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慢病毒介导bcr/abl基因RNAi对白血病K562细胞生物学特性的影响
被引量：
3
1
作者
吴枝娟
许建华
+1 位作者
黄秀旺
吴丽贤
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期145-150,共6页
目的:研究慢病毒介导RNAi致bcr/abl基因长期沉默对K562白血病细胞各种生物学特性的影响。方法:构建含bcr/ablRNAi序列的pNL-B/A-EGFP慢病毒重组质粒载体并包装病毒,感染K562细胞,挑取稳定转化的克隆(B/A-K562)。Real-time PCR及Western ...
目的:研究慢病毒介导RNAi致bcr/abl基因长期沉默对K562白血病细胞各种生物学特性的影响。方法:构建含bcr/ablRNAi序列的pNL-B/A-EGFP慢病毒重组质粒载体并包装病毒,感染K562细胞,挑取稳定转化的克隆(B/A-K562)。Real-time PCR及Western blotting验证干扰效应;锥虫蓝染色、集落形成实验检测细胞增殖能力变化;联苯胺染色观察细胞分化;ELISA法检测酪氨酸激酶活性;AO-EB染色观察细胞凋亡;比色法检测Caspase-3、Caspase-9活性;以上检测均以K562细胞和转染空质粒EGFP-K562作对照。结果:成功构建bcr/abl基因RNAi稳定转染的B/A-K562细胞,Real-time PCR及Westernblotting证实B/A-K562细胞中bcr/ablmRNA及P210bcr/abl蛋白含量明显下调。bcr/abl基因稳定下调后,K562细胞倍增时间明显延长(37.1vs20.4、23.3h)、集落形成能力减弱(P<0.01),K562细胞向红系分化,酪氨酸激酶活性下降(P<0.01),自发凋亡率显著提高(P<0.01),细胞中Caspase-3(P<0.05)及Caspase-9(P<0.01)活性明显提高。结论:慢病毒介导的RNAi能实现bcr/abl基因长期沉默,从而抑制K562细胞恶性增殖,诱导其分化及凋亡。
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关键词
RNA干扰
白血病细胞
BCR/ABL基因
慢病毒
稳定转染
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职称材料
题名
慢病毒介导bcr/abl基因RNAi对白血病K562细胞生物学特性的影响
被引量：
3
1
作者
吴枝娟
许建华
黄秀旺
吴丽贤
机构
福建医科大学药学院临床药理学研究所
福建医科大学
基础医
学院
生
理学
与病理生
理学
系
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期145-150,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30873101)~~
文摘
目的:研究慢病毒介导RNAi致bcr/abl基因长期沉默对K562白血病细胞各种生物学特性的影响。方法:构建含bcr/ablRNAi序列的pNL-B/A-EGFP慢病毒重组质粒载体并包装病毒,感染K562细胞,挑取稳定转化的克隆(B/A-K562)。Real-time PCR及Western blotting验证干扰效应;锥虫蓝染色、集落形成实验检测细胞增殖能力变化;联苯胺染色观察细胞分化;ELISA法检测酪氨酸激酶活性;AO-EB染色观察细胞凋亡;比色法检测Caspase-3、Caspase-9活性;以上检测均以K562细胞和转染空质粒EGFP-K562作对照。结果:成功构建bcr/abl基因RNAi稳定转染的B/A-K562细胞,Real-time PCR及Westernblotting证实B/A-K562细胞中bcr/ablmRNA及P210bcr/abl蛋白含量明显下调。bcr/abl基因稳定下调后,K562细胞倍增时间明显延长(37.1vs20.4、23.3h)、集落形成能力减弱(P<0.01),K562细胞向红系分化,酪氨酸激酶活性下降(P<0.01),自发凋亡率显著提高(P<0.01),细胞中Caspase-3(P<0.05)及Caspase-9(P<0.01)活性明显提高。结论:慢病毒介导的RNAi能实现bcr/abl基因长期沉默,从而抑制K562细胞恶性增殖,诱导其分化及凋亡。
关键词
RNA干扰
白血病细胞
BCR/ABL基因
慢病毒
稳定转染
Keywords
RNA interfere
leukemia
bcr-abl gene
lentivirus
stably transfection
分类号
R733.72 [医药卫生—肿瘤]
R730.54 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
慢病毒介导bcr/abl基因RNAi对白血病K562细胞生物学特性的影响
吴枝娟
许建华
黄秀旺
吴丽贤
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009
3
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