 陈晶鑫 连文华 +2 位作者 程元初 许建华 张连茹 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2018年第1期71-77,共7页

以最简单的真核生物——酿酒酵母为材料,利用姜黄素的荧光性质,借助荧光光谱法和荧光显微镜研究了姜黄素在酵母细胞中的定位及其对酵母生长的影响.结果表明,姜黄素可以进入酵母细胞中并抑制酵母生长,初步得到了姜黄素对酵母作用的量效... 以最简单的真核生物——酿酒酵母为材料,利用姜黄素的荧光性质,借助荧光光谱法和荧光显微镜研究了姜黄素在酵母细胞中的定位及其对酵母生长的影响.结果表明,姜黄素可以进入酵母细胞中并抑制酵母生长,初步得到了姜黄素对酵母作用的量效关系和时间效应结果,证明了姜黄素可以与酵母细胞线粒体结合.本文结果为以酵母为模型研究姜黄素通过线粒体影响细胞代谢及其与细胞凋亡的关系奠定了基础. 展开更多

关键词 姜黄素 酿酒酵母菌 线粒体 荧光光谱

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