灵芝多糖肽对糖尿病肾病小鼠肾脏抗氧化应激及免疫炎症的作用及机制研究 被引量：4

1

作者 蒋丹容 康晓平 +2 位作者 林冬梅 王联福 游育红 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第1期39-45,共7页

目的:研究灵芝多糖肽(GLPP)对糖尿病肾病小鼠肾脏的抗氧化应激和免疫炎症的作用及机制。方法:采用链脲佐菌素联合高糖高脂饮食建立C57雄性小鼠糖尿病肾病模型,将造模成功的60只糖尿病肾病小鼠分为模型组、氯沙坦组、GLPP组(低、中、高... 目的:研究灵芝多糖肽(GLPP)对糖尿病肾病小鼠肾脏的抗氧化应激和免疫炎症的作用及机制。方法:采用链脲佐菌素联合高糖高脂饮食建立C57雄性小鼠糖尿病肾病模型,将造模成功的60只糖尿病肾病小鼠分为模型组、氯沙坦组、GLPP组(低、中、高剂量组)、GLPP高剂量+氯沙坦组,每组10只,正常饮食喂养的10只小鼠作为空白组,氯沙坦组给予10 mg/kg氯沙坦灌胃,GLPP低、中、高剂量组分别给予50、100、200 mg/kg GLPP灌胃,GLPP高剂量+氯沙坦组给予200 mg/kg GLPP+10 mg/kg氯沙坦灌胃,空白组、模型组灌胃生理盐水。灌胃后观察小鼠饮食量、饮水量、肾脏病理、结构及肾小管上皮细胞凋亡情况,并分析小鼠血生化指标、免疫炎症、氧化应激指标水平、细胞凋亡/周期调控蛋白表达量。结果:与空白组比较,模型组血生化指标Scr、BUN、TC、TG、GSP升高(P<0.05),炎症指标IL-6、TNF-α、MCP-1水平降低(P<0.05),氧化应激指标MDA升高,TAOC、GSH-PX、SOD降低(P<0.05),肾小管上皮细胞凋亡率升高(P<0.05),Bax、Caspase-3、P53、P21表达量均升高,Bcl-2、Cyclin D1表达量降低(P<0.05)。与模型组比较,氯沙坦组、GLPP各剂量组、GLPP高剂量+氯沙坦组Scr、BUN、TC、TG、GSP、IL-6、TNF-α、MCP-1、MDA水平、肾小管上皮细胞凋亡率、Bax、Caspase-3、P53、P21表达量均降低,T-AOC、SOD、GSH-PX水平、Bcl-2、Cyclin D1表达量均升高,肾病理改变有所改善,线粒体肿胀程度减轻,其中GLPP高剂量+氯沙坦组改善效果最显著(P<0.05)。结论:GLPP可逆转糖尿病肾病小鼠肾损伤,可能与减轻肾脏氧化应激、免疫炎症损伤来抑制肾小管上皮细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 灵芝多糖肽 糖尿病肾病 肾脏损伤 氧化应激 免疫炎症

在线阅读 下载PDF 职称材料

蛋白沉淀-高效液相色谱法筛查血浆中61种常见的中枢神经系统药物 被引量：9

2

作者 张吟 陈崇宏 +1 位作者 林玲 陈一农 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期787-793,共7页

建立了利用蛋白沉淀提取血浆中61种常见的中枢神经系统药物并用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)分析的方法。1mL血浆样品中加入1.5mL乙腈,旋涡混合后,离心,上清液过滤后直接采用HPLC测定。选用Agilent TC-C18色谱柱(250mm×... 建立了利用蛋白沉淀提取血浆中61种常见的中枢神经系统药物并用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)分析的方法。1mL血浆样品中加入1.5mL乙腈,旋涡混合后,离心,上清液过滤后直接采用HPLC测定。选用Agilent TC-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以磷酸盐缓冲液和乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速1.5mL/min,柱温35℃,检测波长210nm。61种药物的回收率均大于80%,相对标准偏差为0.94%～11.23%。采用乙腈沉淀蛋白,方法简便、快速、回收率高且稳定,能够作为系统毒物分析的通用前处理方法。该蛋白沉淀方法与HPLC-DAD技术结合,可应用于61种药物的分析。 展开更多

关键词 蛋白沉淀 高效液相色谱法 系统毒物分析 常见中枢神经系统药物 药物筛查 血浆

在线阅读 下载PDF 职称材料

新型化合物XN4抑制急性粒细胞白血病细胞增殖与其诱导氧化性的DNA损伤的关系 被引量：2

3

作者 吴丽贤 黄立森 +3 位作者 陈显凌 柯方 郑鸣 许建华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期478-483,共6页

目的研究XN4在体外抑制急性粒细胞白血病细胞(AML)增殖的作用与诱导DNA损伤的关系。方法 MTT法检测XN4对AML细胞增殖抑制作用;流式细胞术检测AML细胞反应性氧自由基(ROS)、DNA损伤、细胞周期和细胞凋亡;Western blot探讨XN4对相关蛋白... 目的研究XN4在体外抑制急性粒细胞白血病细胞(AML)增殖的作用与诱导DNA损伤的关系。方法 MTT法检测XN4对AML细胞增殖抑制作用;流式细胞术检测AML细胞反应性氧自由基(ROS)、DNA损伤、细胞周期和细胞凋亡;Western blot探讨XN4对相关蛋白表达的影响。结果 XN4明显抑制AML细胞增殖,半数抑制率(IC50)分别为(2.79±0.15)μmol·L-1和(2.76±0.20)μmol·L-1;XN4增加细胞ROS水平和r-H2AX的表达,诱导细胞阻滞在S期并增加细胞凋亡率;XN4能增加H2AX、ATM的磷酸化以及Parp和Caspase-3的切割,而减少CDK2和Cyclin E1的表达。结论 XN4通过激活ROS,诱导DNA的损伤和细胞周期S期阻滞,抑制DNA损伤修复和诱导细胞的凋亡,抑制HL-60及KG1α细胞的增殖,抗氧化剂NAC(N-乙酰半胱氨酸)能减少ROS的产生逆转XN4的作用。 展开更多

关键词 急性粒细胞白血病 DNA损伤 细胞周期阻滞 细胞凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

新生霉素抑制HL-60／Bcr-Abl细胞增殖与阻断Hsp90伴侣功能的关系 被引量：1

4

作者 吴丽贤 许建华 +2 位作者 张昆仲 温彩霞 黄秀旺 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期14-19,共6页

目的研究新生霉素(novobiocin,NB)对HL-60/Bcr-Abl细胞的作用,并探讨该作用是否与Bcr-Abl水平和热休克蛋白90(Hsp90)分子伴侣的功能有关。方法用蛋白免疫印迹法检测Bcr-Abl的含量,采用免疫共沉淀的方法研究Hsp90分子伴侣的功能。先将Bcr... 目的研究新生霉素(novobiocin,NB)对HL-60/Bcr-Abl细胞的作用,并探讨该作用是否与Bcr-Abl水平和热休克蛋白90(Hsp90)分子伴侣的功能有关。方法用蛋白免疫印迹法检测Bcr-Abl的含量,采用免疫共沉淀的方法研究Hsp90分子伴侣的功能。先将Bcr-Abl与其分子伴侣共沉淀下来,然后用免疫印迹法检测沉淀物中与Bcr-Abl结合的Hsp90和Hsp70含量变化。应用蛋白酶体抑制剂ALLnL研究Bcr-Abl降解的途径。结果NB能降低HL-60/Bcr-Abl细胞中Bcr-Abl的蛋白水平,NB使Bcr-Abl与Hsp90和Hsp70的结合减少,促进蛋白酶体降解Bcr-Abl蛋白,ALLnL处理后NP-40insoluble部分Bcr-Abl蛋白水平提高。结论该研究证明NB通过干扰Hsp90伴侣功能,减少Bcr-Abl与Hsp90和辅伴侣的结合,从而促进蛋白酶体降解Bcr-Abl蛋白,最终抑制HL-60/Bcr-Abl细胞增殖。 展开更多

关键词 新生霉素 Bcr-Abl蛋白 热休克蛋白90 分子伴侣

在线阅读 下载PDF 职称材料

雷公藤内酯醇减少放射性肺纤维化中肌成纤维细胞活化与抑制TGF-β1/ERK/Smad3通路相关 被引量：24

5

作者 张彦伟 张志强 +2 位作者 吴丽贤 张鲁榕 陈纯 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期630-636,共7页

目的通过体内外实验,观察雷公藤内酯醇(TPL)减少放射性肺纤维化中肌成纤维细胞(MFBs)活化与TGF-β1/ERK/Smad3通路的相关性。方法以TGF-β1刺激成纤维细胞建立体外MFBs活化模型,C57BL/6小鼠胸部照射形成体内MFBs活化、放射性肺纤维化模... 目的通过体内外实验,观察雷公藤内酯醇(TPL)减少放射性肺纤维化中肌成纤维细胞(MFBs)活化与TGF-β1/ERK/Smad3通路的相关性。方法以TGF-β1刺激成纤维细胞建立体外MFBs活化模型,C57BL/6小鼠胸部照射形成体内MFBs活化、放射性肺纤维化模型。MFBs活化状态通过检测小鼠成纤维细胞中α-SMA(RT-PCR、Western blot方法)和ColⅠ(RT-PCR、ELISA方法)的表达,通路活性采用Western blot法检测p-ERK、p-Smad3(Ser208)、p-Smad3(Ser423)的水平。ERK siRNA及Smad3 siRNA观察ERK、Smad3在MFBs活化中的地位。结果 TGF-β1激活p-ERK/p-Smad3(Ser208)及p-Smad3(Ser423),诱导成纤维细胞表达α-SMA,活化为MFBs,合成Col I明显增多;使用ERK siRNA及Smad3 siRNA确定了ERK及Smad3均参与α-SMA、ColⅠ的表达,其中ERK可能通过磷酸化Smad3连接区(Ser208)起相关作用。小鼠胸部照射可致肺组织中p-ERK、p-Smad3(Ser208)、p-Smad3(Ser423)的水平上调,α-SMA表达增加,显示多量MFBs活化。TPL对体内和体外实验中ERK、Smad3(Ser208)、Smad3(Ser423)的磷酸化活化均有明显抑制作用,可明显下调α-SMA表达及ColⅠ合成,减少MFBs的活化。结论 TPL可通过抑制TGF-β1/ERK/Smad3通路,减少肺部照射后MFBs活化,从而抑制放射性肺纤维化进展。 展开更多

关键词 雷公藤内酯醇 放射性肺纤维化 肌成纤维细胞 Α-平滑肌肌动蛋白 Ⅰ型胶原蛋白 转化生长因子β1 ERK SMAD3

在线阅读 下载PDF 职称材料

灵芝多糖肽对人脐静脉内皮细胞氧化损伤的保护作用 被引量：24

6

作者 杨丽娟 游育红 +1 位作者 林志彬 林云峰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期657-660,共4页

目的研究灵芝多糖肽对人脐静脉内皮细胞(HU-VECs)氧化损伤的保护作用。方法原代培养人脐静脉内皮细胞,CD31免疫荧光法鉴定细胞。以叔丁基氢过氧化物(tBOOH)为氧化剂损伤细胞,造成氧化损伤模型,培养液中加入不同浓度灵芝多糖(6.125、12.5... 目的研究灵芝多糖肽对人脐静脉内皮细胞(HU-VECs)氧化损伤的保护作用。方法原代培养人脐静脉内皮细胞,CD31免疫荧光法鉴定细胞。以叔丁基氢过氧化物(tBOOH)为氧化剂损伤细胞,造成氧化损伤模型,培养液中加入不同浓度灵芝多糖(6.125、12.5、25、50、100mg·mL-1),以CCK-8法检测细胞存活率;Hoechst333258检测细胞氧化损伤引起的凋亡;比色法检测Caspase-3活性变化;电镜检测细胞及细胞器形态学改变。结果灵芝多糖(6.125、12.5、25、50、100mg·mL-1)可减轻叔丁基氢过氧化物对HUVECs的氧化损伤,CCK-8检测灵芝多糖给药组,HUVEC细胞存活率增加。Hoechst33258检测给药组细胞凋亡数量较损伤组减少。比色法检测损伤组Caspase-3活性明显增高,给药组较损伤组减少。电镜可见灵芝多糖给药组减轻细胞器的氧化损伤,减少细胞凋亡。结论灵芝多糖肽(GLPP)对人脐静脉内皮细胞氧化损伤具有保护作用。 展开更多

关键词 灵芝多糖肽 人脐静脉内皮细胞 氧化损伤 抗氧化剂 叔丁基氢过氧化物 Hoechst33258 CASPASE3

在线阅读 下载PDF 职称材料

南瓜蛋白对B16细胞的诱导分化作用 被引量：18

7

作者 谢捷明 俞昌喜 +4 位作者 陈明晃 许盈 赵蓉 吴国华 周琳瑛 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期329-332,共4页

目的测定南瓜蛋白对小鼠黑色素瘤B16细胞的诱导分化作用。方法以MTT法测定南瓜蛋白对B16细胞的增殖抑制作用,并以形态学、黑色素含量及细胞周期变化为指标,观察南瓜蛋白诱导B16细胞分化的作用。结果南瓜蛋白对B16细胞具有明显的增殖抑... 目的测定南瓜蛋白对小鼠黑色素瘤B16细胞的诱导分化作用。方法以MTT法测定南瓜蛋白对B16细胞的增殖抑制作用,并以形态学、黑色素含量及细胞周期变化为指标,观察南瓜蛋白诱导B16细胞分化的作用。结果南瓜蛋白对B16细胞具有明显的增殖抑制作用,并阻止B16细胞由G1期向S期过渡从而停滞于G1期;细胞形态向正常上皮样细胞分化,生长缓慢,平铺不重叠,甚至形成网状结构,胞质内细胞器丰富,黑色素小体明显增多;黑色素含量增加。结论南瓜蛋白对B16细胞具有明显的诱导分化作用。 展开更多

关键词 南瓜蛋白 黑色素瘤细胞 诱导分化

在线阅读 下载PDF 职称材料

Hsp90抑制剂新生霉素诱导HL-60细胞凋亡及其机制 被引量：7

8

作者 吴丽贤 许建华 +2 位作者 张昆仲 温彩霞 黄秀旺 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1419-1424,共6页

目的研究Hsp90抑制剂新生霉素(novobiocin,NB)诱导HL-60细胞凋亡的作用,探讨该作用与线粒体凋亡途径的关系,并进一步研究NB对Hsp90客户蛋白(clientprotein)AKT和ERK2功能的影响。方法细胞用NB处理后,采用AO/EB染色后荧光显微镜观察凋亡... 目的研究Hsp90抑制剂新生霉素(novobiocin,NB)诱导HL-60细胞凋亡的作用,探讨该作用与线粒体凋亡途径的关系,并进一步研究NB对Hsp90客户蛋白(clientprotein)AKT和ERK2功能的影响。方法细胞用NB处理后,采用AO/EB染色后荧光显微镜观察凋亡形态,采用AnnexinV-FITC/PI双染后流式细胞仪检测细胞凋亡率,分光光度法检测Caspase-9和Caspase-3的活性,用蛋白免疫印迹法检测细胞色素C的含量,以及procaspase-3、p-AKT(Ser473)和p-ERK2的蛋白水平。结果NB能明显抑制HL-60细胞增殖,IC50是0.3546mmol.L-1;NB能促进细胞色素C释放入胞质,激活Caspase-3/9的活性,触发HL-60细胞凋亡;NB能抑制AKT和ERK的功能,使细胞内p-AKT(Ser473)和p-ERK2的蛋白含量减少。结论NB可通过线粒体途径诱导HL-60细胞凋亡,还可干扰Hsp90伴侣功能阻断增殖信号通路,抑制HL-60细胞生长。 展开更多

关键词 新生霉素 凋亡 热休克90 分子伴侣 HL-60细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

南瓜蛋白联合吉非替尼对人胰腺癌BxPC-3细胞的抑制作用 被引量：4

9

作者 谢捷明 杨爱琴 +4 位作者 王丛菲 黄鹤光 张宝明 吴雪燕 陈明晃 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1724-1728,共5页

目的研究南瓜蛋白(cucurmosin,CUS)联合表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼(Gefitinib,GEF)对人胰腺癌细胞株Bx-PC-3的生长抑制作用。方法采用SRB法测定CUS与GEF联用对体外培养的BxPC-3... 目的研究南瓜蛋白(cucurmosin,CUS)联合表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼(Gefitinib,GEF)对人胰腺癌细胞株Bx-PC-3的生长抑制作用。方法采用SRB法测定CUS与GEF联用对体外培养的BxPC-3细胞的增殖抑制作用;应用集落形成实验测定CUS与GEF联用对体外培养的BxPC-3细胞集落形成的影响;以Western blot技术检测CUS与GEF联用对体外培养的BxPC-3细胞EGFR的影响。结果 CUS联用GEF对BxPC-3细胞的增殖抑制率大于单用药物,q>0.85;CUS联用GEF对BxPC-3细胞的集落形成抑制率大于单用药物,q>1.15;CUS联合GEF干预BxPC-3细胞可明显下调其EGFR蛋白表达,q>2.0。结论 CUS联合GEF对人胰腺癌BxPC-3细胞的生长抑制具有协同作用。 展开更多

关键词 南瓜蛋白 吉非替尼 胰腺癌 EGFR 细胞增殖 药物协同作用

在线阅读 下载PDF 职称材料

高速逆流色谱分离纯化钩吻中钩吻素甲 被引量：5

10

作者 刘浩 沈洁 +2 位作者 刘铭 许盈 俞昌喜 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期479-483,488,共6页

采用高速逆流色谱法,分别以正己烷-乙酸乙酯-无水乙醇-水(3∶3∶2∶3 V/V)和氯仿-甲醇-0.2 mol/L盐酸(4∶3∶1.5 V/V)为溶剂体系,从300 mg钩吻总碱中分离纯化出一种钩吻生物碱单体30.78 mg,高效液相色谱技术分析其质量分数为97.76%,核... 采用高速逆流色谱法,分别以正己烷-乙酸乙酯-无水乙醇-水(3∶3∶2∶3 V/V)和氯仿-甲醇-0.2 mol/L盐酸(4∶3∶1.5 V/V)为溶剂体系,从300 mg钩吻总碱中分离纯化出一种钩吻生物碱单体30.78 mg,高效液相色谱技术分析其质量分数为97.76%,核磁共振谱、质谱分析确证其为钩吻素甲;通过小鼠醋酸扭体法检测,表明钩吻总碱和钩吻素甲对小鼠均具有显著的镇痛活性。高速逆流色谱技术可高效分离纯化具有镇痛活性的钩吻素甲。 展开更多

关键词 钩吻 钩吻素甲 高速逆流色谱 分离纯化 镇痛

在线阅读 下载PDF 职称材料

二氨基肉豆蔻酸活化胱天蛋白酶依赖的线粒体途径诱导HL-60细胞凋亡 被引量：3

11

作者 吴枝娟 翁绳美 +2 位作者 王瑞幸 方秋娟 黄自强 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期249-254,共6页

目的探讨二氨基肉豆蔻酸(D-82)诱导HL-60细胞凋亡的作用及与线粒体途径活化的关系。方法 D-821.5,3和6mg·L-1处理HL-60细胞6h,或D-826mg·L-1处理细胞6,12及24h后,锥虫蓝染色法检测细胞存活率;AO-EB染色分析凋亡率;琼脂糖凝胶... 目的探讨二氨基肉豆蔻酸(D-82)诱导HL-60细胞凋亡的作用及与线粒体途径活化的关系。方法 D-821.5,3和6mg·L-1处理HL-60细胞6h,或D-826mg·L-1处理细胞6,12及24h后,锥虫蓝染色法检测细胞存活率;AO-EB染色分析凋亡率;琼脂糖凝胶电泳检测DNA损伤;罗丹明123染色流式细胞术检测线粒体膜电位变化;比色法测定胱天蛋白酶3和胱天蛋白酶9活性;Western印迹法检测胞浆和线粒体细胞色素c(Cytc)及细胞中Bcl-2和Bax蛋白表达。结果 D-82的浓度和作用时间与HL-60细胞存活率密切相关,相关系数分别为0.938(P<0.01)和0.809(P<0.05)。D-821.5,3和6mg·L-1处理HL-60细胞6h,细胞存活率分别为(81±11)%,(70±9)%和(56±11)%;D-826mg·L-1作用HL-60细胞12和24h,存活率降至(36±7)%和(24±9)%。D-821.5,3和6mg·L-1诱导HL-60细胞出现凋亡形态学改变及DNA阶梯状条带,凋亡率从正常对照组的(2±2)%上升至(18±4)%,(40±11)%和(75±11)%(n=3,P<0.05)。D-823和6mg·L-1组,罗丹明平均荧光强度由正常对照组的24±5降至20±5及12±4(n=3,P<0.05),说明线粒体膜电位降低;D-823和6mg·L-1组胱天蛋白酶3活性分别增加39%和125%,胱天蛋白酶9活性分别增加61%和145%(P<0.05,P<0.01)。与正常对照组比,D-823和6mg·L-1组线粒体Cytc表达分别降低22%和38%(P<0.05,P<0.01),胞浆中Cytc表达分别升高22%和65%(P<0.05);Bax表达分别增加45%和116%(P<0.05,P<0.01),Bcl-2表达分别减少27%和40%(P<0.01)。结论 D-82通过活化胱天蛋白酶依赖的线粒体途径诱导HL-60细胞凋亡。 展开更多

关键词 二氨基肉豆蔻酸 细胞凋亡 膜电位 线粒体 细胞色素C 胱天蛋白酶类 Bcl-2 Bax 蛋白表达

在线阅读 下载PDF 职称材料

四乙酰哌嗪苯氧基酞菁锌及其蛋白质复合物的制备、表征与光动力活性 被引量：6

12

作者 黄剑东 刘丰冉 +2 位作者 陈燕梅 孙建成 江舟 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第3期435-442,共8页

合成了2个酞菁锌配合物,即α-四(4-(4-乙酰哌嗪)苯氧基))酞菁锌(C80H72N16O8Zn)(1)和"-四(4-(4-乙酰哌嗪)苯氧基)酞菁锌(C80H72N16O8Zn)(2),并通过1HNMR,MS,IR和元素分析等手段进行表征。配合物1、2在N,N-二甲基甲酰胺、四氢呋喃... 合成了2个酞菁锌配合物,即α-四(4-(4-乙酰哌嗪)苯氧基))酞菁锌(C80H72N16O8Zn)(1)和"-四(4-(4-乙酰哌嗪)苯氧基)酞菁锌(C80H72N16O8Zn)(2),并通过1HNMR,MS,IR和元素分析等手段进行表征。配合物1、2在N,N-二甲基甲酰胺、四氢呋喃和正辛醇等有机溶剂中呈现出典型的酞菁的单体吸收光谱特征,Q带分别位于693￣698nm和681￣682nm,相对于β位取代者,α位取代的配合物的Q带明显红移。在含水溶剂中的吸收光谱测试显示,α位取代较β位取代更能有效地阻止配合物在含水溶剂中形成聚集体。通过吸收光谱和荧光光谱研究了2个配合物与血清白蛋白(BSA,HSA)和转铁蛋白(apoTf)的相互作用,结果表明,结合常数在(1￣20)×105mol-1·L之间,相对而言,β位取代的配合物与白蛋白的结合能力强于α位取代者。同时,制备了1-BSA、2-BSA、1-HSA、1-apoTf和1-FeTf等非共价键结合的酞菁-蛋白质复合物。对MCF-7乳腺癌细胞的光动力杀伤作用的测试初步表明,复合物的活性较高,活性顺序为:1-BSA>1-FeTf>1-HSA,1-apoTf>2-BSA>1>2。 展开更多

关键词 酞菁 合成 蛋白质 光动力治疗

在线阅读 下载PDF 职称材料

黄癸素诱导小鼠黑色素瘤B16细胞凋亡的研究 被引量：22

13

作者 林菁 彭华毅 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1630-1634,共5页

目的探讨黄癸素诱导小鼠黑色素瘤B16细胞凋亡的作用。方法应用MTT法检测黄癸素对体外培养的B16细胞增殖的抑制作用,观察量效及时效关系;通过Rhodamine123染色、琼脂糖凝胶电泳、Hoechst33258染色、caspase-3和caspase-8活性检测,观察黄... 目的探讨黄癸素诱导小鼠黑色素瘤B16细胞凋亡的作用。方法应用MTT法检测黄癸素对体外培养的B16细胞增殖的抑制作用,观察量效及时效关系;通过Rhodamine123染色、琼脂糖凝胶电泳、Hoechst33258染色、caspase-3和caspase-8活性检测,观察黄癸素诱导细胞凋亡的作用和机制。结果黄癸素抑制B16细胞的增殖,具有明显的时间依赖性和浓度依赖性,作用24、48、72h的IC50分别为16.59、9.29和6.22mg·mL-1;B16细胞经黄癸素处理后,出现染色质固缩、DNALadder等凋亡表现,Rhodamine123染色荧光降低和caspase-3、caspase-8活性增强,提示黄癸素引起线粒体膜电位降低可能触发caspases级联反应而导致细胞凋亡。结论黄癸素可抑制B16细胞增殖,诱导B16细胞凋亡。 展开更多

关键词 黄癸素 B16细胞 罗丹明123 Hoechst33258 DNALadder CASPASE 凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

褪黑素对HeLa细胞的生长及NF-κB蛋白表达的影响 被引量：3

14

作者 陈少雅 陈崇宏 +1 位作者 杨丽娟 林菁 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期73-76,共4页

目的探讨褪黑素(melatonin,MT)对HeLa细胞生长的影响及其对HeLa细胞中NF-κB蛋白表达的影响。方法 MTT法观察药物对HeLa细胞生长的影响,吖啶橙(acri-dine orange,AO)和溴化乙锭(ethidium bromide,EB)双染荧光显微镜观察MT对HeLa细胞形... 目的探讨褪黑素(melatonin,MT)对HeLa细胞生长的影响及其对HeLa细胞中NF-κB蛋白表达的影响。方法 MTT法观察药物对HeLa细胞生长的影响,吖啶橙(acri-dine orange,AO)和溴化乙锭(ethidium bromide,EB)双染荧光显微镜观察MT对HeLa细胞形态学的影响,Western blot法检测HeLa细胞中的NF-κB蛋白水平。结果 MT作用72h,抑制HeLa的IC50为61.71 mg.L-1;MT 1 g.L-1作用1、2、3 d,细胞坏死随作用时间延长而增多;MT 0.2 g.L-1作用1,2、3 d以及MT 0.008、0.04和0.2 g.L-1作用3 d可下调HeLa细胞NF-κB蛋白水平,存在剂量依赖性与时间依赖性。结论 MT抑制HeLa细胞增殖可能与其下调NF-κB蛋白水平有关。 展开更多

关键词 褪黑素 HELA细胞 抗增殖活性 吖啶橙 溴化乙锭 核(转录)因子-κB WESTERNBLOT法

在线阅读 下载PDF 职称材料

盐酸小檗碱对HL-60细胞增殖与分化的影响 被引量：28

15

作者 王志红 林菁 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期1305-1308,共4页

目的　研究盐酸小檗碱对人早幼粒白血病HL 6 0细胞增殖与分化的影响。方法　应用生长曲线测定法、克隆形成实验检测药物对HL 6 0细胞生长抑制作用 ;细胞分化根据细胞形态、硝基蓝四氮唑 (NBT)还原能力、细胞表面标记的改变来决定 ;细胞... 目的　研究盐酸小檗碱对人早幼粒白血病HL 6 0细胞增殖与分化的影响。方法　应用生长曲线测定法、克隆形成实验检测药物对HL 6 0细胞生长抑制作用 ;细胞分化根据细胞形态、硝基蓝四氮唑 (NBT)还原能力、细胞表面标记的改变来决定 ;细胞周期变化用流式细胞仪测定。结果　HL 6 0细胞经小檗碱处理后生长明显受抑 ,呈时间和浓度依赖性。选择 1、2、4、8mg·L-1小檗碱作用于HL 6 0细胞 ,动态观察发现 ,HL 6 0细胞向成熟细胞分化 :细胞核变小 ,核浆比减少 ;NBT还原能力增强 ;CD11b表达升高。细胞周期分析发现 ,小檗碱处理后细胞阻滞于G0 /G1期 ,S期细胞明显减少。结论　盐酸小檗碱可抑制HL 6 0细胞的增殖 ,并诱导HL 6 0细胞向成熟细胞分化。 展开更多

关键词 小檗碱 HL-60细胞 生长抑制 分化作用

在线阅读 下载PDF 职称材料

灵芝多糖肽对ECV304细胞氧化损伤的保护作用 被引量：20

16

作者 游育红 林志彬 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1510-1513,共4页

目的研究灵芝多糖肽对ECV304氧化损伤的保护作用。方法培养ECV304细胞,以叔丁基氢过氧化物(tBOOH)为氧化剂损伤细胞,造成氧化损伤模型,培养液中加入不同浓度灵芝多糖(12.5、25、50、100mg.L-1),以MTT法测细胞存活率;以光镜、电镜检测细... 目的研究灵芝多糖肽对ECV304氧化损伤的保护作用。方法培养ECV304细胞,以叔丁基氢过氧化物(tBOOH)为氧化剂损伤细胞,造成氧化损伤模型,培养液中加入不同浓度灵芝多糖(12.5、25、50、100mg.L-1),以MTT法测细胞存活率;以光镜、电镜检测细胞形态学改变及线粒体损伤;用AnnexinV/PI双标记细胞,流式细胞检测细胞凋亡的百分率。结果灵芝多糖(12.5、25、50、100mg.L-1)可减少叔丁基氢过氧化物对ECV304的氧化损伤,MTT检测灵芝多糖给药组,ECV304细胞存活率增加。光镜下可见细胞损伤减少,电镜可见灵芝多糖(50mg.L-1,温育24h)减轻细胞器如线粒体氧化损伤,减少细胞凋亡。细胞流式检测表明:对照组、给药组、损伤组总凋亡百分率分别2.24%±0.43%、24%±6.4%(P<0.01)、82.1%±7.9%。结论灵芝多糖肽(GLPP)对ECV304细胞氧化损伤具有保护作用。 展开更多

关键词 灵芝多糖肽 ECV304 氧化损伤 线粒体 凋亡 流式细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

HSP90C-端抑制剂新生霉素与HSP90N-端抑制剂联合应用对白血病细胞的作用 被引量：3

17

作者 吴丽贤 许建华 +2 位作者 张昆仲 温彩霞 黄秀旺 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期165-171,共7页

目的体外研究HSP90 C-端抑制剂新生霉素(novobio-cin,NB)与HSP90 N-端抑制剂格尔德霉素(Geldnamycin,GA)的联合应用对Bcr-Abl-的HL-60细胞和Bcr-Abl+的HL-60/Bcr-Abl细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用及该作用与细胞色素C释放、Caspase-9/3... 目的体外研究HSP90 C-端抑制剂新生霉素(novobio-cin,NB)与HSP90 N-端抑制剂格尔德霉素(Geldnamycin,GA)的联合应用对Bcr-Abl-的HL-60细胞和Bcr-Abl+的HL-60/Bcr-Abl细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用及该作用与细胞色素C释放、Caspase-9/3活性的关系,并且研究序贯应用NB和GA对HL-60细胞的作用。方法细胞用NB和GA联合处理后,采用AO/EB和AnnexinV/PI双染检测细胞凋亡,分光光度法检测Caspase-9/3的活性,用蛋白免疫印迹法检测细胞色素C和procaspase-3的含量。用MTT法检测NB→GA和GA→NB序贯处理对HL-60细胞增殖的抑制作用。结果NB和GA合用抑制HL-60细胞增殖有单独相加的作用;NB和GA合用激活HL-60和HL-60/Bcr-Abl细胞中Caspase-3/9的活性程度高于单独使用NB或GA,协同触发细胞凋亡;预先用NB处理可增强HL-60细胞对GA的敏感性,相比之下,预先用GA处理不影响HL-60细胞对NB的敏感性。结论NB和GA合用可协同抑制白血病细胞生长,诱导细胞凋亡;NB可增强GA对HL-60细胞的抑制能力,而GA不影响NB对HL-60细胞的抑制作用。 展开更多

关键词 新生霉素 格尔德霉素 凋亡 热休克90 联合作用

在线阅读 下载PDF 职称材料

13-MTD对氧反常诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤的影响 被引量：7

18

作者 余涓 胡桂芳 翁绳美 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期347-352,共6页

目的:研究13-甲基十四烷酸(13-methyltetradecanoic acid,13-MTD)对SH-SY5Y神经细胞氧反常的保护作用。方法:采用体外细胞培养建立SH-SY5Y细胞氧糖剥夺/再复氧糖(OGD/R)模型,光镜观察细胞形态,SRB法检测细胞存活率,AO/EB双重染色法观察... 目的:研究13-甲基十四烷酸(13-methyltetradecanoic acid,13-MTD)对SH-SY5Y神经细胞氧反常的保护作用。方法:采用体外细胞培养建立SH-SY5Y细胞氧糖剥夺/再复氧糖(OGD/R)模型,光镜观察细胞形态,SRB法检测细胞存活率,AO/EB双重染色法观察细胞凋亡,MTT法检测线粒体活性,Rhodamine-123染色流式细胞仪检测线粒体膜电位。结果:与正常对照组细胞相比,OGD/R模型组SH-SY5Y细胞出现明显病理损伤,细胞凋亡率显著增加(P<0.01),线粒体活性、细胞存活率、线粒体膜电位均显著下降(P<0.01);不同剂量的13-MTD可显著改善以上变化(P<0.01),且存在剂量依赖关系。结论:13-MTD对OGD/R诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤有保护作用,其可能对脑缺血再灌注损伤具有治疗作用。 展开更多

关键词 13-MTD SH-SY5Y 糖氧剥夺/再复糖氧 细胞存活率 凋亡 线粒体活性 线粒体膜电位

在线阅读 下载PDF 职称材料

5-LO通路活化对大鼠脑缺血再灌注损伤致血脑屏障破坏的影响 被引量：5

19

作者 余涓 吴艳云 翁绳美 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期177-183,共7页

为了研究大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤(CIRI)后血脑屏障(BBB)通透性的改变,观察5-脂氧酶(5-LO)、白三烯(LTs)、核因子-κB(NF-κB)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达变化,探讨5-LO通路活化参与BBB破坏的可能机制,本实验采用线栓法制备大... 为了研究大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤(CIRI)后血脑屏障(BBB)通透性的改变,观察5-脂氧酶(5-LO)、白三烯(LTs)、核因子-κB(NF-κB)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达变化,探讨5-LO通路活化参与BBB破坏的可能机制,本实验采用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞2h/再灌注24h模型。伊文氏蓝示踪剂检测BBB的通透性;RT-PCR检测损伤侧脑组织5-LO mRNA、半胱氨酰白三烯受体1(CysLTR1)mRNA的表达;ELISA检测血清LTB4的含量;免疫组织化学法检测损伤侧脑组织5-LO、NF-κB、MMP-9蛋白的表达情况。结果显示:局灶性脑缺血2h/再灌注24h后,大鼠BBB的通透性明显增高,5-LO mRNA、CysLTR1 mRNA的表达以及血清LTB4的含量均增高;5-LO、NF-κB、MMP-9蛋白在脑组织内的表达亦显著增多。本研究结果提示,CIRI后5-LO通路活化可经CysLTR1、LTB4、NF-κB、MMP-9介导BBB破坏,继而引发级联反应,加重脑损伤。 展开更多

关键词 脑缺血再灌注损伤 血脑屏障 5-脂氧酶 白三烯 核因子-κB 基质金属蛋白酶-9 大鼠

在线阅读 下载PDF 职称材料

扎鲁司特对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用 被引量：3

20

作者 刘颖 余涓 +1 位作者 许琳 陈崇宏 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2006年第4期436-439,共4页

目的:探讨白三烯受体拮抗剂扎鲁司特对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法:线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血2 h再灌注24 h模型,观察扎鲁司特(20、40 mg.kg-1,灌胃)对脑梗死体积、脑水肿程度、血脑屏障通透性的影响,测定脑... 目的:探讨白三烯受体拮抗剂扎鲁司特对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法:线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血2 h再灌注24 h模型,观察扎鲁司特(20、40 mg.kg-1,灌胃)对脑梗死体积、脑水肿程度、血脑屏障通透性的影响,测定脑组织中髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、一氧化氮(NO)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)含量。结果:扎鲁司特能有效减少脑梗死体积、脑水肿程度与血脑屏障通透性,增高脑组织GSH-PX活性,降低MDA、MPO含量,抑制iNOS活性并减少NO含量。结论:扎鲁司特对脑缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与降低血脑屏障通透性、抑制脑内炎症反应、抗脂质过氧化、降低NO毒性有关。 展开更多

关键词 扎鲁司特 再灌注损伤 血脑屏障 炎症反应 脂质过氧化

在线阅读 下载PDF 职称材料