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蛋白沉淀-高效液相色谱法筛查血浆中61种常见的中枢神经系统药物 被引量:9
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作者 张吟 陈崇宏 +1 位作者 林玲 陈一农 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期787-793,共7页
建立了利用蛋白沉淀提取血浆中61种常见的中枢神经系统药物并用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)分析的方法。1mL血浆样品中加入1.5mL乙腈,旋涡混合后,离心,上清液过滤后直接采用HPLC测定。选用Agilent TC-C18色谱柱(250mm×... 建立了利用蛋白沉淀提取血浆中61种常见的中枢神经系统药物并用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)分析的方法。1mL血浆样品中加入1.5mL乙腈,旋涡混合后,离心,上清液过滤后直接采用HPLC测定。选用Agilent TC-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以磷酸盐缓冲液和乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速1.5mL/min,柱温35℃,检测波长210nm。61种药物的回收率均大于80%,相对标准偏差为0.94%~11.23%。采用乙腈沉淀蛋白,方法简便、快速、回收率高且稳定,能够作为系统毒物分析的通用前处理方法。该蛋白沉淀方法与HPLC-DAD技术结合,可应用于61种药物的分析。 展开更多
关键词 蛋白沉淀 高效液相色谱法 系统毒物分析 常见中枢神经系统药物 药物筛查 血浆
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姜黄素类似物合成与体外抗肿瘤活性研究 被引量:2
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作者 刘洋 许建华 +2 位作者 黄秀旺 刘锋 吴梅花 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期923-927,共5页
以芳香醛、4-哌啶酮为原料,Claisen-Schimidt缩合制备3,5-(E)-二亚苄基哌啶-4-酮类化合物。采用MTT法测试目标化合物对人类慢性粒细胞白血病急变细胞K562,人结肠癌细胞SW1116增殖的抑制活性。化合物1-19的结构经核磁和质谱确证,化合物7... 以芳香醛、4-哌啶酮为原料,Claisen-Schimidt缩合制备3,5-(E)-二亚苄基哌啶-4-酮类化合物。采用MTT法测试目标化合物对人类慢性粒细胞白血病急变细胞K562,人结肠癌细胞SW1116增殖的抑制活性。化合物1-19的结构经核磁和质谱确证,化合物7、10、11对SW1116的抑制活性比EF-24强,化合物1-5、9、14、18对K562的抑制活性均比EF-24强。 展开更多
关键词 姜黄素 姜黄素类似物 EF-24 3 5-(E)-二亚苄基哌啶-4-酮 抗肿瘤活性
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褪黑素对冈田酸毒性拟阿尔茨海默病大鼠脑突触超微结构的改善作用 被引量:2
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作者 吴敏霞 许盈 +2 位作者 周琳瑛 林曦 胡祥炬 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期726-730,共5页
在冈田酸(okadaic acid,OA)毒性拟阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)大鼠模型上,探讨褪黑素(melatonin,MT)对AD动物模型学习记忆能力、海马和皮质神经元及突触超微结构的改善作用,初步阐明MT抗AD作用与对脑突触超微结构的保护作用... 在冈田酸(okadaic acid,OA)毒性拟阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)大鼠模型上,探讨褪黑素(melatonin,MT)对AD动物模型学习记忆能力、海马和皮质神经元及突触超微结构的改善作用,初步阐明MT抗AD作用与对脑突触超微结构的保护作用的关系。 展开更多
关键词 褪黑素 冈田酸 阿尔茨海默病 超微结构
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钙调蛋白小亚基Capn4在鼻咽癌细胞中的表达及对CNE2细胞增殖的影响 被引量:2
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作者 王丰 郑鸣 +2 位作者 郑培婵 吴丽贤 王慧 《山西医科大学学报》 CAS 2016年第5期434-438,共5页
目的研究钙调蛋白小亚基Capn4在鼻咽癌病理组织及鼻咽癌细胞CNE2中的表达,并观察Capn4对顺铂作用后细胞增殖的改变。方法收集153例鼻咽癌组织及30例非癌鼻咽组织的石蜡标本,所有患者均未进行放化疗,免疫组化法检测Capn4在鼻咽癌组织及... 目的研究钙调蛋白小亚基Capn4在鼻咽癌病理组织及鼻咽癌细胞CNE2中的表达,并观察Capn4对顺铂作用后细胞增殖的改变。方法收集153例鼻咽癌组织及30例非癌鼻咽组织的石蜡标本,所有患者均未进行放化疗,免疫组化法检测Capn4在鼻咽癌组织及非鼻咽癌组织中的表达;选取鼻咽癌细胞CNE2与293T细胞在37℃、5%CO_2条件下培养,Western blot法检测不同细胞中Capn4蛋白表达水平;构建shRNA下调Capn4表达的CNE2细胞并以Western blot法验证;MTT法检测顺铂作用下,shRNA下调Capn4的鼻咽癌细胞增殖改变。结果 Capn4在鼻咽癌组织中的表达显著高于正常鼻咽组织(P<0.001),在鼻咽癌细胞系中表达明显高于293T细胞;shRNA确实下调Capn4在鼻咽癌细胞中的表达;DNA损伤药物顺铂作用下,下调Capn4表达的鼻咽癌细胞CNE2较之未下调的CNE2细胞增殖受抑制(P<0.05)结论 Capn4在鼻咽癌组织和细胞中高表达,下调Capn4表达能抑制顺铂作用后的细胞增殖。 展开更多
关键词 Capn4 鼻咽癌 顺铂 SHRNA
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钙调蛋白小亚基Capn4对依托铂甙诱导的鼻咽癌细胞CNE2 DNA损伤修复的作用 被引量:1
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作者 王丰 王慧 +1 位作者 吴丽贤 郑鸣 《山西医科大学学报》 CAS 2017年第7期685-690,共6页
目的研究钙调蛋白小亚基Capn4对依托铂甙(VP-16)诱导的鼻咽癌细胞CNE2 DNA损伤修复中的作用及可能影响的修复通路。方法构建shRNA下调Capn4表达的CNE2细胞并以Western blot法验证;高内涵检测γ-H2AX在CNE2细胞及下调Capn4表达的CNE2细... 目的研究钙调蛋白小亚基Capn4对依托铂甙(VP-16)诱导的鼻咽癌细胞CNE2 DNA损伤修复中的作用及可能影响的修复通路。方法构建shRNA下调Capn4表达的CNE2细胞并以Western blot法验证;高内涵检测γ-H2AX在CNE2细胞及下调Capn4表达的CNE2细胞中的平均荧光强度,分析下调Capn4对VP-16诱导的CNE2细胞DNA损伤修复的作用;NHEJ(非同源重组修复)通路特异性的质粒EJ5-GFP用Fugen6 HD转入CNE2细胞及下调Capn4的CNE2细胞,用高内涵仪检测GFP的阳性率,观察下调Canp4对VP-16诱导的鼻咽癌细胞DNA损伤NHEJ修复通路的影响。结果 shRNA确实下调Capn4在鼻咽癌细胞中的表达。2.5μmol/L VP-16处理CNE2^(Vector)细胞和CNE2^(Capn4(-))细胞后6 h和12 h,CNE2^(Capn4(-))的损伤都较空载体的CNE2^(Vector)细胞高;下调Capn4表达对VP-16造成的CNE2细胞DNA损伤修复有抑制作用(P<0.01)。2.5μmol/L VP-16作用后,CNE2^(Capn4(-))细胞与CNE2^(Vector)细胞相比较GFP平均荧光强度明显更低;下调CNE2表达能够抑制DNA损伤后NHEJ通路的修复(P<0.01)。结论在鼻咽癌细胞中下调Capn4的表达能抑制VP-16所致的DNA损伤修复,这种作用可能是通过抑制NHEJ通路实现的。 展开更多
关键词 Capn4 鼻咽癌 VP-16 shRNA NHEJ通路
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钙调蛋白小亚基Capn4对依托铂甙诱导的鼻咽癌细胞CNE2 DNA损伤修复NHEJ通路相关蛋白的作用
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作者 王丰 王慧 +1 位作者 吴丽贤 郑鸣 《山西医科大学学报》 CAS 2019年第8期1093-1099,共7页
目的研究钙调蛋白小亚基Capn4对依托铂甙(VP-16)诱导的鼻咽癌细胞CNE2 DNA损伤修复NHEJ通路相关蛋白Ku80及DNApks的作用,以及对裸鼠体内成瘤的影响。方法高内涵分析仪检测空载的CNE2细胞及下调Capn4的CNE2细胞中非同源重组NHEJ修复通路... 目的研究钙调蛋白小亚基Capn4对依托铂甙(VP-16)诱导的鼻咽癌细胞CNE2 DNA损伤修复NHEJ通路相关蛋白Ku80及DNApks的作用,以及对裸鼠体内成瘤的影响。方法高内涵分析仪检测空载的CNE2细胞及下调Capn4的CNE2细胞中非同源重组NHEJ修复通路的特异性质粒EJ5-GFP的阳性率;检测空载的CNE2细胞及下调Capn4表达的CNE2细胞在VP16诱导后Ku80的表达;实时荧光定量PCR检测空载的CNE2细胞及下调Capn4表达的CNE2细胞的Ku80转录水平的变化;体内异种移植空载的CNE2细胞及下调Capn4的CNE2细胞后观察VP-16对鼻咽癌肿瘤质量大小的影响及抑瘤率。结果高内涵分析显示下调Capn4的表达能够抑制CNE2细胞DNA损伤后NHEJ修复通路的GFP阳性率(P<0.01);下调Capn4表达后VP16诱导的CNE2细胞NHEJ通路相关蛋白Ku80、DNApks的表达下降(P<0.01);下调Capn4表达能下调裸鼠成瘤后肿瘤的体积与质量(P<0.01)。结论Capn4对NHEJ通路的抑制与通路相关蛋白Ku80、DNApks有关;下调Capn4的表达能够抑制鼻咽癌肿瘤生长、增加鼻咽癌对放化疗的敏感。 展开更多
关键词 Capn4 鼻咽癌 VP-16 NHEJ通路 KU80 DNApks
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